劉苗，劉瑞波，劉巴蒂，錢(qián)鷹

（東南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,南京 211189）

在光激發(fā)下，光敏染料通過(guò)光控能量轉(zhuǎn)移的方式產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的單線態(tài)氧，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、壞死，實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的光動(dòng)力治療（PDT）.光動(dòng)力治療具有選擇性好、耐藥性強(qiáng)、暗毒性低以及可協(xié)同治療等優(yōu)勢(shì)，在惡性腫瘤治療領(lǐng)域中具有重要的應(yīng)用潛力［1～6］.近紅外雙光子激發(fā)的光敏劑具有生物損傷小、組織深部光透性強(qiáng)、自身熒光干擾弱和時(shí)空選擇性高的優(yōu)勢(shì)，能有效地殺死腫瘤細(xì)胞［7，8］.因此，設(shè)計(jì)和合成雙光子光敏染料具有重要意義.另一方面，光敏染料產(chǎn)生的單線態(tài)氧存在壽命短（＜5 s）、擴(kuò)散范圍?。ǎ?00 nm）的不足，只能在光敏劑富集的區(qū)域發(fā)生作用［9～12］.由此可知，具有細(xì)胞器靶向的光敏劑可以提高對(duì)惡性腫瘤治療的靶向性.溶酶體內(nèi)含多種水解酶，是細(xì)胞的消化中心.快速增長(zhǎng)、分裂的腫瘤細(xì)胞為了可以應(yīng)對(duì)微環(huán)境的改變和保證足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，需要溶酶體的降解功能，破壞溶酶體膜結(jié)構(gòu)會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡或壞死.因此，引入多個(gè)溶酶體靶向基團(tuán)可以實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的光動(dòng)力治療［13～16］.目前文獻(xiàn)報(bào)道的光敏劑主要包括卟啉類(lèi)、花菁類(lèi)、萘酰亞胺類(lèi)、羅丹明類(lèi)以及氟硼二吡咯類(lèi)［17～22］.然而，這些光敏劑存在發(fā)射波長(zhǎng)較短、單線態(tài)氧效率低及腫瘤靶向性差等缺陷.綜上所述，設(shè)計(jì)和合成具有溶酶體靶向的近紅外光敏劑用于雙光子熒光成像及光動(dòng)力治療具有重要的意義和價(jià)值.

本課題組［23～29］近期報(bào)道了一系列化合物用于光動(dòng)力治療研究.以氟硼二吡咯（BODIPY）為母核，設(shè)計(jì)合成了基于自旋軌道電荷轉(zhuǎn)移-系間竄越（SOCT-ISC）機(jī)制的光敏劑［23，24］；報(bào)道了噻吩-氟硼二吡咯雙光子光敏染料，用于雙光子熒光成像及腫瘤細(xì)胞的光動(dòng)力治療［25］；首次將熒光蛋白生色團(tuán)類(lèi)似物應(yīng)用于光動(dòng)力治療，設(shè)計(jì)合成了吩噻嗪-熒光蛋白類(lèi)雙光子光敏染料［26～28］；報(bào)道了一種基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的七甲川菁光敏劑，用于A549細(xì)胞的光動(dòng)力治療和雙光子熒光成像［29］.在前期工作基礎(chǔ)上，結(jié)合BODIPY染料具有摩爾消光系數(shù)大、熒光量子產(chǎn)率高、光穩(wěn)定性好以及熒光發(fā)射峰窄等優(yōu)點(diǎn)［30～33］，本文設(shè)計(jì)合成了一個(gè)具有溶酶體靶向的近紅外光敏劑IMBDP-Lys，用于雙光子熒光成像及光動(dòng)力治療（Scheme 1）.該光敏劑是通過(guò)“一鍋法”和Knoevenagel縮合反應(yīng)引入吲哚嗎啉功能團(tuán)到BODIPY的8-位和3-位構(gòu)筑而成.3-位和8-位的2個(gè)嗎啉基團(tuán)提高了光敏劑對(duì)溶酶體的靶向能力和生物相容性，共軛連接使光敏劑吸收與發(fā)射波長(zhǎng)均發(fā)生紅移.測(cè)定了光敏劑IMBDP-Lys在二氯甲烷溶液中的紫外-可見(jiàn)吸收光譜、熒光量子產(chǎn)率及單線態(tài)氧量子產(chǎn)率.此外，將該光敏劑成功應(yīng)用于斑馬魚(yú)的雙光子熒光成像和A549腫瘤細(xì)胞的光動(dòng)力治療研究.

Scheme 1 Structure of photosensitizer IMBDP-Lys and its application in two-photon fluorescence imaging and photodynamic therapy

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

吲哚-3-甲醛，分析純，阿拉丁試劑有限公司；N-（2-氯乙基）嗎啉鹽酸鹽，分析純，上海畢得醫(yī)藥科技有限公司；N-碘代丁二酰亞胺（NIS），分析純，Sigma Aldrich公司；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)用溴化噻唑藍(lán)四氮唑（MTT），上海碧云天生物技術(shù)有限公司；石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、無(wú)水乙醇和甲苯，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司.

AvanceⅢHD 600 Hz型核磁共振光譜儀（NMR），瑞士Bruker公司；Ultraflex II型（MALDI-TOF）高分辨質(zhì)譜儀（HRMS），瑞士Bruker公司；UV-3600型紫外-可見(jiàn)光譜儀（UV-Vis），日本島津公司；FluoroMax-4型熒光光譜儀，日本崛場(chǎng)公司；Fluoviewfv 3000型共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM），奧林巴斯公司；FV1000MPE型雙光子熒光顯微鏡，奧林巴斯公司.

1.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.2.1 光敏劑IMBDP-Lys的合成參照文獻(xiàn)［34～36］方法制備中間體BDP和IMBDP，光敏劑IMBDPLys的合成路線如Scheme 2所示.

Scheme 2 Synthetic route of photosensitizer IMBDP-Lys

在N2氣保護(hù)下，將218.4 mg（0.3 mmol）IMBDP和92.9 mg（0.4 mmol）1-（2-嗎啉代乙基）1H-吲哚-3-甲醛溶于20.0 mL甲苯中，攪拌均勻后，加入20.0 μL催化劑哌啶和20.0 μL冰醋酸.將上述混合液在110℃下攪拌反應(yīng)，利用薄層色譜跟蹤反應(yīng)進(jìn)程.反應(yīng)結(jié)束后，用二氯甲烷和水洗滌3次，用無(wú)水硫酸鈉干燥，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)抽干多余溶劑，用閃式柱層析純化得到IMBDP-Lys深綠色固體，產(chǎn)率為38%.1HNMR（600 MHz，CDCl3），δ：8.52（d，J=7.5 Hz，2H），8.23（d，J=7.8 Hz，2H），7.88（d，J=16.6 Hz，2H），7.56（s，2H），7.32（d，J=7.3 Hz，2H），7.17（t，J=7.5 Hz，1H），7.05（s，1H），4.37～4.30（m，4H），3.73（s，8H），2.81（s，6H），2.55（s，12H），1.49（s，3H）.C42H45BF2I2N6O2HRMS實(shí)測(cè)值（理論值），m/z：969.1859（969.1827）［M+H］+.

1.2.2 光動(dòng)力治療實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)中采用1640不完全培養(yǎng)基和10%胎牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)A549細(xì)胞，于37℃，5%（體積分?jǐn)?shù)）CO2的孵育箱中培養(yǎng).通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定了細(xì)胞的暗毒性和光毒性.用含有光敏劑的新鮮培養(yǎng)基分別孵育A549細(xì)胞和斑馬魚(yú)1 h，可得到斑馬魚(yú)的雙光子熒光成像和細(xì)胞成像.將商用溶酶體綠色染料Lyso-Tracker Green與含有光敏劑的A549細(xì)胞共孵育30 min，溶酶體共定位成像在共聚焦激光掃描顯微鏡下進(jìn)行（Lyso-Tracker Green：λex=488 nm，λem=515～545 nm）.采用活性氧熒光探針DCFH-DA測(cè)試了細(xì)胞內(nèi)活性氧含量［CLSM，2’，7’-二氯二氫熒光素二乙酸酯（DCFH-DA）：λex=488 nm，λem=488～520 nm］.在黑暗環(huán)境中用吖啶橙（AO）和溴化乙錠（EB）染料進(jìn)行AO/EB雙染色實(shí)驗(yàn)，研究了腫瘤細(xì)胞的凋亡過(guò)程.采用細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)探究了光敏劑抑制腫瘤細(xì)胞的能力.

2 結(jié)果與討論

2.1 雙吲哚嗎啉取代的近紅外光敏劑IMBDP-Lys的設(shè)計(jì)與理論計(jì)算

實(shí)驗(yàn)中選擇BODIPY染料作為熒光母核，通過(guò)“一鍋法”、Knoevenagel縮合反應(yīng)引入吲哚嗎啉基團(tuán)到BODIPY染料的3-位和8-位，構(gòu)筑了一種雙吲哚嗎啉取代、紅光發(fā)射的光敏劑IMBDP-Lys.光敏劑3-位，8-位的2個(gè)嗎啉基團(tuán)不僅強(qiáng)化了對(duì)溶酶體的靶向能力，還改善了光敏劑的水溶性.此外，吲哚嗎啉基團(tuán)的共軛連接使光敏劑吸收與發(fā)射波長(zhǎng)均發(fā)生紅移，可以應(yīng)用于雙光子熒光成像和光動(dòng)力治療.中間體IMBDP和目標(biāo)產(chǎn)物IMBDP-Lys均采用1HNMR和HRMS進(jìn)行了表征，所得譜圖見(jiàn)本文支持信息圖S1～圖S5.

雙吲哚嗎啉取代的近紅外光敏染料IMBDP-Lys具有較強(qiáng)的系間竄越（ISC）能力，可顯著提升單線態(tài)氧效率.采用高斯09W理論計(jì)算了光敏劑IMBDP-Lys的系間竄越過(guò)程.基于DFT/CAM-B3LYP/6-31G（d）/LANL2DZ方法優(yōu)化了光敏劑IMBDP-Lys染料的幾何構(gòu)型，基于TD-DFT/CAM-B3LYP/TD-DFT//B3LYP/6-31g（d）/LANL2DZ方法，用TD-DFT預(yù)測(cè)了光敏劑IMBDP-Lys的單重態(tài)和三重態(tài)激發(fā)能，計(jì)算結(jié)果列于本文支持信息表S1.由圖1可見(jiàn)，IMBDP-Lys光敏劑的S0→S1和S0→T1躍遷過(guò)程由最高占據(jù)分子軌道（HOMO）→最低未占據(jù)分子軌道（LUMO）主導(dǎo)，T2態(tài)由HOMO-1→LUMO主導(dǎo).光敏劑S1態(tài)的能量值（2.52 eV）遠(yuǎn)高于T1態(tài)（1.07 eV），而略高于T2態(tài)（2.40 eV），由此可知，S1與T2態(tài)之間的能量差較?。?.12 eV），可以發(fā)生系間竄越.另一方面，T2態(tài)通過(guò)內(nèi)轉(zhuǎn)換（IC）至T1態(tài)產(chǎn)生的能量值大于三重態(tài)氧（3O2）轉(zhuǎn)化為單重態(tài)氧（1O2）所需的能量值（0.98 eV）.由理論計(jì)算結(jié)果預(yù)測(cè)，雙吲哚嗎啉取代的近紅外光敏染料IMBDP-Lys可通過(guò)系間竄越產(chǎn)生單線態(tài)氧.

Fig.1 Energy and frontier molecular orbital diagrams of photosensitizer IMBDP-Lys obtained with TD-DFT/CAM-B3LYP/TD-DFT//B3LYP/6-31g(d)/LANL2DZ level based on the optimized ground state geometries at DFT/CAM-B3LYP/6-31G(d)/LANL2DZ level basis set

2.2 IMBDP-Lys光敏劑在660 nm光作用下的單線態(tài)氧產(chǎn)率

圖2（A）給出光敏劑IMBDP-Lys的紫外-可見(jiàn)光譜和熒光光譜，最大吸收波長(zhǎng)為631 nm（摩爾消光系數(shù)為6.8×104L·mol-1·cm-1），發(fā)射波長(zhǎng)為684 nm.以吲哚菁綠為參比，熒光量子產(chǎn)率為9.7%.

光敏劑IMBDP-Lys的單線態(tài)氧量子效率用參比法進(jìn)行測(cè)試，以亞甲基藍(lán)為參比，1，3-二苯基異苯并呋喃（DPBF）為單線態(tài)氧捕獲劑.由圖2（B）可見(jiàn)，用660 nm的燈照射9.59 s后，IMBDP-Lys光敏劑能使DPBF的吸光度逐漸降低，經(jīng)計(jì)算其單線態(tài)氧效率為48.3%.同時(shí)，光敏劑自身主吸收峰處吸光度幾乎保持不變，表明光敏劑有良好的光穩(wěn)定性.由上述結(jié)果可知，光敏劑在660 nm光照下可以產(chǎn)生單線態(tài)氧并且在紅光區(qū)有良好的光穩(wěn)定性.光敏劑IMBDP-Lys在二氯甲烷溶液中紫外吸收波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)、摩爾消光系數(shù)以及熒光量子產(chǎn)率和單線態(tài)產(chǎn)率的數(shù)據(jù)見(jiàn)表1.

Fig.2 Absorbance spectrum and fluorescence spectrum of photosensitizer IMBDP-Lys(1×10-5 mol/L)in CH2Cl2(A)and absorbance decrease at 414 nm of DPBF with photosensitizer IMBDP-Lys under 660 nm irradiation(B)

Table 1 UV absorption,emission wavelength,molar absorption coefficient,ΦF and ΦΔof PS IMBDP-Lys

2.3 IMBDP-Lys光敏劑用于雙光子熒光成像

雙光子吸收具有組織穿透性強(qiáng)、生物損傷小、光漂白小及空間選擇性強(qiáng)的特點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)深層組織的高分辨熒光成像，為光動(dòng)力治療提供指導(dǎo).將斑馬魚(yú)胚胎經(jīng)培養(yǎng)液孵育成幼苗，與光敏劑IMBDPLys共孵育1 h后，用900 nm的飛秒激光對(duì)光敏劑進(jìn)行雙光子熒光成像.由圖3可見(jiàn)，斑馬魚(yú)的頭部、身體以及尾部呈現(xiàn)清晰明亮的紅色熒光.光敏劑IMBDP-Lys可以在近紅外激光激發(fā)下產(chǎn)生雙光子上轉(zhuǎn)換熒光，在雙光子激發(fā)光動(dòng)力治療方面具有重要的應(yīng)用潛力.

Fig.3 Two-photon imaging of the photosensitizer IMBDP-Lys(2 μmol/L)in zebrafish(λex=900 nm)

對(duì)光敏劑IMBDP-Lys進(jìn)行了單光子熒光成像.將A549細(xì)胞在含有2 μmol/L光敏劑IMBDP-Lys的培養(yǎng)基中孵育30 min，用CLSM進(jìn)行成像拍攝.由圖4可見(jiàn)，光敏劑IMBDP-Lys能迅速進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并呈現(xiàn)出紅色熒光，由此可知光敏劑MBDP-Lys具有良好的生物相容性.

Fig.4 Single-photon imaging of the photosensitizer IMBDP-Lys(2 μmol/L)in A549 cells

光敏劑產(chǎn)生的活性氧存在壽命短、擴(kuò)散范圍小的不足，具有亞細(xì)胞器靶向的光敏劑產(chǎn)生的活性氧有更好的光動(dòng)力效果.本文引入了2個(gè)溶酶體靶向功能團(tuán)——嗎啉，含有光敏劑IMBDP-Lys的細(xì)胞與商用溶酶體染料Lyso-Tracker Green共孵育進(jìn)行溶酶體共定位成像.由圖5可見(jiàn)，商業(yè)溶酶體染料發(fā)出的綠色熒光和光敏劑IMBDP-Lys展現(xiàn)的紅色熒光重疊效果較好，經(jīng)計(jì)算共定位系數(shù)高達(dá)0.95.上述結(jié)果表明，光敏劑IMBDP-Lys具有良好的溶酶體共定位能力.

Fig.5 Lysosome co-localization image of photosensitizers IMBDP-Lys(1 μmol/L)and Lyso-Tracker Green(1 μmol/L)

2.4 IMBDP-Lys光敏劑在A549細(xì)胞中的光動(dòng)力治療研究

采用MTT法測(cè)定了光敏劑IMBDP-Lys對(duì)A549細(xì)胞的毒性.由圖6可見(jiàn)，在黑暗環(huán)境中，細(xì)胞與光敏劑IMBDP-Lys孵育24 h后細(xì)胞存活率超過(guò)85%，這表明光敏劑IMBDP-Lys在黑暗中對(duì)細(xì)胞的生存能力影響較小，具有較低的暗毒性.相反，在光照條件下，細(xì)胞存活率顯著降低，且隨著光敏劑IMBDP-Lys濃度和光照時(shí)間的增加，細(xì)胞存活率不斷下降.在660 nm近紅外光分別照射10和30 min后，A549細(xì)胞的最大半數(shù)抑制濃度（IC50）值分別為1.85和0.52 μmol/L.上述結(jié)果表明，光敏劑IMBDP-Lys具有低的暗毒性和高的光毒性.

采用活性氧熒光探針DCFH-DA探究了光敏劑產(chǎn)生活性氧的能力，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的單線態(tài)氧可以使無(wú)熒光的DCFH轉(zhuǎn)變成有綠色熒光的2’，7’-二氯熒光素（DCF）.由圖7可見(jiàn)，在黑暗條件下，光敏劑IMBDP-Lys與A549細(xì)胞孵育24 h，加入DCFH-DA染料后細(xì)胞只顯示了光敏劑本身的紅色熒光，由此可知，黑暗條件下光敏劑未產(chǎn)生活性氧.但用660 nm的光照細(xì)胞5 min后，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)了綠色熒光，表明光敏劑在光照下可以產(chǎn)生活性氧.類(lèi)似地，光敏劑IMBDP-Lys在斑馬魚(yú)內(nèi)也有上述相同的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象.由此說(shuō)明近紅外光照下光敏劑IMBDP-Lys在細(xì)胞和斑馬魚(yú)體內(nèi)均可以產(chǎn)生活性氧.

采用AO和EB進(jìn)行活/死細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)，探究了光敏劑對(duì)A549細(xì)胞的凋亡過(guò)程.AO具有膜通透性，可以使活細(xì)胞核DNA和RNA染成綠色，EB僅能透過(guò)膜受損的細(xì)胞，嵌入核DNA并發(fā)出紅色熒光，因此通過(guò)熒光可以區(qū)分細(xì)胞的存活狀態(tài).由圖8（A）可見(jiàn)，無(wú)光照條件下，Group a細(xì)胞顯示出均勻的綠色熒光.在660 nm光照Group b細(xì)胞5 min后，Group b細(xì)胞發(fā)出的綠色熒光減少，并且EB染料通道出現(xiàn)紅色熒光.上述現(xiàn)象表明，光敏劑在660 nm光照下可以使腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死.

Fig.6 Cell viability of different concentrations of photosensitizer IMBDP-Lys under 660 nm illumination for 0,10 and 30 min

Fig.7 Imaging of ROS with photosensitizer IMBDP-Lys

Fig.8 Photodynamic therapy with photosensitizers IMBDP-Lys in A549 cell

通過(guò)細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)探究了光敏劑對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制能力.由圖8（B）可見(jiàn)，含有光敏劑IMBDP-Lys（1 μmol/L）的細(xì)胞在無(wú)光照下其生長(zhǎng)不受限制，劃痕逐漸愈合.這表明光敏劑IMBDP-Lys在黑暗條件下對(duì)細(xì)胞的毒性極低，不會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖產(chǎn)生負(fù)面影響.然而，在用660 nm的燈照射細(xì)胞5 min后，細(xì)胞的遷移被顯著抑制，即使在孵育48 h后遷移也幾乎無(wú)變化.由此可知，光敏劑IBDP-Lys在660 nm的光照下能有效抑制腫瘤細(xì)胞的遷移.

本文設(shè)計(jì)合成了一個(gè)雙溶酶體靶向的近紅外光敏劑IMBDP-Lys，該光敏劑具有單線態(tài)氧效率高、生物相容性好及精準(zhǔn)靶向溶酶體的性質(zhì)，成功應(yīng)用于雙光子熒光成像和光動(dòng)力治療.3-位和8-位的2個(gè)嗎啉基團(tuán)強(qiáng)化了對(duì)溶酶體的定位能力，與溶酶體商業(yè)染料共定位系數(shù)為0.95.此外，用900 nm飛秒激光對(duì)光敏劑IMBDP-Lys進(jìn)行了雙光子熒光成像，光敏劑能夠快速進(jìn)入斑馬魚(yú)體內(nèi)并顯示出清晰的紅色熒光.用660 nm光照射光敏劑可以產(chǎn)生單線態(tài)氧誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡，具有良好的模擬光動(dòng)力治療效果.因此，光敏劑IMBDP-Lys有望為雙光子熒光成像和光動(dòng)治療打下基礎(chǔ).

3 結(jié) 論

設(shè)計(jì)合成了一種雙溶酶體靶向、紅光發(fā)射的光敏染料IMBDP-Lys，應(yīng)用于雙光子熒光成像和腫瘤細(xì)胞中的光動(dòng)力治療.選擇具有優(yōu)異光物理性質(zhì)的吲哚嗎啉-BODIPY熒光染料作為熒光母核，通過(guò)Knoevenagel縮合反應(yīng)引入吲哚嗎啉基團(tuán)共軛連接到吲哚-BODIPY染料的3位，構(gòu)筑了一種結(jié)構(gòu)新穎、雙吲哚嗎啉取代的近紅外光敏染料IMBDP-Lys.采用高斯09W軟件計(jì)算了光敏劑的S1與T2態(tài)之間的能量差為0.12 eV，可以有效地發(fā)生系間竄越從而提高單線態(tài)氧的效率.此外，光敏劑IMBDP-Lys中3-位和8-位的2個(gè)嗎啉基團(tuán)可以強(qiáng)化對(duì)溶酶體的靶向能力，改善光動(dòng)力治療效果.在二氯甲烷溶液中，光敏劑IMBDP-Lys的最大吸收波長(zhǎng)為631 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為684 nm.在660 nm光照射下，以亞甲藍(lán)為參比，光敏劑IMBDP-Lys的單線態(tài)氧產(chǎn)率高達(dá)48.3%.在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，含有2個(gè)吲哚嗎啉基團(tuán)的光敏劑具有良好的細(xì)胞相容性和精準(zhǔn)的溶酶體靶向性；用900 nm的飛秒激光照射斑馬魚(yú)進(jìn)行雙光子熒光成像，呈現(xiàn)出清晰的紅色熒光.與商業(yè)溶酶體綠色染料Lyso-Tracker Green共孵育顯示紅色熒光與綠色熒光具有良好的重疊，共定位系數(shù)（R）經(jīng)計(jì)算為0.95.MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，光敏劑IMBDP-Lys有極低的暗毒性（細(xì)胞存活率≥85%）和高的光毒性（IC50=0.52 μmol/L）.在660 nm近紅外光照下，活性氧熒光探針DCFH-DA顯示出綠色熒光，表明光敏劑在近紅外光照下可以產(chǎn)生活性氧.此外，AO/EB細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，光敏劑IMBDP-Lys不僅可以誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡，而且能夠有效抑制腫瘤細(xì)胞的遷移.總之，雙吲哚嗎啉取代的近紅外光敏劑IMBDP-Lys可以應(yīng)用于雙光子熒光成像和光動(dòng)力治療，是一種非常有應(yīng)用前景的光敏劑.

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