魏雪琴，李雯，李丙國(guó)，耿露菲，林雨詩(shī)，龐杰

（1.武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院，福建 武夷山 354300；2.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002）

近年，隨著酵素的日益盛行[1]，其相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) （QB/T 5323—2018《植物酵素》、QB/T 5324—2018《酵素產(chǎn)品分類導(dǎo)則》）目前已發(fā)布并實(shí)施。據(jù)報(bào)道，食用植物酵素多以新鮮果蔬、菌菇、中草藥等單一或復(fù)合植物為原料，經(jīng)多種益生菌發(fā)酵而成，含有豐富的維生素、氨基酸、多糖、多酚、酶、礦物質(zhì)和微生物次生代謝產(chǎn)物等營(yíng)養(yǎng)成分[2-4]，并具有抗氧化、抗菌消炎、調(diào)節(jié)腸道菌群、解酒、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力等多種功能[5-6]。農(nóng)用植物酵素、日化植物酵素、環(huán)保植物酵素等非食用植物酵素也含有豐富的活性成分，包括抗氧化類物質(zhì)、功效酶和有機(jī)酸等[7]，并具有多功能性，如可抑制病原微生物和腐敗細(xì)菌等有害微生物的活動(dòng)[8]；具有溶解剩余活性污泥、凈化污水等作用，可用于個(gè)人護(hù)理、土壤改良、環(huán)境治理與保護(hù)等領(lǐng)域[9-10]。

On the Fruitful Practice of Xi Jinping’s Eco-civilization Thought in Jiangxi Province Hua Ming

對(duì)表達(dá)思想感情強(qiáng)烈的課文，教師應(yīng)多花點(diǎn)精力，指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行表情朗讀，以讀激情，引起共鳴?！对僖?jiàn)了，親人》一文的語(yǔ)言感情充沛，運(yùn)用了比較多的祈使句、感嘆句等句式，來(lái)表達(dá)贊美、感激、關(guān)切、崇敬等感情內(nèi)容，字里行間洋溢著中朝人民的深情厚誼。教學(xué)時(shí)，為了讓學(xué)生體會(huì)這種感情，我指導(dǎo)學(xué)生朗讀重點(diǎn)句、重點(diǎn)片斷，通過(guò)齊讀、指名讀、默讀、輕聲讀等，從多次反復(fù)的朗讀中激發(fā)他們的感情，從而體會(huì)到中朝人民的友誼確實(shí)是比山還高比海還深，是用鮮血凝成的。

酵素制備的傳統(tǒng)工藝多偏向采用能有效保留原料活性成分的自然發(fā)酵法，通過(guò)添加蜂蜜、紅糖或白糖等外源碳源提高酵素營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及功效，發(fā)酵周期一般為幾個(gè)月至2年不等[11-12]。自然發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵原料、發(fā)酵碳源、發(fā)酵時(shí)間等均對(duì)植物酵素品質(zhì)具有重要影響。據(jù)報(bào)道，果蔬酵素中，滇橄欖酵素品質(zhì)優(yōu)于由檸檬、青梅、火龍果、諾麗果、食用仙人掌等原料制備的酵素[13]；不同配方酵素酶活力具有差異，且與酵素產(chǎn)品原料種類不成正比[14]；松針酵素陳釀期間，各組分經(jīng)氧化還原、酯化、縮合、聚合等復(fù)雜生理生化反應(yīng)，其營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)增加或減少，其中發(fā)酵2年的松針酵素營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最高[15]；適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間有利于提高咖啡果皮酵素蛋白質(zhì)、總酚、2，2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽陽(yáng)離子[2，2'-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）cation，ABTS+]自由基和 1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基的清除能力等綜合指標(biāo)[16]；添加紅糖有利于改善葡萄酵素微生物的生長(zhǎng)代謝并提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，而添加蜂蜜制備的葡萄酵素，其酵母菌數(shù)量增長(zhǎng)速度及最大細(xì)胞濃度明顯高于添加紅糖組[17]。

植物酵素發(fā)酵過(guò)程涉及的生物化學(xué)反應(yīng)復(fù)雜，過(guò)程難以控制，因而建立簡(jiǎn)易的綜合品質(zhì)評(píng)價(jià)方法對(duì)植物酵素質(zhì)量管理及其產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。目前，關(guān)于不同原料、不同碳源植物酵素的綜合品質(zhì)評(píng)價(jià)較少。因此，本研究選用不同原料，基于相同配比添加蜂蜜或紅糖制備12種植物酵素，采用主成分分析和聚類分析，對(duì)其品質(zhì)進(jìn)行綜合分析，構(gòu)建植物酵素品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)模型，篩選出高品質(zhì)植物酵素的發(fā)酵原料，旨在為酵素品質(zhì)的科學(xué)評(píng)價(jià)及功能性酵素產(chǎn)品研發(fā)提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

蘆丁、沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)樣品（色譜純，純度≥98%）：上海源葉生物科技有限公司；福林酚試劑：上海麥克林生化科技有限公司；濃硫酸、鹽酸（分析純）：三明市三圓化學(xué)試劑有限公司；總蛋白定量（total protein，TP）測(cè)試盒、總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）測(cè)試盒、DPPH自由基清除能力測(cè)試盒：南京建成生物工程研究所；其余化學(xué)試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。酵素原料、蜂蜜、紅糖：市售。

1.2 儀器與設(shè)備

V-1100D型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：上海美譜達(dá)儀器有限公司；ReadMax 1200型酶標(biāo)儀：上海閃譜生物科技有限公司；AR224CN型電子分析天平、Starter型pH計(jì)：上海奧豪斯儀器有限公司；DRP-9162型電熱恒溫培養(yǎng)箱、DHG-9140A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海培英實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；SB-25-12DT型超聲波清洗機(jī)：寧波新芝生物科技股份有限公司；WP-UP-UV-20型超純水機(jī)：四川沃特爾科技發(fā)展有限公司；HH-S4型恒溫水浴鍋：常州中捷實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；TopPette系列移液槍（200 μL/1 mL/5 mL）：大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；QL-901型渦旋振蕩器：海門市其林貝爾儀器制造有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

2.3.2 綜合評(píng)價(jià)

采用Excel2010進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和繪圖。采用PASW statistics 18.0軟件進(jìn)行方差分析、Duncan’s多重比較差異顯著性檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)性分析，顯著性水平P＜0.05，數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。利用PASW statistics 18.0中的Z-score描述性統(tǒng)計(jì)對(duì)篩選的品質(zhì)指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化，最后進(jìn)行主成分分析和聚類分析。

學(xué)生通過(guò)案例討論后，經(jīng)過(guò)提煉和歸納總結(jié)，教師做簡(jiǎn)潔的總結(jié)，回顧案例分析的整個(gè)過(guò)程，對(duì)學(xué)生在討論過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行分析和評(píng)價(jià)，繼續(xù)進(jìn)行補(bǔ)充和完善，加深對(duì)理論知識(shí)的理解，使學(xué)生能夠得到進(jìn)一步的啟發(fā)。

翻轉(zhuǎn)課堂能夠?qū)崿F(xiàn)知識(shí)內(nèi)化于知識(shí)傳授之間的緊密互動(dòng)和配合，學(xué)生可以結(jié)合個(gè)人的學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和學(xué)習(xí)內(nèi)容，在學(xué)習(xí)實(shí)踐的過(guò)程之中主動(dòng)地參與老師所組織的各種教學(xué)活動(dòng)，老師也可以通過(guò)翻轉(zhuǎn)課堂的有效實(shí)踐來(lái)了解學(xué)生的知識(shí)學(xué)習(xí)情況和掌握情況，從而在后期進(jìn)行針對(duì)性的教學(xué)調(diào)整，真正地為學(xué)生提供有效的幫助，對(duì)學(xué)生的問(wèn)題進(jìn)行答疑解惑。許多英文老師提出翻轉(zhuǎn)課堂能夠不斷的調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性，實(shí)現(xiàn)英語(yǔ)專業(yè)翻譯教學(xué)水平的綜合提升。

表1 酵素試樣信息Table 1 The information of Jiaosu samples

總酸含量測(cè)定：采用pH計(jì)電位滴定法，參照GB/T 12456—2021《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總酸的測(cè)定》，結(jié)果以g/kg表示；粗多糖含量測(cè)定：采用苯酚-硫酸法，參照SN/T 4260—2015《出口植物源食品中粗多糖的測(cè)定苯酚-硫酸法》，測(cè)定波長(zhǎng)為490 nm；總蛋白含量測(cè)定：采用二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）法，取稀釋的酵素離心上清液20 μL，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行具體操作，測(cè)定波長(zhǎng)為562 nm；總酚含量測(cè)定：采用Folin-Ciocalteu比色法[18]，以沒(méi)食子酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x，μg/mL），以吸光度為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：y=0.020 0x+0.000 2，R2=0.999 1，測(cè)定波長(zhǎng)為765 nm；總黃酮含量測(cè)定：采用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法[19]，以蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x，mg/mL），以吸光度為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程為：y=6.623 8x+0.001 4，R2=0.999 2，測(cè)定波長(zhǎng)為510 nm。

北京市境內(nèi)北運(yùn)河流域，一級(jí)至五級(jí)支流110條，總長(zhǎng)1 562km。其中一級(jí)支流2條，河道長(zhǎng)度138km；二級(jí)支流25條，河道長(zhǎng)度609km；三級(jí)支流56條，河道長(zhǎng)度588km；四級(jí)支流23條，河道長(zhǎng)度195km；五級(jí)支流4條，河道長(zhǎng)度32km。

1.3.2 基本理化指標(biāo)測(cè)定

1.3.3 酶活力及抗氧化能力測(cè)定

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力測(cè)定：采用水溶性四唑鹽（water soluble tetrazolium，WST-1）法測(cè)定酵素中SOD酶活性。取待測(cè)樣本20 μL、酶工作液20 μL和底物應(yīng)用液200 μL混勻，置于電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱37℃孵育20 min，在波長(zhǎng)為450 nm時(shí)用酶標(biāo)儀比色讀取吸光度。

在碎片化學(xué)習(xí)的時(shí)代，學(xué)習(xí)者必須突破淺層學(xué)習(xí)的局限，以實(shí)現(xiàn)深度學(xué)習(xí)。碎片化學(xué)習(xí)中信息的片段化拾取往往是零碎的甚至閑散的，這樣的信息獲取往往缺乏對(duì)內(nèi)容的深入思考，不能建立信息的廣泛聯(lián)系，學(xué)習(xí)僅僅停留在淺層面，不易進(jìn)行學(xué)習(xí)的推理。如果學(xué)習(xí)只能停留在這種無(wú)組織、孤立的知識(shí)片段層面，也就難以超越碎片化導(dǎo)致的淺層學(xué)習(xí)局限。超越碎片化實(shí)現(xiàn)深層學(xué)習(xí)，是探索解決碎片化問(wèn)題的要義。

T-AOC測(cè)定：取離心后的酵素原液100 μL，按照T-AOC測(cè)定試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行具體操作，測(cè)定波長(zhǎng)為520 nm。在37℃時(shí)，每分鐘每毫升試樣溶液使反應(yīng)體系的吸光度每增加0.01，計(jì)為一個(gè)總抗氧化能力單位，酵素試樣中總抗氧化能力以U/mL表示。

DPPH自由基清除能力測(cè)定：取離心后的酵素原液400 μL，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行具體操作，測(cè)定波長(zhǎng)為517 nm。DPPH自由基清除率按下式計(jì)算。

式中：A0為樣品液+80%甲醇的吸光度；A1為工作液+樣品液的吸光度；A2為工作液+80%甲醇的吸光度。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

將新鮮酵素原料、碳源和水按1∶3∶10的質(zhì)量比裝桶混合，進(jìn)行室溫（20℃～30℃）發(fā)酵。經(jīng)1個(gè)月定期排氣并攪拌后，密封，自然發(fā)酵2年，離心（10 000 r/min）10 min，室溫（20℃～30℃）貯藏備用。酵素的具體信息如表1所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵素理化指標(biāo)與抗氧化能力比較

2.1.1 基本理化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

表2為12種酵素總酸、粗多糖、總蛋白、總黃酮、總多酚含量。

表2 不同酵素基本理化指標(biāo)Table 2 Physicochemical properties of different Jiaosu samples

由表2可知，12種酵素總酸含量差異較大，其中4號(hào)胎菊蜂蜜酵素總酸含量最高，達(dá)23.21 g/kg，其次為10號(hào)梨皮、柚子皮紅糖酵素（22.02 g/kg）。2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素（7.31 g/kg）與8號(hào)玫瑰花紅糖酵素（7.44 g/kg）總酸含量無(wú)顯著差異（P＞0.05），5號(hào)松花蜂蜜酵素總酸含量最低（1.41 g/kg）。粗多糖含量中，8號(hào)玫瑰花紅糖酵素（97.73 mg/mL）最高且與其他酵素存在顯著差異（P＜0.05），其次是11號(hào)柚子皮紅糖酵素（72.80 mg/mL），而4號(hào)胎菊蜂蜜酵素（9.99 mg/mL）與6號(hào)生姜、紅棗紅糖酵素（9.98 mg/mL）無(wú)顯著差異（P＞0.05）；3號(hào)洛神花蜂蜜酵素（4.12 mg/mL）與9號(hào)滇橄欖紅糖酵素（3.60 mg/mL）之間的粗多糖含量接近，無(wú)顯著差異（P＞0.05），5號(hào)松花蜂蜜酵素粗多糖含量最低，為2.26mg/mL?？偟鞍缀恐校?號(hào)玫瑰花紅糖酵素（77.60 mg/mL）最高，其次是2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素（72.20 mg/mL）及9號(hào)滇橄欖紅糖酵素（72.71 mg/mL）且二者含量無(wú)顯著差異（P＞0.05），6號(hào)生姜、紅棗紅糖酵素總蛋白含量最低（5.99 mg/mL）。12種酵素總黃酮含量變化范圍為0.22 mg/mL～3.32 mg/mL，其中含量最高的是8號(hào)玫瑰花紅糖酵素（3.32 mg/mL），其次是4號(hào)胎菊蜂蜜酵素（2.25 mg/mL），6號(hào)生姜、紅棗紅糖酵素最低（0.22 mg/mL）。總多酚含量中，2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素（7.42 mg/mL）顯著高于其他11種酵素，3號(hào)洛神花蜂蜜酵素（1.11 mg/mL）、10號(hào)梨皮、柚子皮紅糖酵素（1.09 mg/mL）和12號(hào)柚子皮、香蕉皮紅糖酵素（1.00 mg/mL）總多酚含量接近，無(wú)顯著差異（P＞0.05），5號(hào)松花蜂蜜酵素總多酚含量（0.74 mg/mL）最低。由以上結(jié)果可知，不同原料酵素的理化成分存在較大差異，其中8號(hào)玫瑰花紅糖酵素的粗多糖、總蛋白、總黃酮含量均顯著高于其他11種酵素；相同原料不同發(fā)酵碳源酵素之間的理化成分也有差異，如8號(hào)與1號(hào)酵素原料均為玫瑰花，2號(hào)與9號(hào)酵素原料均為滇橄欖，但由于發(fā)酵碳源不同，其總酸、粗多糖、總黃酮、總多酚含量均存在顯著差異。

2.1.2 SOD酶活力測(cè)定結(jié)果

不同酵素的SOD酶活力如圖1所示。

圖1 不同酵素SOD酶活力Fig.1 The SOD enzyme activity of different Jiaosu samples

由圖1可知，8號(hào)玫瑰花紅糖酵素SOD酶活力（234.45 U/mL）最高且與其他酵素存在顯著差異（P＜0.05），其次是10號(hào)梨皮、柚子皮紅糖酵素（211.66 U/mL）、4號(hào)胎菊蜂蜜酵素（204.91 U/mL）、9號(hào)滇橄欖紅糖酵素（138.38 U/mL）、2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素（130.04 U/mL）、1號(hào)玫瑰花蜂蜜酵素（128.70 U/mL），而5號(hào)松花蜂蜜酵素SOD酶活力最低，為55.30 U/mL。其中，4號(hào)胎菊蜂蜜酵素與10號(hào)梨皮、柚子皮紅糖酵素、1號(hào)玫瑰花蜂蜜酵素與2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素、11號(hào)柚子皮紅糖酵素與12號(hào)柚子皮、香蕉皮紅糖酵素之間的SOD酶活力無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

作者所在醫(yī)院于2012年作為北京第一家試點(diǎn)醫(yī)院，實(shí)施了法人治理機(jī)制改革，由北京市醫(yī)院管理局作為授權(quán)經(jīng)營(yíng)國(guó)有資產(chǎn)的出資人代表，任命了醫(yī)院理事會(huì),以理事長(zhǎng)為法人代表，落實(shí)公立醫(yī)院的獨(dú)立法人地位，實(shí)現(xiàn)公立醫(yī)院所有權(quán)和經(jīng)營(yíng)權(quán)分離的委托代理關(guān)系。

2.1.3 總抗氧化能力測(cè)定結(jié)果

不同酵素的總抗氧化能力如圖2所示。

圖2 不同酵素總抗氧化能力Fig.2 The total antioxidant capacity of different Jiaosu samples

由圖2可知，12種酵素中總抗氧化能力最強(qiáng)的酵素為2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素，總抗氧化能力大小排序?yàn)?號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素＞8號(hào)玫瑰花紅糖酵素＞1號(hào)玫瑰花蜂蜜酵素＞9號(hào)滇橄欖紅糖酵素＞4號(hào)胎菊蜂蜜酵素＞3號(hào)洛神花蜂蜜酵素＞7號(hào)紅棗枸杞紅糖酵素≈11號(hào)柚子皮紅糖酵素＞10號(hào)梨皮柚子皮紅糖酵素＞5號(hào)松花蜂蜜酵素＞12號(hào)柚子皮香蕉皮紅糖酵素≈6號(hào)生姜紅棗紅糖酵素。其中，以滇橄欖和玫瑰花為原料制備的酵素抗氧化能力顯著高于其他原料的酵素。

2.1.4 DPPH自由基清除率測(cè)定結(jié)果

經(jīng)矩陣分析主成分與原始品質(zhì)指標(biāo)變量間的相關(guān)系數(shù)，得到酵素8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)的載荷量，其絕對(duì)值越高，說(shuō)明關(guān)系越密切。酵素品質(zhì)變量因子荷載矩陣及成分得分系數(shù)矩陣見(jiàn)表5。

圖3 不同酵素DPPH自由基清除率Fig.3 The DPPH free radical scavenging rate of different Jiaosu samples

由圖3可知，1號(hào)玫瑰花蜂蜜酵素（89.5%）、2號(hào)滇橄欖蜂蜜酵素（89.2%）、4號(hào)胎菊蜂蜜酵素（90.4%）、7號(hào)紅棗枸杞紅糖酵素（89.2%）、8號(hào)玫瑰花紅糖酵素（89.4%）的DPPH自由基清除能力相當(dāng)并顯著高于其他酵素（P＜0.05），3號(hào)洛神花蜂蜜酵素的DPPH自由基清除率最低，僅為34.9%。

2.2 酵素品質(zhì)指標(biāo)的相關(guān)性分析

不同酵素各品質(zhì)指標(biāo)變量間的相關(guān)性見(jiàn)表3。

表3 酵素品質(zhì)指標(biāo)間的相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis among quality indexes of Jiaosu

由表3可知，總抗氧化能力與總蛋白、總多酚呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與總黃酮呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；DPPH自由基清除率與總黃酮、總多酚呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與總蛋白、SOD酶活力呈顯著正相關(guān)（P＜0.05），說(shuō)明蛋白質(zhì)、多酚、黃酮類等生物活性物質(zhì)及SOD酶是植物酵素抗氧化作用的重要因子，對(duì)抗氧化能力具有重要貢獻(xiàn)。

2.3 酵素品質(zhì)指標(biāo)的主成分分析及綜合評(píng)價(jià)

2.3.1 主成分分析

但是飛水時(shí)間一定不要過(guò)長(zhǎng)，尤其是貝殼類等小海鮮。正確的操作方法是：鍋中水沸騰時(shí)將小海鮮下鍋，焯水15 s后，撈出瀝水。此時(shí)的貝殼類海鮮多呈半開(kāi)半閉狀態(tài)（小體積的也可能全部打開(kāi)了），去殼取肉，進(jìn)行下一步烹飪。

為更好評(píng)價(jià)不同指標(biāo)對(duì)植物酵素品質(zhì)的貢獻(xiàn)作用，同時(shí)明確不同原料酵素的品質(zhì)差異，采用主成分分析建立不同酵素的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。通過(guò)KOM檢驗(yàn)法和Bartlett球體檢驗(yàn)法進(jìn)行主成分分析的適用性檢驗(yàn)，可知KMO=0.654＞0.5，說(shuō)明各指標(biāo)之間存在一定的相關(guān)性。Bartlett球體檢驗(yàn)結(jié)果為57.865，顯著性為0.001（P＜0.01），說(shuō)明各個(gè)指標(biāo)之間相互關(guān)聯(lián)。以上兩項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果均表明12種植物酵素的總酸、粗多糖、總蛋白、總黃酮、總多酚、SOD酶活力、總抗氧化能力及DPPH自由基清除率8個(gè)指標(biāo)數(shù)據(jù)適合進(jìn)行主成分分析。各個(gè)主成分的特征值、方差貢獻(xiàn)率和累積方差貢獻(xiàn)率見(jiàn)表4。

表4 主成分的方差貢獻(xiàn)率Table 4 Variance contribution ratios of principal components

主成分分析中，把特征值大于1作為提取主成分的標(biāo)準(zhǔn)[20]。由表4可知，當(dāng)提取3個(gè)主成分時(shí)，方差貢獻(xiàn)率分別為51.639%、21.072%、15.572%，累積方差貢獻(xiàn)率達(dá)88.284%，說(shuō)明這3個(gè)主成分涵蓋了原始變量主要信息。并且，前3個(gè)主成分的特征值均大于1，分別為4.131、1.686、1.246，故提取因素能夠反映酵素品質(zhì)的總體特征。

不同酵素在相同稀釋倍數(shù)下DPPH自由基清除率如圖3所示。

表5 酵素品質(zhì)變量因子荷載矩陣及成分得分系數(shù)矩陣Table 5 Factor loading matrix and component score coefficient matrix of of Jiaosu quality variable

由表5可知，主成分1與總蛋白、總黃酮、總多酚、總抗氧化能力、DPPH自由基清除率等關(guān)系密切，均呈正相關(guān)，主要反映酵素活性成分及抗氧化能力信息；主成分2與總酸、SOD酶活力關(guān)系密切，呈正相關(guān)；主成分3與粗多糖關(guān)系密切，呈正相關(guān)。

1.3.1 酵素的制備

根據(jù)成分得分系數(shù)與相對(duì)應(yīng)指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)乘積的加和，得到3個(gè)主成分得分，設(shè)提取的主成分得分依次為F1、F2、F3，可得到酵素品質(zhì)3個(gè)主成分的函數(shù)表達(dá)式。

從心理學(xué)的視角看，與空間觀念有著密切聯(lián)系的概念有空間知覺(jué)、空間表象、空間想象和空間能力?！坝^察物體”需要學(xué)生在頭腦中對(duì)原有的“表象”進(jìn)行加工，融入一部分“空間想象”解決眼前的問(wèn)題。通過(guò)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，“觀察物體”讓學(xué)生感到困難的主要原因是：學(xué)生缺少空間知覺(jué)的支撐，難以形成空間表象，沒(méi)有表象自然無(wú)從想象，而“當(dāng)空間想象受阻時(shí)，提供操作材料動(dòng)手實(shí)驗(yàn)，是行之有效的教學(xué)對(duì)策”[3]。培養(yǎng)空間能力的一個(gè)重要條件就是讓學(xué)生看到、接觸到學(xué)習(xí)的對(duì)象。那么是否可以設(shè)計(jì)一節(jié)實(shí)驗(yàn)課，以豐富學(xué)生的空間知覺(jué)為目標(biāo)，從而促進(jìn)學(xué)生空間能力的發(fā)展呢？

將各主成分所對(duì)應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率作為權(quán)重，得到主成分的綜合評(píng)價(jià)模型。

“純天然”的不都是自然的產(chǎn)品，它只是商家推出的宣傳用語(yǔ)，并非國(guó)家權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證標(biāo)志。美國(guó)食品和藥品管理局（FDA）根本就沒(méi)有對(duì)這個(gè)詞匯下過(guò)定義。我國(guó)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中，也沒(méi)有“純天然”這一項(xiàng)。因此，商家在這些食品里添加合格的著色劑、人工香料等“合成材料”并不違法。商家利用“純天然”作為宣傳手段，讓消費(fèi)者以為其是“綠色”產(chǎn)品，有誤導(dǎo)之嫌。

根據(jù)各主成分得分函數(shù)表達(dá)式計(jì)算出12種植物酵素各主成分的得分情況，同時(shí)根據(jù)綜合評(píng)價(jià)模型計(jì)算出12種植物酵素品質(zhì)的綜合得分，綜合得分越高，說(shuō)明該酵素的品質(zhì)越好，結(jié)果如表6所示。

表6 主成分得分和排名Table 6 Principal component score and ranking

由表6可知，8號(hào)（玫瑰花紅糖酵素）總蛋白、總黃酮、總多酚、總抗氧化能力、DPPH自由基清除率均較高，對(duì)主成分1的貢獻(xiàn)最大，故綜合得分最高，品質(zhì)最優(yōu)；其次為4號(hào)（胎菊蜂蜜酵素）、2號(hào)（滇橄欖蜂蜜酵素）、1號(hào)（玫瑰花蜂蜜酵素）、9號(hào)（滇橄欖紅糖酵素），四者綜合得分較接近，品質(zhì)較相近；而11號(hào)（柚子皮紅糖酵素）、3號(hào)（洛神花蜂蜜酵素）、12號(hào)（柚子皮香蕉皮紅糖酵素）、6號(hào)（生姜紅棗紅糖酵素）、5號(hào)（松花蜂蜜酵素）總黃酮含量較低，總抗氧化能力、DPPH自由基清除率和SOD酶活力較低，對(duì)主成分1和主成分2貢獻(xiàn)均較小，綜合得分較低，品質(zhì)較差。1號(hào)與8號(hào)酵素原料均為玫瑰花，2號(hào)與9號(hào)酵素原料均為滇橄欖，但由于發(fā)酵碳源不同，其綜合品質(zhì)亦有差異。

目前隨著大眾生活水平的提高，也開(kāi)始注意口腔方面的健康。臨床上，口腔牙列疾病屬于一種較為常見(jiàn)的疾病，此病的發(fā)病率是隨著患者年齡增長(zhǎng)而升高的，此病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為牙齒松動(dòng)、咬合能力差以及牙髓炎癥導(dǎo)致的疼痛等，對(duì)于有合并高血壓、心臟病以及糖尿病等并發(fā)癥有著較大的治療難度。以往治療口腔疾病的主要治療手段就是口腔修復(fù)，但是有著一定的局限性，會(huì)對(duì)患者牙齒的美觀程度造成一定的影響，大部分患者都不太能夠接受，目前正畸治療正逐漸應(yīng)用在了口腔修復(fù)的治療中，保證牙齒的美觀度[1]。在本次研究中，我院對(duì)口腔疾病患者的修復(fù)治療中應(yīng)用了正畸治療，取得了良好的治療效果，具體情況如下。

2.4 酵素品質(zhì)指標(biāo)的聚類分析

為更加直觀地對(duì)相似組分信息進(jìn)行綜合分析和評(píng)價(jià)，體現(xiàn)不同酵素品質(zhì)指標(biāo)間的差異，將12種酵素的8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，以平方Euclidean距離為度量標(biāo)準(zhǔn)，以組間連接為聚類方法進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析[21]，結(jié)果如圖4所示。

圖4 酵素品質(zhì)指標(biāo)的聚類樹狀圖Fig.4 Dendrogram obtained from cluster analysis of different Jiaosu

由圖4可知，當(dāng)距離約為10時(shí)，12種酵素品質(zhì)指標(biāo)可劃分為3大類。第1類聚集了總黃酮、總多酚、總酸、總蛋白、粗多糖、DPPH自由基清除率；第2類為SOD酶活力；第3類為總抗氧化能力。結(jié)合相關(guān)性分析和主成分分析結(jié)果，DPPH自由基清除率與總蛋白呈顯著正相關(guān)（P＜0.05，表3），與總黃酮、總多酚呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01，表3），故DPPH自由基清除率可代表總蛋白、總黃酮和總多酚的信息。因此，最終確定總酸、粗多糖、SOD酶活力、總抗氧化能力、DPPH自由基清除率5個(gè)品質(zhì)指標(biāo)作為酵素品質(zhì)的核心指標(biāo)，用于評(píng)價(jià)酵素品質(zhì)的優(yōu)劣。

3 結(jié)論

本文對(duì)12種不同植物酵素的總酸、粗多糖、總蛋白、總黃酮、總多酚、SOD酶、總抗氧化能力、DPPH自由基清除率8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，并對(duì)其進(jìn)行主成分分析和聚類分析。結(jié)果表明，植物酵素8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)之間存在差異性和相關(guān)性，主成分分析法將8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)簡(jiǎn)化為3個(gè)主成分，主成分1主要反映植物酵素活性成分及抗氧化能力信息；主成分2主要反映總酸含量及酶活力信息；主成分3反映粗多糖含量信息；3個(gè)主成分累積方差貢獻(xiàn)率為88.284%，反映了酵素品質(zhì)的絕大部分信息。由主成分分析法得出的綜合評(píng)價(jià)模型顯示，以玫瑰花為發(fā)酵原料制備的酵素綜合品質(zhì)較優(yōu)。通過(guò)聚類分析將不同酵素的8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)劃分為3類，結(jié)合相關(guān)性和主成分分析結(jié)果，確定總酸、粗多糖、SOD酶活力、總抗氧化能力、DPPH自由基清除率等5項(xiàng)核心指標(biāo)，可用于評(píng)價(jià)酵素品質(zhì)的優(yōu)劣。植物酵素發(fā)酵原料和品質(zhì)指標(biāo)數(shù)量等研究范圍還有待于擴(kuò)大并進(jìn)一步發(fā)掘植物酵素品質(zhì)評(píng)價(jià)的規(guī)律性，為酵素研究與開(kāi)發(fā)提供參考。

SPSS19.0統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料給予的檢驗(yàn)方式是t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料則實(shí)施χ2檢驗(yàn),P<0.05顯示差異顯著。