羅煉 吳文華

珠蛋白生成障礙性貧血在臨床上較為常見，是一種遺傳性疾病。珠蛋白生成障礙性貧血是一種因血液紊亂而產生的輕度或重度貧血癥，主要是由于還原血紅蛋白與紅血細胞比常規(guī)較少所致，根據臨床表現(xiàn)，珠蛋白生成障礙性貧血被分為輕型、中型以及重型[1]。針對輕型珠蛋白生成障礙性貧血患者而言，患者無明顯癥狀或表現(xiàn)為小細胞低色素貧血、紅細胞滲透脆性降低，只有在體檢的時候才能夠發(fā)現(xiàn)；中型珠蛋白生成障礙性貧血患者的表現(xiàn)癥狀較為多樣化，臨床尚未統(tǒng)一；重型珠蛋白生成障礙性貧血患者表現(xiàn)為面色蒼白、肝脾大、語法不良以及黃疸等癥狀，容易死亡[2]。根據疾病性質，臨床將地中海分為α-珠蛋白以及β-珠蛋白生成障礙性貧血兩種類型，α重型珠蛋白以及β重型珠蛋白生成的障礙性貧血都會導致患兒死亡或重度貧血[3]。近些年來，由于發(fā)生珠蛋白生成障礙性貧血的患病數(shù)量呈逐漸上升的趨勢，導致其已經成為我國的重要公共衛(wèi)生問題。目前，臨床中尚未研制出能夠徹底根治珠蛋白生成障礙性貧血的有效治療方法，因此在珠蛋白生成障礙性貧血患兒出生時降低發(fā)病率是有效干預措施之一。通過調查分析發(fā)現(xiàn)，不同省份以及地區(qū)，珠蛋白生成障礙性貧血的發(fā)病率存在差異，其中沿海地區(qū)的病發(fā)率相比較其他區(qū)域的病發(fā)率要高，因此，加強沿海地區(qū)的珠蛋白生成障礙性貧血疾病發(fā)生的防治工作十分重要[4]。清遠市位于廣東省西北部，是珠蛋白生成障礙性貧血的高發(fā)區(qū)域，為了進一步的分析研究清遠地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血基因分型的特征，文章對清遠市全市遺傳代謝篩查中心-清遠市婦幼保健院篩查中心，召回確診和因貧血自愿體檢的3 430例患兒為例進行分析，探析基因檢測的診斷價值，為臨床提供依據，具體報告內容如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

觀察例數(shù)有3 430例，觀察時間在2019年7月—2021年6月，觀察對象是清遠市婦幼保健院篩查中心召回和因貧血自愿確診檢查的患兒，其中男患兒1 900例（占比55.39%），女患兒1 530（占比44.61%）；患兒年齡區(qū)間范圍在0～2歲，平均（1.02±0.24）歲。

納入標準：（1）3 430例患兒家屬同意擇期開展基因檢測；（2）患兒年齡處于0～2歲；（3）患兒家屬對此次研究知情，并且愿意參與研究當中；（4）本次研究得到倫理委員會的批準。

排除標準：（1）患兒合并存在先天性的心臟疾病、先天性畸形等先天性疾病；（2）患兒的病歷資料不齊全；（3）患兒家屬不愿意參加本次研究。

1.2 方法

3 430例患兒均開展珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢測，詳細方法為：（1）主要儀器和試劑：全自動血液分析儀（全自動血液細胞分析儀 BC-2600，產地：廣東·深圳 產品注冊號：粵械注準20172401153）及配套試劑來自于中國貝克曼庫爾特商貿有限公司，α缺失型珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測所使用的試劑盒與β珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測所用的試劑盒均來自于廣東凱普生物科技股份有限公司。（2）樣本采集及保存：空腹抽取2 mL外周靜脈血，放入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管中完全混勻，在標本采集1周內對所有的珠蛋白生成障礙性貧血樣本完成基因檢查，完成檢測后將樣本保存在-20 ℃的冰箱中保存，方便復查。（3）基因檢測方法：利用DNA快速提取試劑盒（生產廠家：天根生化科技北京有限公司，型號：KG203）提取DNA，隨后利用α珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測試劑盒通過Gap-PCR技術檢測α-珠蛋白生成障礙性貧血常見的6類基因；利用β珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測試劑盒通過PCR反向點雜交技術檢測β-珠蛋白生成障礙性貧血的17類常見突變。所有檢測操作都將嚴格的依照試劑盒使用規(guī)范標準實施檢測操作，避免因操作錯誤而影響檢測結果，檢測結束后仔細記錄檢測數(shù)據，并進行比較。

1.3 觀察指標

（1）觀察珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測的結果，統(tǒng)計地中海貧血的陽性率。

（2）分析地中海貧血基因型的分布情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

統(tǒng)計數(shù)據采用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件展開整理分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，表示為n（%），計量資料采用t檢驗，表示為（±s），P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測結果

通過統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，3 430例患兒中，珠蛋白生成障礙性貧血患兒的例數(shù)為2 548例，陽性率為74.29%（2 548/3 430）。2 548例珠蛋白生成障礙性貧血患兒中，男患兒1 353例，構成比為53.10%（1 353/2 548）；女患兒1 195例，構成比為46.90%（1 195/2 548）；男患兒與女患兒的檢出率差異有統(tǒng)計學意義（χ2=19.595，P=0.000）。α-珠蛋白生成障礙性貧血患兒的占比為78.10%（1 990/2 548），β-珠蛋白生成障礙性貧血患兒的占比為21.90%（558/2 548），對比差異有統(tǒng)計學意義（χ2=1 609.595，P=0.000）。

2.2 α-珠蛋白生成障礙性貧血的基因類型

在1 990例α-珠蛋白生成障礙性貧血基因中，東南亞型（標準型）、3.7靜止型、4.2靜止型位居前三位，見表1。

表1 α-地中海貧血的基因類型（n=1 990）

2.3 β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因類型

從表2結果中可以得出，βCD41-42/βN、βIVSII-654/βN、β-28/βN以及βCD17/βN位居前四位，見表2。

表2 β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因類型（n=558）

2.4 α-珠蛋白生成障礙性貧血合并β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因型

3.7 靜止型珠蛋白生成障礙性貧血合并β-珠蛋白生成障礙性貧血、東南亞型（標準型）珠蛋白生成障礙性貧血合并β-珠蛋白生成障礙性貧血以及4.2靜止型珠蛋白生成障礙性貧血合并β-地中海貧血類型主要位于前列，見表3。

表3 α-珠蛋白生成障礙性貧血合并β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因類型（n=2 548）

3 討論

珠蛋白生成障礙性貧血是一種遺傳性疾病，因其首先現(xiàn)在地中海地區(qū)發(fā)現(xiàn)，故命名為珠蛋白生成障礙性貧血[5]。隨著對珠蛋白生成障礙性貧血的深入研究，發(fā)現(xiàn)靠近海洋的地方發(fā)病率比較高，在我國東南地區(qū)與西南地區(qū)是疾病高發(fā)區(qū)域，廣西地區(qū)的發(fā)病率最高（14.13%），其次為廣東地區(qū)（9.46%），故又被稱之為海洋性貧血[6]。在我國的染色體遺傳疾病類型當中珠蛋白生成障礙性貧血屬于一種具有高發(fā)病率且相對較為常見的染色體遺傳疾病，屬于單基因遺傳，引發(fā)珠蛋白生成障礙性貧血的主要原因是因為血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈基因發(fā)生突變或者是出現(xiàn)缺失的情況，從而造成珠蛋白肽鏈的有效合成出現(xiàn)降低的狀況，最終造成引發(fā)的一種遺傳性慢性溶血性貧血。由于珠蛋白屬于一種能夠攜帶氧的蛋白質，主要是在機體中的血紅蛋白、肌紅蛋白當中能夠發(fā)現(xiàn)珠蛋白的存在，若是機體中的珠蛋白的含量出現(xiàn)減少情況或者是其功能出現(xiàn)障礙，將會無法滿足機體組織對氧的需求，從而引發(fā)貧血[7]。人體中的珠蛋白鏈結構的構成以及有效合成，主要取決于珠蛋白生成障礙性貧血的相關基因，通常情況下，正常嬰兒的體內會從生父及生母的基因中各繼承2個α珠蛋白基因（αα/αα），最終統(tǒng)一的合成α珠蛋白鏈，并且會從父母的基因中各繼承1個β珠蛋白基因，促進合成嬰兒體中的β珠蛋白鏈，因此珠蛋白生成障礙性貧血可常規(guī)分為α-/β-珠蛋白生成障礙性貧血兩種貧血類型[8]。目前，臨床尚未明確珠蛋白生成障礙性貧血的根治方法，主要通過長期輸血、鐵螯合劑來穩(wěn)定患者的病情，但是給患兒家庭和社會造成極大的負擔[9]。因此，臨床加強對珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢測是非常有必要的。

本次研究結果發(fā)現(xiàn)，3 430例患兒中，珠蛋白生成障礙性貧血的陽性率為74.29%（2 548/3 430）。α-珠蛋白生成障礙性貧血的占比為78.1%（1 990/2 548），β-珠蛋白生成障礙性貧血的占比為21.90%（558/2 548），對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。由此看出，清遠市珠蛋白生成障礙性貧血的檢出率高于全國平均水平。分析原因是：清遠市位于廣東省，而我國的高發(fā)珠蛋白生成障礙性貧血疾病區(qū)域主要位處于廣東省地區(qū)，且自愿接受基因檢測的患兒比較多，接受基因檢測的患兒多為疑似病例或有癥狀病例，從而使得珠蛋白生成障礙性貧血患兒的比率相對較為集中，且檢出率也比較高[10]。

α-珠蛋白生成障礙性貧血主要是由于α珠蛋白基因缺失導致α肽鏈合成障礙，根據基因缺失程度，臨床將α-珠蛋白生成障礙性貧血劃分為標準型、靜止型、中間型以及重型，病情嚴重的患兒，其在出生不久后會死亡，而存活的患兒可能會出現(xiàn)嚴重貧血、黃疸、腹腔積液等[11]。研究發(fā)現(xiàn)，在1 990例α-珠蛋白生成障礙性貧血基因中，東南亞型（標準型）、3.7靜止型、4.2靜止型位居前三位。β-珠蛋白生成障礙性貧血屬于一種具體有遺傳性的溶血性疾病，主要是由于11號染色體上珠蛋白結構突變引起合成障礙[12]。近些年來，隨著基因篩查技術的發(fā)展，已經發(fā)現(xiàn)了200種β-珠蛋白生成障礙性貧血基因的突變類型，而現(xiàn)目前存在于我國的β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因類型高達34種[13]。從此次研究結果中得出，558例β-珠蛋白生成障礙性貧血基因之中，主要有四種位居前列（βCD41-42/βN、βIVS-II-654/βN、β-28/βN以 及βCD17/βN）。此外，本次研究還發(fā)現(xiàn)，在α-珠蛋白生成合并β-珠蛋白生成的珠蛋白生成障礙性貧血的基因當中，其中東南亞型（標準型）合并β-珠蛋白生成障礙貧血以及3.7靜止型合并β-珠蛋白生成障礙性貧血與4.2靜止型合并β-珠蛋白生成障礙性貧血的發(fā)生率高居前列?；诖耍R床中強化對珠蛋白生成障礙性貧血血患兒的基因實施檢測具有重要意義，能夠及時確診疾病，對患兒開展治療，改善患兒的預后。針對已經被診斷確定的珠蛋白生成障礙性貧血患兒而言，醫(yī)院需要立即建立健康檔案，同時對于患兒的家屬要實施相應的健康知識教育干預措施，促使患兒家屬了解疾病，積極配合治療（常用治療方法為輸血、除鐵劑以及造血干細胞移植等），降低患兒的死亡率[14]。同時，建議清遠區(qū)需要進一步提高篩查力度，實現(xiàn)婚前珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測，通過指導婚配、優(yōu)生優(yōu)育、早期篩查等方法來減少兒童發(fā)生珠蛋白生成障礙性貧血的發(fā)生率，能夠進一步的對珠蛋白生成障礙性貧血基因的擴散起到干預作用，從而降低地中海貧血的發(fā)生率[15]。

綜上所述，清遠區(qū)兒童發(fā)生珠蛋白生成障礙性貧血的幾率較高，導致兒童出現(xiàn)障礙性貧血的主要類型有α-珠蛋白生成障礙性貧血以及β-珠蛋白生成障礙性貧血這兩種貧血類型。采用基因檢測對珠蛋白生成障礙性貧血兒童實施檢測的效果較佳，能夠為貧血患兒的預防及治療提供有效的依據，可進一步推廣應用。