張艷泓，黃海龍，徐兩蒲

地中海貧血是一種嚴(yán)重威脅人類健康的可致死、致殘的遺傳性血液病。根據(jù)受累珠蛋白的不同分為不同類型，主要包括α-地中海貧血（α-地貧）與β-地中海貧血（β-地貧）。β-地貧主要是由于人第11號染色體短臂1區(qū)5帶3亞帶位點(diǎn)上的β-珠蛋白基因發(fā)生突變，導(dǎo)致β-珠蛋白合成減少或缺如，引起α 與β 鏈比例失衡，多余的α-珠蛋白沉積在紅細(xì)胞膜上，造成紅細(xì)胞破壞，最終引發(fā)無效造血和溶血性貧血[1]。臨床大多數(shù)β-地貧患者表現(xiàn)為慢性進(jìn)行性貧血，表型嚴(yán)重程度與基因型相關(guān)，根據(jù)患者的臨床表征將其分為輕型、中間型、重型三種類型，重型β-地貧患者往往表現(xiàn)為嚴(yán)重貧血、溶血和大量無效紅細(xì)胞生成。除造血干細(xì)胞移植是明確能夠根治β-地貧的療法外，目前暫無其他特異性治療方法。已有大量研究證實(shí)，通過激活內(nèi)源性γ-珠蛋白基因的表達(dá)可以提高胎兒血紅蛋白含量，從而改善β-地貧患者臨床癥狀[2]。隨著表觀遺傳學(xué)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)微小RNA（microRNA，miRNA）在γ-珠蛋白基因轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮重要的調(diào)控作用。本文就miRNA 對γ-珠蛋白基因的調(diào)控機(jī)制展開綜述。

1 miRNA在β-地貧中異常表達(dá)

miRNA 是一類長度約為19~25 nt 的內(nèi)源性非編碼RNA 分子，是人類基因組中約40%~70%基因的關(guān)鍵調(diào)控因子。大部分miRNA 在細(xì)胞核中由RNA 聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄形成初級轉(zhuǎn)錄物（pri-miRNA），pri-miRNA 經(jīng)由RNase-Ⅲ酶Drosha 和雙鏈RNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白組成的多蛋白復(fù)合物剪切形成長度約為70 nt 的miRNA 前體（pre-miRNA），pre-miRNA由Exportin5 識別，通過RNA-GTP 依賴途徑轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)一步剪切加工成為成熟的miRNA。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA在組織特異性或發(fā)育階段以特異性的方式表達(dá)，并在細(xì)胞的生長、發(fā)育、增殖、分化及凋亡過程中都有一定的影響，其表達(dá)的變化與人類疾病發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)[3]。在調(diào)控機(jī)制上，miRNA 通過與其他蛋白質(zhì)形成miRNA 誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（miRICS），進(jìn)而與靶基因mRNA3′-UTR 序列完全或不完全匹配來發(fā)揮作用，導(dǎo)致miRNA降解或抑制翻譯表達(dá)[4]。

miRNA 是表觀遺傳調(diào)控中重要的一環(huán)，主要在轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行調(diào)節(jié)。部分miRNA 與紅系特異性轉(zhuǎn)錄因子相結(jié)合來影響γ-珠蛋白的表達(dá)，同時(shí)miRNA 也會對紅系細(xì)胞的發(fā)育及成熟產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響β-地貧患者的臨床癥狀。隨著研究深入，發(fā)現(xiàn)β-地貧患者中多種miRNA 存在表達(dá)失衡，miRNA 通過與紅系特異性轉(zhuǎn)錄因子相結(jié)合來影響γ-珠蛋白的表達(dá)，同時(shí)也對紅系細(xì)胞的發(fā)育及成熟產(chǎn)生影響，從而影響β-地貧患者的臨床癥狀。最近的研究表明，miR-155 與miR-125b 在β-地貧患者中的表達(dá)水平可能與單核細(xì)胞的吞噬活性相關(guān)，miR-155 能夠通過靶向轉(zhuǎn)錄因子BACH1增強(qiáng)單核細(xì)胞吞噬活性[5-6]。此外，單核細(xì)胞中的miR-125b的表達(dá)水平與β-地貧患者的貧血嚴(yán)重程度也有一定的關(guān)聯(lián)。miRNA 不僅能反映出β-地貧的嚴(yán)重程度，也能夠調(diào)控γ 珠蛋白基因的表達(dá)，并在β-地貧的發(fā)生發(fā)展中有著不可或缺的作用[7]。因此，深入了解miRNA 在地貧中的調(diào)控機(jī)制，能更好的對β-地貧進(jìn)行預(yù)防及精準(zhǔn)治療。

2 γ-珠蛋白與β-地貧的關(guān)系

血紅蛋白是由4 條珠蛋白肽鏈所組成的四聚體分子，在不同發(fā)育階段血紅蛋白的種類及組成也不同（表1），其主要成分為α 類珠蛋白肽鏈和β 類珠蛋白肽鏈。α 類珠蛋白肽鏈由位于16 號染色體上的α 珠蛋白基因簇所合成，其產(chǎn)物有ζ 珠蛋白鏈和α 珠蛋白鏈。β 基因簇位于11 號染色體短臂15.5 上，有ε、γ、δ、β 基因和一個(gè)偽基因，隨著人體發(fā)育的不同階段開啟和關(guān)閉，按照基因簇順序從5′~3′方向依次轉(zhuǎn)錄翻譯ε 珠蛋白鏈、γ 珠蛋白鏈、δ 珠蛋白鏈和β 珠蛋白鏈。

表1 人體不同發(fā)育時(shí)期的血紅蛋白及其組成

β-珠蛋白基因在妊娠10周時(shí)開始表達(dá)，在出生后表達(dá)逐漸增強(qiáng)，因此β-地貧患者在胚胎發(fā)育期直至出生時(shí)，突變對β-珠蛋白基因的抑制作用幾乎不顯示，只有在出生后當(dāng)β-珠蛋白基因開放，突變使β-珠蛋白基因受到明顯抑制時(shí)，受累純合子患兒才表現(xiàn)出貧血相關(guān)的臨床癥狀。此外，β 類珠蛋白基因簇中的γ-珠蛋白基因的表達(dá)及其調(diào)節(jié)因素也是β-地貧病理學(xué)機(jī)制的重要因素，在β-地貧中合并遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白綜合征（hereditary persistence of fetal hemoglobin，HPFH）突變的病例中，γ-珠蛋白基因的重新開放使胎兒血紅蛋白（fetal hemo‐globin，HbF）升高降低珠蛋白鏈的不平衡性，可顯著改變β-地貧的表型，其臨床癥狀有不同程度的減輕。γ-珠蛋白基因在β-地貧中的臨床治療的重要性不言而喻。目前，已有利用藥物或通過慢病毒基因治療去誘導(dǎo)γ-珠蛋白再激活，提高HbF 表達(dá)，減少異常HbA表達(dá)，減輕患者的臨床癥狀[8]。

3 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控γ-珠蛋白基因表達(dá)

血紅蛋白在發(fā)育過程中的轉(zhuǎn)換受到多種轉(zhuǎn)錄因子的影響，這些轉(zhuǎn)錄因子通過招募相應(yīng)的輔助因子，形成轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物，與β-珠蛋白基因簇上游的基因座控制區(qū)(LCR)增強(qiáng)子和珠蛋白基因啟動子相互作用，在特定的發(fā)育階段開啟和關(guān)閉珠蛋白基因[9]，如B 細(xì)胞淋巴瘤11A（B-cell lymphoma，BCL11A）、Krüppel 樣 轉(zhuǎn) 錄 因 子(Krüppel-like transcription factors，KLFs)和MYB等轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物直接或間接參與調(diào)節(jié)γ-珠蛋白轉(zhuǎn)換為β 珠蛋白，這些轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物共同調(diào)控γ-珠蛋白，影響其轉(zhuǎn)錄后表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)對γ-珠蛋白表達(dá)的精細(xì)調(diào)控。miRNA 可靶向BCL11A、KLFs、MYB等轉(zhuǎn)錄因子間接作用于γ-珠蛋白基因，影響胎兒血紅蛋白的轉(zhuǎn)錄后表達(dá)，改善或加速β-地貧進(jìn)展（表2和圖1），下面將以此為切入點(diǎn)來闡述miRNA對γ-珠蛋白基因的調(diào)控機(jī)制。

表2 目前已報(bào)道m(xù)iRNA對γ-珠蛋白基因的調(diào)控作用

圖1 目前已報(bào)道m(xù)iRNA對γ-珠蛋白基因的調(diào)控模式圖

3.1 miRNA 通過調(diào)控BCL11A參與γ-珠蛋白基因調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)錄因子BCL11A基因編碼產(chǎn)物為鋅指蛋白，主要在腦和造血組織中表達(dá)。BCL11A 主要作為轉(zhuǎn)錄阻遏物發(fā)揮作用，在大腦、造血系統(tǒng)發(fā)育以及胎兒-成人血紅蛋白轉(zhuǎn)換中至關(guān)重要。經(jīng)全基因組關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)地貧患者中BCL11A基因的rs11886868 位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與其胎兒血紅蛋白異常表達(dá)密切相關(guān)[10]。Liu 等[11]利用CUT&RUN方法繪制出紅細(xì)胞蛋白結(jié)合位點(diǎn)，證明BCL11A 能優(yōu)先占據(jù)遠(yuǎn)端基序，并通過結(jié)合γ-珠蛋白基因啟動子區(qū)域來破壞遠(yuǎn)端基序，從而抑制γ-珠蛋白的表達(dá)。另外，最近的一項(xiàng)研究通過利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)對β-地貧及SOD 患者進(jìn)行基因編輯，通過敲除BCL11A紅系特異性增強(qiáng)子，成功提高了患者體內(nèi)胎兒血紅蛋白的表達(dá)水平[12]。上述研究表明，BCL11A是胎兒血紅蛋白轉(zhuǎn)錄阻遏物，能夠直接抑制γ-珠蛋白啟動子從而抑制其表達(dá)，是β-地貧基因治療的一個(gè)強(qiáng)有力靶點(diǎn)。

目前，已知靶向BCL11A的miRNA主要有miR-210、miR-138-5p、miR-486-3p、let-7、miR-30a等。其中miR-210 與紅細(xì)胞表型密切相關(guān)，miR-210 在低氧條件下參與促成紅系分化，而且miR-210 在HPFH 患者的紅系前體細(xì)胞以及絲裂霉素治療的β-地貧患者中都有較高的表達(dá)[13]。研究人員利用生物大分子相互作用分析技術(shù)確定了miR-210 和BCL11AmRNA 結(jié)合位點(diǎn)之間的相互作用，當(dāng)miR-210 表達(dá)增強(qiáng)時(shí)紅細(xì)胞中BCL11AmRNA 含量下降，γ-珠蛋白mRNA含量增加，miR-210通過直接結(jié)合BCL11AmRNA 的編碼序列調(diào)節(jié)BCL11A基因表達(dá)，從而參與γ-珠蛋白基因的調(diào)節(jié)[14]。另外，let-7成熟序列在多個(gè)物種中高度保守，在胎兒及成人的網(wǎng)織紅細(xì)胞中存在差異性表達(dá)且受發(fā)育調(diào)控[15]。let-7a 和let-7b 是外周血細(xì)胞中主要表達(dá)的家族成員，在成熟紅細(xì)胞中集中抑制let-7a 和let-7b 可以引起發(fā)育特異性相關(guān)的成紅細(xì)胞基因的變化，包括γ-珠蛋白mRNA 表達(dá)和HbF 的增加[16]。研究發(fā)現(xiàn)，LIN28B 靶向let-7，作為BCL11A基因的上游調(diào)節(jié)因子來影響HbF的表達(dá)[17]。

近來有研究提出LIN28B 能夠直接結(jié)合BCL11AmRNA 并阻止其有效翻譯，不依賴于典型的let-7 通路[18]。當(dāng)let-7 下降時(shí)，BCL11A 也隨之下降，HMGA2含量增加，進(jìn)而提高γ-珠蛋白轉(zhuǎn)錄水平。Lulli等[19]發(fā)現(xiàn)miR-486-3p通過與BCL11A3'-UTR直接結(jié)合負(fù)性調(diào)控BCL11A的表達(dá)，提高地貧患者中γ-珠蛋白的含量，并在參與血紅蛋白的轉(zhuǎn)換開關(guān)發(fā)揮著重要作用。與此相似的還有miR-30a 與miR-138-5p，能直接靶向BCL11A，并上調(diào)γ-珠蛋白的表達(dá)[20-21]。此外，研究人員還發(fā)現(xiàn)miR-30a 不僅是BCL11A表達(dá)的直接調(diào)節(jié)因子，而且在β-地貧患者的紅系前體細(xì)胞中miR-30a也與鐵蛋白水平存在負(fù)相關(guān)，miR-30a 可能在β-地貧患者應(yīng)激紅細(xì)胞生成過程中控制珠蛋白轉(zhuǎn)換、HbF誘導(dǎo)和鐵超載狀態(tài)中起著關(guān)鍵作用[20]。上述結(jié)果說明，不同的miRNA能夠靶向同一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同參與γ-珠蛋白的調(diào)節(jié)，在誘導(dǎo)HbF生成中有著不可忽視的重要作用。

3.2 miRNA 通過調(diào)控KLFs參與γ-珠蛋白基因調(diào)節(jié) KLFs 是一類高度保守的具有鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子，其中Krüppel 樣因子1（KLF1）能與DNA 序列基序結(jié)合，啟動下游基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)而參與調(diào)節(jié)紅系細(xì)胞的生長及發(fā)育過程。KLF1 是從γ 珠蛋白到β珠蛋白轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，能夠調(diào)節(jié)胎兒和成人血紅蛋白的發(fā)育轉(zhuǎn)換[22]。KLF1 能夠直接與β-珠蛋白基因啟動子結(jié)合，使得β-珠蛋白在成年期處于高表達(dá)的水平。在重型β-地貧患者中具有KLF1雜合突變的患者HbF水平較其他患者高，臨床癥狀較輕[23]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，KLF1 通過直接上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子BCL11A的表達(dá)，促進(jìn)其與其他伴侶分子結(jié)合成為轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，間接抑制γ-珠蛋白的表達(dá)[24]。此外，KLF1 還存在由胚胎珠蛋白抑制因子ZBTB7A/LRF 介導(dǎo)的第二種γ-珠蛋白抑制機(jī)制，表現(xiàn)為KLF1在紅細(xì)胞中通過與其近端啟動子結(jié)合直接驅(qū)動ZBTB7A，進(jìn)而影響B(tài)CL11A及γ-珠蛋白基因表達(dá)[25]Krüppel 樣因子3 (KLF3) 在體內(nèi)可以取代KLIF1與關(guān)鍵的紅系基因啟動子和增強(qiáng)子結(jié)合，并在紅細(xì)胞生成過程能被KLF1 激活并反饋抑制Krüppel 樣因子8（KLF8）的表達(dá)[26]。研究人員通過構(gòu)建KLF3與KLF8敲除小鼠模型，發(fā)現(xiàn)KLF3 在γ-珠蛋白啟動子也具有一定的占據(jù)率，但并不直接結(jié)合啟動子，可能是通過珠蛋白基因座內(nèi)的遠(yuǎn)端位點(diǎn)影響胚胎珠蛋白基因表達(dá)[27]。KLF3 與KLF8 可能相互作用共同參與發(fā)育過程中抑制γ-珠蛋白的表達(dá)，但其具體機(jī)制暫不明確。

研究發(fā)現(xiàn)，miR-326 直接靶向結(jié)合KLF1的3′-UTR 在轉(zhuǎn)錄后下調(diào)KLF1 的表達(dá)，使BCL11A表達(dá)下降，從而提高γ-珠蛋白基因的表達(dá)[28]。KLF3 是促紅細(xì)胞生成的負(fù)性調(diào)節(jié)劑，能夠抑制γ-珠蛋白和miR-23a 的表達(dá)，與SP1 同屬于β 類珠蛋白基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，miR-23a、miR-27a 分別靶向結(jié)合SP1和KLF3，抑制SP1 及KLF3 與β 類球蛋白基因座的結(jié)合，促進(jìn)β 類球蛋白的轉(zhuǎn)錄，提高了γ 球蛋白的表達(dá)[29]。最近，有研究團(tuán)隊(duì)[30]對KLFs表達(dá)譜進(jìn)行分析，認(rèn)為KLF6也是潛在的紅細(xì)胞生成調(diào)節(jié)劑，當(dāng)抑制KLF6的表達(dá)可顯著提高紅系細(xì)胞系HUDEP-2和CD34+細(xì)胞中的γ-珠蛋白mRNA 和蛋白質(zhì)水平，miR-2355-5p 通過抑制KLF6的表達(dá)使得γ-球蛋白的合成增加，說明miR-2355-5p和KLF6之間的相互作用會影響γ-珠蛋白的表達(dá)，為β-地貧患者的臨床治療提供更多信息。

3.3 miRNA 通過調(diào)控MYB參與γ-珠蛋白基因調(diào)節(jié) MYB 是一種廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子，在造血細(xì)胞、胸腺和神經(jīng)組織中高度表達(dá)，并在淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞發(fā)育過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。全基因組關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)HBSL1和MYB基因的單核苷酸多態(tài)性與非貧血人群HbF 表達(dá)變異性相關(guān)，其中MYB上游的-84kb 和-71 kb 區(qū)域的單核苷酸多態(tài)性可妨礙MYB與紅系增強(qiáng)子的結(jié)合，抑制MYB基因的表達(dá)，進(jìn)而影響紅系細(xì)胞發(fā)育過程及HbF 表達(dá)水平[31]。Suzuki 等[32]通 過 建 立HBSL1-MYB突 變 的HPFH 小鼠模型，發(fā)現(xiàn)MYB 可以正向調(diào)控KLF1及BCL11A，間接抑制γ-珠蛋白的表達(dá)。MYB的表達(dá)水平一方面受HBS1L-MYB基因區(qū)間基因多態(tài)性的影響，另一方面miRNA 也能影響其功能。如miR-15a 和miR-16-1 可以與MYB 3′-UTR直接結(jié)合，降低轉(zhuǎn)錄因子MYB的表達(dá)水平，進(jìn)而促進(jìn)γ-珠蛋白表達(dá)[33]。

3.4 miRNA 通過調(diào)控其他轉(zhuǎn)錄因子參與γ-珠蛋白基因調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)錄激活因子4（ATF4）是一種應(yīng)激誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子，能夠控制多種適應(yīng)性基因的表達(dá)，并參與應(yīng)激反應(yīng)的相關(guān)調(diào)節(jié)。Huang 等[34]通過CRISPR-Cas9 技術(shù)確定ATF4 是一種新的γ-珠蛋白阻遏物，能夠特異性結(jié)合BCL11A+55增強(qiáng)子來調(diào)節(jié)BCL11A 進(jìn)而抑制γ-珠蛋白的表達(dá)。ATF4 還參與了β-地貧的壓力性造血[35]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，ATF4突變的細(xì)胞中BCL11A和MYB水平表達(dá)均降低，γ-珠蛋白表達(dá)增加，ATF4 可能與HBS1L-MYB基因間增強(qiáng)子區(qū)域結(jié)合并調(diào)節(jié)MYB的表達(dá)，因而影響γ-珠蛋白的表達(dá)。目前，ATF4 雖未被證實(shí)與miRNA 直接結(jié)合來調(diào)控γ-珠蛋白基因，但現(xiàn)有的研究顯示其可通過直接結(jié)合γ-珠蛋白基因相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)而參與γ-珠蛋白調(diào)控。

轉(zhuǎn)錄因子GATA-1 也是紅系特異性激活劑，參與紅系分化及血紅蛋白的轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)，GATA-1 還可抑制STAT3 活性，在γ-珠蛋白5'-UTR 中與STATS3競爭結(jié)合，且過表達(dá)GATA1通過STAT3 逆轉(zhuǎn)對γ-珠蛋白的沉默。miRNA 能夠結(jié)合這些轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)而參與調(diào)控γ-珠蛋白基因表達(dá)，如miR-26b 可特異性激活GATA-1 轉(zhuǎn)錄因子，使其表達(dá)顯著增加，提高K562 細(xì)胞中的γ-珠蛋白表達(dá)水平[36]。miR-34a可與STAT3相互作用，通過STAT3基因沉默來對γ球蛋白進(jìn)行調(diào)控，使γ-珠蛋白表達(dá)增加[37]。miRNA還能通過參與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的NRF2 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)紅系細(xì)胞的氧化應(yīng)激耐受性及γ-珠蛋白的表達(dá)[38]。Li等[39]對鐮狀細(xì)胞性貧血患者的網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA 進(jìn)行miRNA 表達(dá)譜分析，發(fā)現(xiàn)患者中HbF 含 量 差 異 與miR-144 相 關(guān)，miR-144 可 介 導(dǎo)NRF2基因沉默，從而抑制γ-珠蛋白表達(dá)。血紅蛋白的表達(dá)主要是通過轉(zhuǎn)錄后修飾來調(diào)節(jié)，miRNA除了與轉(zhuǎn)錄因子形成復(fù)合物外，還能直接與γ-珠蛋白mRNA 相結(jié)合來影響其表達(dá)。Azzouzi 等[40]在臍帶和外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)行miRNA 篩選，證明miR-96 直接靶向結(jié)合γ-珠蛋白mRNA 的開放閱讀框，以使γ-珠蛋白表達(dá)沉默。

4 miRNA在β-地貧中的治療作用

目前，γ-珠蛋白基因的再激活能有效改善β-地貧患者臨床癥狀，羥基脲是至今為止唯一獲得FDA批準(zhǔn)的HbF 誘導(dǎo)劑，能夠有效誘導(dǎo)β-地貧患者體內(nèi)γ-珠蛋白基因的表達(dá)，抑制無效紅細(xì)胞生成，從而減輕患者的臨床癥狀。羥基脲誘導(dǎo)HbF 的具體機(jī)制仍不明確，據(jù)已有的研究推測，羥基脲可能是通過調(diào)節(jié)GATA-1 和GATA-2 表達(dá)，延緩紅細(xì)胞的成熟并刺激γ-球蛋白的表達(dá)，促進(jìn)血紅蛋白向HbF的轉(zhuǎn)換[41]。最近研究發(fā)現(xiàn)另一種通過羥基脲介導(dǎo)γ-珠蛋白基因表達(dá)的新途徑，是通過miRNA 介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。Mnika等[42]發(fā)現(xiàn)經(jīng)羥基脲處理后22個(gè)miRNA 的表達(dá)發(fā)生了改變，而這些差異表達(dá)的miRNA 的分子靶標(biāo)大多數(shù)與γ-珠蛋白基因調(diào)控相關(guān)，包括BCL11A（miR-148b-3p，miR-32-5p，miR-340-5p 和miR-29c-3p），MYB（miR-105-5p）和KLF3（miR-106b-5）和SP1（miR-29b-3p，miR-625-5p，miR-324-5p，miR-125a-5p，miR-99b-5p，miR-374b-5p 和miR-145-5p），它們在成人胎兒血紅蛋白沉默中起重要作用。另一項(xiàng)研究在羥基脲的應(yīng)答者中發(fā)現(xiàn)高水平表達(dá)的miR-210 和miR-486-3p，表明上述miRNA可能與羥基脲的最大耐受劑量相關(guān)聯(lián)[43]。

5 總結(jié)與展望

目前，已經(jīng)確定參與調(diào)控γ-珠蛋白基因的轉(zhuǎn)錄因子，如BCL11A、MYB、KLFs、ATF4、GATA-1等，對γ-珠蛋白基因調(diào)控機(jī)制有了新的認(rèn)識。隨著對miRNA 研究的深入及γ-珠蛋白基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的完善，發(fā)現(xiàn)miRNA 可靶向轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)而影響γ-珠蛋白表達(dá)，如miR-210、LIN28B、miR-438-3p、miR-30a和miR-138-5p 靶向BCL11A促進(jìn)γ-珠蛋白基因的表達(dá)，另外，如miR-326、miR-15a、miR-16-1、miR-26b、miR-34a、miR-23a、miR-27a、miR-23355-5p 和miR-144 也可與相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合促進(jìn)γ-珠蛋白的表達(dá)。除此之外，miRNA 也可直接結(jié)合γ-珠蛋白基因，抑制其表達(dá)，如miR-96。盡管現(xiàn)在已有對β-地貧患者進(jìn)行基因治療的相關(guān)研究，但存在操作難度大，有一定的治療風(fēng)險(xiǎn)及費(fèi)用高昂等問題，暫時(shí)無法在臨床上大力推廣。目前為止，內(nèi)源性γ-珠蛋白基因的激活依然是可行性較高的治療方向，我們可根據(jù)miRNA 對其的調(diào)控作用，制定相應(yīng)靶向miRNA的抑制劑或?qū)胪庠葱詍iRNA激活γ-珠蛋白基因，從而提高患者體內(nèi)胎兒血紅蛋白含量。但是，miRNA 的種類繁多，具有不同的調(diào)控途徑，仍有許多miRNA 暫未探明其具體機(jī)制，相信在未來科研人員的努力下，miRNA 對γ-珠蛋白基因的調(diào)控研究將更加明朗，對β-地貧的發(fā)生發(fā)展的機(jī)制研究也會更加明確，這些都將為以后β-地貧的早期診斷及治療提供巨大的幫助。