劉夢，吳森

(青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院 青海省高原家畜遺傳資源保護與創(chuàng)新利用重點實驗室，西寧 810016)

藏羊耐寒、耐粗飼，對高寒草地低氣壓、寒冷、濕度等自然條件和常年放牧管理模式有較強的適應(yīng)性[1]。歐拉羊，原名歐拉型藏羊，是在低溫、低氧的生態(tài)環(huán)境中經(jīng)過長期自然和人工繁育而成的一種地方特色動物品種。與其他藏羊相比，歐拉羊體形大、四肢高、腰背部寬而平、后軀豐滿、肉用生產(chǎn)性能好、前期生長快[2]。在同一畜種中，無角型動物比有角型動物性格溫順，攻擊性低、生產(chǎn)性能良好，且更適合現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖。有研究指出，無角公羊的適應(yīng)性較強，尤其在冬季和春季，無角公羊的體況明顯優(yōu)于有角公羊[3]，無角母羊的繁殖性能優(yōu)于有角母羊，培育無角羊?qū)Πl(fā)展草原生態(tài)畜牧業(yè)具有重要的意義[4]。同時，歐拉羊羔經(jīng)短時間育肥后日增重高，接近進口純種肉羊水平，增重速度也相當快，適用于羊肉的工業(yè)化生產(chǎn)，具有廣闊的市場前景，是肉羊養(yǎng)殖場和專業(yè)家庭飼養(yǎng)肉羊的理想品種[5]。本研究以青海省歐拉羊主產(chǎn)區(qū)的傳統(tǒng)有角型歐拉羊及新選育出的無角型歐拉羊為研究對象，對自然放牧狀態(tài)下不同生長階段的無角及有角歐拉羊進行血清生化指標檢測，以期為無角型歐拉羊生產(chǎn)性能評定及生產(chǎn)養(yǎng)殖提供理論和技術(shù)支持，同時，為未來無角型歐拉羊品種育成提供技術(shù)理論積累。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

該試驗于2020年4～6月，在青海省黃南藏族自治州河南蒙古族自治縣開展。隨機選取自然放牧條件下健康狀況良好，體重相近的羔羊48只，分成2組(無角型歐拉羊為A組，有角型歐拉羊為B組)，每組年齡段分為6月齡、12月齡和36月齡，且每組3個重復(fù)，每個重復(fù)8只羊。在枯草期時，將試驗動物同時自然放牧飼養(yǎng)。預(yù)試期為10 d，正式期為60 d。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗所用歐拉羊在天然草場進行自然放牧，自由采食和飲水，自由活動，正常免疫防疫。

1.3 樣品采集

采集的血液樣本在青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院實驗室內(nèi)利用“酶標生物”的綿羊血清Elisa試劑盒進行血清生化指標測定，每組歐拉羊清晨空腹靜脈采血，靜置后，2 500 r/min離心20 min。檢測收集的上清液，在保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

1.4 血清生化指標的測定

本試驗檢測的血清指標包括抗氧化相關(guān)、生長代謝相關(guān)、免疫相關(guān)指標(共計24個)。

1.4.1抗氧化指標 超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)。

1.4.2生長代謝指標 谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、白蛋白(Albumin)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、雌二醇(E2)、生長激素(GH)、胰島素(INS)、尿素(Urea)。

1.4.3免疫指標 球蛋白(GLB)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細胞介素1β(IL-1β)、白細胞介素2(IL-2)、白細胞介素4(IL-4)、白細胞介素6(IL-6)、總蛋白(TP)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)資料采用Excel進行整理，采用IBM SPSS 24.0軟件進行T檢驗比較兩組差異，結(jié)果以“平均值±標準差”表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 歐拉羊抗氧化相關(guān)血清生化指標的測定

由表1可知，6月齡A組血清SOD、LDH、GSH-Px含量顯著高于B組(P<0.05)，B組血清CAT、MDA含量顯著高于A組(P<0.05)；12月齡A組血清LDH、GSH-Px含量高于B組，但未達到顯著(P>0.05)，B組血清CAT、MDA含量高于A組(P>0.05)；36月齡A組血清SOD、CAT、LDH含量高于B組，但未達到顯著(P>0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且B組血清MDA含量高于A組(P>0.05)。

表1 無角、有角型歐拉羊抗氧化相關(guān)血清生化指標的比較

2.2 歐拉羊生長代謝相關(guān)血清生化指標的測定

由表2可知，6月齡A組血清GH含量顯著高于B組(P<0.05)，B組血清AST、ALT、ALP、Albumin、TC含量顯著高于A組(P<0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且A組血清E2、Urea含量高于B組(P>0.05)；12月齡A組血清TP、AST、TC、TG、E2、GH、INS含量高于B組，但均未達到顯著(P>0.05)，B組血清ALT、Urea含量高于A組，但未達到顯著(P>0.05)；36月齡A組血清AST、Albumin、TC、TG含量顯著高于B組(P<0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且B組血清TP、ALP、GH、Urea含量高于A組(P>0.05)。

表2 無角、有角型歐拉羊生長代謝相關(guān)血清生化指標的比較

2.3 歐拉羊免疫相關(guān)血清生化指標的測定

由表3可知，6月齡A組血清GLB含量顯著高于B組(P<0.05)，B組血清IgM、IL-6含量顯著高于A組(P<0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且A組血清IgG、IL-1β、IL-2、IL-4含量高于B組(P>0.05)；12月齡A組血清IL-6含量顯著高于B組(P<0.05)，B組血清IgM含量顯著高于A組(P<0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且A組血清IgG、IL-1β、IL-4含量高于B組(P>0.05)；36月齡A組血清IgA、IgM、IL-2含量顯著高于B組(P<0.05)，B組血清GLB、IL-4含量顯著高于A組(P<0.05)，其余指標均未達到顯著(P>0.05)，且A組血清IgG、IL-1β含量高于B組(P>0.05)。

表3 無角、有角型歐拉羊免疫相關(guān)血清生化指標的比較

3 討論

3.1 無角、有角型歐拉羊血清抗氧化指標的比較

由于動物體內(nèi)產(chǎn)生的自由基和消除一直處于微觀動態(tài)平衡，當動物機體受到外在因素刺激后發(fā)生氧化應(yīng)激，產(chǎn)生大量自由基，且動物體內(nèi)的SOD、CAT、GSH-Px等發(fā)生抗氧化酶還原反應(yīng)，通過酶解系統(tǒng)可以清除自由基，維持動物體內(nèi)氧化還原的微動力學(xué)平衡[6]。LDH是衡量機體糖代謝的主要指標[7]，在本試驗中，6月齡A組血清SOD、LDH、GSH-Px含量顯著高于B組(P<0.05)，12月齡A組血清SOD、LDH、GSH-Px含量高于B組，但未達到顯著(P>0.05)，36月齡A組血清SOD、CAT、LDH、GSH-Px含量高于B組，但差異不顯著(P>0.05)。說明在枯草期自然放牧條件下，可以提高無角型歐拉羊的抗氧化能力和抗病能力，能夠很好地保護機體免受損傷，這與張勇[8]的研究結(jié)果一致。MDA是脂質(zhì)氧化的最終產(chǎn)物，MDA含量直接反映了動物體內(nèi)脂質(zhì)氧化和細胞損傷的程度[9]。在本試驗中，A組血清MDA含量無論在哪個月齡均低于B組，說明在枯草期時，無角型歐拉羊的抗氧化能力強于有角型，這與陳浩等[10]的研究結(jié)果一致。

3.2 無角、有角型歐拉羊血清生化指標的比較

在血清生化指標中，血清中ALP、ALT、AST的活性是反映機體肝臟生理機能狀況的重要指標[11-13]。在本試驗中，6月齡B組血清AST、ALT、ALP含量顯著高于A組(P<0.05)，12月齡B組血清ALT含量顯著高于A組(P<0.05)，36月齡A組血清AST含量顯著高于B組(P<0.05)，說明枯草期能夠使有角型歐拉羊的蛋白質(zhì)水平提高，這與郭武君[14]、戴東文[15]、王彩蓮[16]、莫文生[17]的研究結(jié)果相似。TC和TG是反映機體脂類吸收、代謝和利用的重要指標，它們的數(shù)值越低，表明機體脂肪利用率越高[18-20]。在本試驗中，6月齡B組血清TC含量顯著高于A組(P<0.05)，12月齡A組血清TC、TG含量高于B組，但差異不顯著(P>0.05)，36月齡A組血清TC、TG含量顯著高于B組(P<0.05)，說明在枯草期自然放牧條件下，隨著月齡的增加，提高了有角型歐拉羊脂肪的攝入量，使脂肪的利用率增加，這與吳華卓[21]的研究結(jié)果一致。

3.3 無角、有角型歐拉羊血清免疫指標的比較

在血清免疫指標中，免疫球蛋白是由具有抗體球蛋白活性的漿細胞產(chǎn)生的，由一種高活性小分子多肽分泌的免疫細胞和細胞因子合成，動物血清中免疫球蛋白和細胞因子水平雖然低，但在機體的免疫防御系統(tǒng)中起著重要的作用[22]。GLB對動物體液免疫具有重要的影響作用[23,24]，在本試驗中，僅有6月齡A組血清GLB含量顯著高于B組，而12月齡和36月齡A組血清GLB含量顯著低于B組，說明在枯草時期，隨著月齡的增加，有角型歐拉羊的免疫系統(tǒng)強于無角型歐拉羊。IgA、IgG、IgM均是動物機體體液免疫的主要檢測指標。在本試驗中，6月齡、12月齡和36月齡A組血清IgG含量高于B組，36月齡A組血清IgA、IgM含量顯著高于B組(P<0.05)，說明在枯草時期，隨著月齡的增加，無角型歐拉羊的免疫系統(tǒng)也不斷增強。白細胞介素(IL)是由多種細胞產(chǎn)生并作用于免疫系統(tǒng)的一類細胞因子。常見的促炎性因子包括IL-2、IL-6等，常見的抗炎性因子包括IL-4和IL-10等[25]。IL-2能夠刺激T淋巴細胞增殖，IL-6能夠誘導(dǎo)B細胞分化，IL-4可以抑制促炎因子的產(chǎn)生[26]。在本試驗中，6月齡A組血清IL-1β、IL-2、IL-4含量高于B組，12月齡A組血清IL-6含量顯著高于B組(P<0.05)，36月齡A組血清IL-2含量顯著高于B組(P<0.05)，說明在枯草時期能夠提高無角型歐拉羊機體的免疫力，這與徐萍[27]、楊春濤[28]的研究結(jié)果相似。

4 結(jié)論

綜上所述，在枯草期自然放牧條件下，無角型歐拉羊的抗氧化能力、免疫能力強于有角型歐拉羊，6月齡無角型歐拉羊GH(生長因子)水平高于有角型歐拉羊，生產(chǎn)性能更優(yōu)。

致謝感謝青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動物科學(xué)專業(yè)高永強同學(xué)在本研究數(shù)據(jù)整理、樣本測定中的幫助。