胡見英

肺癌是常見惡性腫瘤，WHO統(tǒng)計(jì)顯示肺癌每年的發(fā)生人數(shù)和因肺癌致死人數(shù)約為120萬例和110萬例，且肺癌在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率呈明顯升高的趨勢，在人類的死亡原因中占據(jù)惡性腫瘤首位，其診斷和治療已經(jīng)成為全球性的公共健康問題。肺癌起病隱匿，發(fā)現(xiàn)時(shí)多數(shù)已至中晚期，嚴(yán)重影響患者治療、預(yù)后。因此肺癌患者早期、及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷對治療具有重要的臨床意義[1]。由于肺癌的早期癥狀與多種呼吸系統(tǒng)癥狀具有極高的相似度，因此以常規(guī)的影像檢測的效果并不理想，穿刺活檢等病理檢測難以實(shí)施，患者因此極易錯(cuò)過黃金診斷和治療的時(shí)機(jī)，腫瘤標(biāo)志物是較早用于肺癌的診斷方法，目前常用的腫瘤標(biāo)志物有多種，人附睪蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）在相關(guān)的研究中被認(rèn)為具有肺癌診斷和評估預(yù)后的潛力，其是WFDC2基因編碼的產(chǎn)物，是評估生殖系統(tǒng)惡性腫瘤（卵巢癌）的重要標(biāo)志物[2]，癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）在席艷等[3]研究中發(fā)現(xiàn)其對多種腫瘤具有較高的敏感性，通常被作為廣泛性的腫瘤標(biāo)志物，但由于影響CEA血清水平的因素較多，目前雖然多將其作為多種腫瘤的診斷和預(yù)后判斷的重要標(biāo)志物，具有重要的臨床價(jià)值。但目前對兩種腫瘤標(biāo)志物在肺癌中的應(yīng)用研究相對較少，本研究旨在觀察HE4、CEA單獨(dú)和聯(lián)合檢測在肺癌的診斷和預(yù)后生存的檢測效果，具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)過中國倫理學(xué)會原副會長、經(jīng)濟(jì)倫理學(xué)專業(yè)委員會會長批準(zhǔn)后，選取東莞市寮步醫(yī)院2012年1月—2014年1月收治的86例肺癌患者為研究對象，其中男：51例，女：35例，年齡：35～70歲，平均年齡（57.3±12.1）歲。非小細(xì)胞肺癌68例，小細(xì)胞肺癌18例。分期：Ⅰ期：18例，Ⅱ期：20例，Ⅲ期：32例，Ⅳ期：16例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有納入病例均為經(jīng)影像學(xué)及病理學(xué)確診的初診患者，均未進(jìn)行手術(shù)及放療、化療；（2）患者為原發(fā)性肺癌，剔除其他部位的轉(zhuǎn)移性癌；（3）經(jīng)CT、骨掃描、MRI、實(shí)驗(yàn)室生化及常規(guī)等檢測提示無大范圍全身轉(zhuǎn)移，預(yù)期生存期在3個(gè)月以上；（4）患者一般狀況可，美國東部腫瘤協(xié)作組評分（Eastern collaborative oncology group，ECOG）：0～2分；（5）患者無嚴(yán)重高血壓、糖尿病等代謝性疾病，腎功能無明顯異常，既往無腎臟病史。另選擇東莞市寮步醫(yī)院體檢中心80例健康體檢者為對照，其中男：42例，女：38例，年齡：32～65歲，平均年齡（57.5±12.1）歲。肺癌患者與健康體檢者間年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有患者均知曉本研究目的、過程及意義，簽署知情同意書。

1.2 方法

所有患者在入院第2天、未進(jìn)行任何治療的情況下，取清晨、空腹靜脈血5 mL，3 500 r/min離心5 min，取血清于-20℃保存待測。HE4檢測：選用天津華裕生物科技有限公司提供的HE4檢測試劑盒酶聯(lián)反應(yīng)吸附法（enzyme-linked immune sorbent assay，ELISA），由高年資檢驗(yàn)技師獨(dú)立完成，所有操作步驟均嚴(yán)格參照試劑盒說明書。CEA檢測：采用羅氏公司（品牌國別：瑞士）提供的全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀（羅氏Cobas e601型）測定，選用配套CEA測定試劑盒，所有步驟嚴(yán)格參照試劑盒說明書。檢測前所有儀器及試劑均需進(jìn)行質(zhì)量控制，確定試劑及儀器均在控后才可進(jìn)行檢測，以確保檢測結(jié)果的可信性。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察記錄兩組患者血清中HE4、CEA水平，分析2項(xiàng)血清指標(biāo)聯(lián)合檢測和單項(xiàng)血清指標(biāo)檢測對肺癌的診斷特異度、靈敏度和準(zhǔn)確性，同時(shí)記錄肺癌患者無進(jìn)展生存時(shí)間（是指由隨機(jī)至第1次發(fā)生疾病進(jìn)展或任何原因死亡的時(shí)間）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用（±s）描述，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用（n，%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，兩種標(biāo)志物對肺癌的診斷價(jià)值采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）分析；采用Kaplan-Meier法分析患者無疾病進(jìn)展生存時(shí)間（progression-free survival，PFS）；所有結(jié)果均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺癌患者與健康體檢者血清HE4、CEA水平比較

肺癌患者與健康體檢者HE4血清水平比較：（162.81±38.65）pmol/Lvs. （35.12±10.08）pmol/L，P=0.000，CEA血清水平比較：（16.38±7.29）U/mLvs. （2.15±1.03）U/mL，P=0.000。肺癌患者血清HE4、CEA水平均顯著高于健康體檢者。見表1。

表1 肺癌患者與健康體檢者HE4、CEA水平比較（±s）

表1 肺癌患者與健康體檢者HE4、CEA水平比較（±s）

2.2 HE4、CEA對肺癌的診斷價(jià)值

HE4、CEA診斷肺癌的曲線下面積均大于0.70（P＜0.001），兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.928，P=0.352）。而HE4和CEA二者聯(lián)合診斷肺癌的曲線下面積為0.933，均顯著大于HE4、CEA診斷的曲線下面積（Z=2.808、2.715，P=0.004、0.007），同時(shí)敏感度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值均高于單一指標(biāo)。見表2。

表2 HE4、CEA診斷肺癌的ROC曲線分析結(jié)果

2.3 肺癌患者疾病進(jìn)展生存時(shí)間（PFS）比較

以HE4中位值98.12 pmol/L為臨界值，5 U/mL為CEA臨界值，分為低水平組與高水平組。HE4高水平與低水平組中位PFS比較：8.9月vs.12.6月，P=0.016；CEA高水平與低水平組中位PFS比較：9.1月vs.12.3月，P=0.025。

3 討論

肺癌的早期診斷對該病的治療和預(yù)后有積極意義，CT、MRI等影像學(xué)檢測、細(xì)胞學(xué)檢測、腫瘤標(biāo)志物等實(shí)驗(yàn)室檢測均是目前應(yīng)用較為廣泛的診斷方法[4-5]。但是影像學(xué)只能起到診斷的提示作用，不能確診，而肺癌在早期、中期的癥狀并不明顯，極易與其他肺相關(guān)疾病誤診，細(xì)胞學(xué)檢測雖然被認(rèn)為是“金標(biāo)準(zhǔn)”，但是穿刺針取得肺組織標(biāo)本是一個(gè)有創(chuàng)過程，容易導(dǎo)致組織損傷或者癌細(xì)胞沿針道擴(kuò)撒，且不能保證取到惡變組織，所以臨床一般只在高度懷疑的情況下做確診采用該種方法。考慮到肺癌的主要治療方法為手術(shù)治療，如能早期進(jìn)行有效的切除，還能取得相對較好的預(yù)后，而晚期手術(shù)治療的效果并不理想，患者術(shù)后5年生存率極低，因此尋找能盡早、準(zhǔn)確的診斷方法，以及在術(shù)前、術(shù)后能用于反復(fù)檢測的診斷方法具有必要性[6-7]。

腫瘤標(biāo)志物是最早用于肺癌的診斷方法之一[8-9]，具有無創(chuàng)、簡便等優(yōu)點(diǎn)，對肺癌早期診斷、臨床分期、病理分型、指導(dǎo)預(yù)后和療效判定都具有重要提示作用[10]。目前用于肺癌臨床診斷的腫瘤標(biāo)志物眾多，但是單項(xiàng)檢測往往受制于其低敏感性，診斷效果不顯著，因而尋求多種腫瘤血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測是臨床上提高診斷靈敏度和特異度的重要方法[11-12]。本研究選擇了新型腫瘤標(biāo)志物HE4與臨床最為常見的腫瘤標(biāo)志物CEA聯(lián)合應(yīng)用于肺癌的診斷和預(yù)后判斷，分析其對肺癌的臨床應(yīng)用價(jià)值，以期為肺癌診斷、預(yù)后判斷提供新思路。HE4是以半胱氨酸豐富肽、酸性單信號肽為特征的一種乳酸分泌蛋白，其在輸卵管上皮、子宮內(nèi)膜腺體等女性生殖系統(tǒng)上皮組織，及附睪、輸精管等男性生殖系統(tǒng)上皮組織呈高表達(dá)狀態(tài)，所以HE4的異常表達(dá)在卵巢癌病理過程中有較多研究，既往多被認(rèn)為是卵巢癌的特異性腫瘤標(biāo)志物[13-14]。但最近有研究顯示，HE4在肺癌組織中也呈高表達(dá)，如崔勝金等[15]對99例肺癌患者采用免疫組化的方法測定了肺癌組織HE4水平，以及采用RT-PCR檢測肺癌組織HE4基因水平變化，發(fā)現(xiàn)HE4無論是蛋白層面還是基因?qū)用嬖诜伟┙M織均高表達(dá)，在肺腺癌尤其顯著，這提示提示HE4可能是肺癌的潛在生物標(biāo)志物。

本次研究結(jié)果顯示，HE4在肺癌患者血清水平顯著高于健康體檢者，陳波等[16]在對非小細(xì)胞癌的研究中指出，HE4對于肺癌具有較高的敏感度，血清HE4對于早期非小細(xì)胞肺癌具有高表達(dá)，診斷敏感度為72.41%，特異度和準(zhǔn)確率分別為92.63%和87.90%，本次研究則分別為83.36%、80.69%、84.17%，數(shù)據(jù)差異較小，本文中CEA有類似的結(jié)果，這表明HE4和CEA均可作為肺癌診斷的腫瘤標(biāo)志物，且研究中對于HE4、CEA檢測的結(jié)果還顯示，HEA與CEA兩者單獨(dú)檢測的曲線下面積均對肺癌有診斷價(jià)值，由此可見，HE4、CEA兩項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物在肺癌中均存在高表達(dá)，在用于疑似肺癌的患者的診斷時(shí)具有一定價(jià)值，但考慮到單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的影響因素較多，單獨(dú)檢測的局限性較強(qiáng)，本次研究中HE4、CEA單獨(dú)檢測的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值均在80%左右，檢測率并不理想，因此聯(lián)合檢測已經(jīng)成為目前研究的主要方向，本次研究中，兩項(xiàng)指標(biāo)結(jié)合后曲線下面積、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值等指標(biāo)也均顯示高于兩項(xiàng)指標(biāo)的單獨(dú)診斷效率，與相關(guān)研究的結(jié)果相符合[17-18]，可見聯(lián)合檢測的效果更加理想，可顯著降低漏診和誤診的發(fā)生率，價(jià)值更高。在對患者的預(yù)后生存分析中筆者發(fā)現(xiàn)，HE4、CEA高水平組與低水平組比較，高水平組中位PFS明顯降低，這表明HE4與CEA高水平可能提示其預(yù)后不佳，聯(lián)合用于肺癌患者的診斷、治療、預(yù)后檢測具有重要價(jià)值[19]。由于本次研究中收集患者例數(shù)相對較少，研究結(jié)果可能存在一定偏畸，在今后的研究中，還需要擴(kuò)大臨床病例數(shù)，以便在相關(guān)問題上做進(jìn)一步分析。

綜上所述，肺癌患者血清HE4、CEA水平顯著升高，HE4可以作為類似CEA的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于肺癌臨床診斷和預(yù)后判斷，但兩者單獨(dú)檢測的準(zhǔn)確率相對較低，而兩者聯(lián)合檢測可在一定程度上彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測的不足，提高診斷效率，對預(yù)后也有較好的判定價(jià)值，值得推廣。