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大連市婦女兒童醫(yī)療中心(集團) 遺傳代謝醫(yī)療中心 遼寧 大連 116600

新生兒疾病篩查是指在新生兒期通過快速、簡便、敏感的檢測方法對一些嚴重影響患兒身體和智力發(fā)育的先天性、遺傳性疾病進行早期群體篩查，從而使患兒得到早期診斷、早期治療，避免患兒生長、智力發(fā)育障礙，甚至死亡。先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)是一種常染色體隱性遺傳病，由于類固醇激素合成過程中某些酶先天缺陷，導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)醇的合成過程完全或者部分受阻，使促腎上腺皮質(zhì)激素增加，導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)增生，引發(fā)以腎上腺皮質(zhì)功能不同程度減退、性腺發(fā)育異常、伴或不伴水鹽代謝、高血壓等為主要表現(xiàn)的綜合征[1]。血17α-羥孕酮(17-OHP)水平測定是CAH診斷和療效評估的一個重要指標(biāo)。本研究對大連地區(qū)新生兒CAH篩查數(shù)據(jù)進行分析，探討大連地區(qū)足月兒、早產(chǎn)兒及正常體重兒、低體重兒CAH篩查中17-OHP分布狀況及切值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為2019年12月至2021年4月在我市分娩的活產(chǎn)新生兒，共計45 504例。新生兒出生72 h后，并充分哺乳6次以上由助產(chǎn)機構(gòu)專業(yè)護理人員采集3滴足跟血滴于專用濾紙上，要求每個血斑直徑≥8 mm，血斑均勻滲透到濾紙兩面，在室溫下自然晾干，避免陽光直射，放置于4℃冰箱密封保存，一周內(nèi)運送或者郵寄到實驗室進行新生兒疾病篩查。

1.2 儀器與試劑 全自動打孔儀(Panthera-PuncherTM9，美國PerkinElmer公司)；美國PerkinElmer公司全自動熒光免疫分析儀(GSP，Genetic Screening Processor，型 號為2021-0010)及其配套的測定試劑盒。質(zhì)控品采用第三方質(zhì)控品，由杭州寶榮科技有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號為R1191201-2。檢測方法為時間分辨熒光免疫分析法。

1.3 結(jié)果判斷 測定濾紙血片中17-OHP濃度，初篩切值統(tǒng)一定為11 nmol/L。若標(biāo)本17-OHP濃度≥11 nmol/L，則判斷該新生兒先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥初篩為陽性，然后原血片復(fù)查，結(jié)果仍為陽性則由網(wǎng)絡(luò)組人員通知患兒家長召回復(fù)查，若復(fù)查仍為可疑陽性則需到綜合性醫(yī)院進行確診及分型。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件對新生兒17-OHP濃度結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。對新生兒的17-OHP篩查結(jié)果做正態(tài)性檢驗，由于17-OHP濃度數(shù)據(jù)屬于偏態(tài)分布，因此本研究通過百分位數(shù)法確定其切值。

2 結(jié)果

2.1 17-OHP初篩濃度分析 研究對象中足月兒(≥37 w)42 987例，占比94.5%，早產(chǎn)兒(<37 w)2 517例，占比5.5%；正常體重兒(≥2 500 g)43 770例占比96.2%，低體重兒(<2 500 g)的1 734例，占比3.8%。對45 504例新生兒17-OHP初篩濃度進行正態(tài)性檢驗分析，結(jié)果顯示45 504例新生兒17-OHP初篩濃度呈偏態(tài)分布，見表1。17-OHP總體最小值為0.30 nmol/L，最大值為396.30 nmol/L，95%和99%百分位數(shù)分別為8.10 nmol/L和13.20 nmol/L。

表1 17-OHP濃度頻數(shù)分布表

2.2 17-OHP濃度與孕周的關(guān)系 將45 504例新生兒按出生孕周分為早產(chǎn)兒組(<37 w)和足月兒組(≥37 w)。其中早產(chǎn)兒2 517例，早產(chǎn)兒組17-OHP濃度分布水平為(8.6±6.3)nmol/L。早產(chǎn)兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.12 nmol/L和32.87 nmol/L；足月兒42 987例，足月兒組17-OHP濃度分布水平為(3.8±2.7)nmol/L。足月兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為7.20 nmol/L和10.01 nmol/L(表2)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，早產(chǎn)兒組和足月兒組17-OHP濃度比較，P<0.01。

表2 早產(chǎn)兒與足月兒17-OHP濃度的比較

2.3 17-OHP濃度與體重的關(guān)系 將45 504例新生兒按出生體重分為低體重兒組(<2 500 g)和正常體重兒組(≥2 500 g)。其中低體重兒1 734例，低體重兒組17-OHP濃度分布水平為(8.8±6.6)nmol/L。低體重兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.99 nmol/L和33.62 nmol/L；正常體重兒43 770例，正常體重兒組17-OHP濃度分布水平為(3.9±2.8)nmol/L。正常體重兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為7.5nmol/L和10.7 nmol/L(表3)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，低體重兒組和正常體重兒組17-OHP濃度比較，P<0.01。

表3 低體重兒與正常體重兒17-OHP濃度的比較

2.4 新生兒CAH篩查確診情況匯總分 45 504例篩查標(biāo)本中初篩陽性共計818例，其中早產(chǎn)兒543例，足月兒275例；低體重兒415例，正常體重兒403例。經(jīng)召回復(fù)查確診，最終確診CAH共3例，均為男性患兒。確診患兒17-OHP初篩值及孕周、體重詳情見表4，CAH篩查發(fā)病率為1/15 168。

表4 確診患兒17-OHP初篩值與孕周、體重統(tǒng)計表

3 討論

CAH是一種常染色體隱性遺傳病，主要包括21-羥化酶、11β-羥化酶、17α-羥化酶缺陷等類型，其中21-羥化酶缺陷癥所占的比例高達90%～95%，是最常見的一種類型，通過對新生兒17-OHP濃度的檢測能篩查出70%未出現(xiàn)臨床癥狀的21-羥化酶缺陷，使患兒及時得到診斷和治療。21-羥化酶缺陷癥根據(jù)臨床癥狀可分為單純男性化型、失鹽型和非經(jīng)典型[2]。我國CAH發(fā)病率約為1/14 000～1/16 000[3]，大連市2019年12月—2021年4月新生兒CAH發(fā)病率為1/15 168。

在新生兒疾病篩查實驗中，建立合理的切值十分重要，所采用的切值是否合理將直接影響陽性結(jié)果的判斷，若切值過高會增加漏診的風(fēng)險；若切值過低則會增加假陽性率，浪費人力、物力，并且還會給新生兒家長帶來不必要的心理負擔(dān)。因此，設(shè)立合適的陽性切值是CAH篩查的關(guān)鍵點。由于各篩查實驗室篩查條件、方法不完全相同，且不同地區(qū)人群分布亦不同，因此各地區(qū)應(yīng)建立適合本地區(qū)、本實驗室的17-OHP合理切值。切值設(shè)置常用方法包括均值±標(biāo)準(zhǔn)差法、ROC曲線法及百分位數(shù)法。由于17-OHP濃度分布為偏態(tài)分布，因此適合使用百分位數(shù)法確定其切值。

國內(nèi)研究表明，新生兒17-OHP濃度水平與新生兒出生孕周及體重有關(guān)，早產(chǎn)和低體重新生兒17-OHP濃度可有不同程度的增高[4-5]。因此，要制定與新生兒出生孕周、體重相關(guān)的17-OHP切值。本研究顯示，兩組新生兒17-OHP濃度差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。本研究顯示17-OHP濃度隨體重增加而降低；且早產(chǎn)兒17-OHP濃度水平高于足月兒，這與國內(nèi)其他學(xué)者研究報道[6-8]相一致。

胡定波等[9]研究表明，提前采血尤其是新生兒出生后24 h內(nèi)就采血，會使CAH篩查的假陽性率明顯升高。因此篩查的血標(biāo)本采集時間不宜過早，各采血單位應(yīng)嚴格按照采血規(guī)范采血、保存以及運輸血片，以免造成假陽性或者假陰性。對于CAH篩查，國內(nèi)多數(shù)新生兒疾病篩查實驗室都有各自的陽性切值，目前全國并無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。為了防止CAH病例的漏診及盡可能減少初篩假陽性率,結(jié)合以上統(tǒng)計數(shù)據(jù)同時根據(jù)本實驗室的實際情況,建議目前大連地區(qū)的足月且正常體重兒的17-OHP陽性切值不調(diào)整依然為11 nmol/L；而早產(chǎn)兒或低體重兒的17-OHP陽性切值切值適當(dāng)調(diào)高暫定為30 nmol/L，待本實驗室早產(chǎn)和低體重新生兒17-OHP數(shù)據(jù)積累到一定數(shù)量再重新計算并校正其切值。