白珊澤，姚萬玲，紀(jì) 鵬，魏彥明，華永麗

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅蘭州 730070)

潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)是結(jié)腸的慢性炎癥，其病因包括遺傳、環(huán)境因素、微生物群和免疫系統(tǒng)等[1]。UC的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，UC最常見的癥狀是腹瀉、腹部絞痛、直腸出血、食欲不振和體重減輕等。如今，已開發(fā)出多種常規(guī)藥物(即非甾體抗炎藥、皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑和生物拮抗劑)用于臨床實(shí)踐中的UC治療[2]。但是，副作用和治療后反復(fù)發(fā)作限制了它們的臨床應(yīng)用。因此，鑒于這些缺點(diǎn)，迫切需要新藥和更好的治療方法。

白頭翁湯(Pulsatilladecoction，PD)始見于《傷寒論·厥陰篇》，原文：熱利下重者，白頭翁湯主之，下利欲飲水者，以有熱故也，白頭翁湯主之[3]，白頭翁湯主治腹瀉諸疾，療效可靠[4]。白頭翁湯由白頭翁、黃連、黃柏、秦皮四味藥組成，具有清熱解毒，涼血止痢功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，白頭翁湯具有抗菌、抗炎等作用，經(jīng)現(xiàn)代大量臨床及動物試驗(yàn)研究,已證明其對潰瘍性結(jié)腸炎的確有良好療效[2]。但是，白頭翁湯治療UC的分子機(jī)制尚不清楚。

中藥作用于機(jī)體的復(fù)雜性使他們的深入研究變得困難，而網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)則提供了在分子水平上評估藥理作用的有效方法。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一種基于疾病，蛋白質(zhì)靶標(biāo)和藥物相互作用網(wǎng)絡(luò)的系統(tǒng)分析方法[5]，目的是發(fā)現(xiàn)多組分與靶標(biāo)之間的協(xié)同作用和潛在的相互作用機(jī)制。由于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的優(yōu)勢，它們的整合通過連接活性物質(zhì)、分子靶標(biāo)和潛在途徑，為中藥機(jī)理提供了系統(tǒng)的見解[6]。分子對接預(yù)測配體與受體生物大分子相互作用的親和力和結(jié)合模式，這一技術(shù)被用于活性成分作用靶標(biāo)確認(rèn)以及中藥分子復(fù)方研究[7]。因此，本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接方法,分析白頭翁湯治療UC 的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和可能的分子作用機(jī)制,建立“有效成分-靶點(diǎn)-通路”之間的關(guān)系，探究該方治療UC的多成分、多靶點(diǎn)和多途徑作用機(jī)制，為后續(xù)的研究工作提供思路。

1 材料與方法

試驗(yàn)方案包括以下步驟：(1)篩選白頭翁湯活性成分，建立白頭翁湯活性成分-靶蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)；(2)篩選UC相關(guān)靶點(diǎn)，建立疾病-靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)；(3)建立活性成分靶點(diǎn)，疾病相關(guān)靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)，并將2個PPI網(wǎng)絡(luò)合并；(4)篩選核心靶點(diǎn)，進(jìn)行GO和KEGG富集分析；(5)活性成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)分子對接。整個過程如圖1所示。

1.白頭翁湯活性成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò);2.潰瘍性結(jié)腸炎-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò);3.PD治療UC的潛在靶點(diǎn)的相互作用網(wǎng)絡(luò);4.GO和KEGG富集分析;5.分子對接

1.1 PD活性成分和相關(guān)靶點(diǎn)篩選

通過TCMSP數(shù)據(jù)庫(http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)、PubChem數(shù)據(jù)庫(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)以及相關(guān)文獻(xiàn)尋找白頭翁湯中白頭翁、黃柏、黃連、秦皮化學(xué)成分，篩選口服生物利用度(OB)值≥30%，化合物類藥性(DL)值≥0.18[8-9]的活性成分，獲得白頭翁湯活性成分及其作用的蛋白靶點(diǎn)。

1.2 UC相關(guān)靶點(diǎn)的預(yù)測

通過DrugBank數(shù)據(jù)庫(https://www.drugbank.ca/)、OMIM數(shù)據(jù)庫(http://www.omim.org/)、PharmGKB數(shù)據(jù)庫(https://www.pharmgkb.org/)輸入“Ulcerative colitis”，檢索UC的相關(guān)基因。通過蛋白數(shù)據(jù)庫Uniprot 網(wǎng)站(https://www.Uniprot.org/)將白頭翁湯基因靶點(diǎn)轉(zhuǎn)換為人類基因標(biāo)準(zhǔn)名，使用網(wǎng)站檢索設(shè)定蛋白的種屬為“Homosapiens(Human)”。

1.3 白頭翁湯化合物-靶點(diǎn)和UC靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系的構(gòu)建

將篩選后的白頭翁湯活性化合物及其作用靶點(diǎn)對應(yīng)關(guān)系導(dǎo)入Cytoscape 3.2.1軟件構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖，進(jìn)行拓?fù)鋮?shù)分析，根據(jù)中介中心性(betweenness centrality,BC)和接近中心性(closeness centrality，CC)以及連接度(Degree)的中位數(shù)來分析化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)核心靶點(diǎn)，相同方法建立UC靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖。

1.4 白頭翁湯治療UC蛋白互相作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與核心靶點(diǎn)的分析

將白頭翁湯活性成分作用靶點(diǎn)和UC疾病靶點(diǎn)上傳到STRING11.0數(shù)據(jù)庫(http://string-db.org/cgi/input.pl)，分別構(gòu)建白頭翁湯活性成分作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)和UC靶蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI)，利用Cytoscape軟件的Bisogenet插件和CytoNCA插件構(gòu)建PD治療UC的潛在靶點(diǎn)的相互作用網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)選擇degree大于中位數(shù)的節(jié)點(diǎn)，篩選核心交集基因。

1.5 富集分析

運(yùn)用Rstudio軟件及R軟件包對篩選獲取的核心交集基因分別進(jìn)行GO功能注釋和KEGG通路分析(P<0.05)[13]，q<0.05(q為校正后P值)為富集的篩選閾值。

1.6 分子對接驗(yàn)證

運(yùn)用分子對接模擬軟件AutoDock Vina(1.1.2)對由1.1篩選得到PD的活性成分和1.4篩選得到的核心基因進(jìn)行受體-配位對接模擬計算。分子對接結(jié)果以Docking Score分?jǐn)?shù)值判決配體與受體的結(jié)合程度的強(qiáng)弱，對接結(jié)果自由結(jié)合能小于-16.736 kJ/mol表示具有一定的結(jié)合活性，小于-20.920 kJ/mol表示具有較好的結(jié)合活性，小于-29.288 kJ/mol表示具有強(qiáng)烈的結(jié)合活性[10-12]，利用Origin 2019b軟件用熱圖表示分子對接結(jié)果，利用LigPlus和PyMOL軟件分別對分子對接結(jié)果繪制2D和3D相互作用圖。

2 結(jié)果

2.1 白頭翁湯活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)的篩選

通過TCMSP等數(shù)據(jù)庫以及相關(guān)文獻(xiàn)篩選得到45個活性成分，其中白頭翁12個活性成分、秦皮6個活性成分、黃連12個活性成分、黃柏25個活性成分。利用45個活性成分與靶點(diǎn)關(guān)系構(gòu)建白頭翁湯活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(圖2)。經(jīng)Network Analyzer計算該化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)Degree、BC、CC值篩選白頭翁湯核心活性成分，其包括唐松草酚定(thalifendine)、槲皮素(quercetin)、β-谷甾醇(beta-sitosterol)、異鼠李素(isorhamnetin)、菜油甾醇(campesterol)、白屈菜紅堿(chelerythrine)、小檗紅堿(berberrubine)、豆甾醇(stigmasterol)、巴馬汀(palmatine)、甲基黃連堿(worenine)、小檗浸堿(berlambine)和白頭翁皂苷B4(anemoside B4)(表1)。這些Degree值排名在前的有效成分可能在白頭翁湯的藥理功能中發(fā)揮著相對重要的作用。

三角形.白頭翁、黃柏、秦皮、黃連;菱形.白頭翁湯活性成分；長方形.PD作用于UC的靶點(diǎn)

表1 白頭翁湯核心活性成分

2.2 UC靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

使用DrugBank、OMIM和PharmGKB數(shù)據(jù)庫篩選出急性結(jié)腸炎靶標(biāo)，得到潰瘍性結(jié)腸炎-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(圖3)。

菱形.UC;圓形.UC基因靶點(diǎn)

2.3 白頭翁湯治療UC的核心靶點(diǎn)

篩選出的PD活性成分靶點(diǎn)和UC相關(guān)基因靶點(diǎn)上傳在線STRING11.0平臺，分別得到PD活性成分靶點(diǎn)和UC基因靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)(圖4A和圖4B)，導(dǎo)入Cytoscape軟件得到PD治療UC的潛在相互作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(圖4C)。利用“Merge”功能獲取藥物與疾病的交集靶點(diǎn)，根據(jù)degree>45得到PD有效活性成分治療UC的核心靶點(diǎn)67個，其中IL-6，TNF、抑癌基因(TP53)、血管內(nèi)皮生長因子A(vascular endothelial growth factor A，VEGFA)、絲氨酸/蘇氨酸激酶(alpha serine/threonine-protein kinase AKT1，AKT1)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素1B(IL1B)、RELA、胱天蛋白酶3(recombinant caspase3，CASP3)、絲裂原激活蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase1，MAPK1)、癌基因(JUN)、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)，核內(nèi)癌基因(MYC)，表皮細(xì)胞生長因子(epidermal growth Factor，EGF)，核蛋白轉(zhuǎn)錄因子(FOS)，雌激素受體基因(estrogen receptor 1，ESR1)，PTGS2均degree>90(中位數(shù)2倍)(表2)，在白頭翁湯治療UC的作用靶點(diǎn)中處于核心位置，可能在PD治療UC中起到重要作用。

A.白頭翁湯作用潰瘍性結(jié)腸炎PPI網(wǎng)絡(luò);B.潰瘍性結(jié)腸炎基因靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò);C.白頭翁湯治療潰瘍性結(jié)腸炎潛在作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(注：節(jié)點(diǎn)越大，對應(yīng)的靶點(diǎn)度值越大，蛋白質(zhì)間聯(lián)系越緊密。)

表2 PD治療UC的主要核心靶點(diǎn)

2.4 基因生物學(xué)過程富集分析

對67個核心交集基因進(jìn)行GO富集分析，得到114個生物過程，選取P值最小的前20個GO條目作圖(圖5)，富集的基因數(shù)排名靠前主要包括為細(xì)胞因子受體結(jié)合(cytokine receptor binding)、細(xì)胞因子活性(cytokine activity)、受體配體活性(receptor ligand activity)、磷酸酶結(jié)合(phosphatase binding)、生長因子活性(growth factor activity)、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合(ubiquitin-like protein ligase binding)、核心啟動子結(jié)合(core promoter binding)、趨化因子受體結(jié)合(chemokine receptor binding)、抑制轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合(repressing transcription factor binding)和激酶調(diào)節(jié)活性(kinase regulator activity)等。

P值越小，富集越明顯，氣泡大小表示通路中基因數(shù)量

2.5 基于京都基因和基因組百科全書富集分析

對67個核心交集基因進(jìn)行KEGG富集分析，通過分析得到134條信號通路，其中與UC有關(guān)的通路主要為IL-17信號通路(IL-17 signaling pathway)、TNF信號通路(TNF signaling pathway)、Toll樣受體信號通路(Toll-like receptor signaling pathway)、炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease，IBD))、Th17細(xì)胞分化等(Th17 cell differentiation)和一些腫瘤癌癥相關(guān)通路，選取P值最小的前20條KEGG條目作圖(圖6)。得到的134條信號通路中核心交集基因所占的數(shù)目可能說明基因在各通路發(fā)揮作用的程度，其中IL-6、TNF、TP53、AKT1、RELA、MAPK1、JUN、EGFR、EGF、核因子κB 抑制因子α(NFκBIA)、絲裂原激活蛋白激酶14(recombinant mitogen activated protein Kinase-14，MAPK14)、B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子(inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells，IKBKB)在超過40條通路中出現(xiàn)，推測在PD治療UC中可能發(fā)揮重要作用。

P值越小，富集越明顯，氣泡大小表示通路中基因數(shù)量

2.6 分子對接驗(yàn)證結(jié)果

對PD治療UC的作用靶點(diǎn)和PD的活性成分進(jìn)行分子對接。結(jié)果顯示結(jié)合自由能最小值為-12.552 kJ/mol，最大值為-49.789 kJ/mol。根據(jù)分子對接值小于-37.656 kJ/mol，結(jié)合PD的活性成分的數(shù)目大于10選取核心交集基因9個，分別是細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶1(cyclin-dependent kinases1，CDK1)、EGFR、激酶插入?yún)^(qū)受體(kinase-insert domain-containing receptor，KDR)、MAPK1、基質(zhì)金屬蛋白酶3(matrix metallopeptidase 3，MMP3)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metallopeptidase9，MMP9)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(recombinant Nitric Oxide Synthase3，NOS3)和過氧化物酶體增生激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptor γ，PPARγ)，這些基因與PD的活性成分有強(qiáng)烈的結(jié)合活性(表3)，對其中可能起到PD治療UC作用的分子對接結(jié)果繪圖(圖7)，從左至右，從上到下分別是MPO與rutaecarpine、PPARG與Worenine、N0S3與beta-sitosterol、epiberberin、MMP3與LAN、MMP9與Aureusidin、IL17A與Anemoside B4、KDR與epiberberine的分子對接圖。

3 討論

基于白頭翁湯活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)，degree值靠前成分主要有槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、豆甾醇、小檗堿、巴馬汀等。研究表明槲皮素是屬于黃酮類化合物，其可以抑制NF-κB通路的激活等來發(fā)揮鎮(zhèn)痛和抗炎作用[14]并能夠改善腹瀉狀態(tài)[15]。異鼠李素是槲皮素的直接衍生物，可以上調(diào)人孕烷X受體(PXR)基因的表達(dá)，而PXR是消除炎癥性腸炎中炎癥反應(yīng)的重要靶點(diǎn)，其可以抑制MPO的活性、阻礙促炎介質(zhì)(腫瘤壞死因子-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase2，COX2)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)等的釋放，作用于NF-κB信號通路來達(dá)到抗炎、治療炎癥性腸炎的作用[16]，分子對接的結(jié)果MPO和PD活性成分吳茱萸次堿，iNOS和表小檗堿、β-谷甾醇有強(qiáng)烈結(jié)合活性。β-谷甾醇、豆甾醇為甾醇類物質(zhì)，β-谷甾醇可以提高IL-10的抗炎活性，降低趨化因子和促炎因子活性，抑制NF-κB遷移，通過減少NO的合成，抑制IL-6活性，減少TNF-α等炎性因子的分泌發(fā)揮抗炎作用。豆甾醇具有抗炎作用，可以降低炎癥因子IL-1、IL-6、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein1，MCP-1)以及COX2的mRNA表達(dá)[17]。白頭翁皂苷B4屬于皂苷類可以通過減少炎癥因子釋放起到抗炎作用[18]。小檗堿和巴馬汀屬于生物堿類，小檗堿可改善DSS誘發(fā)的UC小鼠結(jié)腸損傷[19]，巴馬汀可通過抑制NLRP3炎癥小體的激活而起到治療UC的作用[20]。綜上所述，PD活性成分大多調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌和活性，通過NF-κB等信號通路發(fā)揮抗炎作用，改善腹瀉癥狀以達(dá)到治療UC的效果。

表3 分子對接部分結(jié)果

A.分子對接2D圖，B.分子對接3D圖

通過分子對接發(fā)現(xiàn)MPO、NOS3、PPARG、IL-17A、MMP3、MMP9參與多條通路且同PD活性成分有強(qiáng)烈的結(jié)合活性，MPO活性標(biāo)志著中性粒細(xì)胞的功能和激活，對炎癥反應(yīng)的發(fā)生和調(diào)節(jié)等發(fā)揮作用。腸黏膜MPO表達(dá)與UC病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，是腸道炎癥的監(jiān)測指標(biāo)[21]、診斷和治療的關(guān)鍵靶點(diǎn)[22]。NOS能夠產(chǎn)生NO，而在UC中可觀察到組織中NO生成增加，NO主要調(diào)節(jié)Thl/Th2細(xì)胞間的平衡來調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，同時NO產(chǎn)生細(xì)胞毒性效應(yīng)、誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子(TNF-α和IL-1)發(fā)揮功能，其促炎或抗炎能力隨著NO濃度的改變而變[23]。PPARG基因是過氧化物酶體增生激活受體γ編碼基因，可抑制炎癥反應(yīng)，研究發(fā)現(xiàn)UC的發(fā)病演變與PPARγ的表達(dá)受抑密切相關(guān)，上調(diào)表達(dá)PPARγ是UC治療的新靶向[24]。IL-17A召集巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞到達(dá)炎癥部位，并通過MAPKs激酶途徑，核轉(zhuǎn)錄因子C/EBPs和核因子κB等途徑促進(jìn)T淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的分化、增殖、成熟、活化，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，破壞皮膚等屏障[25]。研究顯示MMP3，MMP9在UC中均有明顯增高，且MMP3水平與炎變組織MPO活性呈正相關(guān)，由此發(fā)現(xiàn)PD醇提物可能通過改變MMP3的mRNA的表達(dá)等方式改善炎癥來治療大鼠結(jié)腸炎[26]。MMP9可使促炎因子過表達(dá)而誘導(dǎo)炎癥，研究表明在結(jié)直腸腺瘤和炎癥性腸病中MMP9過表達(dá)，影響腸黏膜通透性[20]，同時在結(jié)直腸腺癌中KDR的表達(dá)率顯著高于結(jié)直腸腺瘤，說明KDR會促進(jìn)了腫瘤生長[27]，推測UC轉(zhuǎn)為結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)時PD仍可用于治療。綜上所述，PD活性成分結(jié)合MPO、MMP3、MMP9等一系列酶，通過改善腸黏膜通透性，抑制炎癥來發(fā)揮作用治療UC。

通過GO分析發(fā)現(xiàn)，PD治療UC涉及到的過程主要是細(xì)胞因子的活性和細(xì)胞因子受體結(jié)合，生長因子的活性和生長因子受體結(jié)合，磷酸酶和蛋白磷酸酶結(jié)合，泛素蛋白連接酶結(jié)合等其他過程，同PD活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)分析和分子對接結(jié)果相一致，表明PD通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌和活性以及一系列酶來治療UC。通過KEGG分析發(fā)現(xiàn)，基因富集較多的通路是IL-17、TNF、Toll樣受體信號通路等其他通路，以及炎癥性腸病、Th17細(xì)胞分化。由Th17、IL-23及IL-17參與的炎癥通路也被稱為“IL-23/Th17/IL-17/IL-6軸”，研究表明此軸是炎癥性腸病發(fā)生的信號通路[28]。作用于此軸的IL-17免疫通路調(diào)控異常可導(dǎo)致UC的發(fā)生，而Th17細(xì)胞參與炎癥性腸病的免疫反應(yīng)，Th17保護(hù)腸道免疫屏障，分泌細(xì)胞因子IL-17、TNF-α等來維持腸道免疫穩(wěn)態(tài)，影響炎癥發(fā)展，同時能夠誘導(dǎo)其他免疫細(xì)胞分泌炎癥因子、趨化因子和能夠降解組織的基質(zhì)金屬蛋白酶，激活NF-κB和MAPK等炎癥信號通路，誘發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致腸黏膜損傷發(fā)生[29]。IL-17家族包括6個成員的配體(IL-17A～I(xiàn)L-17F)IL-17A和IL-17F結(jié)合后形成復(fù)合物激活I(lǐng)KK復(fù)合物進(jìn)而激活NF-κB和MAPK通路[28]，激活的核轉(zhuǎn)錄因子C/EBP、NF-κB可上調(diào)趨化因子和細(xì)胞因子的表達(dá)，包括iNOS、IL-6、TNF-α、CXC趨化因子等，從而誘導(dǎo)免疫細(xì)胞募集、炎癥反應(yīng)和組織損傷[30]。TNF信號通路參與全身炎癥反應(yīng)，NF-κB信號通路是TNF-α的三條信號通路之一[31]，而TNF刺激NF-κB后抑制因子IKB被降解[32]，激活后NF-κB的主要細(xì)胞效應(yīng)是促進(jìn)炎癥相關(guān)蛋白的表達(dá)和拮抗細(xì)胞調(diào)亡[33]。Toll樣受體信號通路中IKK復(fù)合體激活NF-κB使得RELA發(fā)揮作用，KEGG富集結(jié)果發(fā)現(xiàn)IKBKB、RELA參與PD治療UC的多條通路。另外各通路中包含基因數(shù)目發(fā)現(xiàn)TP53在PD治療UC的眾多通路中均有參與，TP53可能作為炎癥性腸病相關(guān)大腸癌和發(fā)育異常篩查的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)[34]，TP53突變可導(dǎo)致炎癥和先天免疫途徑的顯著激活[35]，有助于炎癥性腸病進(jìn)展為結(jié)腸炎相關(guān)的癌[36]。KEGG富集分析發(fā)現(xiàn)“IL-23/Th17/IL-17/IL-6軸”、NF-κB和MAPK等炎癥信號通路可能是PD治療UC的核心途徑。

綜上所述，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)發(fā)現(xiàn)UC與白頭翁湯的成分槲皮素、β-谷甾醇和生物堿類等有強(qiáng)烈結(jié)合活性，通過MPO、iNOS等酶作用“IL-23/Th17/IL-17/IL-6軸”、NF-κB、MAPK等炎癥信號通路影響腸黏膜通透性，維持腸道免疫，誘發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)治療UC。利用分子對接方法初步驗(yàn)證了白頭翁湯化合物成分與其治療UC潛在關(guān)鍵靶點(diǎn)發(fā)生相互作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，為白頭翁湯治療UC進(jìn)一步研究提供了科學(xué)依據(jù)。