郁件康，周良*，龔銀華*，卞金磊

(1.蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院，江蘇 蘇州 215006；2.中國藥科大學(xué)，江蘇 南京 211198)

吲哚胺-2,3-雙加氧酶1(indoleamine-2,3-dioxygenase 1,IDO1)在免疫耐受中發(fā)揮著重要作用，近年來被認(rèn)為是小分子腫瘤免疫療法的新靶點(diǎn)[1]。IDO1是人體內(nèi)必需氨基酸色氨酸(Trp)代謝的關(guān)鍵限速酶，在多種腫瘤組織中過度表達(dá)[2]。腫瘤組織中過度表達(dá)的IDO1致使腫瘤微環(huán)境中Trp耗竭，以此抑制T細(xì)胞的增殖分化，從而抑制免疫系統(tǒng)對腫瘤的免疫應(yīng)答。研究表明聯(lián)用IDO1抑制劑，不但可以增強(qiáng)常規(guī)化學(xué)療法的療效，同時能與放射療法產(chǎn)生協(xié)同作用[3]。此外，研究表明ido1基因敲除的小鼠能健康地存活，這說明使用IDO1抑制劑不會產(chǎn)生嚴(yán)重的基于機(jī)制的副作用。因此，新型IDO1抑制劑的研究和開發(fā)對于腫瘤的治療具有重要的意義。

自2006年，報道了首個IDO1與4-苯基咪唑(PIM)的共晶復(fù)合結(jié)構(gòu)(PDB代碼:2D0T)后，到目前已有數(shù)十個不同配體的IDO1共晶復(fù)合結(jié)構(gòu)先后被報道。這些晶體結(jié)構(gòu)的解析為計算機(jī)輔助藥物設(shè)計(CADD)的方法發(fā)現(xiàn)潛在的IDO1抑制劑鋪奠定了基礎(chǔ)。盡管已有多種IDO1抑制劑被報道，然而到目前為止仍未有藥物成功上市。目前在研的IDO1抑制劑中，其骨架主要集中在[5,6]-稠合雜芳族類衍生物、羥脒類衍生物、苯基咪唑類衍生物、醌類衍生物、苯基脲類衍生物和苯基苯磺酰肼類衍生物等6種結(jié)構(gòu)類型上(見圖1)[4-7]。

圖1 處于臨床研究的IDO1小分子抑制劑

為獲得結(jié)構(gòu)新穎具有良好類藥性性質(zhì)的IDO1抑制劑，前期運(yùn)用虛擬篩選與活性評價相結(jié)合的方法從32個結(jié)構(gòu)各異的化合物中獲得苗頭化合物L(fēng)VS-019[8]。基于LVS-019在IDO1酶催化口袋中的結(jié)合模式，本研究從占據(jù)口袋A的部分、連接鏈部分和占據(jù)口袋 B的部分3個方面設(shè)計并合成3個系列共23個衍生物。希望基于前期虛擬篩選出的苗頭化合物L(fēng)VS-019與IDO1的結(jié)合模式，及其他類已報道的IDO1抑制劑的構(gòu)效關(guān)系，對苗頭化合物L(fēng)VS-019進(jìn)行合理結(jié)構(gòu)改造[9]，并對設(shè)計合成得到的一系列具有新型骨架結(jié)構(gòu)的小分子化合物進(jìn)行IDO1抑制活性的初步篩選[10]。同時，通過探索我們希望能為IDO1抑制劑的研究提供新的思路，為今后新型骨架結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)與活性較好的IDO1抑制劑的開發(fā)提供線索。

1 設(shè)計與合成

1.1 化合物的設(shè)計 前期為獲得新型骨架的IDO1抑制劑，采用相似性搜索與分子對接相結(jié)合的方法發(fā)現(xiàn)了一系列結(jié)構(gòu)各異的化合物，同時對這篩選得到的化合物進(jìn)行IDO1酶抑制活性測定和基于HeLa細(xì)胞的IDO1抑制實驗，得到一個含有氰基吡啶結(jié)構(gòu)的新型IDO1抑制劑LVS-019[8]。運(yùn)用分子對接軟件將LVS-019與IDO1(PDB代碼：4PK5)研究LVS-019在IDO1蛋白活性口袋中的結(jié)合模式(見圖2)?？梢园l(fā)現(xiàn)：①吡啶環(huán)位于A口袋中，6位異丙基部分與A口袋中周圍氨基酸殘基形成疏水相互作用，氰基與IDO1活性位點(diǎn)中的亞鐵血紅素配位；②硫乙酰胺連接鏈控制末端苯環(huán)部分延伸至B口袋；③末端苯環(huán)與氨基酸殘基Phe226形成π-π堆疊作用。

圖2 LVS-019與IDO1活性位點(diǎn)關(guān)鍵氨基酸殘基分析

綜上所述，本論文基于LVS-019在IDO1活性口袋中的作用模式，擬在A部分引入不同取代的氰基吡啶環(huán)和不同取代的喹啉環(huán)、連接鏈部分引入多種環(huán)狀片段、B部分引入不同取代基進(jìn)行化合物設(shè)計，探索各部分對IDO1抑制活性的影響(見圖3)。

1.2 化合物的合成 化合物的合成如圖4所示。首先，以2-氯-3-腈基吡啶與新戊酸為原料，通過Menisci反應(yīng)得到中間體4a。同時，以4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯與取代酰氯為原料，通過縮合反應(yīng)得到中間體2，隨后脫除Boc保護(hù)得到關(guān)鍵中間體3。中間體3與2-氯-3-氰基吡啶(4a)發(fā)生取代反應(yīng)得到終產(chǎn)物6a～6e(結(jié)構(gòu)見表1)。具體合成過程參考實驗部分，所有終產(chǎn)物都經(jīng)過核磁與質(zhì)譜確證。

(i)AgNO3,(NH4)2S2O8,H2SO4,0 ℃ to rt；(ii)CH2Cl2,0 ℃ to rt;(iii)HCl,EtOAc,rt;(iv)Et3N,DMF,80 ℃

2 化合物的IDO1抑制活性及結(jié)果討論

根據(jù)文獻(xiàn)報道，可采用如CCK-8法來測定抗腫瘤增殖活性獲取IC50值。考慮研究實際，目前通過檢測在不同濃度的IDO1抑制劑作用下產(chǎn)生的色氨酸代謝物犬尿氨酸的吸光度計算得到各個IDO1抑制劑的IC50值，進(jìn)而對其進(jìn)行初步的IDO1抑制活性評價。其中化合物6a～6c和6e的活性與LVS-019相比有1.2～3倍的提高。將連接鏈延長一個碳原子長度合成的化合物6e的IDO1抑制活性優(yōu)于6a～6d，與LVS-019相比活性提高了3倍左右。將6b～6d進(jìn)行結(jié)構(gòu)和活性的對比，發(fā)現(xiàn)在末端苯環(huán)對位引入氯原子的IDO1抑制活性較引入氟原子或溴原子提高2倍左右。

通過以上工作我們對構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行初步總結(jié)：①連接鏈部分為環(huán)己烯乙酰胺時，有利于IDO1抑制活性的提高，但引入氮雜環(huán)或縮短、增加連接鏈的長度會使IDO1抑制活性有不同程度的下降；②B部分為芳香環(huán)時，IDO1抑制活性保持；當(dāng)B部分為苯環(huán)時，苯環(huán)上引入單鹵素取代基特別是氯原子取代時，有利于IDO1抑制活性的提高。

3 代表化合物的初步藥代動力學(xué)實驗

基于較好的體外IDO酶綜合抑制結(jié)果，我們選取具有代表性的化合物6e進(jìn)行了理化性質(zhì)考察及成藥性評價來進(jìn)一步驗證改造方向的合理性(見表2)。我們測試了并計算了化合物的水溶性(S)、透膜性(Caco-2透膜實驗)、極性表面積(polar surface area,PSA)。如表2所示，化合物6e在水溶性上與先導(dǎo)化合物L(fēng)VS-019相比有了6倍左右的提高。在隨后的Caco-2透膜性實驗中，化合物表現(xiàn)出了中等的水平(Papp A-B2.94× 10-6cm·s-1)，且無明顯的外排作用，但就透膜作用來說具有良好的成藥性。

表2 代表性化合物6e理化性質(zhì)與成藥性考察

隨后我們對6e進(jìn)行了初步藥代動力學(xué)(Pharmacokinetic,PK)評價，結(jié)果如表3所示。整體來看，代表化合物6e相比于LVS-019來說均顯著提高的PK性質(zhì)。靜脈給藥途徑中(iv,15 mg·kg-1)，化合物6e半衰期為1.66 h，AUC為1 902 ng·mL-1·h。在口服給藥途徑中(po,50 mg·kg-1)，化合物6e半衰期為1.91 h，口服生物利用度[F(%)]達(dá)到31%?；衔風(fēng)VS-019則表現(xiàn)出了較快的清除率，以及隨之的較短保留時間(po t1/2=0.34 h)?？傮w來說，代表化合物6e的初步體內(nèi)藥代動力學(xué)實驗呈現(xiàn)出良好的成藥性，顯示出代表化合物作為口服藥物具有一定潛力，值得進(jìn)一步研究。

表3 代表化合物6e初步PK考察

4 實驗部分

4.1 儀器與試藥 本文涉及的化學(xué)合成所使用的試劑(除特殊說明外)均為市場上銷售的化學(xué)純或分析純產(chǎn)品，不經(jīng)處理直接使用。化合物純化所使用的薄層層析板采用青島海浪硅膠干燥劑廠生產(chǎn)的硅膠GF254薄層板，柱層析硅膠采用青島海浪硅膠干燥劑廠生產(chǎn)的100～200目或200～300目硅膠。未經(jīng)特殊說明，本文所使用的柱層析方法為濕法裝柱、干法上樣，洗脫劑的比例為體積比，所使用的石油醚沸程為60～90 ℃。

化合物結(jié)構(gòu)確證所使用的儀器包括：Nicolet Impact 410 型(KBr壓片)紅外測定儀、GC-MS-QP2010型質(zhì)譜儀、Agilent technologies 6520 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS高分辨質(zhì)譜儀、AV-300 BRUKER核磁共振儀、X-4數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測定儀。

4.2 化合物6a～6g的合成

4.2.1 4-(4-硝基苯甲酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2a)的制備 將1-Boc-4-氨基哌啶(2.00 g,9.99 mmol,1 eq)溶解于20 mL的二氯甲烷中，于0 ℃下逐滴滴加對硝基苯甲酰氯(2.04 g,10.98 mmol,1.1 eq)，滴加完畢后，室溫下攪拌5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：反應(yīng)液用1 mol·L-1稀鹽酸溶液洗滌一次，水洗滌一次，再用飽和氯化鈉溶液洗滌一次后，有機(jī)相減壓蒸除溶劑得2a(2.74 g,78.5%)，為白色固體。HRMS(m/z):C17H23N3O5計算值350.171 0,(M+H)+,實際值350.171 5。

4.2.2 4-硝基-N-(哌啶-4-)苯甲酰胺(3a)的制備 2a(2.00 g,5.72 mmol,1 eq)溶解于20 mL 的乙酸乙酯中，于室溫下通入干燥的氯化氫氣體，反應(yīng)過夜，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液抽濾，濾餅干燥得3a(1.35 g,82.5%)，為白色固體。HRMS(m/z):C12H15N3O3計算值250.118 6,(M+H)+,實際值250.119 3。

4.2.3 4-(4-氟苯甲酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2b)的制備 將1-Boc-4-氨基哌啶(2.00 g,9.99 mmol,1 eq)溶解于20 mL的二氯甲烷中，于0 ℃下逐滴滴加對氟苯甲酰氯(1.74 g,10.98 mmol,1.1 eq)，滴加完畢后，室溫下攪拌5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：反應(yīng)液用1 mol·L-1稀鹽酸溶液洗滌一次，水洗滌一次，再用飽和氯化鈉溶液洗滌一次后，有機(jī)相減壓蒸除溶劑得2b(2.73 g,84.9%)，為白色固體。HRMS(m/z):C17H23FN2O3計算值323.176 5,(M+H)+,實際值323.176 9。

4.2.4 4-氟-N-(哌啶-4-)苯甲酰胺(3b)的制備 將2h(2.00 g,6.20 mmol,1 eq)溶解于20 mL 的乙酸乙酯中，于室溫下通入干燥的氯化氫氣體，反應(yīng)過夜，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液抽濾，濾餅干燥得3b(1.42 g,88.5%)，為白色固體。HRMS(m/z):C12H15FN2O計算值223.124 1,(M+H)+,實際值223.124 2。

4.2.5 4-(4-氯苯甲酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2c)的制備 將1-Boc-4-氨基哌啶(2.00 g,9.99 mmol,1 eq)溶解于20 mL的二氯甲烷中，于0 ℃下逐滴滴加對氯苯甲酰氯(1.92 g,10.98 mmol,1.1 eq)，滴加完畢后，室溫下攪拌5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：反應(yīng)液用1 mol·L-1稀鹽酸溶液洗滌一次，水洗滌一次，再用飽和氯化鈉溶液洗滌一次后，有機(jī)相減壓蒸除溶劑得2c(2.88 g,85.1%)，為白色固體。HRMS(m/z):C17H23ClN2O3計算值339.147 0,(M+H)+,實際值339.147 3。

4.2.6 4-氯-N-(哌啶-4-)苯甲酰胺(3c)的制備 將2i(2.00 g,5.90 mmol,1 eq)溶解于20 mL 的乙酸乙酯中，于室溫下通入干燥的氯化氫氣體，反應(yīng)過夜，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液抽濾，濾餅干燥得3c(1.47 g,90.4%)，為白色固體。HRMS(m/z):C12H15ClN2O計算值239.094 6,(M+H)+,實際值239.095 5。

4.2.7 4-(4-溴苯甲酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2d)的制備 將1-Boc-4-氨基哌啶(2.00 g,9.99 mmol,1 eq)溶解于20 mL的二氯甲烷中，于0 ℃下逐滴滴加對溴苯甲酰氯(2.41 g,10.98 mmol,1.1 eq)，滴加完畢后，室溫下攪拌5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：反應(yīng)液用1 mol·L-1稀鹽酸溶液洗滌一次，水洗滌一次，再用飽和氯化鈉溶液洗滌一次后，有機(jī)相減壓蒸除溶劑得2d(3.21 g,83.9%)，為白色固體。HRMS(m/z):C17H23BrN2O3計算值383.096 5,(M+H)+,實際值383.096 5。

4.2.8 4-溴-N-(哌啶-4-)苯甲酰胺(3e)的制備 將2j(2.00 g,5.21 mmol,1 eq)溶解于20 mL 的乙酸乙酯中，于室溫下通入干燥的氯化氫氣體，反應(yīng)過夜，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液抽濾，濾餅干燥得3e(1.54 g,92.3%)，為白色固體。HRMS(m/z):C12H15BrN2O計算值283.044 1,(M+H)+,實際值283.044 4。

4.2.9N-(1-(6-(叔丁基)-3-氰基吡啶-2-)哌啶-4-基)-4-硝基苯甲酰胺(6a)的制備 將4a(0.33 g,1.70 mmol,1 eq)、3a(0.53 g,1.86 mmol,1.1 eq)和三乙胺(0.38 g,3.72 mmol,2.2 eq)溶解于DMF中，于80 ℃下反應(yīng)5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅柱層析得6a(0.52 g,75.3%)，為淡黃色固體。m.p.127～129 ℃。1H-NMR(300 MHz,CDCl3-d6),δ:8.31(d,J=9.0 Hz,2H,Ar-H),7.95(d,J=9.0 Hz,2H,Ar-H),7.72(d,J=6.0 Hz,1H,Ar-H),6.82(d,J=9.0 Hz,1H,Ar-H),6.16-6.13(m,1H,-NH-),4.46-4.34(m,2H,-N-CH-),4.31-4.28(m,1H,-CH-),3.25-3.17(m,2H,-N-CH-),2.24-2.19(m,2H,-CH-),1.72-1.63(m,2H,-CH-),1.30(s,9H,-CH3)ppm;13C-NMR(75 MHz,CDCl3-d6),δ:172.2,164.4,159.1,149.0,143.3,139.7,127.7,123.2,118.1,109.4,90.9,47.3,46.8,37.7,31.4,29.1 ppm;HRMS(m/z):C22H25N5O3計算值 408.203 0,(M+H)+,實際值408.201 8。

4.2.10N-(1-(6-(叔丁基)-3-氰基吡啶-2-)哌啶-4-基)-4-氟苯甲酰胺(6b)的制備 將4a(0.32 g,1.64 mmol,1 eq)、3b(0.47 g,1.80 mmol,1.1 eq)和三乙胺(0.36 g,3.60 mmol,2.2 eq)溶解于DMF中，于80 ℃下反應(yīng)5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅柱層析得6b(0.39 g,62.6%)，為淡黃色固體。m.p.136～138 ℃。1H-NMR(300 MHz,CDCl3-d6),δ:7.80-7.75(dd,J=9.0 Hz,J=6.0 Hz,2H,Ar-H),7.69(d,J=9.0 Hz,1H,Ar-H),7.14-7.09(m,2H,Ar-H),6.79(d,J=9.0 Hz,1H,Ar-H),5.97(d,J=6.0 Hz,1H,-NH-),4.41(d,J=12.0 Hz,2H,-N-CH-),4.27-4.25(m,1H,-CH-),3.19(t,J=12.0 Hz,2H,-N-CH-),2.18(d,J=12.0 Hz,2H,-CH-),1.67-1.63(m,2H,-CH-),1.31(s,9H,-CH3)ppm;13C-NMR(75 MHz,CDCl3-d6),δ:172.1,165.8,165.3,162.5,159.1,143.3,130.3,128.8,128.7,118.2,115.1,114.9,109.2,90.9,46.9,46.7,37.7,31.6,29.1 ppm;HRMS(m/z):C22H25FN4O 計算值381.208 5,(M+H)+,實際值381.209 6.

4.2.11N-(1-(6-(叔丁基)-3-氰基吡啶-2-)哌啶-4-基)-4-氯苯甲酰胺(6c)的制備 將4a(0.34 g,1.75 mmol,1 eq)、3c(0.53 g,1.92 mmol,1.1 eq)和三乙胺(0.39 g,3.84 mmol,2.2 eq)溶解于DMF中，于80 ℃下反應(yīng)5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅柱層析得6c(0.36 g,51.6%)，為淡黃色固體。m.p.153～155 ℃。1H-NMR(300 MHz,CDCl3-d6),δ:7.72-7.68(m,3H,Ar-H),7.41(d,J=9.0 Hz,2H,Ar-H),6.79(d,J=9.0 Hz,1H,Ar-H),5.98(d,J=6.0 Hz,1H,-NH-),4.43-4.38(d,J=15.0 Hz,2H,-N-CH-),4.31-4.21(m,1H,-CH-),3.24-3.14(m,2H,-N-CH-),2.20-2.15(dd,J=12.0 Hz,J=3.0 Hz,2H,-CH-),1.68-1.63(m,2H,-CH-),1.31(s,9H,-CH3)ppm;13C-NMR(75 MHz,CDCl3-d6),δ:172.1,165.3,159.1,143.3,132.4,128.2,127.9,121.7,118.1,109.3,90.9,46.9,46.7,37.7,31.6,29.1 ppm;HRMS(m/z):C22H25ClN4O計算值397.179 0,(M+H)+,實際值397.179 6。

4.2.12N-(1-(6-(叔丁基)-3-氰基吡啶-2-)哌啶-4-基)-4-溴苯甲酰胺(6d)的制備 將4a(0.32 g,1.64 mmol,1 eq)、3d(0.58 g,1.81 mmol,1.1 eq)和三乙胺(0.37 g,3.62 mmol,2.2 eq)溶解于DMF中，于80 ℃下反應(yīng)5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅柱層析得6d(0.33 g,45.5%)，為淡黃色固體。m.p.188～190 ℃。1H-NMR(300 MHz,CDCl3-d6),δ:7.70(d,J=6.0 Hz,1H,Ar-H),7.65-7.56(dd,J=12.0 Hz,J=9.0 Hz,4H,Ar-H),6.80(d,J=6.0 Hz,1H,Ar-H),5.99(d,J=6.0 Hz,1H,-NH-),4.41(d,J=12.0 Hz,2H,-N-CH-),4.27-4.26(m,1H,-CH-),3.23-3.15(m,2H,-N-CH-),2.17(d,J=12.0 Hz,2H,-CH-),1.72-1.60(q,J=12.0 Hz,2H,-CH-),1.31(s,9H,-CH3)ppm;13C-NMR(75 MHz,CDCl3-d6),δ:172.1,165.3,159.1,143.3,132.9,131.3,128.0,125.6,118.1,109.3,90.9,46.9,46.7,37.3,31.6,29.1 ppm;HRMS(m/z):C22H25BrN4O計算值441.128 5,(M+H)+,實際值441.128 8。

4.2.13N-(1-(6-(叔丁基)-3-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基)-2-苯基乙酰胺(6e)的制備 將4a(0.32 g,1.64 mmol,1 eq)、3e(0.46 g,1.81 mmol,1.1 eq)和三乙胺(0.37 g,3.62 mmol,2.2 eq)溶解于DMF中，于80 ℃下反應(yīng)5 h，TLC檢測反應(yīng)完全。后處理：將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅柱層析得6e(0.33 g,53.3%)，為淡黃色固體。m.p.138～140 ℃。1H-NMR(300 MHz,CDCl3-d6),δ:7.67(d,J=9.0 Hz,1H,Ar-H),7.38-7.28(m,5H,Ar-H),5.32(t,J=6.0 Hz,1H,-NH-),4.29(d,J=12.0 Hz,2H,-N-CH-),4.13-4.00(m,1H,-CH-),3.60(s,2H,-CH2-),3.16-3.07(m,2H,-N-CH-),2.03-1.98(m,2H,-CH-),1.49-1.40(m,2H,-CH-),1.30(s,9H,-CH3)ppm;13C-NMR(75 MHz,CDCl3-d6),δ:172.0,169.8,159.0,143.3,134.3,128.8,128.5,126.8,118.1,109.1,90.7,46.5,46.3,43.4,37.6,31.4,29.1 ppm;HRMS(m/z):C23H28N4O計算值377.233 6,(M+H)+,實際值 377.234 0。

5 結(jié)論

本文基于前期研究獲得的具有氰基吡啶結(jié)構(gòu)的IDO1抑制劑LVS-019，該化合物在IDO1酶抑制活性測定和基于HeLa細(xì)胞的IDO1抑制實驗中測得其具有良好的IDO1抑制活性，且在MTT比色法測定細(xì)胞毒性實驗中LVS-019對HeLa細(xì)胞的毒性遠(yuǎn)小于Epacadostat。我們運(yùn)用分子對接軟件將LVS-019與IDO1(PDB代碼：4PK5)進(jìn)行分子對接觀察LVS-019在IDO1蛋白活性口袋中的結(jié)合模式?；贚VS-019在IDO1活性口袋中的占據(jù)情況，設(shè)計并合成一系列衍生物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)HRMS和NMR確證。并得到初步構(gòu)效關(guān)系：①連接鏈部分為環(huán)己烯乙酰胺時，有利于IDO1抑制活性的提高，但引入氮雜環(huán)或縮短、增加連接鏈的長度會使IDO1抑制活性有不同程度的下降；②B部分為芳香環(huán)時，IDO1抑制活性保持；當(dāng)B部分為苯環(huán)時，苯環(huán)上引入單鹵素取代基特別是氯原子取代時，有利于IDO1抑制活性的提高。其中最優(yōu)化合物6e表現(xiàn)出良好的藥代性質(zhì)，具有成為口服抗腫瘤藥物的潛力。本論文的研究希望能為后期IDO1抑制劑的結(jié)構(gòu)修飾與改造提供理論依據(jù)。