李 敏，邵 燕，孫江漫，于洪遠(yuǎn)△，陳寶榮

1.北京航天總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100076；2.北京金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司，北京 100015

胱抑素C是一種比血肌酐更敏感的早期腎損傷標(biāo)志物，其也能更準(zhǔn)確地反映內(nèi)源性腎小球?yàn)V過率[1]。即往由于沒有統(tǒng)一的胱抑素C標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，導(dǎo)致不同系統(tǒng)之間檢測結(jié)果的差異較大。2010年歐洲標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的推出[2]，有效保障了胱抑素C檢測結(jié)果的一致性,該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是通過分離混合血清中的干擾物，添加重組胱抑素C制備而來[3]。目前，關(guān)于ERM-DA471互換性的研究收集的單人份血清標(biāo)本水平范圍未能覆蓋ERM-DA471，可能對互換性結(jié)果的判斷有影響，同時，研究中也未將ERM-DA471稀釋成系列水平后進(jìn)行互換性評價[4]。因此，本研究重點(diǎn)針對上述兩個不足之處進(jìn)行了相關(guān)探討，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源 收集北京航天總醫(yī)院2021年5月10日至16日門診、住院患者胱抑素C水平為0.5～8.0 mg/L的42份無溶血、無乳糜的血清標(biāo)本，血清標(biāo)本水平覆蓋標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的水平，每份血清標(biāo)本分為兩份，置于-80 ℃冰箱保存。有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為ERM-DA471/國際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(IFCC)。

1.2儀器與試劑 日立7170A全自動生化分析儀、LA120S型電子天平、Eppendorf reference移液器。九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司(公司A)、邁克生物股份有限公司(公司B)、邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司(公司C)、羅氏公司(公司D)、中元生物技術(shù)有限公司(公司E)、積水醫(yī)療科技有限公司(公司F)、德賽公司(公司G)、瑞源生物科技有限公司(公司H)、景源生物科技股份有限公司(公司I)生產(chǎn)的胱抑素C檢測試劑及其配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.3方法 按照說明書將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471進(jìn)行溶解，得到水平為5.48 mg/L的原液(記為C5)，再采用稱重法將原液稀釋為4.0、2.0、1.0、0.5 mg/L的系列水平，按照水平由低到高分別記為C1～C4[5]。在日立7170A全自動生化分析儀上建立上述9家公司的檢測系統(tǒng)(系統(tǒng)A～I(xiàn))，所有參數(shù)均由相應(yīng)公司提供。使用對應(yīng)的校準(zhǔn)品對系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)，質(zhì)控在控后方可進(jìn)行檢測。將5個系列水平的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471穿插在42份血清標(biāo)本中排序檢測，標(biāo)本分別按照先奇后偶、倒序、先偶后奇的順序檢測3次，結(jié)果取平均值。根據(jù)EP14-A3標(biāo)準(zhǔn)評價系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的互換性[6]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。將9個檢測系統(tǒng)進(jìn)行兩兩組合，檢測結(jié)果構(gòu)建回歸方程，計(jì)算R2。觀察5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的檢測結(jié)果是否落在預(yù)測值的95%CI內(nèi)，以此來判斷檢測結(jié)果是否具有互換性。

2 結(jié) 果

2.1血清標(biāo)本和待評價標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的檢測結(jié)果 將9個檢測系統(tǒng)兩兩組合，將42份血清標(biāo)本的檢測結(jié)果進(jìn)行回歸分析，回歸方程、R2、斜率的95%CI見表1。36種檢測系統(tǒng)組合對應(yīng)的斜率范圍為0.782～1.125，截距范圍為-0.216～0.141，R2范圍為0.991～0.998。各檢測系統(tǒng)對5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的檢測結(jié)果見表2。

表1 36種檢測系統(tǒng)組合檢測結(jié)果的線性回歸分析

表2 9個檢測系統(tǒng)檢測5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的結(jié)果(mg/L)

2.2互換性評價 以檢測系統(tǒng)組合中1個檢測系統(tǒng)對5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的檢測結(jié)果為X，得到預(yù)測值Y及其95%CI，觀察另一個系統(tǒng)的檢測結(jié)果是否落在預(yù)測值Y的95%CI內(nèi)[6]。C5的檢測結(jié)果具有互換性的檢測系統(tǒng)組合占41.7%(15/36)，C1～C4與C5互換性結(jié)果一致的檢測系統(tǒng)組合占16.7%(6/36)；C1～C4的檢測結(jié)果具有互換性的檢測系統(tǒng)組合分別占69.4%(25/36)、69.4%(25/36)、80.6%(29/36)、44.4%(16/36)，見表3。

表3 5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471在不同檢測系統(tǒng)間的互換性評價

續(xù)表3 5個系列水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471在不同檢測系統(tǒng)間的互換性評價

3 討 論

胱抑素C標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的出現(xiàn)，有效促進(jìn)了檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果的一致化，其技術(shù)報告上顯示該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)基質(zhì)和新鮮標(biāo)本不同，因此在臨床應(yīng)用中應(yīng)評估其互換性。雖然ERM-DA471能溯源至Si單位，但其水平遠(yuǎn)高于人體內(nèi)胱抑素C的生理水平。目前，市場占有率較高的試劑盒其校準(zhǔn)品均為多點(diǎn)校準(zhǔn)，因此廠家在進(jìn)行溯源時需要對ERM-DA471進(jìn)行稀釋。本研究結(jié)果表明，ERM-DA471在36種檢測系統(tǒng)組合中的互換性并不理想，稀釋后的各水平ERM-DA471在大多數(shù)檢測系統(tǒng)組合間的互換性發(fā)生改變。分析其原因可能有：(1)EP14-A3評價ERM-DA471互換性的缺陷在于兩個系統(tǒng)的相關(guān)性越好，95%CI越窄，ERM-DA471越不可能有互換性[6-8]，最終造成ERM-DA471在大多數(shù)檢測系統(tǒng)組合間缺乏互換性。(2)對ERM-DA471進(jìn)行稀釋時，水平越低，操作中引入的誤差對稀釋結(jié)果影響越大，可能造成稀釋后的實(shí)際水平與靶值的偏倚較大，研究結(jié)果表現(xiàn)為水平越低，檢測偏倚越大。(3)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同檢測系統(tǒng)間的結(jié)果是否具有互換性取決于兩個方面，即材料與新鮮標(biāo)本的接近程度及方法的特異性。稀釋的過程改變了ERM-DA471原有的基質(zhì)狀態(tài)，因此在臨床應(yīng)用過程中不能以原水平ERM-DA471的互換性結(jié)果來籠統(tǒng)代表稀釋后各水平ERM-DA471的互換性結(jié)果。

本研究通過評估原水平和稀釋后不同水平ERM-DA471在36個檢測系統(tǒng)組合間的

互換性，發(fā)現(xiàn)其互換性結(jié)果并不理想，且稀釋后的ERM-DA471在大部分檢測系統(tǒng)組合間的互換性發(fā)生改變，廠家在使用其進(jìn)行量值傳遞的過程中需注意稀釋對ERM-DA471互換性結(jié)果的影響。由于本研究僅使用EP14-A3對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-DA471的互換性進(jìn)行評估，可能造成評估結(jié)果的片面性，今后的研究中將結(jié)合IFCC提出的互換性評估方案[9]，使標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的互換性評估更加合理、可靠。