張秀娟

前列腺癌（prostatic cancer，PCa）的臨床發(fā)病率較高，且常規(guī)療法為根治手術(shù)。術(shù)后正確判斷病理結(jié)果可指導(dǎo)術(shù)后療法，合理決定是否需要進行內(nèi)分泌輔助治療[1]?，F(xiàn)階段，常規(guī)切片是較常用的標(biāo)本處理技術(shù)，其將切除后的前列腺組織切成20余個大小接近的組織塊，而后進行病理檢查。但是此種方法會破壞前列腺組織的完整度，加之癌細胞在整個前列腺組織中不等分散，可能會因多個切片處理影響癌細胞的原本生理結(jié)構(gòu)。為此，大組織切片技術(shù)備受關(guān)注，其采取完整切面分層次取材的方法可以確保組織完整[2]。有研究證實[2]，大組織切片可以高效檢出手術(shù)切緣和微小病灶。為此，本研究回顧性分析2018年8月—2020年5月院內(nèi)診治的79例PCa患者，評價大組織切片的診斷效用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年8月—2020年5月院內(nèi)診治的PCa患者79例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核后開展；所有患者以及家屬對研究知情而且完全同意?；仡櫡治龌颊呋举Y料，依據(jù)不同切片方法分為A組41例，年齡42～75歲，平均（58.32±2.75）歲；體質(zhì)量指數(shù)21～26 kg/m2，平均（23.52±1.32）kg/m2。B組38例，年齡41～77歲，平均（58.85±2.66）歲；體質(zhì)量指數(shù)22～28 kg/m2，平均（23.84±1.82）kg/m2。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究開始前已通過法律文件取得了患者的授權(quán)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)病理切片明確診斷為PCa；（2）術(shù)前接受全身骨掃描、腹部B超與MRI等檢查；（3）于我院接受治療與護理，且留存的臨床資料較為完整、詳細；（4）患者依從性較高。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）癌細胞骨骼轉(zhuǎn)移患者；（2）癌細胞內(nèi)臟轉(zhuǎn)移患者；（3）伴有精神類疾病或語言功能障礙，無法進行充分溝通患者。

1.2 方法

儀器選擇電化學(xué)發(fā)光儀、數(shù)字病理掃描儀、全自動組織脫水機、大組織切片機、大組織包埋盒和蓋玻片等、生物色標(biāo)劑、超低溫冰箱、室溫石蠟切片柜。B組采用常規(guī)組織切片法：將組織離體后放置在甲醛溶液（4%）內(nèi)固定24 h，切取輸尿管、前列腺四周和精囊組織。以病灶穿刺位置為準(zhǔn)，于冠狀位取材后編號。進行脫水-浸蠟包埋-切片染色（HE染色）-封片處理。A組采用大組織切片法：離體標(biāo)本左側(cè)染色綠色、右側(cè)染色黃色，并進行吹干。將大組織充分浸泡在甲醛溶液（4%）中有效固定。固定24 h后從前列腺尖部開始取材（厚度約為0.4 cm），至基底冠狀面，編號。用大組織網(wǎng)狀包埋盒（6.5 cm）平鋪并展開組織，而后按壓和固定。再次浸泡至甲醛溶液（4%）中，固定標(biāo)本中央處組織，時間同為24 h，而后脫水-透明-浸蠟處理。操作時選擇二次包埋法，充分冷凍后融蠟并修正。勻速平推切片，厚度5 μm，保證切片完整。載玻片撈片的規(guī)格為2.5 cm×6.0 cm×8.0 cm，取得切片樣本后，進行HE染色后封片。借助數(shù)字病理掃描系統(tǒng)掃描圖像，而后經(jīng)NDP-Scan軟件掃描焦點以及區(qū)域，區(qū)間為40～50倍，保存信息。

1.3 觀察指標(biāo)及評價標(biāo)準(zhǔn)

記錄兩組的手術(shù)時間與前列腺體積、病理特征，其中Gleason分級標(biāo)準(zhǔn)為：1級（1分），腺體互相分離且排列密集，邊界清晰；2級（2分），腫瘤侵襲周邊組織，腺體稀松排列，存在異型性；3級（3分），腺體大小不一，浸潤性生長，且形態(tài)無規(guī)則，腺體間不融合，管腔清晰；4級（4分），腺體融合呈篩孔狀，或細胞呈環(huán)形排列，細胞內(nèi)不存在腺腔；5級（5分），低分化癌表現(xiàn)，腺管不明顯，呈細胞條索單雙排排列或?qū)嵭约毎才帕衃3]。TNM病理分期標(biāo)準(zhǔn)：PT2a為癌細胞在器官內(nèi)；PT3b為癌細胞侵襲前列腺包膜外；PT4為癌細胞侵襲精囊外組織。最后，通過對比圖像情況，分析病灶邊緣與微小病灶情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)處理經(jīng)由SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件完成，計量資料以（±s）表示，經(jīng)t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，經(jīng)χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組手術(shù)時間與前列腺體積數(shù)值比較

A組的手術(shù)時間接近B組，前列腺體積略小于B組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組的手術(shù)時間與前列腺體積數(shù)值比較（±s）

表1 兩組的手術(shù)時間與前列腺體積數(shù)值比較（±s）

組別 例數(shù) 手術(shù)時間（min） 前列腺體積（cm3）A組 41 138．52±20．32 45．26±2．65 B組 38 139．85±20．49 46．01±2．77 t值 - 0．290 1．230 P值 - 0．773 0．223

2.2 兩組病理特征比較

A組的病灶切緣陽性率和微小病灶檢出率顯著高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兩組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、侵犯精囊率與術(shù)后Gleason評分提升率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。A組術(shù)后Gleason評分為（7.75±1.02）分，B組為（7.86±1.09）分，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.463，P=0.644）。見表2。

表2 兩組病理特征比較[例（%）]

2.3 兩組TNM病理分期情況比較

兩組TNM病理分期情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 患者TNM病理分期情況比較[例（%）]

2.4 兩組切緣陽性和微小病灶圖像比較

圖像顯示A組可多層次且全面地顯示病變類型，且能準(zhǔn)確采集圖像和定位病灶，進而高效分辨切緣陽性部位以及微小病灶。圖1A為A組前列腺切緣圖像，箭頭處為切緣陽性部位，HE×100；圖1B為B組前列腺切緣圖像，箭頭處為切緣陰性部位，HE×40。見圖1所示。

圖1 兩組前列腺切緣比較圖像

圖2C為A組微小病灶部位，HE×100；圖2D為B組微小病灶部位，其較難被發(fā)現(xiàn)，HE×200。見圖2所示。

圖2 兩組微小病灶比較圖像

3 討論

根治手術(shù)是前列腺癌的主要術(shù)式，術(shù)后病理診斷能夠確定腫瘤性質(zhì)，進而決定是否繼續(xù)采取內(nèi)分泌治療，且能作為手術(shù)效果的評價指標(biāo)，判斷治療預(yù)后。常規(guī)組織切片是較為常用的檢查技術(shù)，臨床研究提示[5]，常規(guī)前列腺根治手術(shù)的標(biāo)本病理檢查中，需要將前列腺切成細碎的小塊狀，一般情況下，應(yīng)切開40～60塊，部分檢查中要求切開的塊數(shù)更多。臨床處置程序較為繁瑣，且病理診斷醫(yī)師的閱片工作量也較大，會對檢測造成較為嚴(yán)重的影響。且這種檢測方式會對取得的前列腺組織造成一定破壞，無法充分體現(xiàn)前列腺組織的完整情況，對診斷效果造成影響。而大組織切片技術(shù)在制片時要求在最大程度上保留前列腺組織，臨床研究提示[6]，與常規(guī)切片技術(shù)的質(zhì)量相比，大組織切片技術(shù)的質(zhì)量較好。從厚度與染色兩個角度進行比較后顯示，大組織切片的制片質(zhì)量與常規(guī)制片的質(zhì)量無顯著差異。但大組織切片技術(shù)無需將取樣組織切碎，能在最大程度上保持取樣組織的完整性，且臨床中所需的制片數(shù)量相對較少，能在一定程度上減少制片的工作量。病理師在進行診斷時也能對組織進行全面的觀察，從而提升診斷準(zhǔn)確率。臨床研究提示[4]，大組織切片技術(shù)可以充分保留前列腺每個區(qū)域和各個切緣的腫瘤侵犯情況，具有較好的臨床應(yīng)用價值。

本研究結(jié)果顯示，兩種切片技術(shù)的手術(shù)時間、前列腺體積比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。提示兩種技術(shù)的診斷價值比較排除了手術(shù)和腺體體積等因素，嚴(yán)謹(jǐn)性更強。能夠基本維持的切片結(jié)構(gòu)的相對完整，且具有較清晰形態(tài)。但B組對于切緣的取材局限性較明顯，無法明確顯示腫瘤與切緣之間的距離，從而導(dǎo)致無法提高切緣陽性率，也無法充分預(yù)防假陰性情況的發(fā)生[7-9]。A組病灶切緣陽性率和微小病灶檢出率顯著高于B組（P＜0.05）。且A組對于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、侵犯精囊率與術(shù)后Gleason評分提升率與B組接近（P＞0.05），A兩組TNM病理分期情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究結(jié)果提示A、B兩組均能明確PCa的病理分級，有效評估術(shù)后風(fēng)險，且對于病灶的定位更為精準(zhǔn)。此外，大組織切片技術(shù)能夠保留腺體形態(tài)的完整性，臨床醫(yī)生通過學(xué)習(xí)病理標(biāo)本特征可以有效判斷前列腺形狀與大小的個體差異，評估手術(shù)是否造成前列腺組織殘留或是腸壁組織粘連等，進而制訂下一階段治療方案[10-11]。PCa的主要特點是多灶性，影像學(xué)技術(shù)能夠在術(shù)前判斷腫瘤位置和大小，但其精準(zhǔn)性有限[12]。

臨床研究提示，大組織切片可以對比于術(shù)前影像學(xué)特征，進而判斷腫瘤位置和影像學(xué)之間的關(guān)聯(lián)性，可提升閱片技術(shù)，有效提高術(shù)前診斷準(zhǔn)確率[13]。更為重要的是，臨床醫(yī)生和病理科醫(yī)生能夠根據(jù)大組織切片技術(shù)所得出的結(jié)果制訂下一步治療方案，改進手術(shù)流程。為保證大組織切片技術(shù)的診斷效果，在操作期間需要注意以下問題[14]：（1）按時更換試劑，由于切片制作所選用的試劑具有揮發(fā)性，會使其濃度降低，進而影響切片制作的準(zhǔn)確度，因此需要及時更換試劑。（2）前列腺組織塊需要平整性按壓，取材時要保證切面平整，分片固定時也要適度按壓，防止卷曲。包埋時要保證組織塊平鋪，必須保證切片平整。（3）操作熟練，切片期間需要操作者熟知切片機的操作原理，精細調(diào)節(jié)切片機參數(shù)，確保參數(shù)合理，且能及時發(fā)現(xiàn)切片問題，并立即解決，保證切片質(zhì)量。（4）部分臨床研究提示[15]，在開始取樣前，需注意對患者進行心理護理，保證患者取樣時的心理情緒處于穩(wěn)定的狀態(tài)。避免因患者的情緒問題而對取樣造成影響。院內(nèi)可對護理人員進行適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn)。

綜上所述，大組織切片可以作為PCa病理診斷的首選技術(shù)，其可判斷前列腺切緣的實際陽性率，高效檢出微小病灶，診斷精準(zhǔn)度更高，可以在病理診斷中廣泛性使用。