姚向陽(yáng)，鄧晨希，劉 偉，吳智超，王 涵，簡(jiǎn)麗娟，葛勝祥

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染病，至今仍是全球十大致死因素之一[1]。根據(jù)世界衛(wèi)生組織《2020年全球結(jié)核病報(bào)告》，2019年全球約有1 000萬(wàn)人罹患結(jié)核病、120萬(wàn)結(jié)核病死亡病例[1]。早期診斷有助于結(jié)核病患者得到及時(shí)治療，以及隔離傳染源從而減少疾病傳播。然而，據(jù)估計(jì)，全球每年漏診36%結(jié)核病新發(fā)病例[2]。傳統(tǒng)的結(jié)核病診斷依賴于痰培養(yǎng)、涂片鏡檢和X光胸片。痰培養(yǎng)是結(jié)核病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但檢測(cè)周期長(zhǎng)；涂片鏡檢靈敏度低，且無法區(qū)分結(jié)核分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌；X光胸片檢查也難以獲得令人滿意的臨床診斷靈敏度和特異性。新興的分子生物學(xué)檢測(cè)方法如GeneXpert等，其在涂陽(yáng)標(biāo)本中具有極高的靈敏度和特異度，然而在涂陰標(biāo)本中診斷性能依舊不佳[3]。此外，上述檢測(cè)方法大都基于痰液標(biāo)本，對(duì)于肺外結(jié)核和不易獲取合格痰液標(biāo)本的肺結(jié)核患者(如人免疫缺陷病毒共感染患者、老人和小孩等)，臨床應(yīng)用具有較大的樣本獲取限制。當(dāng)前亟需發(fā)展新的結(jié)核病臨床診斷方法，世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)在其發(fā)布的《結(jié)核病診斷高優(yōu)先級(jí)目標(biāo)產(chǎn)品文件》(High-priority target product profiles for new tuberculosis diagnostics,TPP)中，明確提出了對(duì)發(fā)展非痰液標(biāo)本診斷方法的需求[4]。

通過對(duì)結(jié)核患者全血轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究產(chǎn)生的一系列轉(zhuǎn)錄組標(biāo)志物，為基于血液檢測(cè)的結(jié)核診斷候選靶標(biāo)篩選提供了依據(jù)。2010年，《自然》雜志發(fā)表了一篇基于不同人群的外周血全基因組轉(zhuǎn)錄譜學(xué)研究，獲得了一組由393個(gè)轉(zhuǎn)錄子組成的活動(dòng)性結(jié)核特征基因群，為結(jié)核病診斷提供了豐富的潛在靶標(biāo)[5]。在隨后的十余年里，隨著結(jié)核病患者外周血轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究的深入，越來越多結(jié)核病患者與其他組別之間差異表達(dá)的宿主基因被發(fā)現(xiàn)和后續(xù)評(píng)價(jià)。Emily MacLean等學(xué)者對(duì)已有的結(jié)核轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進(jìn)行了系統(tǒng)性綜述[6]，表明共有4組轉(zhuǎn)錄組標(biāo)志物[7-9]在病例對(duì)照研究中達(dá)到了WHO TPP對(duì)于非痰液樣本的結(jié)核病篩查產(chǎn)品的最低性能要求，即靈敏度達(dá)到90%的同時(shí)特異度達(dá)到70%。2019年，Warsinske等[10]利用NCBI GEO 和EBI ArrayExpress數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)16組已報(bào)道用于結(jié)核診斷研究的轉(zhuǎn)錄組標(biāo)志物進(jìn)行了系統(tǒng)性評(píng)價(jià)，其結(jié)果表明Sweeney[11]and Sambarey[12]這2組標(biāo)志物達(dá)到了WHO TPP結(jié)核篩查產(chǎn)品的最低要求。2020年，Turner等[13]對(duì)27組高質(zhì)量的結(jié)核轉(zhuǎn)錄組標(biāo)志物開展了前瞻性臨床診斷準(zhǔn)確性研究，其中4組標(biāo)志物達(dá)到或接近達(dá)到WHO TPP結(jié)核篩查產(chǎn)品的最低要求，分別為Sweeney[11]、Kaforou[7]、Roe[14]和BATF[15]。

上述符合WHO TPP結(jié)核篩查實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的9組轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物，具備良好的應(yīng)用前景，有望向臨床轉(zhuǎn)化，彌補(bǔ)基于痰液診斷方法的不足。但這些標(biāo)志物的臨床應(yīng)用仍存在一些限制因素。一方面，這9組轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物包含基因數(shù)目較多，且相互之間重疊基因較少，大部分基因僅出現(xiàn)在某一組標(biāo)志物中，需對(duì)這些基因進(jìn)行篩選以減少納入使用的基因數(shù)目。另一方面，轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物依賴于核酸檢測(cè)技術(shù)，由于核酸檢測(cè)對(duì)設(shè)備、設(shè)施和人員素質(zhì)的要求較高，不利于在結(jié)核負(fù)擔(dān)嚴(yán)重的基層和邊遠(yuǎn)地區(qū)的推廣應(yīng)用[16]。

由于基因轉(zhuǎn)錄水平越高其蛋白表達(dá)水平也高，因此上述結(jié)核患者外周血宿主標(biāo)志物也可能在蛋白水平上具有區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)核患者的能力，但目前尚無相關(guān)研究予以驗(yàn)證。如果確實(shí)存在具有結(jié)核病區(qū)分能力的外周血宿主蛋白，建立相應(yīng)免疫檢測(cè)試劑，則更便于在不同應(yīng)用場(chǎng)景下的臨床推廣應(yīng)用。為了驗(yàn)證外周血轉(zhuǎn)錄水平存在差異的靶標(biāo)基因是否在蛋白水平上也同樣存在差異，我們選擇4個(gè)轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)現(xiàn)的代表性基因(9組轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物中高頻出現(xiàn)的FCGR1A出現(xiàn)4次、DUSP3出現(xiàn)4次和BATF2出現(xiàn)2次，以及其他研究中被多次報(bào)道的SEPT4出現(xiàn)1次，表1)。其中FCGR1A和BATF2基因已知均由干擾素介導(dǎo)表達(dá)，F(xiàn)CGR1A編碼高親和力的I型免疫球蛋白Fc受體(FcγR1，也稱CD64)，在細(xì)菌侵襲和促炎性細(xì)胞因子作用下，中性粒細(xì)胞表面FCGR1A蛋白表達(dá)量迅速增加；BATF2編碼的堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子2，屬于激活蛋白1(AP-1)轉(zhuǎn)錄因子家族，在內(nèi)毒素作用下在單核巨噬細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)；DUSP3基因是ERK和JNK通路的負(fù)調(diào)節(jié)因子；SEPT4基因?qū)儆贕TP酶基因家族，主要與細(xì)胞分裂、囊泡運(yùn)輸、細(xì)胞支架以及凋亡等相關(guān)。建立上述4個(gè)基因的全血蛋白水平免疫檢測(cè)體系，評(píng)估其在活動(dòng)性結(jié)核患者和非結(jié)核肺病患者之間的差異，為基于結(jié)核外周血轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物免疫檢測(cè)試劑的研究提供指導(dǎo)和依據(jù)。

表1 基因FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2在9組轉(zhuǎn)錄組標(biāo)志物中出現(xiàn)的情況Tab.1 Frequencies of FCGR1A,DUSP3,SEPT4 and BATF2 genes in nine significant transcriptional signatures

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 臨床標(biāo)本 336例臨床患者的抗凝全血標(biāo)本均采集自廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院杏林分院肺科的住院患者(2020年3月至2020年8月)，均為治療前使用肝素鋰抗凝管采集患者靜脈全血，并于-20 ℃保存。其中190例活動(dòng)性結(jié)核患者依據(jù)新版《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)》(WS 288-2017)[17]確診，其他146例非結(jié)核肺病患者為肺炎、肺部感染、肺部腫瘤等其他疾病。隨機(jī)將其中30例結(jié)核患者與30例非結(jié)核患者作為前期篩選隊(duì)列，其余納入驗(yàn)證隊(duì)列。本研究經(jīng)廈門大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

1.1.2 主要試劑耗材 FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2重組蛋白及相應(yīng)單克隆鼠抗由本實(shí)驗(yàn)室前期制備，96孔微孔板購(gòu)于廈門怡佳美公司，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)使用的稀釋液、封閉液、洗滌液和顯色底物均由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司提供。

1.1.3 主要儀器 小型臺(tái)式高速離心機(jī)購(gòu)于美國(guó)Thermo公司，自動(dòng)洗板機(jī)購(gòu)于北京拓普分析儀器有限公司，酶標(biāo)儀購(gòu)于安圖實(shí)驗(yàn)儀器(鄭州)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 雙抗體夾心法ELISA建立 用20 mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)將包被抗體稀釋至400 ng/mL，100 μL/孔加入至微孔板，37 ℃恒溫包被2 h；PBST洗液(20 mmol/L磷酸鹽緩沖液，pH 7.4，150 mmol/L NaCl，0.05% 吐溫-20)洗板1次后，加入封閉液(1% BSA)200 L/孔，37 ℃恒溫封閉 2 h。標(biāo)記抗體則采用過碘酸鈉法標(biāo)記辣根過氧化物酶，工作濃度為1 g/mL。檢測(cè)流程：在已包被的微孔板中每孔加入100 μL樣本(已知濃度的系列稀釋抗原或全血裂解后的臨床標(biāo)本)，37 ℃恒溫孵育1 h，PBST洗板5次；加入100 μL工作濃度的標(biāo)記抗體37 ℃恒溫孵育1 h后，用PBST洗板5次；加入100 L辣根過氧化物酶底物，37 ℃避光顯色15 min；每孔加入50 L終止液終止反應(yīng)后，檢測(cè)450 nm處(參考波長(zhǎng)630 nm)的光密度(OD值)。

1.2.2 ELISA檢測(cè)體系線性范圍測(cè)定 將4個(gè)重組蛋白分別用20% 小牛血清進(jìn)行倍比稀釋，用1.2.1所建立的方法進(jìn)行測(cè)定。每個(gè)濃度的樣品均重復(fù)測(cè)定2次，以2次OD值的平均值進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

1.2.3 全血標(biāo)本檢測(cè) 全血裂解液按1% NP-40和0.25%過氧膽酸鈉配制，按照1份全血加3份裂解液的比例進(jìn)行樣本和裂解液混合，渦旋震蕩后使用小型臺(tái)式高速離心機(jī)離心10 min (12 000 r/min)，吸取上清按照1.2.1所述方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 利用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，利用GraphPad Prism 8軟件進(jìn)行圖表繪制。對(duì)非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距(IQR)進(jìn)行描述，組間數(shù)據(jù)比較采用雙側(cè)非參數(shù)秩和檢驗(yàn)。生物標(biāo)志物區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)核肺病以受試者工作曲線(Receiver operating characteristic,ROC)進(jìn)行分析，計(jì)算其曲線下面積(Area under ROC curve,AUC)，根據(jù)最大約登指數(shù)確定最優(yōu)Cut off值并以此計(jì)算靈敏度和特異度。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 研究隊(duì)列的人口學(xué)與臨床信息資料比較 在篩選隊(duì)列中，活動(dòng)性結(jié)核組與非活動(dòng)性結(jié)核組的年齡分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.18,P>0.05)，而在驗(yàn)證隊(duì)列中，分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.37,P<0.05)；在篩選隊(duì)列和驗(yàn)證隊(duì)列中，活動(dòng)性結(jié)核組(χ2=5.71,P<0.05)與非活動(dòng)性結(jié)核組(χ2=5.96,P<0.05)的性別分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在兩個(gè)隊(duì)列中，活動(dòng)性結(jié)核組IGRA陽(yáng)性、培養(yǎng)陽(yáng)性、涂片陽(yáng)性、Xpert陽(yáng)性比率均高于非結(jié)核肺病組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表2。

表2 研究隊(duì)列的人口學(xué)與臨床信息資料Tab.2 Demographic and clinical characteristics of analyzed participants

2.2 雙抗體夾心法ELISA檢測(cè)的線性范圍 將真核細(xì)胞表達(dá)的FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2蛋白采用20% 小牛血清進(jìn)行倍比稀釋后，系列稀釋標(biāo)本分別用相應(yīng)的雙抗體夾心法ELISA試劑進(jìn)行雙孔重復(fù)檢測(cè)。將每種蛋白的蛋白濃度和OD值取以2為底數(shù)的對(duì)數(shù)后，分別繪制散點(diǎn)圖，取線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方在0.98以上的蛋白濃度范圍作為試劑檢測(cè)的線性范圍(圖1)，其結(jié)果顯示，4種雙抗體夾心法ELISA檢測(cè)試劑的線性范圍分別為0.156～10 ng/mL(FCGR1A)、1.56～50 ng/mL(DUSP3)、0.059～1.875 ng/mL(SEPT4)和0.039～2.5 ng/mL(BATF2)。

注：A為FCGR1A;B為DUSP3;C為SEPT4;D為BATF2。圖1 雙抗體夾心法ELISA檢測(cè)的線性范圍Fig.1 Linear range of double-antibody sandwich ELISA

2.3 全血中FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2蛋白的水平 為探究FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2的全血蛋白水平在活動(dòng)性結(jié)核患者和非結(jié)核肺病患者之間是否存在差異，分別用4種ELISA試劑檢測(cè)30例活動(dòng)性結(jié)核患者和30例非結(jié)核肺病患者的外周全血標(biāo)本。FCGR1A蛋白在活動(dòng)性結(jié)核患者全血中的水平為2.424 (IQR：2.179～2.810)ng/mL，而在非結(jié)核肺病患者全血中的水平為2.154 (IQR：2.015～2.335)ng/mL(表3)，秩和檢驗(yàn)表明兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.979，P<0.05)。其他3個(gè)標(biāo)志物在兩組患者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖2)。

2.4 全血FCGR1A蛋白水平區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核能力的驗(yàn)證 為進(jìn)一步驗(yàn)證全血FCGR1A蛋白水平區(qū)分結(jié)核和非結(jié)核患者的能力，使用FCGR1A蛋白ELISA試劑檢測(cè)了另外160份活動(dòng)性結(jié)核和116份非結(jié)核肺病患者，結(jié)果顯示活動(dòng)性結(jié)核患者全血中FCGR1A蛋白的水平為3.377 (IQR:2.181～6.580)ng/mL，而非結(jié)核肺病患者為2.003 (IQR:1.390～3.109)ng/mL，秩和檢驗(yàn)表明兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-5.738，P<0.001)(圖3)。ROC曲線分析結(jié)果顯示，F(xiàn)CGR1A檢測(cè)體系診斷結(jié)核病的AUC為0.702(P<0.01)(圖4)。根據(jù)最大約登指數(shù)確定最優(yōu)Cut off值為3.036 ng/mL，此時(shí)靈敏度為73.28% (95%CI:64.57%～80.49%)，特異度為60.63% (95%CI:52.89%～67.86%)。

注：A為FCGR1A;B為DUSP3;C為SEPT4;D為BATF2；TB為活動(dòng)性結(jié)核患者；non-TB為肺結(jié)核肺病患者。圖中加黑短線為中位數(shù)，誤差線為四分位間距。圖2 不同蛋白在活動(dòng)性結(jié)核與非結(jié)核肺病患者外周血中的水平Fig.2 Protein levels in the whole blood of patients with active tuberculosis and non-tuberculosis pulmonary disease

表3 患者外周血中FCGR1A、DUSP3、SEPT4和BATF2的蛋白水平 Tab.3 Protein levels of FCGR1A,DUSP3,SEPT4 and BATF2 in patients whole blood

注：TB為活動(dòng)性結(jié)核患者，non-TB為非結(jié)核肺病患者。圖中加粗的短線為中位數(shù)，誤差線為四分位間距。圖3 FCGR1A蛋白在活動(dòng)性結(jié)核與非結(jié)核肺病患者外周血中的水平Fig.3 FCGR1A protein levels in the whole blood of patients with active tuberculosis and non-tuberculosis pulmonary disease

3 討 論

結(jié)核病是世界范圍內(nèi)嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題，而診斷困難嚴(yán)重影響結(jié)核病的防治工作，且增加了患者的負(fù)擔(dān)。相較于傳統(tǒng)痰培養(yǎng)、涂片鏡檢和核酸檢測(cè)等基于痰液標(biāo)本的檢測(cè)手段，基于非痰液標(biāo)本(如血液、尿液等)的檢測(cè)方法可以對(duì)無痰肺結(jié)核、肺外結(jié)核以及HIV共感染等免疫能力低下的患者可以具有更好的診斷效能。外周血轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物作為基于血液的結(jié)核診斷候選靶標(biāo)，受到越來越多的關(guān)注。當(dāng)前對(duì)于結(jié)核轉(zhuǎn)錄學(xué)組標(biāo)志物的研究大多基于微陣列(Illumina和Affymetrix等)和PCR檢測(cè)，盡管相關(guān)技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成熟，但在臨床推廣上仍會(huì)受到設(shè)備和環(huán)境限制，而轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)便、低成本的免疫檢測(cè)則更有利于向基層和資源匱乏的地區(qū)推廣。理論上基因轉(zhuǎn)錄水平的差異有可能體現(xiàn)在蛋白水平的差異上，但尚無相關(guān)報(bào)道。本研究針對(duì)經(jīng)過系統(tǒng)驗(yàn)證過的外周全血轉(zhuǎn)錄標(biāo)志物中的4種常見基因，通過檢測(cè)其在活動(dòng)性結(jié)核患者和非結(jié)核肺病患者外周血中的蛋白水平，發(fā)現(xiàn)與其轉(zhuǎn)錄水平的表現(xiàn)不一致，僅有FCGR1A的全血蛋白水平在結(jié)核和非結(jié)核患者間體現(xiàn)出差異。最近，Jiang L等針對(duì)人體不同組織臟器的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，組織中mRNA的豐度與對(duì)應(yīng)蛋白的豐度并不完全一致[18]。因此，在轉(zhuǎn)錄水平上可區(qū)分結(jié)核病和非結(jié)核病的標(biāo)志物，其蛋白水平不一定具有完全相同的臨床價(jià)值，結(jié)核全血轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究成果尚不能完全指導(dǎo)結(jié)核相關(guān)宿主蛋白標(biāo)志物的開發(fā)應(yīng)用。

雖然全血FCGR1A蛋白水平在活動(dòng)性結(jié)核患者和非結(jié)核肺病患者之間存在差異，但尚不能達(dá)到WHO TPP對(duì)于基于非痰液結(jié)核篩選試劑的要求。結(jié)核病相關(guān)的宿主標(biāo)志物主要是因活動(dòng)性結(jié)核病而引起其轉(zhuǎn)錄、翻譯水平的變化，單個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄水平或蛋白表達(dá)水平在靈敏度和特異性上一般難以具有較好的臨床診斷價(jià)值，往往需要多個(gè)宿主基因轉(zhuǎn)錄、表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行聯(lián)合才能獲得較好的診斷效能。如現(xiàn)有已報(bào)道的宿主全血轉(zhuǎn)錄組學(xué)標(biāo)志物，多有多個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄水平共同組成[6]。因此，如需發(fā)展基于宿主外周血蛋白水平的活動(dòng)性結(jié)核免疫診斷技術(shù)，則需要發(fā)現(xiàn)更多的能區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)合肺病的宿主全血蛋白標(biāo)志物，并將其聯(lián)合應(yīng)用來提升該方法的臨床應(yīng)用價(jià)值。發(fā)現(xiàn)更多有潛力的全血蛋白標(biāo)志物，一是可以將已報(bào)道的、在轉(zhuǎn)錄水平存在差異的基因在蛋白水平上進(jìn)行逐一驗(yàn)證；二是可以通過全血質(zhì)譜的方式在蛋白水平上直接進(jìn)行篩選。

基于血液免疫檢測(cè)的新型結(jié)核標(biāo)志物開發(fā)具有十分顯著的臨床意義，不僅可以克服基于痰液檢測(cè)面臨的采樣問題，如無痰肺結(jié)核、肺外結(jié)核等，還可以規(guī)避分子檢測(cè)在中低收入國(guó)家和基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)難以推廣應(yīng)用的問題。但目前已有的基于血液樣本的結(jié)核免疫學(xué)檢測(cè)方法或多或少都存在一些不足，尚不能完全滿足臨床對(duì)活動(dòng)性結(jié)核診斷的臨床性能需求，如結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)無法區(qū)分是結(jié)核感染還是卡介苗接種導(dǎo)致的免疫反應(yīng)[19]，γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)IGRA不受卡介苗接種的影響，但無法區(qū)分潛伏感染和活動(dòng)性結(jié)核[20]，結(jié)核抗體檢測(cè)的靈敏度和特異度均較低。目前基于結(jié)核全血轉(zhuǎn)錄組學(xué)的相關(guān)研究已發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證了外周全血中部分宿主基因的轉(zhuǎn)錄水平能有效區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)核患者，提示外周血中這些宿主基因的蛋白水平應(yīng)也有區(qū)分二者的能力，但尚無相關(guān)研究報(bào)道。本研究首次選取在轉(zhuǎn)錄水平有差異的代表性基因，探索其在蛋白水平是否也存在類似的活動(dòng)性結(jié)核區(qū)分能力，結(jié)果表明某些宿主基因的全血蛋白水平確實(shí)也同樣在活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)核肺病間存在差異，但同時(shí)也有部分宿主基因的蛋白水平?jīng)]有表現(xiàn)出與轉(zhuǎn)錄水平一致的差異。本研究結(jié)果提示全血宿主蛋白標(biāo)志物的水平活動(dòng)性結(jié)核和非結(jié)核患者之間部分存在差異，研發(fā)基于蛋白水平的活動(dòng)性結(jié)核免疫檢測(cè)試劑存在可能性，但同時(shí)也發(fā)現(xiàn)全血結(jié)核轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究成果對(duì)該類試劑研制的指導(dǎo)價(jià)值有限。