杜琴，王強，蔡艷娟，杜娟，張茂鑫，郭曉蘭

(川北醫(yī)學院，1.附屬醫(yī)院檢驗科；2.醫(yī)學檢驗系；3.轉化醫(yī)學研究中心，四川 南充 637000)

惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的公共衛(wèi)生問題之一，最新癌癥報告顯示，我國平均每分鐘有8.2個人被確診，且發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)上升態(tài)勢。肺癌和消化道腫瘤是我國主要的惡性腫瘤，臨床上確診主要依靠穿刺活檢或胃腸鏡等侵入性操作[1]，患者體感較差。隨著技術的發(fā)展，腫瘤標志物在臨床應用愈發(fā)廣泛，組織多肽抗原(tissue polypeptide antigen，TPA)作為一種廣譜腫瘤篩查標志物[2]，在惡性腫瘤患者血清中具有較高檢出率。有研究[3-4]發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤在病理生理上與炎癥組織相似，炎癥組織損傷可能引起腫瘤的發(fā)生。因此，近年C反應蛋白(CRP)在診斷惡性腫瘤方面也逐漸受到重視。熱休克蛋白90α(heat shock protein 90α，Hsp90α)是一類具有分子伴侶特性的蛋白，在腫瘤細胞增殖過程中通過保護客戶蛋白參與腫瘤的多種行為，且能夠幫助腫瘤生長、侵襲和轉移[5]。本研究旨在探討Hsp90α聯(lián)合TPA、C反應蛋白CRP檢測在惡性腫瘤臨床診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2019年6月川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院收治74例術后病理明確診斷的惡性腫瘤患者為腫瘤組，另選48例同期肺部及消化道炎癥病變患者為炎癥組，49名健康體檢者為非炎癥組。腫瘤組中，男性52例，女性22例；年齡44～81歲，平均(62.42±9.45)歲；肺癌28例，食管癌22例，消化道腫瘤19例，其他腫瘤5例。炎癥組中，男性32例，女性16例；年齡36～83歲，平均(66.42±13.92)歲。非炎癥組中，男性32名，女性17名；年齡39～85歲，平均(62.00±12.43)歲。三組對象年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 納入標準：(1)經(jīng)術后病理明確診斷為惡性腫瘤者；(2)初次確診，既往未行手術、放化療及靶向治療者。排除標準：(1)存在意識及表達障礙者；(2)中途退出研究者。

1.2 方法

1.2.1 Hsp90α、TPA及CRP檢測 采集清晨空腹血4 mL，3 500 rpm離心5 min，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿中Hsp90α濃度(煙臺普羅吉生物科技發(fā)展有限公司，批號：201809002)；化學發(fā)光法測定血清中TPA濃度(意大利索靈公司，批號：17845A)；用速率散射比濁法測定血清中CRP濃度(貝克曼庫爾特公司，批號： M909057)。

1.2.2 陽性判斷標準 Hsp90α正常參考范圍0～82.06 ng/mL，Hsp90α>82.06 ng/mL為陽性；TPA 正常參考范圍0～75 ng/mL ，TPA >75 ng/mL為陽性；CRP正常參考范圍0～5 mg/mL，CRP>5 mg/mL為陽性[6]。

1.3 觀察指標

(1)Hsp90α、TPA和CRP水平；(2)Hsp90α、TPA和CRP單一檢測和聯(lián)合檢測對惡性腫瘤的診斷效能。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析與處理。計量資料以[M(Q1,Q3)]表示，采用t檢驗；診斷效能采用ROC曲線分析，曲線下面積(AUC)曲線下面積(AUC)>0.75，提示診斷價值較高。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組對象Hsp90α、TPA和CRP水平比較

腫瘤組Hsp90α水平均明顯高于非炎癥組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 Hsp90α、TPA和CRP對炎癥性疾病的診斷效能

ROC曲線分析顯示， Hsp90α、TPA和CRP的AUC分別為0.608、0.617和0.924，CRP對炎癥性疾病的診斷效能最大。見圖1。

2.3 Hsp90α、TPA和CRP對非炎癥性疾病的診斷效能

ROC曲線分析顯示， Hsp90α、TPA和CRP的AUC分別為0.707、0.711和0.560，均小于0.75，表明健康人群外周血Hsp90α、TPA和CRP濃度不高。見圖2。

2.4 Hsp90α、TPA和CRP對惡性腫瘤的診斷效能

ROC曲線分析顯示， Hsp90α、TPA和CRP的AUC分別為0.593、0.587和0.321，Hsp90α對惡性腫瘤的診斷效能相對較好，但靈敏度和特異性不高，分別僅為62.2%和58.8%。見圖3和表2。

2.5 Hsp90α、TPA和CRP聯(lián)合檢測對惡性腫瘤的診斷效能

ROC曲線分析顯示，Hsp90α&TPA、Hsp90α&CRP、TPA&CRP和Hsp90α&TPA&CRP的AUC分別為0.593、0.784、0.679和0.784，Hsp90α&CRP聯(lián)合檢測能提高對惡性腫瘤的診斷效能；而TPA的聯(lián)合檢測，并不能提高惡性腫瘤的檢出靈敏度和特異性。見圖4。

2.6 Hsp90α和TPA與CRP的比值對惡性腫瘤的診斷效能

ROC曲線分析顯示， Hsp90α/CRP、TPA/CRP的AUC分別為0.765和0.742，Hsp90α與CRP進行比值計算后，靈敏性和特異度提高，提高了對惡性腫瘤的診斷效能。見圖5。

2.7 Hsp90α、TPA和CRP單獨和聯(lián)合運用對惡性腫瘤的診斷效能

ROC曲線分析顯示， Hsp90α對惡性腫瘤的診斷方面較TPA稍具優(yōu)勢(0.593>0.587)，靈敏度達74.3%，但特異性稍顯不足，僅為40.2%；其聯(lián)合CRP檢測或通過與CRP比值的計算后，可明顯提高對惡性腫瘤的診斷效能，達到0.784或0.765，靈敏度和特異性亦增加。與TPA的聯(lián)合檢測，對惡性腫瘤診斷效能無提高，靈敏度和特異性亦無變化。見表2。

表2 Hsp90α、TPA和CRP單獨和聯(lián)合運用對惡性腫瘤的診斷效能

3 討論

近年來，惡性腫瘤的發(fā)病率逐年上升，多數(shù)患者發(fā)病早期無典型的臨床不適癥狀或癥狀輕微，至初次就診時就已經(jīng)是晚期。因此，惡性腫瘤的死亡率居高不下，嚴重威脅著人類健康。自上世紀起，多種腫瘤標志物應用于惡性腫瘤的早期篩查和輔助診斷，但單一腫瘤標志物的檢測靈敏度仍然較低，特異性不足，遠低于臨床預期。目前，更推薦采用腫瘤標志物的聯(lián)合檢測方法，以期提高惡性腫瘤的檢出率，增加對惡性腫瘤的診斷特異性[7]。

TPA是一種廣譜的腫瘤篩查標志物，與腫瘤細胞的DNA合成相關，在多種腫瘤患者體內均發(fā)現(xiàn)增高[8]，但有相當一部分非惡性腫瘤患者外周血TPA亦發(fā)現(xiàn)增高，陽性率約為14%～35%，故TPA尚不能很好的區(qū)分惡性腫瘤與炎癥性疾病；Hsp90α是細胞內一種高度保守蛋白，正常主要輔助蛋白折疊、維持胞內多種信號傳導蛋白的穩(wěn)定性；而在荷瘤條件下，與腫瘤細胞的增殖分化以及各種癌癥中凋亡相關分子有關[5]。有研究人員發(fā)現(xiàn)Hsp90α能加強DNA聚合酶polη的功能，參與DNA損傷反應和細胞凋亡[9]，Hsp90α還能調節(jié)細胞內多種蛋白質的合成和功能，促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展[10]，并與腫瘤的分級分期和侵襲轉移有關[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，TPA和Hsp90α在惡性腫瘤患者體內均增加(P<0.05)，但Hsp90α對惡性腫瘤的診斷性能更勝一籌，但特異性稍顯不足，將兩者聯(lián)合檢測對惡性腫瘤的診斷價值也未見明顯提高(P>0.05)。

1800年前，Galenus發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤在病理生理上與炎癥組織相似，炎癥組織損傷可能引起腫瘤的發(fā)生[12]。19世紀，學者發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞內有白細胞的存在，這是癌癥與慢性炎癥之間存在一定相關性的第一個證據(jù)[13]。而慢性炎癥誘導腫瘤發(fā)生發(fā)展的機制十分復雜，可能與局部微環(huán)境的反復組織損傷修復，使活化的炎性細胞釋放大量炎癥因子及介質，致細胞DNA鏈斷裂，誘發(fā)基因突變，或引起原癌基因活化和抑癌基因失活，最終導致腫瘤的發(fā)生[14-15]。因此，部分學者將腫瘤相關性炎癥歸于腫瘤的第七大生物學特征。CRP是經(jīng)典的急性時相反應蛋白，在炎癥性疾病體內明顯升高。近年來，CRP在診斷惡性腫瘤方面也逐漸受到重視。本研究ROC曲線分析結果發(fā)現(xiàn)，Hsp90α和CRP聯(lián)合檢測或計算Hsp90α/CRP比值，可以明顯提高診斷效能(P<0.05)。

綜上，Hsp90α是一種全新的腫瘤標志物，和CRP的聯(lián)合檢測或通過Hsp90α/CRP比值的計算，可提升惡性腫瘤的檢出率，對炎癥性疾病和惡性腫瘤的鑒別亦有一定價值。