古 聯(lián)，黃先利，嚴(yán) 雁，楊怡冰，唐略鈞，蘇 莉

（1. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023；2. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001；3. 廣西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，廣西 南寧 530021）

缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS），歸屬傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”范疇，又可名為缺血性中風(fēng)。證候是對(duì)疾病發(fā)展某一階段的病因病機(jī)的總體概括，同一疾病在發(fā)展的不同階段存在不同的病理狀態(tài)，則表現(xiàn)出不同的證候，即“同病異證”。古代醫(yī)家朱丹溪在其著作《丹溪心法》中提出“有諸內(nèi)者必形諸外”，同一疾病出現(xiàn)不同的證候，其內(nèi)在必定存在著與該病理表現(xiàn)相應(yīng)的一些物質(zhì)基礎(chǔ)。既往多項(xiàng)研究結(jié)果表明，基因多態(tài)性與證候具有關(guān)聯(lián)性，基因多態(tài)性可作為證候的客觀生物標(biāo)志［1-3］。小核RNA 激活復(fù)合體多肽3（SNAPC3）位于染色體9p22.3 上，也被稱為SNAP50。SNAP50鋅指結(jié)構(gòu)域在啟動(dòng)子識(shí)別和人類的小核RNA 基因轉(zhuǎn)錄中具有重要作用［4］。目前較少有關(guān)SNAPC3基因多態(tài)性與缺血性中風(fēng)關(guān)系的研究報(bào)道。本研究旨在探尋SNAPC3基因rs12093 位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性中風(fēng)及其中醫(yī)證候的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 病例組：所有納入研究對(duì)象符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)符合中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)。西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)需要與1995 年中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)》中缺血性腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)相符合，所有納入研究對(duì)象通過(guò)頭顱計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）和/或磁共振成像（MRI）醫(yī)學(xué)成像技術(shù)檢查，以獲取診斷明確的結(jié)果。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)同樣需要與國(guó)家中醫(yī)藥管理局1996 年制訂的《中風(fēng)病辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)（試行）》中的中風(fēng)病診斷標(biāo)準(zhǔn)相符合。對(duì)照組：所有納入研究對(duì)象性別、年齡需與病例組相匹配。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 病例組：由其他因素如腦外傷、腦血管畸形、動(dòng)脈炎、腫瘤、短暫性缺血發(fā)作（TIA）、感染、藥物等引起的缺血性腦卒中患者；合并有嚴(yán)重感染性疾病或自身免疫系統(tǒng)疾病患者；合并有嚴(yán)重心臟、肝臟、腎臟功能不全及造血功能障礙患者。對(duì)照組：患有心臟、肝臟、腎臟功能障礙患者以及自身免疫系統(tǒng)疾病患者。

本研究中所有研究對(duì)象自我報(bào)告為中國(guó)漢族人群，且相互之間不存在親緣關(guān)系。本研究方案已提交至廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核，獲得批準(zhǔn)后開(kāi)始進(jìn)行研究。在知情同意的原則下，已詳細(xì)告知研究對(duì)象本研究項(xiàng)目的流程及目的。本研究所有納入研究對(duì)象已充分了解本研究?jī)?nèi)容并表達(dá)同意后，簽署知情同意書。

1.2 中醫(yī)辨證分型

依照《中風(fēng)病辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)（試行）》的中風(fēng)病辨證分型標(biāo)準(zhǔn)，可將本研究的中風(fēng)病中醫(yī)證候分為6 個(gè)證型，具體證型為風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證、陰虛陽(yáng)亢證。采用該標(biāo)準(zhǔn)，在缺血性中風(fēng)患者起病7 d 內(nèi)對(duì)其進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)分。將對(duì)中風(fēng)證候診斷具有高特異性、高敏感性的癥狀和體征納入評(píng)分項(xiàng)內(nèi)容中。賦分依據(jù)為其對(duì)證候診斷所占的比重，將各評(píng)分最高分相加所得總分即為相應(yīng)證候所得分，每個(gè)證候≥7 分則表示該證候診斷成立。每位缺血性中風(fēng)患者，均經(jīng)由2 名中醫(yī)醫(yī)師嚴(yán)格參照該標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分后方可確立其中風(fēng)證候。若存在上述兩位中醫(yī)醫(yī)師證候評(píng)分結(jié)果不一致的情況，則由第3 位具有副主任醫(yī)師以上職稱的中醫(yī)醫(yī)師進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)分并最終確定其證候。

1.3 一般資料

本研究納入研究對(duì)象共計(jì)1 567 例，其中病例組納入774 例缺血性中風(fēng)患者，對(duì)照組納入793 例健康對(duì)照。病例組研究對(duì)象均來(lái)自廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腦病科住院部收治的缺血性中風(fēng)患者。對(duì)照組研究對(duì)象均來(lái)自同期該醫(yī)院體檢中心的健康體檢者或骨科等病勢(shì)輕微的外傷患者。病例組與對(duì)照組平均年齡分別為（64.12±10.34）、（63.81±10.36）歲。病例組與對(duì)照組的研究對(duì)象在性別（χ2＝2.815，P＝0.093）、年齡（t＝-0.582，P＝0.561）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。根據(jù)上述采用的中醫(yī)中風(fēng)病辨證分型標(biāo)準(zhǔn)，本研究病例組缺血性中風(fēng)患者均確立證型，包括痰證、風(fēng)證、血瘀證、氣虛證、火熱證及陰虛陽(yáng)亢證。

1.4 方法

在所有納入研究對(duì)象清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，使用EDTA 抗凝管 采集其2 mL 的外周靜脈血。采用北京艾德萊生物科技有限公司（Aidlab biotechnologies Co. Ltd）的全血基因組DNA 提取試劑盒并嚴(yán)格按照其操作說(shuō)明書，對(duì)采集血樣進(jìn)行血液基因組DNA 提取。光密度（OD）值的檢測(cè)采用Nano-Drop2000 儀器進(jìn)行，1.25%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，DNA 質(zhì)檢合格后轉(zhuǎn)置于-80 ℃低溫冰箱凍存?zhèn)溆?。采用北京博淼生物科技有限公司的Agena 平臺(tái)中的MassARRAY SNP 基因分型實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行基因分型檢測(cè)。

1.5 臨床指標(biāo)檢測(cè)

所有參與者空腹?fàn)顟B(tài)下于清晨采集2 mL 抗凝血。使用邁瑞6900 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)全血中血小板的水平。 活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）、D-二聚體（DD）、纖維蛋白原（FIB）、凝血酶時(shí)間（TT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、凝血酶原時(shí)間活性（PTA）等凝血功能指標(biāo)運(yùn)用STAGO 全自動(dòng)抗凝血凝血儀進(jìn)行測(cè)定。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

遺傳關(guān)聯(lián)分析采用PLINK 軟件進(jìn)行。應(yīng)用擬合優(yōu)度卡方檢驗(yàn)進(jìn)行哈溫平衡（Hardy-Weinberg Equilibrium，HWE）檢驗(yàn)。采用SPSS16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用卡方檢驗(yàn)。rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)及其證候發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性結(jié)果通過(guò)運(yùn)用非條件多因素Logistic 回歸模型進(jìn)行分析獲得，采用分析所得結(jié)果的比值比（OR）及其95%置信區(qū)間（CI）以表示關(guān)聯(lián)強(qiáng)度。應(yīng)用一般線性回歸分析rs12093 位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性中風(fēng)患者數(shù)量性狀之間的相關(guān)性。本研究所有統(tǒng)計(jì)學(xué)的檢驗(yàn)方法為雙側(cè)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α＝0.05。

2 結(jié)果

2.1 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性位點(diǎn)的哈溫平衡檢驗(yàn)及基因型頻率分布比較

擬合優(yōu)度卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)照組的SNAPC3基因rs12093 的基因型頻率分布符合哈溫平衡（PHWE＝0.779）。經(jīng)卡方檢驗(yàn)后，結(jié)果顯示rs12093 位點(diǎn)的基因型頻率在中風(fēng)病例組與對(duì)照組中的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.268）。中風(fēng)風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證各證候組與對(duì)照組之間的rs12093 基因型頻率分布差異也均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（各證型P均＞0.05）。由于本研究收集的陰虛陽(yáng)亢證樣本例數(shù)過(guò)少，故未對(duì)陰虛陽(yáng)亢證型進(jìn)行后續(xù)研究分析。

2.2 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)的關(guān)聯(lián)分析

在4 個(gè)遺傳模型中：SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)均無(wú)顯著關(guān)聯(lián)（各遺傳模型P均＞0.05）；校正年齡、性別后，仍無(wú)顯著關(guān)聯(lián)（各遺傳模型P均＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)易感性的關(guān)聯(lián)分析Tab 1 Association analysis between rs12093 polymorphism of SNAPC3 gene and susceptibility to ischemic stroke

2.3 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)中醫(yī)證候的關(guān)聯(lián)分析

多因素Logistic 回歸模型分析結(jié)果顯示，rs12093 位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性中風(fēng)風(fēng)證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著關(guān)聯(lián)，在校正性別、年齡后，rs12093 與缺血性中風(fēng)風(fēng)證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，在校正年齡、性別前后，均未發(fā)現(xiàn)rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)（P均＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)中醫(yī)證候的關(guān)聯(lián)分析Tab 2 Association analysis between rs12093 polymorphism of SNAPC3 gene and TCM syndrome of ischemic stroke

2.4 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)中醫(yī)證候評(píng)分的關(guān)聯(lián)分析

一般線性模型分析結(jié)果顯示，SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)風(fēng)證評(píng)分顯著關(guān)聯(lián)［加性模型：β＝-0.51，95%CI（-0.98～-0.03），P＝0.037）；隱性模型：β＝-1.48，95%CI（-2.61～-0.36），P＝0.010）］，在校正性別、年齡后這種關(guān)聯(lián)性仍存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［加性模型：βadj＝-0.51，95%CIadj（-0.98～-0.03），Padj＝0.037；隱 性 模 型：βadj＝-1.49，95%CIadj（-2.61～-0.37），Padj＝0.009］。此外，在校正年齡、性別前后，均未發(fā)現(xiàn)rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證的評(píng)分顯著相關(guān)（P均＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)中醫(yī)證候評(píng)分的關(guān)聯(lián)分析Tab 3 Correlation analysis between rs12093 polymorphism of SNAPC3 gene and TCM syndrome score of ischemic stroke

2.5 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)風(fēng)證患者凝血及血小板水平的相關(guān)分析

一般線性模型分析結(jié)果顯示，rs12093 與缺血性中風(fēng)風(fēng)證患者血小板水平［加性模型：β＝-16.29，95%CI（-30.44～-2.15），P＝0.025）；顯性模型：β＝-18.10，95%CI（-35.49～-0.71），P＝0.042）］、凝血酶時(shí)間水平［顯性模型：β＝-0.51，95%CI（-1.00～-0.03），P＝0.039）］顯著關(guān)聯(lián)，校正性別、年齡后，rs12093 與缺血性中風(fēng)風(fēng)證患者血小板水平［加 性 模 型：βadj＝-16.30，95%CIadj（-30.36～-2.24），Padj＝0.024；顯性模型：βadj＝-18.26，95%CIadj（-35.55～-0.98），Padj＝0.039］、凝血酶時(shí)間水平［顯性模型：βadj＝-0.50，95%CIadj（-0.99～-0.02），Padj＝0.042］，關(guān)聯(lián)性仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表4。

表4 SNAPC3 基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)患者凝血相關(guān)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)分析Tab 4 Association between rs12093 polymorphism of SNAPC3 gene and coagulation related indexes in patients with ischemic stroke

3 討論

基因組學(xué)的研究范圍是整個(gè)基因組層面，主要是對(duì)基因的位置、結(jié)構(gòu)、基因產(chǎn)物功能和基因之間的聯(lián)系進(jìn)行研究。運(yùn)用基因組學(xué)的方法技術(shù)可以篩選出與疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程相關(guān)的易感基因，這對(duì)臨床上預(yù)防和治療疾病有重要的指導(dǎo)意義。單核苷 酸 多 態(tài) 性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）是基因組學(xué)主要的研究方法技術(shù)之一，同時(shí)也是目前研究復(fù)雜性疾病的重要方法。近年來(lái)，運(yùn)用SNPs 檢測(cè)技術(shù)的研究方法，發(fā)現(xiàn)了多個(gè)缺血性中風(fēng)易感基因位點(diǎn)。其中在染色體9p21.3 基因座上已經(jīng)有研究證實(shí)存在與缺血性腦卒中、心血管疾病、糖尿病等疾病相關(guān)的易感位點(diǎn)［5］。

多項(xiàng)研究結(jié)果顯示在染色體9p21 區(qū)域上的多個(gè)位點(diǎn)（rs1333047-TT 型、rs1537378、rs10757278、rs2383206）與缺血性中風(fēng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)［6-8］。這提示染色體9p 區(qū)域里可能存在不少缺血性中風(fēng)的易感位點(diǎn)。SNAPC3又稱SNAP50，位于染色體9p22.3，目前尚未見(jiàn)有SNAPC3基因多態(tài)性與缺血性腦卒中的關(guān)聯(lián)研究的報(bào)道。但有學(xué)者在日本人群全基因組關(guān)聯(lián)研究中，發(fā)現(xiàn)SNAPC3附近的基因SYK（9q22.2）與房顫的發(fā)生相關(guān)［9］，而房顫可誘發(fā)腦卒中的發(fā)生。更有研究結(jié)果證實(shí)SYKrs2290890 T 等位基因頻率、SYK基因rs2306040（T/C）多態(tài)性均與缺血性腦中風(fēng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)［10，11］。這些結(jié)果提示位于9p22.3 的SNAPC3基因可能與缺血性腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。 因此本研究對(duì)基因SNAPC3與缺血性中風(fēng)之間的關(guān)系進(jìn)行探索研究，結(jié)果顯示SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)聯(lián)，但該位點(diǎn)與缺血性中風(fēng)風(fēng)證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)及其風(fēng)證評(píng)分顯著關(guān)聯(lián)。

中風(fēng)基本病機(jī)可概括為“火、痰、風(fēng)、虛、氣、血”六端，其中“風(fēng)”有“外風(fēng)”與“內(nèi)風(fēng)”之分。如隋唐之前所倡導(dǎo)的外風(fēng)說(shuō)，便從“內(nèi)虛邪中”立論，認(rèn)為中風(fēng)是人體在氣血虛損，衛(wèi)氣不固等較為虛弱的狀態(tài)下，外受風(fēng)邪侵襲，內(nèi)有臟腑失和所致。唐之后的“內(nèi)風(fēng)”致病說(shuō)，則認(rèn)為中風(fēng)并不是由外來(lái)風(fēng)邪所導(dǎo)致，而是人體內(nèi)生風(fēng)、動(dòng)風(fēng)所致，屬于本氣自?。?2］。李水芹等［13］通過(guò)對(duì)急性缺血性中風(fēng)患者證候的研究，結(jié)果顯示在中風(fēng)患者證候分布中，風(fēng)證最為多見(jiàn)。由此可見(jiàn)，“風(fēng)”是中風(fēng)病致病主要證候要素之一。中醫(yī)證候是對(duì)疾病發(fā)展至某一階段機(jī)體生理病理狀態(tài)變化的概括，而發(fā)病的季節(jié)、地區(qū)以及個(gè)人體質(zhì)的不同對(duì)疾病的發(fā)展具有重要的影響，則同一疾病發(fā)展的不同階段所表現(xiàn)的癥狀、體征、病理變化亦不盡相同，即“同病異證”。個(gè)體之間的差異與基因多態(tài)性有密切的關(guān)聯(lián)，可通過(guò)對(duì)疾病與基因多態(tài)性的探究，探尋與證候形成相關(guān)的基因位點(diǎn)，以揭示證候的本質(zhì)，為中醫(yī)證候及同病異證提供分子生物學(xué)依據(jù)。目前，已有研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)同病異證具有內(nèi)在的生物分子依據(jù)。如龍春莉等［14］發(fā)現(xiàn)Megsin基因C2093T 基因型頻率與IgA 腎病脾腎氣虛證相關(guān)聯(lián)（P＜0.05），而與氣陰兩虛證、肝腎陰虛證和風(fēng)濕熱毒證比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；嚴(yán)新等［15］發(fā) 現(xiàn)IL-1B-31TT 型 基 因 多 態(tài) 性、IL-10-1082AG 型基因多態(tài)性與胃癌前疾病脾胃濕熱證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，而與肝胃不和證、脾胃虛弱證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)；IL-8-25AA 基因多態(tài)性與胃癌前疾病肝胃不和證和脾胃虛弱證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)，而與脾胃濕熱證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)。另有研究發(fā)現(xiàn)TBX21基因rs11657479 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)火熱證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)，但未發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)多態(tài)性與風(fēng)證、痰證、血瘀證、氣虛證的發(fā)生具有相關(guān)性［16］。這些研究結(jié)果表明，通過(guò)基因位點(diǎn)多態(tài)性的檢測(cè)手段尋找中醫(yī)證候內(nèi)在分子生物依據(jù)具有可行性，同時(shí)可為中醫(yī)同病異證提供理論支持。本研究發(fā)現(xiàn)SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)風(fēng)證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)及其風(fēng)證評(píng)分顯著關(guān)聯(lián)，這表明SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性可能是缺血性中風(fēng)風(fēng)證發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)并區(qū)別于其他中醫(yī)證候的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)之一。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)SNAPC3rs12093 多態(tài)性與缺血性腦卒中風(fēng)證患者血小板、凝血酶時(shí)間相關(guān)。血小板和凝血系統(tǒng)激活經(jīng)過(guò)體內(nèi)的各種生理病理反應(yīng)促使了體內(nèi)血栓的形成［17］。血栓形成后導(dǎo)致血管腔變狹窄，血管堵塞引起腦卒中。沈明強(qiáng)等［18］研究發(fā)現(xiàn)GPIa C807T 等位基因型與腦卒中急性期患者血小板功能增強(qiáng)相關(guān)聯(lián)；徐秀芝等［19］研究發(fā)現(xiàn)βFg-455G/A 多態(tài)性頻率對(duì)急性腦梗死患者的血小板聚集率有一定的影響作用。另有研究表明CALM1基因rs3179089 多態(tài)性與缺血性中風(fēng)患者凝血酶時(shí)間顯著相關(guān)［20］。這表明基因多態(tài)性對(duì)缺血性中風(fēng)患者的凝血功能存在影響作用。這提示SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性可能影響著缺血性中風(fēng)風(fēng)證患者的凝血功能，但其的潛在機(jī)制仍需進(jìn)一步研究探討。

SNAPC3基因rs12093 多態(tài)性可能與缺血性中風(fēng)風(fēng)證的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，但不與缺血性中風(fēng)其它中醫(yī)證候的發(fā)生相關(guān)，可能是缺血性中風(fēng)風(fēng)證的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)，為“同病異證”中醫(yī)理論提供了支持。

作者貢獻(xiàn)度說(shuō)明：

古聯(lián)：安排實(shí)驗(yàn)研究工作，收集病例樣本，文章寫作；黃先利：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析；嚴(yán)雁：臨床樣本采集及資料收集；楊怡冰：數(shù)據(jù)錄入；唐略鈞：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；蘇莉：實(shí)驗(yàn)研究工作統(tǒng)籌安排。