章樂生，李婷婷，張世清，黃建國，翟杜娟，楊榮笙，王旗，汪天平

1.安徽省血吸蟲病防治研究所，安徽 合肥 230601； 2.休寧縣疾病預(yù)防控制中心

并殖吸蟲因其成蟲寄生在宿主的肺部，故又稱肺吸蟲。并殖吸蟲病(或稱肺吸蟲病)通常因人誤食被并殖吸蟲囊蚴污染的食品而感染[1]。作為一種重要的人獸共患寄生蟲病，并殖吸蟲病流行于亞洲、非洲和美洲等地區(qū)[2]。目前全球范圍內(nèi)，已報道的并殖吸蟲有50余種[3-4]，其中在我國流行的主要有衛(wèi)氏并殖吸蟲和斯氏貍殖吸蟲。

既往研究發(fā)現(xiàn)，安徽省休寧縣存在衛(wèi)氏并殖吸蟲分布，其中間宿主溪蟹的感染率和感染度均較高[5]。2013年以來，安徽省在休寧縣設(shè)立并殖吸蟲固定監(jiān)測點，監(jiān)測結(jié)果證實當?shù)匾廊粸椴⒅澄x病自然疫源地[6-7]。為進一步了解該縣溪蟹、人群及犬類的并殖吸蟲感染情況，為開展防控工作提供參考，筆者于2018年8—12月沿休寧境內(nèi)兩大水系即率水和橫江流域分別開展了調(diào)查?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 內(nèi)容與方法

1.1調(diào)查點選擇 率水和橫水為休寧縣域內(nèi)兩大主要水系，其中率水河道全長148.2 km,流域面積1 522 km2，橫江河道長40.2 km，面積556 km2。根據(jù)兩條水系長度及途經(jīng)范圍，選取了分布在率水水系的溪口鎮(zhèn)杭溪村、磣溪村，鶴城鎮(zhèn)漁塘村，汪村鎮(zhèn)汪村和山斗鎮(zhèn)山斗村，以及橫江水系的藍田鎮(zhèn)儒村共5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的6個行政村作為調(diào)查點。

1.2調(diào)查方法

1.2.1第二中間宿主感染情況調(diào)查 于調(diào)查點選取有并殖吸蟲第一中間宿主放逸短溝蜷棲息的地方，采用人工抓捕和地籠結(jié)合的方式捕捉溪蟹。捕獲的溪蟹帶回實驗室后逐個登記稱重，置研缽中搗碎，按常規(guī)方法[6]經(jīng)20目、40目和60目網(wǎng)篩過濾細渣，自然沉淀后，在解剖鏡下觀察、挑取囊蚴并計數(shù)。計算每個調(diào)查點溪蟹并殖吸蟲囊蚴的感染率和感染指數(shù)。按感染指數(shù)[8]對并殖吸蟲感染風(fēng)險進行評估，其中感染指數(shù)≥100定為Ⅰ級( 超高度疫源地)；1～99 定為Ⅱ 級(高度疫源地)；≤1 定為Ⅲ級( 中度疫源地)；≤0.01 定為Ⅳ級(輕度疫源地)。

按下列公式計算溪蟹感染率和囊蚴感染指數(shù)。感染率=(感染溪蟹數(shù)/解剖溪蟹數(shù))×100%；囊蚴感染指數(shù)=(感染率×每蟹平均囊蚴數(shù)×每克蟹平均含囊蚴數(shù))/100。

1.2.2人群感染情況調(diào)查 根據(jù)并殖吸蟲第二中間宿主溪蟹的感染情況，在感染風(fēng)險評估為Ⅲ級和Ⅳ級的調(diào)查點(結(jié)合水系分布)中各抽取1個行政村，開展人群并殖吸蟲感染情況調(diào)查，調(diào)查人群年齡≥5歲，每個村不少于100人。采集居民耳垂血，實驗室進行血清分離后，使用并殖吸蟲抗體檢測試劑盒(ELISA法，上海撫生實業(yè)有限公司生產(chǎn))檢測血清中并殖吸蟲特異性IgG抗體。

1.2.3保蟲宿主感染情況調(diào)查 結(jié)合人群感染調(diào)查，同步采集當?shù)厝S樣，浸泡于75%乙醇中，帶回實驗室進行檢測。檢測時，稱取糞樣2 g，使用純凈水拌成稀糊狀后經(jīng)80目鋼篩過濾，濾液用260目尼龍絹兜進行收集，并在自來水下沖洗至濾液澄清后，將尼龍兜內(nèi)沉渣用生理鹽水洗入離心管中，并定容成10 mL懸液?；靹蚝笕? mL懸液經(jīng)涂片鏡檢觀察有無并殖吸蟲蟲卵。

1.3知情同意 本研究涉及人群感染情況調(diào)查均經(jīng)過受檢對象知情同意。

1.4統(tǒng)計分析 相關(guān)結(jié)果通過 Excel 2010建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，率的比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1第二中間宿主感染情況 6個調(diào)查點共捕獲溪蟹324只，溪蟹單個體重5.9～26.8 g，鏡檢發(fā)現(xiàn)65只感染并殖吸蟲囊蚴(大小及形態(tài)見圖1)，總感染率為20.06%。其中，橫江水系捕獲溪蟹50只，陽性33只，感染率為66.00%；率水水系5個調(diào)查點捕獲溪蟹274只，陽性32只，感染率為11.68%；橫江水系溪蟹感染率高于率水水系，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=77.802，P<0.05)。根據(jù)調(diào)查點的溪蟹感染指數(shù)，判定疫源地等級Ⅳ級的為磣溪村、汪村、魚塘村和杭溪村，疫源地等級Ⅲ級的為儒村和山斗村，總體判定等級為Ⅲ級。各調(diào)查點溪蟹感染情況見表1。

圖1 顯微鏡下觀察到的并殖吸蟲囊蚴形態(tài)(×100)

表1 休寧縣溪蟹并殖吸蟲囊蚴感染情況

2.2人群感染情況 本次調(diào)查共檢測515人，檢出陽性者39人，人群并殖吸蟲抗體總陽性率為7.57%(39/515)。汪村調(diào)查240人，抗體陽性率為6.25%(15/240)；儒村調(diào)查275人，抗體陽性率為8.73%(24/275)；兩村人群抗體陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.124，P>0.05 )。其中，男性抗體陽性率6.44%(13/202)，女性8.31%(26/313)，不同性別人群抗體陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.614，P>0.05)。見表2。

表2 不同性別人群血清并殖吸蟲抗體檢測結(jié)果

本次調(diào)查人群中，5～34歲年齡段未檢出陽性，其他各年齡組均檢出陽性，且以35～44歲、45～54歲年齡組陽性率較高，分別為10.00%和14.71%。≥35歲人群血檢陽性率為8.82%，高于<35歲人群，血檢陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.969，P<0.05)。兩村不同年齡人群的血清抗體檢測結(jié)果見表3。

表3 不同年齡組血清并殖吸蟲抗體檢測結(jié)果

2.3保蟲宿主感染情況 汪村和儒村現(xiàn)場采集犬糞分別為10份和16份。經(jīng)實驗室鏡檢，其中汪村的10份樣本中，有4份觀察到衛(wèi)氏并殖吸蟲蟲卵，檢出率為40.00%；在儒村的16份樣本中，有1份觀察到衛(wèi)氏并殖吸蟲蟲卵，檢出率為6.25%。所檢出蟲卵形態(tài)見圖2。

圖2 犬糞中檢出的衛(wèi)氏并殖吸蟲蟲卵(×100)

3 討 論

休寧縣隸屬安徽省黃山市，其地形復(fù)雜、植被茂盛、動物種類豐富，是衛(wèi)氏并殖吸蟲病的自然疫源地。該縣境內(nèi)有率水和橫江兩條主要河流。其中率水發(fā)源于六股尖，流入新安江；橫江發(fā)源于黟縣，流經(jīng)休寧，至屯溪與率水匯合注入新安江。

對并殖吸蟲的第二中間宿主調(diào)查發(fā)現(xiàn)，休寧縣6個調(diào)查村的溪蟹總感染率為20.06%，其中藍田鎮(zhèn)儒村溪蟹囊蚴感染率高達66.00%，高于之前方益民等[9]調(diào)查的藍田鎮(zhèn)溪蟹感染率。此次調(diào)查結(jié)果表明，休寧縣6個調(diào)查點總體溪蟹囊蚴的感染指數(shù)為0.011 829，根據(jù)風(fēng)險評估指標，該縣屬并殖吸蟲中度疫源地(Ⅲ級)。20世紀70年代樊培方等[8]研究發(fā)現(xiàn)，休寧縣溪蟹感染率為100%，溪蟹并殖吸蟲囊蚴感染指數(shù)為Ⅰ級，人群感染并殖吸蟲風(fēng)險較大。兩次研究結(jié)果差異較大的原因，可能為隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展、生態(tài)環(huán)境的變化，休寧縣并殖吸蟲傳播的適宜宿主數(shù)量減少，當前溪蟹并殖吸蟲感染率和感染指數(shù)降低。橫江水系調(diào)查村感染率高于率水水系，可能因率水水流湍急，而橫江河道寬闊、流域緩慢，更利于并殖吸蟲中間宿主的棲息繁衍。

汪村(輕度疫源地)和儒村(中度疫源地)的人群血清學(xué)抗體總陽性率為7.57%(39/515)，不同性別人群抗體陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，兩村抗體陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。年齡分布顯示，抗體陽性者主要為≥35歲以上人群，其中，45～54歲年齡組人群并殖吸蟲抗體陽性率高達14.71%，35～44歲年齡組為10.00%，可能因為該年齡人群是農(nóng)村主要勞動力，他們在野外生產(chǎn)、勞作過程中，易誤飲含并殖吸蟲囊蚴的水體而感染并殖吸蟲。劉道華等[10]對石臺縣人群并殖吸蟲感染的影響因素調(diào)查也表明喝生水的人群血檢陽性率顯著高于不喝生水的人群。提示我們今后要加強并殖吸蟲病防控知識宣傳，提高居民健康意識，注意日常生活中的飲水和食品安全。

犬糞檢測發(fā)現(xiàn)，汪村和儒村的犬糞中存在衛(wèi)氏并殖吸蟲蟲卵，現(xiàn)場調(diào)查發(fā)現(xiàn)調(diào)查點的犬大部分為散養(yǎng)，考慮為犬在溪水邊誤食了含有囊蚴的溪蟹而感染并殖吸蟲，并作為傳染源促成了并殖吸蟲的生活史的完成。該調(diào)查為休寧縣開展并殖吸蟲相關(guān)研究以來，首次發(fā)現(xiàn)犬感染并殖吸蟲，提示目前犬可能為休寧地區(qū)并殖吸蟲的主要傳染源之一，并在并殖吸蟲病的傳播中起重要作用[11]。建議在今后并殖吸蟲感染的防控工作中，應(yīng)加強對犬類的監(jiān)測和管控，防止并殖吸蟲病的傳播。