崔立慧，李素娟，陶建嬌

(東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇 南京 210000)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是常見的呼吸系統(tǒng)疾病，以持續(xù)氣流受限為主要特征，發(fā)病率和致殘率均較高[1]。COPD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，慢性氣道炎癥是其主要病理基礎(chǔ)，多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子被證實(shí)與COPD的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[2]。白細(xì)胞介素-6(IL-6)是一種重要的促炎因子，被發(fā)現(xiàn)與COPD炎性反應(yīng)程度呈正相關(guān)[3]。IL-8是由巨噬細(xì)胞等分泌的細(xì)胞因子，具有炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)作用[4]。部分研究[5]表明，IL-10可能參與了慢性氣道炎癥，與COPD患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)。然而，目前關(guān)于這些細(xì)胞因子與COPD患者肺功能損害的相關(guān)性尚不明確。因此，本研究對(duì)COPD患者血清白細(xì)胞介素家族成員(IL-6、IL-8、IL-10)水平進(jìn)行檢測，探討其與患者肺功能損傷程度的相關(guān)性，為COPD的病情監(jiān)測提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2020年12月東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院收治的80例COPD患者，其中急性加重期46例(急性加重期組)，穩(wěn)定期34例(穩(wěn)定期組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《慢性阻塞性疾病基層診療指南(2018)》[6]中診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡50～80歲；(3)無其他類型呼吸系統(tǒng)疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并嚴(yán)重心肝腎功能障礙者；(2)合并血液系統(tǒng)疾病者；(3)合并免疫系統(tǒng)疾病者；(4)惡性腫瘤患者；(5)近3個(gè)月有感染病史者。急性加重期組中，男性25例，女性21例；年齡50～79(69.21±6.23)歲；吸煙史12例。穩(wěn)定期組中，男性20例，女性14例；年齡51～78(68.87±5.89)歲；吸煙史10例。另選取40名同期體檢的健康體檢者作為對(duì)照組，其中男性22名，女性18名，年齡50～75(67.89±6.21)歲。各組性別、年齡、吸煙史比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，入組對(duì)象均知情同意。

1.2 血清IL-6、IL-8、IL-10水平檢測

采集患者清晨空腹靜脈血5 mL，以3 000 rpm的轉(zhuǎn)速，離心10 min(r=10 cm)，分離上層血清，放置到-20 ℃環(huán)境下保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行IL6、IL-8、IL-10的檢測，試劑盒為武漢華美公司產(chǎn)品；嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行檢測操作。健康體檢者于體檢時(shí)采血，同上述檢測。

1.3 肺功能檢測

利用肺功能儀(德國耶格公司，型號(hào)：MasterScreen Paed/MasterScreenPFT)對(duì)受試者肺功能進(jìn)行測定，包括第1秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1)、用力肺活量(forced vital capacity，F(xiàn)VC)，并計(jì)算FEV1/FVC。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 各組血清IL-6、IL-8、IL-10水平比較

各組血清IL-6、IL-8、IL-10水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；COPD急性加重期組與穩(wěn)定期組血清IL-6、IL-8水平高于對(duì)照組(P<0.05)，IL-10水平低于對(duì)照組(P<0.05)；且急性加重期組血清IL-6、IL-8水平高于穩(wěn)定期組(P<0.05)，IL-10水平低于穩(wěn)定期組(P<0.05)。見表1。

表1 各組血清IL-6、IL-8、IL-10水平比較

2.2 各組肺功能指標(biāo)比較

各組FEV1、FEV1/FVC比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；COPD急性加重期組與穩(wěn)定期組FEV1、FEV1/FVC均低于對(duì)照組(P<0.05)，且急性加重期組FEV1、FEV1/FVC亦低于穩(wěn)定期組(P<0.05)。見表2。

表2 各組肺功能指標(biāo)比較

2.3 COPD患者血清IL-6、IL-8、IL-10水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性

相關(guān)性分析顯示，COPD急性加重期患者血清IL-6、IL-8水平均與FEV1、FEV1/FVC呈負(fù)相關(guān)(r<0，P<0.05)；IL-10水平與FEV1水平呈正相關(guān)(r>0，P<0.05)，而與FEV1/FVC水平無明顯相關(guān)性(P>0.05)。見表3。同時(shí)在COPD穩(wěn)定期患者中，血清IL-6、IL-8水平均與FEV1、FEV1/FVC呈負(fù)相關(guān)(r<0，P<0.05)；IL-10水平與FEV1水平呈正相關(guān)(r>0，P<0.05)，而與FEV1/FVC水平無明顯相關(guān)性(P>0.05)。見表4。

表3 COPD急性加重期患者血清IL-6、IL-8、IL-10水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性(ng/L)

表4 COPD穩(wěn)定期患者血清IL-6、IL-8、IL-10水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性(ng/L)

3 討論

COPD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，有害氣體或顆粒所致的異常肺部炎癥反應(yīng)是其發(fā)病的主要原因。多種炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子參與的炎癥反應(yīng)，會(huì)誘發(fā)免疫損傷，破壞肺實(shí)質(zhì)，造成肺損傷，導(dǎo)致肺功能降低[7-8]。白細(xì)胞介素作為重要炎癥介質(zhì)在COPD炎癥病理改變中發(fā)揮著重要作用。由于COPD病因復(fù)雜、存在地域差異等因素，僅依靠肺功能難以完全反映其病情[9]。因此，尋找可靠的生物標(biāo)志物用于COPD的診斷至關(guān)重要。IL-6是由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生的一種糖蛋白，可促進(jìn)膠原蛋白蛋白凝聚，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞外基質(zhì)降解，參與COPD的氣道重塑[10]。在COPD發(fā)展各階段，IL-6的釋放可進(jìn)一步影響受損的肺功能，并誘發(fā)中性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)[11]。IL-6還能夠誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的成熟，在COPD病情加重時(shí)，其在血清的表達(dá)也相應(yīng)增高，炎癥反應(yīng)也加重。本研究顯示，COPD各組血清IL-6水平顯著高于對(duì)照組，且急性加重期高于穩(wěn)定期，提示血清IL-6水平可用于COPD病情評(píng)估。本研究還發(fā)現(xiàn)，急性加重期與穩(wěn)定期患者血清IL-6均與肺功能指標(biāo)FEV1、FEV1/FVC水平均呈負(fù)相關(guān)，這充分體現(xiàn)了氣道的炎癥反應(yīng)性，原因可能是IL-6等炎性因子分泌增多時(shí)，易引起氣道黏液分泌增多，導(dǎo)致氣道阻塞，從而使得肺功能進(jìn)一步降低。

IL-8是一種由巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子，可通過與趨化因子受體結(jié)合，對(duì)中性粒細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用，進(jìn)而對(duì)炎癥反應(yīng)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用[12]。周仁江[13]發(fā)現(xiàn)，IL-8在毛細(xì)支氣管炎患者血清中表達(dá)增高，并且與病情嚴(yán)重程度具有相關(guān)性。本研究顯示，COPD各組血清IL-8水平均高于對(duì)照組，且IL-8水平與肺功能指標(biāo)FEV1、FEV1/FVC水平均呈負(fù)相關(guān)，提示IL-8可能與COPD發(fā)生密切相關(guān)，可反映肺功能損傷程度。分析其原因可能為：慢性非特異性炎癥是COPD的主要病理基礎(chǔ)，氣管管壁伴隨T淋巴細(xì)胞浸潤，官腔存在中性粒細(xì)胞聚集，IL-8可發(fā)揮趨化中性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等向炎癥部位聚集的作用，使得炎癥介質(zhì)大量釋放，進(jìn)而導(dǎo)致肺組織結(jié)構(gòu)破壞，故IL-8在COPD患者血清表達(dá)增高，且隨著病情加重而增高。

IL-10是一種抑炎因子，主要由淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌，對(duì)Th1細(xì)胞應(yīng)答、中性粒細(xì)胞聚集等有抑制作用[14]。IL-10雖屬于IL-6細(xì)胞因子家族，但功能與IL-6等促炎因子相反，可抑制促炎介質(zhì)的產(chǎn)生，是關(guān)鍵的負(fù)調(diào)控因子[15]。IL-10雖對(duì)IL-17的分泌無直接抑制作用，但能夠通過放大Treg細(xì)胞對(duì)Th的抑制，而對(duì)IL-17有間接抑制作用[16]。Zhang等[17]發(fā)現(xiàn)，IL-10/IL-17失衡可能在COPD發(fā)病過程中有重要作用。本研究顯示，對(duì)照組、穩(wěn)定期組、急性加重期組血清IL-10水平呈逐漸降低趨勢(shì)。其可能機(jī)制為在有害氣體或顆粒的吸入，刺激超氧化物歧化酶的產(chǎn)生，進(jìn)而誘發(fā)氧化應(yīng)激，誘發(fā)免疫反應(yīng)，并導(dǎo)致二次免疫反應(yīng)[18]，這使得促炎因子釋放增多，而抑炎因子表達(dá)減少。本研究還顯示，在COPD穩(wěn)定期或急性加重期患者中，IL-10水平均與FEV1呈正相關(guān)，提示IL-10能夠反映COPD患者肺功能損傷程度，這與楊晶等[19]研究報(bào)道相似。

綜上，COPD患者血清IL-6、IL-8水平均增高，IL-10水平降低，且與肺功能具有相關(guān)性，血清IL-6、IL-8、IL-10水平有助于評(píng)估COPD病情嚴(yán)重程度。但本研究樣本量較小，所得結(jié)果仍需進(jìn)一步驗(yàn)證。