李媛媛 王巍 鞠成國(guó) 賈天柱

中圖分類(lèi)號(hào) R283 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2021）18-2223-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.18.08

摘 要 目的：建立酒仙茅的微波炮制工藝，并與傳統(tǒng)炮制法進(jìn)行比較。方法：采用高效液相色譜法測(cè)定酒仙茅中仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷的含量;在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以加酒量、微波功率、悶潤(rùn)時(shí)間、微波時(shí)間為考察因素，以仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷及醇溶性浸出物含量為考察指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)結(jié)合綜合加權(quán)評(píng)分法優(yōu)化微波炮制的工藝并驗(yàn)證，同時(shí)比較生仙茅飲片和炮制品的含量。結(jié)果：最優(yōu)微波炮制工藝為加酒量20%（生仙茅飲片質(zhì)量的20%），微波功率300 W，悶潤(rùn)時(shí)間3 h，微波時(shí)間2 min。經(jīng)3次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷及醇溶性浸出物的平均含量分別0.095 6%、0.723 9%、0.406 6%、10.115 3%，RSD分別為0.71%、0.54%、0.99%、1.44%（n=3）;平均綜合評(píng)分為99.08分，RSD為0.69%（n=3）。除傳統(tǒng)酒炙品中醇溶性浸出物含量外，傳統(tǒng)酒炙品和微波炮制品中仙茅苷、苔黑酚龍膽二糖苷含量及微波炮制品中醇溶性浸出物含量均顯著高于生仙茅飲片，且微波炮制品中仙茅苷、苔黑酚龍膽二糖苷含量均顯著高于傳統(tǒng)酒炙品（P<0.05）;兩種炮制品中苔黑酚葡萄糖苷均顯著低于生仙茅飲片，但微波炮制品顯著高于傳統(tǒng)酒炙品（P<0.05）。結(jié)論：優(yōu)化所得微波炮制工藝穩(wěn)定、可行，可用于酒仙茅的炮制。

關(guān)鍵詞 酒仙茅;微波炮制;高效液相色譜法;正交實(shí)驗(yàn);含量測(cè)定

Establishment of the Microwave Processing Technology of Yellow Wine-processed Curculigo orchioides and Comparison with Traditional Technology

LI Yuanyuan，WANG Wei，JU Chengguo，JIA Tianzhu（College of Pharmacy， Liaoning University of TCM， Liaoning Dalian 116600， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To establish the microwave processing technology of yellow wine-processed Curculigo orchioides， and compare it with traditional technology. METHODS： HPLC method was adopted to determine the contents of curculigoside， orcinol glucoside and orcinol gentiobioside in C. orchioides. Based on the single factor tests， microwave processing technology was optimized and validated with orthogonal test combined with comprehensive weighted scoring method， with the amount of yellow wine，microwave power，wetting time and microwave time as factors， using the contents of curculigoside， orcinol glucoside， orcinol gentiobioside and ethanol soluble extract as the indexes. The contents of C. orchioides decoction pieces and processed products were compared. RESULTS： The optimal microwave processing technology included that the amount of yellow wine was 20% （the weight of C. orchioides decoction pieces was 20%）， microwave power was 300 W，wetting time was 3 h， microwave time was 2 min. After 3 times of validation tests， average contents of curculigoside， orcinol glucoside， orcinol gentiobioside and ethanol soluble extract were 0.095 6%， 0.723 9%， 0.406 6%， 10.115 3%， and RSD were 0.71%， 0.54%， 0.99%， 1.44% （n=3）. Average comprehensive score were 99.08 （RSD=0.69%， n=3）. Except for the content of ethanol soluble extract in traditional wine-processed product， the contents of curculigoside and orcinol gentiobioside in traditional wine-processed product and microwave processed product as well as the content of ethanol soluble extract in microwave processed product were all significantly higher than C. orchioides decoction pieces; the contents of curculigoside and orcinol gentiobioside in microwave processed product were both significantly higher than traditional wine-processed product （P<0.05）. The contents of orcinol glucoside in 2 processed product were significantly lower than C. orchioides decoction pieces， while the microwave processed product was significantly higher than traditional wine-processed product （P<0.05）. CONCLUSIONS： Optimized microwave processing technology is stable and feasible， and can be used for the processing of yellow wine-processed C. orchioides.

KEYWORDS? ?Yellow wine-processed Curculigo orchioides; Microwave processing technology; HPLC; Orthogonal test; Content determination

仙茅始載于《雷公炮炙論》，為石蒜科植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的干燥根莖[1]，其性熱、味辛，有毒，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、去寒濕的功效，可用于陽(yáng)痿精冷、筋骨痿軟、腰膝冷痛、陽(yáng)虛冷瀉等癥[2]。仙茅成分復(fù)雜，主要包括酚及酚苷類(lèi)、皂苷類(lèi)、木脂素類(lèi)、黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、脂肪族類(lèi)及其他類(lèi)成分[3-5]?，F(xiàn)代藥理研究顯示，仙茅具有清除氧自由基、增強(qiáng)免疫、延緩生殖系統(tǒng)衰老、抗骨質(zhì)疏松、保肝、保護(hù)心血管系統(tǒng)等作用，可用于臨床治療骨質(zhì)疏松癥、乳腺增生、絕經(jīng)后關(guān)節(jié)炎、更年期綜合征及陽(yáng)痿、再生障礙性貧血、原發(fā)性高血壓等疾病[6-8]。

目前，關(guān)于仙茅的炮制研究以酒炙為主，本課題組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，仙茅經(jīng)酒炙后能夠增強(qiáng)其補(bǔ)腎助陽(yáng)的功效[9]。傳統(tǒng)酒炙法為加入黃酒悶潤(rùn)后于鍋中炒干，但對(duì)炒制火候、炮制時(shí)間等條件僅憑經(jīng)驗(yàn)控制，存在著火候難以控制、飲片表面易出現(xiàn)焦斑、色澤不均勻等弊端。微波炮制不僅操作簡(jiǎn)單、節(jié)能高效、工藝可控，還具有消毒殺菌的作用，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)炮制方法的不足[10-11]。仙茅以酚苷類(lèi)化合物為主，其中仙茅苷屬苯甲酸酯類(lèi)酚苷，是2020年版《中國(guó)藥典》（一部）中規(guī)定的仙茅質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分，也是其補(bǔ)肝腎的有效成分之一[1];苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷屬苔黑酚類(lèi)酚苷，在仙茅中的含量較高，是其發(fā)揮強(qiáng)筋骨作用的有效成分[12]?；诖耍狙芯坎捎酶咝б合嗌V法（HPLC）測(cè)定仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷的含量，同時(shí)以上述3種成分及醇溶性浸出物含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)對(duì)酒仙茅的微波炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選，旨在為其微波炮制工藝的規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化操作奠定理論基礎(chǔ)，為酒仙茅飲片的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有：Waters e2695型HPLC儀（美國(guó)Waters公司）、KQ-250E型醫(yī)用超聲波清洗器（江蘇昆山市超聲儀器有限公司）、XMTD-8222型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、HZ-A6002型電子天平（瑞安市金訊貿(mào)易有限公司）、FA1004B型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）、DFT-200型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)（浙江溫嶺市林大機(jī)械有限公司）、S7G88C型微波爐（蘇州三星電子有限公司）等。

1.2 藥品與試劑

仙茅苷對(duì)照品（批號(hào)S0818AS，純度>98%）、苔黑酚葡萄糖苷對(duì)照品（批號(hào)O0201AS，純度≥97%）、苔黑酚龍膽二糖苷對(duì)照品（批號(hào)J1014AS，純度>98%）均購(gòu)自大連美侖生物技術(shù)有限公司;黃酒（批號(hào)20190202，酒精度10%）購(gòu)自浙江古越龍山紹興酒股份有限公司;甲醇、乙腈、磷酸均為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

仙茅藥材（批號(hào)1805002）購(gòu)自安國(guó)市聚藥堂藥業(yè)有限公司，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定室李峰教授鑒定為石蒜科植物仙茅C. orchioides Gaertn.的干燥根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1 仙茅飲片及其酒炙品的制備

2.1.1 生仙茅飲片 將仙茅藥材除去雜質(zhì)，洗凈，切成2 mm厚片，于60 ℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中干燥，即得。

2.1.2 傳統(tǒng)酒炙法 取上述生仙茅飲片20 g，置于密閉容器內(nèi)，加入10%黃酒（即生仙茅飲片質(zhì)量的10%，下同）拌勻，悶透，待黃酒被吸盡后，置于鍋中，以文火炒干，取出，放涼，即得[13]。

2.1.3 微波炮制法 取上述生仙茅飲片20 g，置于密閉容器內(nèi)，加入20%黃酒拌勻，悶透，單層鋪于微波爐托盤(pán)上，微波功率450 W，微波時(shí)間3 min，干燥，取出，放涼，即得。

2.2 醇溶性浸出物的測(cè)定

以95%乙醇為溶劑，按2020年版《中國(guó)藥典》（四部）通則“2201浸出物測(cè)定法”項(xiàng)下“醇溶性浸出物測(cè)定法——熱浸法”測(cè)定[14]。

2.3 仙茅苷等3種成分的含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件 ①仙茅苷——以Diamonsil plus 5（250 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（24 ∶ 76，V/V）為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm;流速為1 mL/min;柱溫為30 ℃;進(jìn)樣量為10 ?L。②苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷——以Diamonsil plus 5（250 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱，以乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫（0～7 min，95%B→90%B;7～20 min，90%B）;檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm;流速為0.6 mL/min;柱溫為30 ℃;進(jìn)樣量為10 ?L。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷對(duì)照品適量，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，混勻，制得仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷質(zhì)量濃度分別為0.152 0、0.227 0、0.247 0 mg/mL的單一對(duì)照品溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備 取“2.1.3”項(xiàng)下微波炮制酒仙茅樣品粉末（過(guò)三號(hào)篩，下同）1.0 g，精密稱定，加入甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，加熱回流2 h，取出，放冷，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)。精密量取上述濾液20 mL，蒸干，殘?jiān)蛹状紡?fù)溶并轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得[1]。同法制得生仙茅飲片、傳統(tǒng)酒炙酒仙茅的供試品溶液。

2.3.4 陰性對(duì)照溶液的制備 以甲醇為陰性對(duì)照溶液，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 取上述各單一對(duì)照品溶液、供試品溶液（微波炮制酒仙茅）和陰性對(duì)照溶液適量，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，詳見(jiàn)圖1。由圖1可知，各色譜峰均基線分離，分離度均大于1.5，陰性對(duì)照對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

2.3.6 線性關(guān)系考察 分別精密吸取“2.3.2”項(xiàng)下各單一對(duì)照品溶液適量，用甲醇稀釋，制成仙茅苷質(zhì)量濃度分別為30.40、60.80、91.20、121.6、152.0 μg/mL，苔黑酚葡萄糖苷45.40、90.80、136.2、181.6、227.0 μg/mL，苔黑酚龍膽二糖苷49.40、98.80、148.2、197.6、247.0 μg/mL的各單一系列線性溶液，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以各待測(cè)成分進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3.7 定量限和檢測(cè)限考察 取“2.3.2”項(xiàng)下各單一對(duì)照品溶液，用甲醇逐級(jí)稀釋，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，分別以信噪比10 ∶ 1、3 ∶ 1計(jì)算定量限和檢測(cè)限，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3.8 精密度試驗(yàn) 分別精密吸取“2.3.2”項(xiàng)下各單一對(duì)照品溶液適量，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷峰面積的RSD分別為0.81%、1.28%、1.55%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.3.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3.3”項(xiàng)下供試品溶液（微波炮制酒仙茅）適量，分別于室溫下放置0、2、4、8、12、24 h時(shí)按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷峰面積的RSD分別為0.84%、1.03%、1.22%（n=6），表明供試品溶液于室溫下放置24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.10 重復(fù)性試驗(yàn) 取“2.1.3”項(xiàng)下微波炮制酒仙茅樣品粉末1.0 g，共6份，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算各待測(cè)成分的含量。結(jié)果，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷的平均含量分別為0.089%、0.789%、0.423%，RSD分別為0.58%、1.42%、1.05%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.11 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取“2.1.3”項(xiàng)下已知含量的微波炮制酒仙茅樣品粉末0.1 g，共6份，分別加入“2.3.2”項(xiàng)下各單一對(duì)照品溶液適量，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.12 樣品含量測(cè)定 分別取傳統(tǒng)酒炙法、微波炮制法制得的酒仙茅樣品粉末各適量，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算各待測(cè)成分的含量。每樣品平行操作3次。

2.4 單因素實(shí)驗(yàn)

通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)[11]及微波炮制工藝與傳統(tǒng)酒炙法之間的相互聯(lián)系，本研究選擇微波功率、悶潤(rùn)時(shí)間、微波時(shí)間、加酒量進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn);同時(shí)，參考相關(guān)文獻(xiàn)[15-16]確定各因素的權(quán)重，3種酚苷類(lèi)成分及醇溶性浸出物含量的權(quán)重均為25%。按以下公式計(jì)算綜合評(píng)分：綜合評(píng)分=（25%X/Xmax+25%Y/Ymax+25%W/Wmax+25%Z/Zmax）×100%。式中，X、Y、W、Z分別表示仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷、醇溶性浸出物的含量，Xmax、Ymax、Wmax、Zmax分別表示上述成分含量的最大值，綜合評(píng)分越高表示樣品質(zhì)量越好[17]。

2.4.1 微波功率 取“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片，共6份，每份20 g，加入20%黃酒，悶潤(rùn)2 h后，單層鋪于微波爐托盤(pán)上，設(shè)定微波時(shí)間3 min，考察不同微波功率（100、180、300、450、600、800 W）對(duì)綜合評(píng)分的影響。結(jié)果，當(dāng)微波功率為450 W時(shí)，綜合評(píng)分最高，故選擇微波功率300～600 W進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，詳見(jiàn)表3。

2.4.2 悶潤(rùn)時(shí)間 取“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片，共6份，每份20 g，加入20%黃酒，悶潤(rùn)不同時(shí)間后，單層鋪于微波爐托盤(pán)上，設(shè)定微波功率450 W、微波時(shí)間3 min，考察不同悶潤(rùn)時(shí)間（1、2、3、4、6、8 h）對(duì)綜合評(píng)分的影響。結(jié)果，悶潤(rùn)2 h或3 h時(shí)的綜合評(píng)分均較高且相差不大，故選擇悶潤(rùn)時(shí)間1～3 h進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，詳見(jiàn)表4。

2.4.3 微波時(shí)間 取“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片，共6份，每份20 g，加入20%黃酒，悶潤(rùn)2 h后，單層鋪于微波爐托盤(pán)上，設(shè)定微波功率450 W，考察不同微波時(shí)間（1、2、3、4、6、8 min）對(duì)綜合評(píng)分的影響。結(jié)果，當(dāng)微波時(shí)間為3 min時(shí)，綜合評(píng)分最高，故選擇微波時(shí)間2～4 min進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，詳見(jiàn)表5。

2.4.4 加酒量 取“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片，共6份，每份20 g，加入不同比例黃酒，悶潤(rùn)2 h后，單層鋪于微波爐托盤(pán)上，設(shè)定微波功率450 W、微波時(shí)間3 min，考察不同加酒量（5%、10%、15%、20%、25%、30%）對(duì)綜合評(píng)分的影響。結(jié)果，當(dāng)加酒量為15%時(shí)，綜合評(píng)分最高，故選擇加酒量10%～20%進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，詳見(jiàn)表6。

2.5 正交實(shí)驗(yàn)

2.5.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本研究以加酒量（A）、微波功率（B）、微波時(shí)間（C）、悶潤(rùn)時(shí)間（D）為考察因素，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷和醇溶性浸出物含量的綜合評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用L9（34）正交表進(jìn)行設(shè)計(jì)。酒仙茅微波炮制工藝的因素與水平見(jiàn)表7，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案與結(jié)果見(jiàn)表8，方差分析結(jié)果見(jiàn)表9。

由表8可知，各因素對(duì)3種酚苷類(lèi)成分和醇溶性浸出物含量影響的大小順序依次均為D>A>C>B，最優(yōu)組合為A3B3C1D3。由表9可知，因素A、C、D對(duì)綜合評(píng)分有顯著影響（P<0.05），因素B無(wú)顯著影響（P>0.05）。為節(jié)約能源，最終確定最優(yōu)工藝為A3B1C1D3，即加酒量20%、微波功率300 W、悶潤(rùn)時(shí)間3 h、微波時(shí)間2 min。

2.5.2 驗(yàn)證 取3批“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片，每批100 g，按上述最優(yōu)微波炮制工藝制備3批酒仙茅樣品，再按“2.3.12”“2.2”項(xiàng)下方法分別測(cè)定含量。結(jié)果，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷和醇溶性浸出物的平均含量分別為0.095 6%、0.723 9%、0.406 6%、10.115 3%，平均綜合評(píng)分為99.08分（RSD為0.69%），表明所得最優(yōu)微波炮制工藝穩(wěn)定、可行，詳見(jiàn)表10。

2.6 生仙茅飲片與兩種炮制品的含量比較

取“2.1.1”項(xiàng)下生仙茅飲片20 g，分別按“2.1.2”“2.5”項(xiàng)下方法分別制備傳統(tǒng)酒炙品和微波炮制品，再按 “2.3.12” “2.2”項(xiàng)下方法分別測(cè)定生仙茅飲及兩種炮制品中仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷和醇溶性浸出物的含量，每樣品平行操作3次。采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果顯示，除傳統(tǒng)酒炙品中醇溶性浸出物含量外，傳統(tǒng)酒炙品和微波炮制品中仙茅苷、苔黑酚龍膽二糖苷含量及微波炮制品中醇溶性浸出物含量均顯著高于生仙茅飲片，且微波炮制品中仙茅苷、苔黑酚龍膽二糖苷含量均顯著高于傳統(tǒng)酒炙品;兩種炮制品中苔黑酚葡萄糖苷含量均顯著低于生仙茅飲片，但微波炮制品顯著高于傳統(tǒng)酒炙品（P<0.05），詳見(jiàn)表11。

3 討論

本課題組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在同時(shí)測(cè)定仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷等3種酚苷類(lèi)成分時(shí)會(huì)出現(xiàn)色譜峰分離度較差、基線不平穩(wěn)等現(xiàn)象。為此，本研究考察了不同色譜柱[Diamonsil plus 5（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Xtimate C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）]、流動(dòng)相（甲醇-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.1%磷酸溶液）在200～400 nm波長(zhǎng)下的分離效果。結(jié)果，仙茅苷在210 nm波長(zhǎng)處響應(yīng)較強(qiáng)，苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷在220 nm波長(zhǎng)處響應(yīng)較強(qiáng);采用 “2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，所得各色譜峰的峰形和分離度均較好。

中藥成分較為復(fù)雜，且各個(gè)成分協(xié)同作用發(fā)揮藥效，僅以單一成分作為質(zhì)量控制的指標(biāo)，不能體現(xiàn)整體的質(zhì)量，故需對(duì)多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，以反映中藥整體的質(zhì)量[18]。酚苷類(lèi)成分是仙茅補(bǔ)腎壯陽(yáng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，故本研究選擇仙茅酚苷中含量較高的成分苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷和2020年版《中國(guó)藥典》（一部）中的指標(biāo)成分仙茅苷作為評(píng)價(jià)指標(biāo)[1，13]。

在實(shí)際操作中，傳統(tǒng)酒炙法的火候、炮制時(shí)間難以控制，太過(guò)易炒焦，不及則無(wú)法達(dá)到預(yù)期的炮制效果。因此，尋找一種節(jié)能、高效且操作工藝可控的新型炮制方法是保證炮制品質(zhì)量的關(guān)鍵[19]。本研究采用微波炮制法，以加酒量、微波功率、悶潤(rùn)時(shí)間、微波時(shí)間為考察因素，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷和醇溶性浸出物含量為考察指標(biāo)，結(jié)合綜合加權(quán)評(píng)分對(duì)工藝進(jìn)行優(yōu)化，得到最優(yōu)微波炮制工藝為加酒量20%、微波功率300 W、悶潤(rùn)時(shí)間3 h、微波時(shí)間2 min。經(jīng)驗(yàn)證，仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龍膽二糖苷及醇溶性浸出物的平均含量分別0.095 6%、0.723 9%、0.406 6%、10.115 3%，RSD分別為0.71%、0.54%、0.99%、1.44%（n=3）;平均綜合評(píng)分為99.08分，RSD為0.69%（n=3），提示所得最優(yōu)微波炮制工藝穩(wěn)定、可行。仙茅經(jīng)酒炙后，所得傳統(tǒng)酒炙品和微波炮制品中仙茅苷的含量均有所增高，可能是在炮制過(guò)程中，其他部分化學(xué)成分轉(zhuǎn)化為仙茅苷，使得炮制品中仙茅苷含量升高[20];同時(shí)，與傳統(tǒng)酒炙法進(jìn)行比較，微波炮制法所得酒仙茅中3種酚苷類(lèi)成分及醇溶性浸出物的含量均略高于傳統(tǒng)酒炙法，而經(jīng)微波炮制和傳統(tǒng)酒炙后的仙茅中苔黑酚葡萄糖苷成分含量均低于生仙茅飲片，但經(jīng)微波炮制后苔黑酚葡萄糖苷含量的降低程度不如傳統(tǒng)酒炙明顯，推測(cè)仙茅在酒炙的過(guò)程中，苔黑酚葡萄糖苷的糖苷鍵可能發(fā)生斷裂，進(jìn)而轉(zhuǎn)化成相應(yīng)苷元[21];而在微波炮制過(guò)程中，由于微波穿透力強(qiáng)，在加熱過(guò)程中吸收能量，分子間互相摩擦而生熱，具有一定的膨化破壁作用，致使溶劑更易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部溶解并釋放成分，有利于有效成分的溶出[22]。

綜上所述，本研究所得最優(yōu)微波炮制工藝穩(wěn)定、可行，可用于酒仙茅的炮制。雖然微波炮制法具有獨(dú)特的熱力學(xué)形態(tài)與能量傳遞轉(zhuǎn)化規(guī)律，操作簡(jiǎn)單且炮制效率高、產(chǎn)品性狀好、生產(chǎn)能耗低等綜合優(yōu)勢(shì)[23]，但由于炮制工藝變化較大，是否能替代傳統(tǒng)的炮制方法，后續(xù)尚需化學(xué)成分分析、藥理實(shí)驗(yàn)、臨床研究等進(jìn)一步驗(yàn)證。

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（收稿日期：2021-04-15 修回日期：2021-07-21）

（編輯：陳 宏）