張 敏 王 芳 劉惠娟 石 巖 張文斌

1.甘肅醫(yī)學院，甘肅 平?jīng)?744000；2 甘肅醫(yī)學院附屬醫(yī)院，甘肅 平?jīng)?744000

中藥作為我國流傳千年的傳統(tǒng)藥物，其在中醫(yī)理論指導(dǎo)之下，用于預(yù)防、治療、診斷疾病或調(diào)節(jié)人體機能，是在我國勞動人民長期與疾病作斗爭的過程中發(fā)展起來的。中藥質(zhì)量評價是中藥現(xiàn)代化的基礎(chǔ)，與單一指標相比，多指標的質(zhì)量評價模式更符合中藥多成分、多功效的特點[1]。但中藥對照品由于其本身化學性質(zhì)、分離難度而導(dǎo)致的高價等因素，始終處于一個無法大批量、穩(wěn)定、廉價供應(yīng)的狀態(tài)。使得多指標成分分析受到一定限制。2006年，王智民等[2]首次提出一測多評法(Quantitative analysis of multi-components by single-marker QAMS)，論證其基本原理，同時通過對木通藥材的檢測，實踐證實了一測多評法在中藥檢測領(lǐng)域有優(yōu)良表現(xiàn)。隨后，以《中國藥典》2010 年版為代表的質(zhì)量標準已經(jīng)確立了“從單指標向多指標、從指標性成分向藥效成分控制”的發(fā)展方向[3]。2015版《中國藥典》新增8個藥材使用一測多評法進行質(zhì)量分析[4]。隨著發(fā)展，一測多評法在中藥檢測上的研究應(yīng)用仍舊不斷被發(fā)掘出新的應(yīng)用，說明該種方法是中藥現(xiàn)代化進步中一個不可或缺的研究方向。

1 一測多評法的基本原理

一測多評法的基本原理為，在一定的線性范圍內(nèi)，其組分量(質(zhì)量或者濃度)，與檢測器的響應(yīng)值成正比。在多指標質(zhì)量評價中，設(shè)置一種穩(wěn)定且廉價易得的對照品作為內(nèi)標參照物，同時建立其與其他待測組之間的相對校正因子(f)，通過即可計算其他組分含有量[2]，具體如圖1所示。

圖1 一測多評法基本原理示意圖

2 一測多評法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用

2.1 一測多評法在單一藥材及飲片中的應(yīng)用 自從一測多評法提出以來，在多種中藥材及其飲片的質(zhì)量控制標準研究中都得到了充分的應(yīng)用。表1列出了近3年一測多評法在中藥材及其飲片中的的應(yīng)用情況，由表1可以看出，其應(yīng)用多見于同類成分的測定。同類成分，紫外吸收相近，有利于檢測波長的選擇。測定結(jié)果準確，體現(xiàn)一測多評法的優(yōu)勢[5]。

表1 一測多評法在中藥材及其飲片中的應(yīng)用

表1 一測多評法在中藥材及其飲片中的應(yīng)用

2.2 一測多評在成方制劑中的應(yīng)用 中藥制劑，相對于單味藥材和飲片來說，成分更為復(fù)雜。在2015版《中國藥典》中已經(jīng)收錄了銀杏葉滴丸、銀杏葉膠囊、以及咳特靈膠囊的一測多評法應(yīng)用方法。近年來，QAMS在中藥制劑的質(zhì)量分析的應(yīng)用迅速增加。表2列出來近3年的應(yīng)用實例。

表2 一測多評法在中藥制劑中的應(yīng)用

3 一測多評法在中藥質(zhì)量控制中的主要問題

3.1 相對校正因子的測定 相對校正因子的準確與否，直接影響含量測定結(jié)果。目前，常見的測定方法為多點校正和斜率法。多點矯正法適用于濃度值在一定范圍內(nèi)的成分分析[5]，其應(yīng)用更加廣泛[32]。斜率法是基于標準曲線進行，結(jié)果相對比較準確。

在使用一測多評法進行中藥質(zhì)量控制中，相對校正因子受測試條件的影響較大。不同實驗室，不同儀器和色譜柱、不同的PH值、柱溫和檢測波長的變動等均會引起值的改變。因此，在進行一測多評對中藥進行檢測時，需要充分考慮實際實驗因素對相對校正因子的影響，對導(dǎo)致其產(chǎn)生較大波動的因素進行限定，以保證最終實驗結(jié)果具有可重現(xiàn)性。

3.2 色譜峰的定位 在使用一測多評法時，供試品的測試中只有內(nèi)標參照物使用對照品，其余成分不設(shè)置對照品。因此，如何對待測成分的目標峰進行定位是目前一測多評法存在的關(guān)鍵問題之一。常見的方法有時間差法和相對保留時間法。時間差法，據(jù)報道在不同的儀器和色譜柱上，會有較大的波動[33]。而相對保留時間法，應(yīng)用比較廣泛。其原理是先利用各自對照品的保留時間，計算出相對保留時間(為相對保留時間，為內(nèi)參物對照品峰保留時間，為待測組分對照品峰保留時間)，后在供試品中根據(jù)確定待測組分的位置。如圖2所示，峰5(內(nèi)標參照物)的保留時間為24.33 min，峰1的R為0.81，即供試品中相對保留時間為0.81的色譜峰就定位為成分1。其他成分依法確定。本方法適用于定位與參照物性質(zhì)類似的成分。如果結(jié)構(gòu)相差較大，誤差較大。同時，還可結(jié)合待測峰形狀、紫外光譜信息以及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)給出的質(zhì)譜信息等進行相關(guān)輔助確認。如仍舊不能定位，可以采用待測成分中藥對照提取物定位。

圖2 典型色譜圖

4 小結(jié)與展望

對于目前的中藥現(xiàn)代化研究來說，所面臨的問題之一即是化學對照品與質(zhì)量檢測需求之間的矛盾，而一測多評法的出現(xiàn)，能夠顯著降低檢測成本，取得了方便、廉價、穩(wěn)定的效果。因此，雖然一測多評法在實際應(yīng)用當中尚存在不少問題，依然是中藥現(xiàn)代化一個重要的前進方向，其對于中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制的闡明、中藥新藥研究和開發(fā)具有重要意義。