車紅明, 馬瑜聰, 張 璐, 石永娟, 劉 麗

（吉林大學(xué)第一醫(yī)院小兒呼吸一科，吉林 長(zhǎng)春 130021）

腺病毒是兒童呼吸道感染的常見(jiàn)病原體之一，6個(gè)月～2歲小兒易感［1］。近年來(lái)，兒童腺病毒感染率總體降低，但其演化特點(diǎn)和嚴(yán)峻程度均無(wú)明顯改變，2019年呈現(xiàn)出暴發(fā)趨勢(shì)［2］。腺病毒引起的肺炎病情程度輕重不一，在兒童重癥肺炎中，腺病毒肺炎約占1/3，由于缺乏特殊抗病毒藥物，腺病毒肺炎病情發(fā)展快，肺內(nèi)外并發(fā)癥多，后遺癥的發(fā)生率和患者病死率均相對(duì)較高［3-4］。因而研究?jī)和俨《痉窝椎陌l(fā)病機(jī)制對(duì)于尋找治療方向、提高診治水平、早期識(shí)別危重癥和降低發(fā)病率及病死率至關(guān)重要?，F(xiàn)從以下幾個(gè)方面對(duì)兒童腺病毒肺炎的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探討。

1 腺病毒病原學(xué)特點(diǎn)

腺病毒是一種無(wú)包膜的雙鏈DNA 病毒，直徑為65～80 nm，由基因核心和蛋白衣殼組成。腺病毒的DNA位于核心部位，全長(zhǎng)為32 000～36 000 bp，分為早、中和晚期3個(gè)部分。早期基因組包括E1～E4 等4個(gè)轉(zhuǎn)錄家族，能夠利用宿主細(xì)胞的原料合成子代病毒。而晚期基因組包含L1～L5 等5個(gè)轉(zhuǎn)錄家族，能夠指導(dǎo)新病毒的組裝和成熟。而病毒DNA的轉(zhuǎn)入、復(fù)制和包裝主要由核心部位的Ⅳa2、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Tp 和抗病毒蛋白（antiviral protein，AVP）等6種核心蛋白完成［5］。病毒外周主要有六鄰體基體、五鄰體基底和纖維蛋白突起3種主要衣殼蛋白及4種次要衣殼蛋白（Ⅲa、Ⅷ、Ⅵ和Ⅸ），其共同構(gòu)成二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)。六鄰體上有含血清型特異的抗原決定簇，而五鄰體上的Fiber 蛋白球部有種屬特異性抗原決定位點(diǎn)，這3種主要衣殼蛋白主要介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞［6］。腺病毒目前已知至少有90個(gè)基因型和70 多個(gè)血清型，有A～G 7個(gè)亞 屬［7-8］，其中B亞屬中的HAdV-3 和HAdV-7 是導(dǎo)致全球嬰幼兒下呼吸道疾病的主要類型［9-10］。目前我國(guó)北方地區(qū)比較流行的2種血清型是HAdV-3和HAdV-7，2007—2012年HAdV-3 和HAdV-7分別占全部血清類型的49.0% 和26.3%，2014—2016年HAdV-3 和HAdV-7分別占全部血清類型的30.8% 和26.9%；而南方地區(qū)流行的優(yōu)勢(shì)型從2009年1月—2013年12月 的HAdV-3（37.5%）和HAdV-7（50.0%）轉(zhuǎn)變?yōu)?014年1月— 2016年12月的HAdV-3（44.4%）及HAdV-2（22.2%）［1］。HAdV-3 型和HAdV-7 型感染易并發(fā)其他病原感染，毒力強(qiáng)，常引起肺外各系統(tǒng)受累，容易以肺部為原發(fā)病灶引起全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）和（或）膿毒癥，進(jìn)而發(fā)展到臟器功能衰竭的序貫狀態(tài)甚至多器官功能障礙綜合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS），治療更困難，患者病死率更高［11-12］。

2 腺病毒引起肺炎的發(fā)病機(jī)制

2.1 腺病毒入侵細(xì)胞、完成復(fù)制并釋放腺病毒入侵細(xì)胞、完成復(fù)制并釋放是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程。首先，腺病毒與細(xì)胞表面受體結(jié)合。大多數(shù)腺病毒的主要免疫受體是柯薩奇腺病毒受體（coxsackie adenovirus receptor，CAR），是免疫球蛋白超家族中的重要成員之一，參與了各種細(xì)胞如極化上皮細(xì)胞之間緊密連接的形成［13］。大多數(shù)B 亞群與CD46結(jié)合，B 亞群是一種廣泛表達(dá)的膜補(bǔ)體調(diào)節(jié)分子，其中HAdV-3 型和HAdV-7 型亦能夠與CD80 或CD86 結(jié)合，除CD46、CD80 和CD86 外，HAdV-3型可能還與其他受體結(jié)合［14］。而除B 亞群以外的A、C、D、E 和F 亞群均可與CAR 受體相互作用［15］，D 亞群的成員（ad37、ad8 和ad19）也可以利用唾液酸受體［16］，有報(bào)道［17］顯示：C亞群的Ad2和Ad5病毒可與硫酸肝素糖胺聚糖（heparan sulfate glycosaminoglycan，HSGAGs）結(jié)合。腺病毒與這些初始受體結(jié)合的同時(shí)，戊子基上的RGD肽（L-proline，glycyl-L-arginylglycyl-L-a-aspartyl-L-asparaginyl-，RGDP）與 細(xì)胞αvβ3/αvβ5整合素結(jié)合［14］。RGD 是一種三肽分子序列，整合素通過(guò)識(shí)別RGD 與配體蛋白結(jié)合，從而導(dǎo)致細(xì)胞和胞外基質(zhì)相互黏附，同時(shí)能夠進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)，參與諸多重要的生命活動(dòng)。整合素，即整聯(lián)蛋白，是一類跨膜受體，廣泛表達(dá)于細(xì)胞表面。迄今為止，已經(jīng)成功發(fā)現(xiàn)24種整合素，與RGD 結(jié)合的整合素研究［18］最多。整合素可以誘導(dǎo)多種細(xì)胞反應(yīng)，如磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）和Rho GTP酶的激活［17］，然后通過(guò)依賴網(wǎng)格蛋白的途徑直接完成內(nèi)吞作用，由網(wǎng)格蛋白輕鏈重鏈形成一種類似三角狀小型復(fù)合體分子結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)在PI3K 激酶及Rho GTP酶的作用下被輸送至細(xì)胞外表面，并使細(xì)胞膜內(nèi)陷形成內(nèi)陷小窩。在動(dòng)力蛋白的作用下，內(nèi)陷小窩最終從細(xì)胞膜上完全脫出，形成包裹小泡，并最終將內(nèi)吞物質(zhì)傳遞給內(nèi)體。初級(jí)內(nèi)體的不斷酸化成熟形成次級(jí)內(nèi)體［19-21］，最終次級(jí)內(nèi)體釋放腺病毒六鄰體、蛋白質(zhì)Ⅲa 和蛋白質(zhì)Ⅵ，并直接暴露腺病毒的核心蛋白，在蛋白質(zhì)Ⅵ與內(nèi)質(zhì)膜的相互作用下，內(nèi)體最終破裂，釋放腺病毒的核心蛋白，最終由核孔轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核［17］。進(jìn)入細(xì)胞核后，腺病毒以自身核酸為控制中心，利用宿主細(xì)胞的合成系統(tǒng)，即原料、核糖體和能源系統(tǒng)等，合成子代病毒核酸與蛋白質(zhì)等組成成分，然后組裝成具有侵襲力的子代病毒，完成復(fù)制并釋放，釋放的同時(shí)，宿主細(xì)胞短時(shí)間內(nèi)受到傷害并死亡［22］?？梢?jiàn)腺病毒入侵靶細(xì)胞和完成復(fù)制是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，阻斷這些過(guò)程對(duì)于治療腺病毒肺炎具有重要意義。

干擾素（interferon，IFN）由活化的T 細(xì)胞和NK 細(xì)胞產(chǎn)生，分為三大類：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。IFN-Ⅰ家族由IFN-α（含13個(gè)亞型）、IFN- β、IFN- δ、IFN- ε、IFN- κ、IFN- τ 和IFN- ω1-3組成［23］，IFN-Ⅱ僅 含IFN-γ 一個(gè) 成 員［24］，IFN-Ⅲ（也被稱為IFN-λ）家族包括IFN-λ1、IFN-λ2 和IFN-λ3［25-26］。Ⅰ型干擾素中的干擾素α 具有廣譜抗病毒效果，還可對(duì)機(jī)體免疫過(guò)程起調(diào)節(jié)作用，對(duì)腺病毒感染有一定的作用。IFN-α 可以通過(guò)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑促使AVP 產(chǎn)生，最常見(jiàn)的為JAK-STAT途徑。而AVP 可以通過(guò)2-5A 合成酶/RNase L通道、蛋白激酶通道和Mx 蛋白通道等通道發(fā)揮作用，導(dǎo)致病毒ds-DNA降解、病毒蛋白無(wú)法復(fù)制和抑制病毒轉(zhuǎn)錄［27］，目前臨床上常應(yīng)用于霧化吸入治療。研究［28］顯示：采用IFN霧化治療兒童腺病毒肺炎，可以有效緩解患兒癥狀，且尚未發(fā)現(xiàn)患兒出現(xiàn)不良反應(yīng)。但加入IFN 治療能否切實(shí)改善患兒腺病毒肺炎病情，還有待進(jìn)一步臨床觀察。

2.2 細(xì)胞因子釋放引起組織損傷和器官功能障礙腺病毒被細(xì)胞釋放的同時(shí)，能夠啟動(dòng)下游通路進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)，刺激可以導(dǎo)致肺組織損傷的炎性細(xì)胞因子和趨化因子的大量釋放，進(jìn)而引起機(jī)能障礙。腺病毒感染后Toll樣受體9（Toll-like receptor-9，TLR-9）可以識(shí)別DNA 病毒中尚未被甲基化的CpG DNA，進(jìn)而激活核因子κB 等轉(zhuǎn)錄因子，這主要依賴于MyD88 信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)，如白細(xì)胞介素1（interleukin-1，IL-1）、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等［29］。IL-1 主要由巨噬細(xì)胞分泌，能夠在腺病毒感染初期階段發(fā)揮作用［30］，促進(jìn)T 細(xì)胞的增殖和分化，也能夠提高CD8＋T 淋巴細(xì)胞的殺傷力［31］。IL-6 與疾病的嚴(yán)重程度有密切關(guān)聯(lián)，在重癥腺病毒肺炎患兒中發(fā)揮重要的治療作用，IL-6 不僅可以促進(jìn)B 淋巴細(xì)胞活化產(chǎn)生抗體，發(fā)揮體液免疫作用，還可以促進(jìn)肝臟合成多種急性蛋白［32］，可導(dǎo)致低血壓、持續(xù)高熱和驚厥發(fā)作等［33-34］。IL-8 作為主要的中性粒細(xì)胞趨化因子，通過(guò)聚集中性粒細(xì)胞在炎癥部位而發(fā)揮作用［35］。血清IL-8 水平與兒童腺病毒肺炎的預(yù)后呈正相關(guān)關(guān)系［33］，其水平越高，患兒預(yù)后越差，病情越重。TNF-α能夠促進(jìn)中性粒細(xì)胞的趨化和激活、促進(jìn)其他炎性介質(zhì)釋放、誘導(dǎo)被侵襲的細(xì)胞如腫瘤細(xì)胞及病毒感染細(xì)胞等發(fā)生凋亡，TNF-α 主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可以與其他細(xì)胞因子協(xié)同作用，引發(fā)更為嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)；急性期腺病毒肺炎患兒肺部炎癥反應(yīng)重于全身炎癥反應(yīng)，而重癥患兒表現(xiàn)為更為強(qiáng)烈的局部炎癥反應(yīng)，與輕癥患兒也有所不同，TNF-α 和IL-6 可能作為預(yù)測(cè)重癥腺病毒肺炎的指標(biāo)［36］。

研究［12］顯示： 在HAdV-7 和HAdV-3感染后24或48h，干擾素誘導(dǎo)蛋白10（inducible protein-10，IP-10）、巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β（macrophage inflammatory protein 1β，MIP-1β）、膜結(jié)合免疫球蛋白（membrance-bound immunoglobulin，MIG）、巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α（macrophage inflammatory protein-1α，MIP-1α）、單核細(xì)胞趨化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）、IFN- α、IFN- γ、IL-6、IL-10 和TNF-α等細(xì)胞因子/趨化因子明顯激活［12］。HAdV-7 較HAdV-3 復(fù)制能力強(qiáng)，感染HAdV-7 后，細(xì)胞因子更加活躍，炎癥反應(yīng)更重，病情更嚴(yán)重。感染后24 h，經(jīng)HAdV-7 感染的肺組織中IL-10 水平明顯高于經(jīng)HAdV-3 感染的肺組織。感染后48 h，經(jīng)HAdV-7感染的肺組織中MIP-1α 和MIP-1β 水平明顯高于經(jīng)HAdV-3 感染的肺組織。感染HAdV-7 和HAdV-3后，重癥肺炎患兒的血清TNF-α、IL-6 和IL-8 水平明顯高于上呼吸道感染患兒，尤其在HAdV-7 感染患兒中更為明顯［37］。在腺病毒感染后期，IP-10和MCP-1 作為單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞趨化因子，在單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)中發(fā)揮重要作用［38］，說(shuō)明經(jīng)HAdV-7 感染后，單核巨噬系統(tǒng)能夠通過(guò)特異性趨化因子（如IP-10 和MCP-1）在抗原呈遞引發(fā)的從先天到適應(yīng)性免疫應(yīng)答的過(guò)度過(guò)程中起更重要的作用，而不僅僅局限于先天性免疫應(yīng)答。HAdV-7 感染和抗原暴露之后，上皮細(xì)胞參與免疫反應(yīng)，上述趨化因子和細(xì)胞因子在黏膜下層釋放，最終引發(fā)炎性反應(yīng)［39］。在炎性反應(yīng)中，細(xì)胞因子起到了不可或缺的作用，因此抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生可減輕組織損傷并改善患者的病情和預(yù)后。糖皮質(zhì)激素既可以抑制IL-1β 和TNF-β等炎癥因子的表達(dá)［40］，又可以下調(diào)IL-8、MIP-1β、MIP-3β、MCP-2、MCP-3 和MCP-4 等炎癥趨化因子，現(xiàn)在臨床上已廣泛應(yīng)用［41-42］。但目前糖皮質(zhì)激素在重癥腺病毒肺炎的治療中的循證依據(jù)不足，尚存在爭(zhēng)議，重癥腺病毒肺炎患兒多有不同程度的免疫損傷，容易并發(fā)其他病原體感染，故使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵循用藥指征，謹(jǐn)慎應(yīng)用。研究［43］顯示：腺病毒肺炎早期應(yīng)用激素容易導(dǎo)致呼吸衰竭的發(fā)生。如有以下情況出現(xiàn)時(shí)，可小劑量應(yīng)用：①中毒癥狀明顯、有腦炎或腦病和噬血細(xì)胞綜合征等并發(fā)癥；②膿毒癥；③有持續(xù)喘息，影像學(xué)以細(xì)支氣管炎為主。藥物選擇［44］：甲潑尼龍1～2 mg·kg－1·d－1或等量氫化可的松，經(jīng)靜脈注射。

2.3 細(xì)胞免疫介導(dǎo)適應(yīng)性免疫應(yīng)答腺病毒感染過(guò)程中，細(xì)胞免疫發(fā)揮重要作用，Mφ 淋巴細(xì)胞、DC 細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞參與了腺病毒感染。Mφ 淋巴細(xì)胞和DC 細(xì)胞主要發(fā)揮免疫抗原的提呈功能，在適應(yīng)性免疫中不可或缺，而免疫應(yīng)答過(guò)程主要有CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞參與。CD8+T淋巴細(xì)胞能夠幫助CD4+T淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過(guò)程中起主導(dǎo)作用［45］，反之，DC 細(xì)胞可以許可CD4+T淋巴細(xì)胞對(duì)HAdV 特異的CD8+細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）進(jìn)行活化，也能分泌Th1 細(xì)胞因子，進(jìn)而維持CD8+T淋巴細(xì)胞 的功能［46-47］，HAdV 特異性CD4+T淋巴細(xì) 胞可以使人白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）Ⅰ類分子的表達(dá)增加，從而使感染細(xì)胞被CD8+T淋巴細(xì)胞的溶解作用增強(qiáng)。研究［48］顯示：重癥腺病毒肺炎急性期的患兒INF-γ 水平明顯升高，這可能是外周血中CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯升高所致，因此推測(cè)CD8+T淋巴細(xì)胞在早期殺傷病毒過(guò)程中起主要作用。免疫功能低下的患兒常常發(fā)生嚴(yán)重的腺病毒感染，一方面由于小兒的免疫功能發(fā)育尚不完善，免疫應(yīng)答反應(yīng)較弱，另一方面由于腺病毒可以對(duì)T淋巴細(xì)胞造成損傷，不僅能引起T淋巴細(xì)胞數(shù)量降低，還可使CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比例降低和Th1/Th2 比例失衡，進(jìn)而使細(xì)胞免疫功能部分抑制、促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子失衡，嚴(yán)重者可引起膿毒癥、多系統(tǒng)臟器損傷和噬血 細(xì)胞綜合征 等［31，49］。研究［17］顯示：在無(wú)胸腔積液患者中CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于存在胸腔積液患者，提示腺病毒肺炎中出現(xiàn)胸腔積液是機(jī)體免疫功能下降的標(biāo)志。當(dāng)患兒出現(xiàn)胸腔積液時(shí)，要及時(shí)提高免疫力。

腺病毒容易導(dǎo)致重癥肺炎，特別是HAdV-3 型和HAdV-7 型腺病毒，治療時(shí)不應(yīng)僅限于控制感染，調(diào)節(jié)免疫功能也是治療重癥腺病毒肺炎的重要手段。體內(nèi)誘導(dǎo)CD4+ T 淋巴細(xì)胞和CD8+ T 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生或體外補(bǔ)充CD4+ T 淋巴細(xì)胞及CD8+T淋巴細(xì)胞對(duì)該病具有一定的療效。過(guò)繼性T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移療法為體外補(bǔ)充CD4+ T 淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的一種，是指將健康個(gè)體獲得的腺病毒特異性T 淋巴細(xì)胞從體內(nèi)提純，在體外進(jìn)行克隆復(fù)制后輸入至患者體內(nèi)，補(bǔ)充患者體內(nèi)T 細(xì)胞的數(shù)量，修復(fù)受損的免疫功能［50］。CD4+ T 淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞靶向治療費(fèi)用較為昂貴，目前臨床上僅在腫瘤治療方面應(yīng)用較廣泛，其能否適用于重癥腺病毒肺炎的治療有待進(jìn)一步研究。

2.4 體液免疫介導(dǎo)病毒抗體復(fù)合體形成體液免疫是抗原刺激B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的一種免疫反應(yīng)，主要由B 淋巴細(xì)胞完成，與細(xì)胞免疫同時(shí)進(jìn)行。而足夠有效的抗體在體液免疫中至關(guān)重要［51］，抗體的主要功能是中和病毒抗原，其主要作用于游離病毒，其次是病毒感染細(xì)胞。抗體中和游離病毒的機(jī)制：抗體與病毒包膜或衣殼蛋白結(jié)合，覆蓋了病毒的結(jié)合位點(diǎn)，從而阻止病毒對(duì)易感靶細(xì)胞吸附。腺病毒感染后，B 淋巴細(xì)胞主要分泌IgG 抗體和IgM 抗體，其早期也分泌部分IgA 抗體。HAdV和抗體結(jié)合以后，能夠進(jìn)入非免疫細(xì)胞中，IgG 和IgM 的Fc 段會(huì)募集病毒抗體形成的復(fù)合體［52］?？贵w能夠加強(qiáng)對(duì)病毒粒子的吞噬和溶解作用，病毒與非中和抗體形成抗原-抗體復(fù)合物，可與巨噬細(xì)胞Fc 受體結(jié)合，從而加強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬病毒的能力；同時(shí)抗體可對(duì)感染細(xì)胞造成破壞，除補(bǔ)體協(xié)同作用溶解受感染細(xì)胞外，還可通過(guò)抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用殺傷細(xì)胞。HAdV 包括纖維、五鄰體和六鄰體3個(gè)抗原，抗體通過(guò)結(jié)合這3個(gè)抗原結(jié)構(gòu)使其失活。招募病毒主要由抗纖維（抗Fi）抗體完成［53］；抗五鄰體（抗Pb）抗體主要起中和作用，這能夠阻止病毒體從核內(nèi)質(zhì)移出至胞漿中；而抗六鄰體（抗Hx）抗體既能募集病毒，又能在酸性環(huán)境下（pH 值5.0～6.0）使部分病毒發(fā)生構(gòu)象改變，起到中和作用；抗Hx 抗體能夠形成較強(qiáng)的中和作用［54］，抗Fi 抗體 及抗Pb 抗體可以協(xié)助 抗Hx 抗體完成中和反應(yīng)。因此在對(duì)機(jī)體不造成不良影響的情況下，將體液免疫的環(huán)境pH 值維持在5.0～6.0，或許能夠使體液免疫更好地發(fā)揮作用，但目前臨床上尚無(wú)特異性方法能夠使體液免疫環(huán)境pH 值維持在上述水平。綜上，中和抗體只能夠在細(xì)胞外發(fā)揮作用，細(xì)胞中的腺病毒無(wú)法被中和抗體中和。一般情況下，在免疫應(yīng)答的初期階段，出現(xiàn)的抗體均為與腺病毒親和力較低的低親和力抗體，其形成的抗原-抗體復(fù)合體容易解離，解離后腺病毒又可以重新活化，重新感染細(xì)胞，因此低親和力抗體發(fā)揮的作用相對(duì)較弱。在免疫應(yīng)答晚期階段，會(huì)出現(xiàn)能夠與腺病毒緊密結(jié)合的高親和力抗體，其中和能力較強(qiáng)，能夠維持抗原-抗體結(jié)合狀態(tài)，有效控制病毒感染。

機(jī)體免疫過(guò)程中產(chǎn)生大容量抗體庫(kù)及高親和性抗體的過(guò)程：首先抗體原始基因組合性重排生成多樣性的最初抗體庫(kù)，經(jīng)抗原刺激后部分抗體被選擇出來(lái)，接著通過(guò)細(xì)胞的高頻突變和進(jìn)一步選擇，獲得大容量的抗體庫(kù)和高親和性的抗體［55-56］。重組多樣性、連接可塑性和細(xì)胞高頻突變促使抗體容量庫(kù)生成，而細(xì)胞高頻突變和抗原選擇則產(chǎn)生高親和性抗體。B 淋巴細(xì)胞在抗原刺激下進(jìn)行增殖和分裂，緊接著體細(xì)胞高頻突變，生成高親和性的抗體，這些B 淋巴細(xì)胞能夠優(yōu)先增殖分裂，最終形成B 淋巴細(xì)胞優(yōu)勢(shì)群，具有高親和性，其繼續(xù)分泌高親和性的抗體，形成良性循環(huán)，因此能夠有效地產(chǎn)生高親和性抗體，對(duì)于腺病毒感染的免疫應(yīng)答尤為重要。目前體外即可培養(yǎng)高親和力抗體，即多樣性B 細(xì)胞群體、克隆選擇和親和力成熟等方法，均屬于能夠模擬體內(nèi)生成高親和性抗體的關(guān)鍵步驟抗體庫(kù)方法，抗體庫(kù)方法能夠回避體內(nèi)生成抗體的復(fù)雜過(guò)程，加速抗體生成，成本較低，能夠從大容量抗體庫(kù)中快速挑選并大量制備高親和性的特異性抗體［57］。但抗體庫(kù)方法現(xiàn)尚存在一些問(wèn)題，如在不破壞抗體庫(kù)多樣性和保持高效率的前提下，如何提高抗體產(chǎn)量和庫(kù)存量等問(wèn)題。

3 小 結(jié)

綜上所述，腺病毒感染仍不可忽視，腺病毒通過(guò)與細(xì)胞表面的受體結(jié)合而實(shí)現(xiàn)病毒顆粒的內(nèi)化、內(nèi)吞作用或大胞飲作用，最終從核心孔進(jìn)入細(xì)胞核完成復(fù)制，進(jìn)而促使炎癥因子釋放和觸發(fā)細(xì)胞免疫及體液免疫等。IFN- α 可以通過(guò)AVP 導(dǎo)致病毒ds-DNA 降解、病毒蛋白無(wú)法復(fù)制和抑制病毒轉(zhuǎn)錄，目前臨床上常應(yīng)用于霧化吸入治療。研究［28］顯示：采用IFN霧化治療兒童腺病毒肺炎能有效緩解患兒癥狀。糖皮質(zhì)激素可以抑制某些炎癥因子的表達(dá)，也可下調(diào)部分炎性趨化因子，現(xiàn)在臨床上已廣泛應(yīng)用。但目前糖皮質(zhì)激素在重癥腺病毒肺炎的治療中療效的循證依據(jù)不足，尚存在爭(zhēng)議。重癥腺病毒肺炎患兒多有不同程度的免疫損傷，易并發(fā)其他病原體感染，故使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵循用藥指征，謹(jǐn)慎應(yīng)用。體內(nèi)誘導(dǎo)CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生或體外補(bǔ)充CD4+T淋巴細(xì)胞及CD8+T淋巴細(xì)胞或具有療效。過(guò)繼性T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移療法可以修復(fù)受損的免疫功能。將體液免疫的環(huán)境pH 值維持在5.0～6.0，或許能使體液免疫更好地發(fā)揮作用，但目前臨床上尚無(wú)特異性方法能夠使體液免疫環(huán)境pH 值維持在上述水平。在機(jī)體免疫反應(yīng)早期，通常出現(xiàn)低親和性抗體，而在免疫反應(yīng)后期常常形成高親和性抗體。抗體庫(kù)方法能夠回避體內(nèi)生成抗體的復(fù)雜過(guò)程，加速抗體生成且成本較低。