李朝陽 林義辦 郭校錫 張梓朗 鄧建中

【摘要】 目的：探究直腸癌患者血清及組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）和金屬蛋白酶組織抑制物（TIMP）的表達(dá)情況及與疾病分期的關(guān)系。方法：選取2018年1月-2020年10月本院120例直腸癌患者為觀察組，另選取同時期本院120例直腸息肉患者為對照組。檢測與比較兩組的血清及組織MMP（MMP-2與MMP-9）和TIMP（TIMP-1與TIMP-2）;比較觀察組中不同疾病分期者的血清及組織MMP及TIMP;采用Spearman秩相關(guān)分析血清及組織MMP和TIMP與疾病分期的關(guān)系。結(jié)果：觀察組血清及組織MMP和TIMP表達(dá)均高于對照組，且觀察組中不同疾病分期者的血清及組織MMP和TIMP表達(dá)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。疾病分期較高者的血清及組織MMP和TIMP指標(biāo)均高于疾病分期較低者（P<0.05）。Spearman秩相關(guān)分析顯示，血清及組織MMP和TIMP指標(biāo)均與直腸癌疾病分期呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：直腸癌患者的血清及組織MMP和TIMP均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且與疾病分期有密切的關(guān)系，在直腸癌患者中的檢測價值較高。

【關(guān)鍵詞】 直腸癌 MMP TIMP

Investigation on the Expression Situation of Serum and Tissue MMP and TIMP of Patients with Rectal Cancer and Relationship with the Disease Stages/LI Zhaoyang， LIN Yiban， GUO Xiaoxi， ZHANG Zilang， DENG Jianzhong. //Medical Innovation of China， 2021， 18（16）： 0-039

[Abstract] Objective： To investigate the expression of matrix metalloproteinase （MMP） and tissue inhibitors of metalloproteinase （TIMP） in serum and tissues of patients with rectal cancer and their relationship with disease stage. Method： A total of 120 patients with rectal cancer in our hospital from January 2018 to October 2020 were selected as the observation group， and another 120 patients with rectal polyps in our hospital during the same period were selected as the control group. The serum and tissue MMP （MMP-2 and MMP-9） and TIMP （TIMP-1 and TIMP-2） were detected and compared between the two groups. The serum and tissue MMP and TIMP of patients with different disease stages in the observation group were compared. Spearman rank correlation was used to analyze the relationship between serum and tissue MMP， TIMP and disease stage. Result： The expression levels of MMP and TIMP in serum and tissues of the observation group were higher than those of the control group， and there were statistically significant differences in the expression levels of MMP and TIMP in serum and tissues of different disease stages in the observation group （P<0.05）. The indexes of MMP and TIMP in serum and tissues of patients with higher disease stage were higher than those of patients with lower disease stage （P<0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that MMP and TIMP in serum and tissues were positively correlated with the stage of rectal cancer （P<0.05）. Conclusion： The serum and tissue MMP and TIMP of patients with rectal cancer show higher expression state， and they have close relationship with the disease stages， and have a high detection value in patients with rectal cancer.

[Key words] Rectal cancer MMP TIMP

First-author’s address： The First People’s Hospital of Foshan， Foshan 528000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.16.008

直腸癌是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤，疾病發(fā)生發(fā)展過程中的相關(guān)指標(biāo)變化是本病的臨床研究熱點。對于疾病相關(guān)指標(biāo)的變化情況掌握不僅僅有助于疾病的早期有效診斷，且可為疾病的治療提供一定的參考作用。臨床中關(guān)于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）和金屬蛋白酶組織抑制物（TIMP）在各類惡性腫瘤患者中的表達(dá)研究可見，且不乏其在直腸癌患者中的表達(dá)變化研究，但是其在本病中的表達(dá)與疾病分期的關(guān)系仍存在諸多研究不足的情況，因此關(guān)于MMP和TIMP在本病患者中的細(xì)致表達(dá)研究意義較高[1-3]。本研究就直腸癌患者血清及組織MMP和TIMP的表達(dá)情況及與疾病分期的關(guān)系進(jìn)行探究與分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月-2020年10月本院120例直腸癌患者為觀察組，另選取同時期本院120例直腸息肉者為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：20～75歲;經(jīng)手術(shù)病理檢查，觀察組確診為直腸癌，對照組為直腸息肉。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他結(jié)直腸疾病;合并創(chuàng)傷;合并神經(jīng)膠質(zhì)瘤等疾病;合并心力衰竭及其他心血管疾病;合并其他惡性腫瘤。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 兩組均經(jīng)手術(shù)治療。血清MMP和TIMP表達(dá)情況：采集兩組術(shù)前1 d外周空腹靜脈血5.0 mL，將血標(biāo)本進(jìn)行離心（離心半徑15 cm，時間5 min，速度3 000 r/min），取血清以酶聯(lián)免疫法檢測血清MMP（MMP-2與MMP-9）及TIMP（TIMP-1與TIMP-2）。組織MMP和TIMP表達(dá)情況：取手術(shù)所得病灶組織采用免疫組化法進(jìn)行檢測，將組織標(biāo)本進(jìn)行石蠟包埋處理，然后進(jìn)行切片脫蠟水化，再以過氧化氫進(jìn)行室溫孵育，以PBS進(jìn)行沖洗，以MMP和TIMP對應(yīng)指標(biāo)抗體處理，孵育，沖洗及加二抗，依次進(jìn)行其他處理。切片在10倍視野下進(jìn)行觀察，根據(jù)陽性細(xì)胞占比及染色程度進(jìn)行評分，評分均為0～3分，其中0～2分表示陰性，3～4分表示+，5～6分表示++。比較兩組血清及組織MMP（MMP-2與MMP-9）、TIMP（TIMP-1與TIMP-2）表達(dá)情況;比較觀察組中不同疾病分期者的血清及組織MMP、TIMP表達(dá)情況;采用Spearman秩相關(guān)分析血清及組織MMP和TIMP與疾病分期的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，重復(fù)測量的計量資料比較采用方差分析;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗;采用Spearman秩相關(guān)分析血清及組織MMP和TIMP與疾病分期的關(guān)系。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對照組男70例，女50例;年齡39～73歲，平均（63.0±6.9）歲。觀察組男68例，女52例;年齡38～74歲，平均（63.1±7.1）歲;疾病分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期35例，Ⅲ期35例，Ⅳ期30例。兩組性別與年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組血清MMP和TIMP比較 觀察組血清MMP和TIMP指標(biāo)均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.3 兩組組織MMP和TIMP指標(biāo)比較 觀察組的組織MMP和TIMP指標(biāo)均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.4 觀察組中不同疾病分期者的血清MMP和TIMP指標(biāo)比較 觀察組中不同疾病分期者的血清MMP和TIMP指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;疾病分期較高者的血清MMP和TIMP指標(biāo)均高于疾病分期較低者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2.5 觀察組中不同疾病分期者的組織MMP和TIMP指標(biāo)比較 觀察組中不同疾病分期者的組織MMP和TIMP指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;疾病分期較高者的組織MMP和TIMP指標(biāo)均高于疾病分期較低者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

2.6 血清及組織MMP和TIMP與直腸癌疾病分期的關(guān)系 Spearman秩相關(guān)分析顯示，血清及組織MMP和TIMP與直腸癌疾病分期均呈正相關(guān)（P<0.05），見表5。

3 討論

直腸癌在我國臨床發(fā)病率較高，且近年來發(fā)病率呈現(xiàn)升高的趨勢，因此對直腸癌患者進(jìn)行診治的研究是臨床重點[4-5]。侵襲、遷移及轉(zhuǎn)移作為惡性腫瘤的重要生物學(xué)行為，直腸癌患者腫瘤細(xì)胞的上述生物學(xué)行為相關(guān)指標(biāo)的研究是臨床重點之一[6-7]。臨床中與直腸癌上述生物學(xué)行為相關(guān)指標(biāo)的研究多見，而MMP和TIMP作為臨床研究中與惡性腫瘤密切相關(guān)的指標(biāo)，其在直腸癌患者中的表達(dá)研究可見，但是其在直腸癌患者血液及病灶組織中的細(xì)致表達(dá)研究相對缺乏，對于直腸癌的早期診斷及疾病分期等方面的檢測研究不足且研究差異普遍存在[8-9]。其中，MMP是細(xì)胞外基質(zhì)降解過程中的重要指標(biāo)，因此在腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移中有較強(qiáng)的作用，同時有研究認(rèn)為其對于腫瘤血管生成及免疫監(jiān)視等方面也有積極的作用[10-12]。TIMP在細(xì)胞核內(nèi)大量聚集，在細(xì)胞的生長調(diào)節(jié)過程中起到一定的作用，正常情況下，與MMP相互影響，而在惡性腫瘤患者中，表達(dá)呈現(xiàn)相對失衡的情況，因此其在直腸癌患者中的表達(dá)相對失衡[13-15]，但是其與直腸癌疾病分期的研究仍不足，導(dǎo)致對于疾病診治的參考作用有待進(jìn)一步探究。

本研究就直腸癌患者血清及組織MMP和TIMP的表達(dá)情況及與疾病分期的關(guān)系進(jìn)行探究，結(jié)果顯示，直腸癌患者的上述血清及組織指標(biāo)均呈現(xiàn)顯著升高的狀態(tài)，其表達(dá)均顯著高于直腸良性病灶者，其分期越高的直腸癌患者其表達(dá)相對越高，經(jīng)Spearman秩相關(guān)分析顯示顯示血清及組織MMP和TIMP均與直腸癌疾病分期呈正相關(guān)（P<0.05），因此肯定了血清及組織MMP和TIMP指標(biāo)在直腸癌患者中的檢測價值。分析原因，直腸癌患者的侵襲、遷移及轉(zhuǎn)移等均表現(xiàn)突出，而在此過程中，細(xì)胞外基質(zhì)降解增強(qiáng)[16-17]，與之相關(guān)的抑制劑表達(dá)失衡，因此MMP和TIMP表達(dá)失衡，且疾病分期越高者其表達(dá)失衡越為嚴(yán)重，對于疾病的分期有較高的反應(yīng)意義[18-20]。

綜上所述，直腸癌患者的血清及組織MMP和TIMP均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且與疾病分期有密切的關(guān)系，上述指標(biāo)在直腸癌患者中的檢測價值較高。

參考文獻(xiàn)

[1]劉偉，董耀，苗江雨，等.S100A4和MMP-2表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系[J].疑難病雜志，2021，20（2）：167-170，175.

[2]徐輝，唐言華，劉繼武，等.基質(zhì)金屬蛋白酶2、整合素-金屬蛋白酶17及上皮性鈣粘附蛋白E在結(jié)直腸癌癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2021，37（2）：220-225.

[3]張健，李玉梅，何志軍，等.結(jié)直腸癌病人miR-21、血管內(nèi)皮生長因子、基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性[J].臨床外科雜志，2020，28（12）：1144-1146.

[4]龐念德，陸曉偉，陳丕績，等.CD24和MMP-2及TK1在不同病理類型結(jié)直腸息肉惡變篩查中的價值[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2020，23（7）：523-526，533.

[5]慈一帆，王海桃，劉曉涵，等.IP6與INS輔助卡培他濱對結(jié)直腸癌小鼠炎癥因子及MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響[J].精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)雜志，2020，35（4）：313-317.

[6]張曉檳，楊清水，王萬川，等.Yap抑制劑抑制NF-κB/MMP-9信號通路誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡的實驗研究[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2020，23（1）：16-19，26.

[7]朱長龍，王曉瓊，何常.結(jié)直腸癌中HIF-1α，CD147和MMP-9表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2020，43（4）：466-471.

[8] Peltonen R，Hagstr?m J，Tervahartiala T，et al.High Expression of MMP-9 in Primary Tumors and High Preoperative MPO in Serum Predict Improved Prognosis in Colorectal Cancer with Operable Liver Metastases[J].Oncology，2021，99（3）：144-160.

[9]倪浩亮，韓越俊，金晰函，等.miR-451a和MMP-2蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及對腫瘤細(xì)胞增殖的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2020，5（9）：15-19.

[10]姜媛，謝海娟，王毓興，等.PKC介導(dǎo)P38MAPK通路調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞MMP-9表達(dá)及侵襲的研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2020，58（26）：4-7，封3.

[11]鄭周紅，朱婷娜，徐剛潮.MMP-9與TRAIL在結(jié)直腸癌的表達(dá)及對術(shù)后化療的評估意義[J].云南醫(yī)藥，2020，41（2）：106-109.

[12]陳政，徐大勇，楊科.ERK-VEG FMMP-9信號通路與直腸癌細(xì)胞增殖和血管新生的關(guān)聯(lián)[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2019，38（12）：5828-5835.

[13]張觀朝，徐兵，陳智年.MMP9、TIMP1、CCL21在結(jié)直腸癌患者血清中的表達(dá)水平及與預(yù)后的關(guān)系[J].癌癥進(jìn)展，2019，17（5）：592-595.

[14]魯峰剛，王秦玉.腹腔鏡直腸癌根治術(shù)對患者凝血功能及血管新生的影響[J].貴州醫(yī)藥，2019，43（12）：1901-1902.

[15] Xu H，Ren Y J，Liu K，et al.Correlations of serum VEGF and MMP-2 levels with CLM in CRC patients and effects of TACE on their expressions[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2018，22（11）：3394-3401.

[16] Guzel T，Mirowska-Guzel D，Lech G，et al.Carcinoembryonic antigen and matrix metalloproteinase 2 serum and peritoneal washes concentration in staging and prognosis in colorectal cancer patients[J].Pol Przegl Chir，2018，90（5）：36-43.

[17]顧玉蘭，丘佳明，蔣延旺，等.結(jié)直腸癌中VEGF-C和MMP-2蛋白表達(dá)量與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2019，27（9）：1576-1580.

[18]武鴻彪，袁旦平，曹躍鵬，等.結(jié)直腸癌患者血清MMP-9、TIMP-1、E-cadherin水平與臨床特征及預(yù)后的關(guān)系研究[J].浙江醫(yī)學(xué)，2019，41（10）：985-990.

[19]姜文佳，湯曉慶，湯國軍，等.白細(xì)胞介素-37在結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)及其與基質(zhì)金屬蛋白酶-8、基質(zhì)金屬蛋白酶-9、血管內(nèi)皮生長因子及可溶性細(xì)胞間黏附分子間的關(guān)系[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2019，29（14）：1728-1731.

[20]劉秀蘭，陳世杰.小RNA干擾MMP-2基因表達(dá)對結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2019，44（10）：1305-1309.

（收稿日期：2021-04-09） （本文編輯：田婧）