張 文，湯佳樂(lè)，程小梅，尚雪波，張 群，王仁才，羅賽男*

（1.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125；2.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125；3.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128）

【研究意義】獼猴桃（ActinidiaLindl.）屬于獼猴桃科（Actinidiaceae）獼猴桃屬（ActinidiaLindl.），因果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，富含維生素C，深受消費(fèi)者喜愛(ài)[1]。近年來(lái)，隨著市場(chǎng)效益增加，我國(guó)獼猴桃產(chǎn)業(yè)進(jìn)入高速發(fā)展階段，全國(guó)獼猴桃的種植面積達(dá)25 萬(wàn)hm2[2]。種植面積的增加，導(dǎo)致病蟲(chóng)害的發(fā)生和危害也越來(lái)越嚴(yán)重，必然會(huì)導(dǎo)致農(nóng)藥的大量使用[3-4]。隨著生活水平的提高，人們對(duì)獼猴桃的品質(zhì)要求也不斷提高，不僅要求果實(shí)好吃、好看，更要安全。獼猴桃果實(shí)農(nóng)藥殘留情況，越來(lái)越引起社會(huì)和消費(fèi)者的重視，開(kāi)展獼猴桃果實(shí)農(nóng)殘檢測(cè)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)尤為重要?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)在蘋(píng)果、桃、葡萄等多種水果上進(jìn)行過(guò)研究和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[5-9]，浙江和陜西也研究獼猴桃農(nóng)殘情況[10-11]，但是在湖南省獼猴桃農(nóng)殘研究和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的報(bào)道甚少?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】湖南省是我國(guó)獼猴桃人工栽培起步最早的省份之一，截至2020 年，全省的獼猴桃栽培面積達(dá)2 萬(wàn)hm2。因此筆者試圖通過(guò)研究湖南省獼猴桃果實(shí)農(nóng)藥殘留及風(fēng)險(xiǎn)情況，為日后系統(tǒng)性進(jìn)行農(nóng)藥監(jiān)測(cè)、監(jiān)管提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)指導(dǎo)獼猴桃進(jìn)行安全生產(chǎn)及引導(dǎo)獼猴桃健康消費(fèi)有重要意義，同時(shí)也為后續(xù)制定獼猴桃中農(nóng)藥的最大殘留限量提供參考依據(jù)?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究基于調(diào)查湖南省43 個(gè)獼猴桃果園的農(nóng)藥使用情況，利用液相色譜-質(zhì)譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)63 個(gè)果實(shí)樣品進(jìn)行農(nóng)藥殘留分析，通過(guò)慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)和急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估，并借鑒英國(guó)獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣進(jìn)行農(nóng)藥和樣品排序，分析湖南省獼猴桃果實(shí)的質(zhì)量安全狀況。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

湖南位于長(zhǎng)江以南，五嶺以北，屬亞熱帶季風(fēng)濕潤(rùn)氣候區(qū)，高溫多濕，年均氣溫達(dá)17.5 ℃，氣溫適中，四季分明，年均降雨量達(dá)1 498 mm，無(wú)霜期達(dá)300 d。年日照時(shí)數(shù)為1 300～1 800 h。土壤類型以紅壤、黃壤、黃棕壤為主，適宜獼猴桃的生長(zhǎng)。

1.2 試驗(yàn)材料

樣品采集來(lái)自湖南省25個(gè)縣市，包括中方縣、懷化市鶴城區(qū)、麻陽(yáng)縣、溆浦縣、安化縣、沅江市、藍(lán)山縣、雙牌縣、鳳凰縣、瀘溪縣、永順縣、岳陽(yáng)市君山區(qū)、岳陽(yáng)縣、祁東縣、常寧市、衡山縣、衡陽(yáng)縣、城步縣、隆回縣、新邵縣、張家界永定區(qū)、長(zhǎng)沙市芙蓉區(qū)、長(zhǎng)沙縣、寧鄉(xiāng)市、桃源縣、臨澧縣、湘潭縣、桂陽(yáng)縣。涉及43個(gè)基地、合作社等，品種包括‘紅陽(yáng)’、‘東紅’、‘金艷’、‘翠玉’和‘米良1號(hào)’等品種。每個(gè)果園選擇樹(shù)勢(shì)基本一致的10～15 株作為取樣樹(shù)，在果實(shí)可溶性固形物達(dá)到6.5%時(shí)，按東南西北4 個(gè)方位采集樹(shù)冠上的果實(shí)，組成一個(gè)樣品，勻漿后貯存于-20 ℃低溫冰箱備用。

1.3 果實(shí)農(nóng)藥殘留量測(cè)定

按照NY/T 761—2008、GB/T 20769—2008、GB/T 23200.8—2016、GB/T 23200.20—2016 的規(guī)定[12-15]，進(jìn)行樣品預(yù)處理，對(duì)70 種農(nóng)藥進(jìn)行含量測(cè)定（表1），每個(gè)樣品做3 次重復(fù)。結(jié)果參考GB 2763—2019限量要求，有針對(duì)獼猴桃限量要求的直接采用，沒(méi)有獼猴桃限量要求的參考漿果類水果或者其他水果的限量[16]。

表1 70種農(nóng)藥名稱及分類Tab.1 Name and classification of 70 pesticides

1.4 慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)的計(jì)算

慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是指對(duì)一般人群和特殊亞人群的化學(xué)污染物長(zhǎng)期膳食暴露情況進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。根據(jù)公式（1）計(jì)算各農(nóng)藥的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)（%ADI），%ADI 越小風(fēng)險(xiǎn)越小，當(dāng)%ADI≤100%時(shí)，表示風(fēng)險(xiǎn)可以接受；%ADI＞100%，表示有不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。

式（1）中，STMR 為平均殘留值（mg/kg）；0.009 5為居民日均獼猴桃消費(fèi)量（kg）；ADI為農(nóng)藥每日允許攝入量（mg/kg·bw）；bw為體質(zhì)量，按60 kg計(jì)算。

1.5 急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)的計(jì)算

急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是指在一天食物消費(fèi)中攝入的食物和水中的某物質(zhì)殘留量，對(duì)一般人群和特殊亞人群的攝入情況進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。采用公式（2）計(jì)算各農(nóng)藥的估計(jì)短期攝入量（NESTI）。通過(guò)公式（3）計(jì)算各農(nóng)藥的急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)（%ARfD）和安全界限（SM）。%ARfD 越小風(fēng)險(xiǎn)越小，當(dāng)%ARfD≤100%時(shí)，表示風(fēng)險(xiǎn)可以接受；%ARfD＞100%，表示有不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。

式（2）、（3）和（4）中，U、v、LP分別為單果質(zhì)量（kg）（獼猴桃值為0.083 kg）、變異因子（取值為3）、消費(fèi)大份餐（kg）（獼猴桃為0.548 7 kg[17]）；HR為最高殘留量（mg/kg）；ARfD為農(nóng)藥急性參考劑量（mg/kg）。

1.6 風(fēng)險(xiǎn)排序

借鑒英國(guó)獸藥殘留委員會(huì)獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣[18]，根據(jù)公式（5）計(jì)算農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)得分（S），并將各風(fēng)險(xiǎn)大小劃分為3類，當(dāng)S≥20.0為高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥；15.0≤S＜20.0為中風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥；S＜15.0為低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥。同樣，根據(jù)公式（6）計(jì)算樣品中農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)（RI），將樣品分為4 類，當(dāng)RI≥15 為高風(fēng)險(xiǎn)樣品；10≤RI＜15 為中風(fēng)險(xiǎn)樣品；5≤RI＜10為低風(fēng)險(xiǎn)樣品；RI＜5為極低風(fēng)險(xiǎn)樣品。

式（5）中，A 為毒性得分（低毒為2 分，中毒為3 分，高毒為4 分，劇毒為5 分），B 為毒效得分（ADI 值≥1×10-2為0 分，1×10-4≤ADI 值＜1×10-2為1 分，1×10-6≤ADI 值＜1×10-4為2 分，ADI 值＜1×10-6為3 分），C 為膳食比例得分（獼猴桃攝入量占總膳食比例為0.71%＜2.5%為0分），D為農(nóng)藥使用頻率得分（獼猴桃中農(nóng)藥的使用頻率最大為2%＜2.5%為0 分），E 為高暴露人群得分（3 分），F(xiàn) 為殘留水平得分。公式（6）中n為檢出農(nóng)藥種類的個(gè)數(shù)，TS0為n種農(nóng)藥均未檢出的樣品殘留風(fēng)險(xiǎn)得分。

1.7 最大殘留限量估計(jì)值的計(jì)算

式（7）中，F(xiàn)為獼猴桃日消費(fèi)量，按照最大風(fēng)險(xiǎn)原則，取大份餐（LP）值（kg）。

2 結(jié)果與分析

2.1 獼猴桃樣品農(nóng)藥殘留水平分析

本次通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法及氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)共檢測(cè)總樣品個(gè)數(shù)為63個(gè)，檢出農(nóng)殘的樣品數(shù)為43個(gè)，占抽樣總數(shù)的68.25%。檢測(cè)了70種農(nóng)藥，檢出的農(nóng)藥共21種，占農(nóng)藥品種檢出率為30%。檢出的農(nóng)藥中未發(fā)現(xiàn)禁限用和劇毒農(nóng)藥，21種農(nóng)藥中高毒農(nóng)藥有1種，中毒農(nóng)藥有3種，低毒農(nóng)藥為17種。檢出率高的農(nóng)藥為多菌靈，檢出率占28.57%，吡唑醚菌酯占20.63%，甲基硫菌靈占14.29%，吡蟲(chóng)啉占11.11%。其他17種農(nóng)藥的檢出率都低于10%（表2）。所有檢出農(nóng)藥中，其中多菌靈的檢出率最高，這與朱杰麗等[10]2012年開(kāi)展浙江省獼猴桃的多菌靈檢測(cè)結(jié)果（26.7%）相似，但與劉君等[19]在2018年西安市的檢測(cè)結(jié)果（多菌靈檢出率5%，嘧霉胺檢出率13.5%）不同。多菌靈的檢出最大值達(dá)到0.49 mg/kg，臨近多菌靈的MRL 值（0.50），18 個(gè)檢出樣品中有22.22%接近最大殘留限量值，存在的原因可能是多菌靈作為一種傳統(tǒng)的廣譜型殺菌劑，在湖南地區(qū)使用時(shí)間長(zhǎng)，頗受種植戶喜歡。值得注意的是檢出率高的吡唑醚菌酯、甲基硫菌靈和吡蟲(chóng)啉都未在獼猴桃或者漿果類水果上制定最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。

表2 湖南獼猴桃中21種農(nóng)藥的殘留水平Tab.2 Residue level of 21 pesticides in kiwifruit of Hunan

2.2 獼猴桃不同品種農(nóng)藥殘留差異分析

文中共檢測(cè)‘紅陽(yáng)’、‘東紅’、‘金艷’、‘翠玉’和‘米良1 號(hào)’5 個(gè)品種，主要從農(nóng)殘檢出率和檢出農(nóng)殘種類分析不同品種的果實(shí)農(nóng)藥殘留差異。5 個(gè)品種的農(nóng)殘檢出率都大于60%，其中最高的是‘紅陽(yáng)’73.33%，最低的是‘米良1號(hào)’64.71%，‘東紅’、金艷和翠玉分別是66.67%、66.67%、69.23%。在檢出的21種農(nóng)藥中，‘紅陽(yáng)’共檢出12 種農(nóng)藥，‘米良1 號(hào)’和‘金艷’都檢出6 種，‘東紅’和‘翠玉’分別是7 種、10 種。‘紅陽(yáng)’的檢出率、農(nóng)藥種類明顯高于‘米良1號(hào)’，歸其原因首先是‘紅陽(yáng)’本身的抗病性低于‘米良1號(hào)’，其次是湖南地區(qū)獼猴桃的標(biāo)準(zhǔn)化栽培管理水平有待提高，需根據(jù)品種自身特性，配套相應(yīng)栽培技術(shù)突出品種優(yōu)勢(shì)，增加樹(shù)體抗病性，減少農(nóng)藥使用頻率。

2.3 獼猴桃中農(nóng)藥殘留慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)與急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)

在2019年食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)—食品中農(nóng)藥最大殘留限量上查詢21種檢出農(nóng)藥的ADI值，根據(jù)公式計(jì)算農(nóng)藥殘留慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)，發(fā)現(xiàn)21 種檢出農(nóng)藥的ADI%值均在0.2%以下，平均值是0.037 6%，其中，阿維菌素的值最高為0.194 7%，遠(yuǎn)小于100%，表示風(fēng)險(xiǎn)可以接受。

通過(guò)在世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)庫(kù)（WHO）中查詢檢出農(nóng)藥的ARFD，嘧霉胺和甲霜靈的ARFD信息為不需要，未找到氯蟲(chóng)苯甲酰胺的信息。根據(jù)公式計(jì)算剩余18種農(nóng)藥的ARFD%為0.200 0%～5.805 6%，值最高的是多菌靈為5.805 6%，平均值為1.638%，遠(yuǎn)小于100%。說(shuō)明湖南省獼猴桃的急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)是可以接受的。從表3可以看出各農(nóng)藥的最高殘留量遠(yuǎn)小于安全界限。

表3 獼猴桃中農(nóng)藥殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及急性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估Tab.3 Chronic risk assessment and acute risk assessment for pesticide residues in kiwifruit

2.4 獼猴桃中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序

根據(jù)獼猴桃中檢出農(nóng)藥的毒性、毒效、使用頻率、殘留水平等因素，計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)因子農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)得分。由圖1可以看出阿維菌素的得分為20.15，屬于高等風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥；其余20種農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)得分在15以下，均屬于低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥。因此，在湖南省獼猴桃的栽培過(guò)程需要加強(qiáng)監(jiān)管和指導(dǎo)該農(nóng)藥的使用。

圖1 獼猴桃中21種農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)得分排序Fig.1 Ranking of residues risk score of 21 pesticides in kiwifruit

通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)樣品的風(fēng)險(xiǎn)程度，共檢測(cè)63 個(gè)樣品，極低風(fēng)險(xiǎn)樣品有50 個(gè)，占79.37%；低風(fēng)險(xiǎn)樣品有10 個(gè)，占15.87%；中風(fēng)險(xiǎn)樣品有2 個(gè)，占3.17%；高風(fēng)險(xiǎn)樣品有1 個(gè)，占1.59%（圖2）。說(shuō)明在湖南省有98.41%的樣品是相對(duì)安全。同時(shí)，值得注意的是獼猴桃栽培過(guò)程中存在多農(nóng)藥殘留，未檢出農(nóng)藥的樣品數(shù)有20個(gè)；檢出農(nóng)藥殘留種類1～2 個(gè)的樣品種類有32 個(gè)，檢出3～5 種農(nóng)藥的樣品有10 個(gè)，檢出6 種農(nóng)藥的樣品有1 個(gè)。3 種以上農(nóng)藥殘留的樣品比率為17.46%，所以在生產(chǎn)上需要針對(duì)性使用殺菌劑，避免重復(fù)濫用。

圖2 獼猴桃樣品中農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)比例Fig.2 The proportion of Ranking of residues risk index in kiwifruit

2.5 現(xiàn)有農(nóng)藥最大殘留限量值的制定建議

在檢出的21種農(nóng)藥中，有9種農(nóng)藥制定了獼猴桃或者漿果類水果最大限留量，其中氯蟲(chóng)苯甲酰胺的ADI 值為2，在獼猴桃中的最大殘留限量估算值高達(dá)218.70，在2019 年國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中制定了漿果類水果上的最大殘留限量（表4）。所以急需制定12 種農(nóng)藥的最大殘留限量值，特別是檢出率高的農(nóng)藥吡唑醚菌酯、甲基硫菌靈、吡蟲(chóng)啉和高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥阿維菌素。根據(jù)已制定9種農(nóng)藥的最大殘留限量，多菌靈的eMRL是MRL的6.56倍，溴氰菊酯的eMRL是MRL的21.8倍，噻蟲(chóng)嗪的eMRL是MRL的17.5倍，氯吡脲的eMRL是MRL 的30.6 倍。可根據(jù)MRL 比eMRL 略嚴(yán)且MRL≤SM 的原則，結(jié)合毒理學(xué)數(shù)據(jù)，參考國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)來(lái)制定相應(yīng)農(nóng)藥在獼猴桃上的最大殘留限量值。

3 結(jié)論與討論

3.1 整體風(fēng)險(xiǎn)水平介紹

湖南省獼猴桃果實(shí)雖有21種農(nóng)藥檢出，但未發(fā)現(xiàn)禁限用農(nóng)藥、劇毒農(nóng)藥和有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑檢出[20]。在獼猴桃栽培過(guò)程中使用較多的農(nóng)藥為多菌靈、吡唑醚菌酯、甲基硫菌靈和吡蟲(chóng)啉都是低毒低殘留農(nóng)藥，其中多菌靈的農(nóng)藥殘留檢測(cè)值臨近最大農(nóng)藥殘留限量值。檢出農(nóng)藥的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)和急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)平均值為0.037 6%、1.638%，遠(yuǎn)小于100%，不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)。在檢出的21 種農(nóng)藥中，阿維菌素屬于高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，98.41%的樣品相對(duì)較為安全，由于樣品來(lái)源層次不一，有散戶種植的非精品果，也有種植大戶的精品包裝果，其結(jié)果只在一定程度上反應(yīng)了湖南省獼猴桃果實(shí)農(nóng)藥含量的現(xiàn)狀。

3.2 關(guān)于農(nóng)藥最大殘留限量

在檢出的21種農(nóng)藥中，只有多菌靈、嘧霉胺、嘧菌酯、氯氟氰菊酯、溴氰菊酯、噻蟲(chóng)嗪、啶蟲(chóng)脒、氯吡脲和氯蟲(chóng)苯甲酰胺9種農(nóng)藥制定了獼猴桃或漿果類水果中的最大殘留限量值（MRL），有必要對(duì)未有標(biāo)準(zhǔn)的12種農(nóng)藥制定獼猴桃或漿果類水果中的最大殘留限量值（MRL），特別是檢出率較高的多菌靈、吡唑醚菌酯、甲基硫菌靈、吡蟲(chóng)啉和高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥阿維菌素。方便準(zhǔn)確評(píng)估其在獼猴桃果實(shí)上的農(nóng)藥殘留情況，以填補(bǔ)我國(guó)獼猴桃果品質(zhì)量安全控制標(biāo)準(zhǔn)方面的空白。在本研究中，值得引起注意的是多菌靈的農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果范圍為0.01～0.487 5，已經(jīng)十分接近國(guó)內(nèi)所設(shè)的MRL 值（0.50）。這可能與農(nóng)戶的個(gè)人使用習(xí)慣有關(guān)，需要針對(duì)性地提醒農(nóng)戶控制多菌靈的使用。也可能與我國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定值太低或太嚴(yán)有關(guān)，筆者參考了歐盟和南韓的多菌靈標(biāo)準(zhǔn)值均為2.0，建議在粗放管理的地區(qū)可以適當(dāng)調(diào)整最大限量值[21]。

3.3 主要存在問(wèn)題和擬解決方法

首先是高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥問(wèn)題，阿維菌素是一種高毒的殺螨劑，63 個(gè)樣品中有2 個(gè)樣品檢出農(nóng)藥殘留，需要針對(duì)性指導(dǎo)農(nóng)戶盡快使用低毒的殺螨劑進(jìn)行替代或者使用生物防治如捕食螨等，同時(shí)加強(qiáng)果園的冬季清園管理。其次是農(nóng)藥多殘留問(wèn)題，尤其是檢出率高的3 種農(nóng)藥多菌靈、吡唑醚菌酯、甲基硫菌靈都屬于殺菌劑。這說(shuō)明湖南獼猴桃在栽培過(guò)程中標(biāo)準(zhǔn)化程度不高，管理比較粗放，在病蟲(chóng)害防控上多種農(nóng)藥多輪次使用，應(yīng)加強(qiáng)獼猴桃綠色栽培技術(shù)的推廣和示范，根據(jù)品種自身特性和差異針對(duì)性用藥，在病蟲(chóng)害防控上應(yīng)該掌握病蟲(chóng)害的發(fā)生規(guī)律，再采取預(yù)防為主，綜合防治，避免過(guò)度用藥，多次用藥和隨便亂用藥。