王升勻，陳錫赟，胡志平，趙鴻賓

(黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州 都勻 558013)

大皂角為豆科植物皂莢GleditsiasinensisLam.的干燥成熟果實(shí)[1]。在全國(guó)大部分地區(qū)均有分布，資源十分豐富，具有祛痰開竅、散結(jié)消腫等功效，經(jīng)炮制后可降低其毒副作用，常用于臨床用藥，為貴州民間治療頭風(fēng)頭痛、癰腫便毒、瘡癬疥癩等疾病的常用中藥[2]。大皂角具有較大的藥用價(jià)值，但不同產(chǎn)地的藥材質(zhì)量參差不齊，難以鑒別，本文旨在通過TLC方法，按照2015版《中國(guó)藥典》四部通則研究的方法為大皂角藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥材

大皂角藥材經(jīng)黔南民族醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校王傳明副教授鑒定為大皂角為豆科植物皂莢GleditsiasinensisLam.的干燥成熟果實(shí)。

1.2 儀器與試劑

LX-05多功能能粉碎機(jī)(上海江信科技有限公司)；GoodSee-20E薄層色譜成像系統(tǒng)(上海科哲生化科技有限公司)；BSA224S電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；TS-Ⅱ雙噴頭超細(xì)噴霧器(上海科哲生化科技有限公司)；SP-Ⅱ電動(dòng)點(diǎn)樣器(上?？普苌萍加邢薰?；GZX-9070電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)；SX-2.5-R型箱式電阻爐(天津市泰斯特儀器有限公司)；WFH-203B三用紫外分析儀(上海精科實(shí)業(yè)有限公司)；HH-6恒溫水浴鍋(常州澳華儀器有限公司)。

表1 藥材來源一覽表

對(duì)照藥材(貴州迪達(dá)生物科技，dzyc0229)；甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚等均為色譜純，氨水、冰醋酸、無水乙醇為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

取大皂角1 g，精密加入甲醇10 mL，超聲處理30 min，取出放涼，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使其溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，得供試品溶液。

2.2 對(duì)照藥材溶液的制備

取大皂角對(duì)照藥材1 g，方法同“2.1”項(xiàng)下供試品溶液制備，得對(duì)照藥材溶液。

2.3 薄層色譜條件考察

2.3.1 不同展開系統(tǒng)的考察 吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶ 1∶0.6∶0.2)、石油醚-乙酸乙酯(85∶15)、正丁醇-無水乙醇-氨水(10∶2∶5)3種展開系統(tǒng)中分別進(jìn)行展開，待展開完全后，噴以10%硫酸乙醇溶液顯色，結(jié)果如圖3所示，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)系統(tǒng)中的展開效果較好，斑點(diǎn)較為清晰且分離度好。大皂角不同展開系統(tǒng)比較色譜見圖1。

A B C

2.3.2 不同檢視波長(zhǎng)的考察 吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展開劑中展開，待其展開的完全后，取出，噴以10%硫酸乙醇進(jìn)行顯色，在白光、254 nm、365 nm三種檢視光中進(jìn)行檢視，其中以365 nm的檢視光為佳，斑點(diǎn)較為清晰，在254 nm的檢視光下雖有部分斑點(diǎn)，但是并不完全；白光下則無明顯斑點(diǎn)。大皂角不同檢視波長(zhǎng)比較色譜見圖2。

A B C

2.3.3 不同硅膠板的考察 吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別各點(diǎn)于硅膠G薄層板、硅膠GF254薄層板、硅膠H薄層板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展開劑中展開，待其展開的完全后，取出，噴以10%硫酸乙醇進(jìn)行顯色，在365 nm檢視光中進(jìn)行檢視，結(jié)果可以看出以硅膠G板為載體為佳，其各成分主斑點(diǎn)顯示清晰，分離度高。大皂角不同硅膠板考察色譜見圖3。

A B C

2.3.4 不同顯色劑考察 吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展開系統(tǒng)中分別進(jìn)行展開，待展開完全后，分別噴以10%硫酸乙醇溶液、1%三氯化鋁乙醇液、10%磷鉬酸乙醇溶液進(jìn)行顯色，在365 nm光下進(jìn)行檢視，結(jié)果顯示以10%硫酸乙醇溶液為顯色劑為佳，顯色比較完全且斑點(diǎn)清晰。大皂角不同顯色劑考察色譜見圖4。

A：10%硫酸乙醇溶液；B：1%三氯化鋁乙醇溶液；C：10%磷鉬酸乙醇溶液

2.3.5 不同產(chǎn)地大皂角的薄層鑒別 照薄層色譜法(2015版《中國(guó)藥典》四部通則0502)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光下(365 nm)下檢視，結(jié)果如圖7、8、9所示，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)下層溶液的展開系統(tǒng)中展開，待其展開完全后，取出，噴以10%硫酸乙醇溶液進(jìn)行顯色，在365 nm紫外光下進(jìn)行檢視，大皂角溶液與對(duì)照藥材溶液在薄層板的相應(yīng)位置有大小與顏色相同的斑點(diǎn)。不同產(chǎn)地大皂角薄層色譜見圖5。

3 討論

大皂角中主要是含有三萜皂苷類成分，在臨床應(yīng)用非常廣泛，具有開竅、祛痰、通便功效，主要用于猝然昏迷、口噤不開、喉中痰壅、支氣管哮喘、便秘、頸淋巴結(jié)結(jié)核。通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)用硅膠G板為載體，展開劑為三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)，10%硫酸乙醇溶液為顯色劑；在365 nm紫外光下進(jìn)行檢視，大皂角溶液與對(duì)照藥材溶液在薄層板的相應(yīng)位置有大小與顏色相同的斑點(diǎn)，并且斑點(diǎn)清晰且分離度好。本實(shí)驗(yàn)為大皂角的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了有利的數(shù)據(jù)支持。

(1=DZJ01；2=DZJ02；3=DZJ03；4=DZJ04；5=DZJ05；6=DZJ06；7=DZJ07；8=DZJ08；9=DZJ09；10=DZJ10；C=對(duì)照品藥材)