陳正浤，李媛媛，雷光焰，李 宏，周智輝

(1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽 712046；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院科研科，陜西 咸陽712046；3.陜西省腫瘤醫(yī)院胸外科，陜西 西安 710061；4.陜西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠，陜西 咸陽 712000)

1 TLE1基因概述

果蠅Groucho(Gro)蛋白是轉(zhuǎn)錄共抑制蛋白家族的創(chuàng)始成員。該家族成員包括脊椎動(dòng)物中分裂蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)素樣增強(qiáng)子(Transducin-like enhancer of split，TLE)和 Gro相關(guān)基因(Gro-related gene，Grg)蛋白。目前人類TLE家族共有7個(gè)成員(TLE1-7)，全長(zhǎng)TLE蛋白有五個(gè)結(jié)構(gòu)域，包括Q域、GP域、CcN域、SP域和WD重復(fù)域。TLE1-4、6是全長(zhǎng)TLE家族成員；TLE5/AES只有Q、GP和CcN域，是一種功能性動(dòng)態(tài)蛋白；TLE7大多是WD重復(fù)域[1]。Gro/TLE可以下調(diào)轉(zhuǎn)錄激活因子靶基因的表達(dá)，增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄抑制因子的轉(zhuǎn)錄抑制作用，也可以將轉(zhuǎn)錄激活因子轉(zhuǎn)化為抑制因子。此外，人類TLE蛋白與多種腫瘤有關(guān)[2]，包括乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、星形細(xì)胞瘤、垂體腺瘤、白血病和淋巴瘤等。

TLE1最初于1992年被描述為果蠅Gro蛋白的人類同源物，在不同的組織和細(xì)胞類型廣泛表達(dá)，是目前研究最多的Gro/TLE家族蛋白。TLE1的功能需要Q和WD40結(jié)構(gòu)域，Q結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)四聚體可以特異性地與染色質(zhì)結(jié)合[3]，其他保守性較低的結(jié)構(gòu)域調(diào)節(jié)TLE1的亞細(xì)胞定位、磷酸化狀態(tài)和轉(zhuǎn)錄抑制活性。TLE1在不同腫瘤中作用不同，可以是腫瘤抑制因子，又可能促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生。TLE1與許多細(xì)胞增殖和分化所必需的重要轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)(包括TCF/Lef[3]、Runx2[4]、HES1[5])，還參與Wnt、Notch、EGFR信號(hào)通路，以及調(diào)節(jié)NF-κB活性[6]。除此之外，TLE1可能調(diào)節(jié)免疫功能。

2 TLE1促腫瘤作用

2.1 肺 癌 在人肺癌組織中，TLE1在部分鱗狀細(xì)胞癌和腺癌中過度表達(dá)，并且被認(rèn)為是一種推測(cè)的肺特異性癌基因[7]。相關(guān)研究表明，TLE1通過抑制上皮性鈣粘蛋白(E-cadherin)促進(jìn)了A549人肺癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)進(jìn)展，在體內(nèi)TLE1以轉(zhuǎn)錄因子E盒結(jié)合鋅指蛋白1(ZEB1)依賴的方式促進(jìn)了A549肺腺癌細(xì)胞的致瘤性。Grg1/TLE1過表達(dá)可誘導(dǎo)肺腺癌的發(fā)生，并積極調(diào)節(jié)Bcl-2表達(dá)和ErbB1/ErbB2信號(hào)傳導(dǎo)以促進(jìn)腫瘤進(jìn)展[8]。TLE1介導(dǎo)的E-cadherin抑制作用被腫瘤抑制因子Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1(Bit1)負(fù)調(diào)控，從而抑制失巢凋亡[9]。

2.2 乳腺癌 在乳腺癌組織中發(fā)現(xiàn)TLE1高表達(dá)，在原位癌和浸潤(rùn)性乳腺癌中TLE1表達(dá)高于正常乳腺組織。高表達(dá)的TLE1與人表皮生長(zhǎng)因子2(HER2)陽性以及三陰性乳腺癌密切相關(guān)，與無病生存或總生存無明顯相關(guān)性[10]。TLE1在侵襲性乳腺腫瘤中選擇性上調(diào)，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的失巢凋亡抵抗和非依賴性生長(zhǎng)[11]。Zahavi等[12]在體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，人乳腺細(xì)胞中非磷酸化的TLE1阻斷了由突變H-Ras誘導(dǎo)的致癌表型。此外，TLE1對(duì)于雌激素受體(ER)介導(dǎo)的有效細(xì)胞分裂是必不可少的。作為ER復(fù)合體的一個(gè)必要轉(zhuǎn)錄成分，TLE1促進(jìn)ER與染色質(zhì)的相互作用，沉默TLE1顯著抑制了MCF7細(xì)胞的生長(zhǎng)[13]。

2.3 胃 癌 TLE1在正常胃黏膜中缺失，但在121例(41.6%)胃癌患者中檢測(cè)到TLE1表達(dá)；TLE1的表達(dá)與早期病理T/N和AJCC分期以及良好的組織學(xué)分級(jí)顯著相關(guān)；單變量分析顯示TLE1的表達(dá)還與更長(zhǎng)的無病生存率和總生存率顯著相關(guān)[14]。Liu等[15]也證實(shí)TLE1在胃癌中表達(dá)明顯增高，并與miR-1281表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。此外，TLE1作為miR-1281潛在靶基因，促進(jìn)了胃癌細(xì)胞的遷移和增殖，并部分緩解了miR-1281對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用。

2.4 神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤 TLE1在神經(jīng)發(fā)育中起著重要作用，可以抑制神經(jīng)前體細(xì)胞向神經(jīng)元的分化。TLE1與叉頭框蛋白G1(FOXG1)在神經(jīng)發(fā)生的調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用，其對(duì)有絲分裂后神經(jīng)元的存活活性主要依賴于FOXG1的相互作用。FOXG1和TLE1在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中高表達(dá)，與較差的總生存率相關(guān)。重要的是，抑制FOXG1和TLE1降低了干細(xì)胞樣特征的腦瘤起始細(xì)胞(BTIC)的生長(zhǎng)，提示FOXG1和TLE1都參與了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的發(fā)生和發(fā)展。在腦瘤起始細(xì)胞中，Notch信號(hào)的負(fù)調(diào)控因子(包括CHAC1)是FOXG1∶TLE1復(fù)合物的轉(zhuǎn)錄抑制靶點(diǎn)，提示在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中FOXG1∶TLE1和Notch介導(dǎo)的通路之間存在相關(guān)性。

3 TLE1腫瘤抑制作用

3.1 血液系統(tǒng)腫瘤 TLE1在白血病中作為腫瘤抑制因子發(fā)揮作用。TLE1通過AML1、Wnt和Notch信號(hào)通路發(fā)揮作用，在急性髓系白血病、非霍奇金淋巴瘤和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中，TLE1被甲基化沉默；TLE1表觀遺傳失活通過擾亂關(guān)鍵分化和生長(zhǎng)抑制途徑導(dǎo)致惡性血液病的發(fā)生[16]。TLE1和TLE4與急性髓系白血病1-ETO融合基因(AML1-ETO)協(xié)同影響髓系細(xì)胞的存活、凋亡和增殖。在急性淋巴細(xì)胞白血病中，TLE1 mRNA水平顯著降低，與較差的預(yù)后相關(guān)。TLE1聯(lián)合LCP2、TNFRSF9、FUT8和IRF4可用于彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤的分子分型，可以作為治療的潛在靶點(diǎn)。

3.2 肝 癌 在四種肝癌細(xì)胞系(HuH6、Hep3B、HepG2、HLE)中，TLE1的下調(diào)促進(jìn)了肝癌發(fā)生。TLE1 mRNA表達(dá)水平從正常肝臟到不典型增生再到肝癌逐漸降低。與鄰近非癌組織相比，TLE1在肝細(xì)胞癌中表達(dá)降低。miRNA-657直接靶向TLE1 3’非翻譯區(qū)并激活NF-κB途徑，促進(jìn)肝癌的發(fā)生。

4 TLE1在腫瘤診斷中的作用

4.1 滑膜肉瘤 TLE1作為滑膜肉瘤潛在標(biāo)志物有許多研究報(bào)道。Jagdis等[17]研究表明，TLE1在滑膜肉瘤中高表達(dá)，與t(X∶18)顯著相關(guān)，TLE1可作為滑膜肉瘤強(qiáng)有力的診斷生物標(biāo)志物和潛在治療靶點(diǎn)。TLE1在滑膜肉瘤中呈強(qiáng)度彌漫性核染色，而在其他軟組織腫瘤和間質(zhì)腫瘤中檢測(cè)到的頻率和水平較低，因此TLE1免疫染色在滑膜肉瘤的診斷中表現(xiàn)出更高的敏感性和特異性。呂京澴等[18]報(bào)道，TLE1對(duì)單相梭形細(xì)胞型滑膜肉瘤及低分化型滑膜肉瘤具有較高的敏感性和特異性，特別是呈彌漫性強(qiáng)陽性表達(dá)特征更有意義。Valente等[19]也證實(shí)TLE1過表達(dá)用于診斷無法分類的高級(jí)別肉瘤中的滑膜肉瘤，是一種高度敏感性和特異性的生物標(biāo)志物。

然而，TLE1在滑膜肉瘤中的特異性也受到質(zhì)疑。研究[20]證實(shí)，TLE1對(duì)滑膜肉瘤具有極好的敏感性，但在絕大多數(shù)滑膜肉瘤以及相當(dāng)數(shù)量的其他可能進(jìn)入滑膜肉瘤的梭形細(xì)胞腫瘤中也有強(qiáng)陽性表達(dá)。當(dāng)面對(duì)具有圓形和(或)梭形細(xì)胞形態(tài)的低分化骨或軟組織肉瘤時(shí)，應(yīng)謹(jǐn)慎解釋TLE1的免疫染色。進(jìn)一步研究顯示，熒光原位雜交SS18基因重排有助于證實(shí)和排除滑膜肉瘤診斷困難的病例。TLE1在區(qū)分尤文肉瘤和滑膜肉瘤中的真正作用可能是其負(fù)面預(yù)測(cè)價(jià)值，即所有TLE1陰性的腫瘤都沒有SS18易位。

一組免疫組織化學(xué)標(biāo)記物已被用于將滑膜肉瘤與其他軟組織肉瘤區(qū)分開來。研究[21]報(bào)道，TLE1與EMA、Bcl-2、MIC2、CD34和CK7可作為較好的免疫組織化學(xué)的有用標(biāo)記物，在小活檢樣品上用于證實(shí)滑膜肉瘤的診斷，可以減少進(jìn)一步的分子測(cè)試要求，特別是對(duì)TLE1陰性腫瘤的要求。在缺乏分子研究的情況下，結(jié)合形態(tài)學(xué)評(píng)估和其他標(biāo)志物(如EMA和CD34)，TLE1有助于增加其診斷價(jià)值。

4.2 皮膚腫瘤 在原發(fā)性皮下滑膜肉瘤中TLE1表現(xiàn)為核強(qiáng)染色，因此TLE1可以作為診斷這種罕見皮膚腫瘤的生物標(biāo)志物[22]。此外，有研究[23]對(duì)42例具有梭形細(xì)胞或結(jié)締組織增生性的黑色素瘤進(jìn)行了TLE1免疫組織化學(xué)評(píng)估，發(fā)現(xiàn)其中24例TLE1陽性表達(dá)。而且，TLE1在皮脂腺腫瘤、基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌等皮膚腫瘤中表達(dá)，具有高度敏感性(63%～96%)。在基底細(xì)胞腺瘤中，TLE1的表達(dá)僅局限于腺體結(jié)構(gòu)的管腔細(xì)胞，可以通過管腔細(xì)胞染色差異來區(qū)分基底細(xì)胞腺瘤和基底細(xì)胞腺癌，特別是在基底細(xì)胞腺癌侵襲區(qū)域，但在管腔細(xì)胞表達(dá)不明顯。有研究[24]在皮下血管周圍軟組織腫瘤中發(fā)現(xiàn)22例(91.6%)TLE1表達(dá)陽性，且其中部分病例表現(xiàn)為核強(qiáng)陽性染色。這些均說明TLE1可以作為診斷某些皮膚腫瘤的潛在標(biāo)志物。

4.3 其他腫瘤 TLE1在惡性橫紋肌樣腫瘤、胰管腺癌等腫瘤中的研究也有報(bào)道。研究者對(duì)100例不同類型的腫瘤進(jìn)行TLE1和CD99免疫染色，發(fā)現(xiàn)TLE1和CD99分別在7%和21%的癌組織中表達(dá)[25]。

5 結(jié) 語

TLE1在腫瘤中的作用主要有以下兩點(diǎn)：①TLE家族是許多轉(zhuǎn)錄因子的共抑制因子，可以作為促腫瘤因子或腫瘤抑制因子，在多種惡性腫瘤發(fā)生與發(fā)展過程中發(fā)揮許多重要作用，在腫瘤研究中顯示出巨大的潛力。②TLE1可作為滑膜肉瘤、皮膚性腫瘤以及其他腫瘤的診斷標(biāo)志物，以及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、血液系統(tǒng)腫瘤的潛在治療靶點(diǎn)。TLE1在滑膜肉瘤中表現(xiàn)出高敏感性和特異性，但是也受到質(zhì)疑，借助于SS18基因重排、形態(tài)學(xué)評(píng)估和其他標(biāo)志物，有助于增加TLE1的診斷價(jià)值。然而，TLE1在Wnt、Notch、EGFR、雌激素信號(hào)通路等關(guān)鍵通路中的功能尚未闡明，TLE1相關(guān)分子機(jī)制及其在惡性腫瘤的作用需要進(jìn)行更多研究加以證實(shí)。