穆小偉，雷建靈

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)研究生院，內(nèi)蒙古自治區(qū) 呼和浩特 010030；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，內(nèi)蒙古自治區(qū) 呼和浩特 010030）

0 引言

在全球，淋巴瘤是第六大最常見(jiàn)的癌癥之一。而來(lái)源于B淋巴細(xì)胞的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL）是非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）中最常見(jiàn)的亞型，具有高度侵襲性和異質(zhì)性的特點(diǎn)。Krüppel樣因子（Krüppel-like factors，KLFs）是一種鋅指轉(zhuǎn)錄因子，該基因?qū)儆赟P/KLFs家族，其中的17個(gè)基因已在人類中被發(fā)現(xiàn)[1]。KLF4在KLF家族中備受關(guān)注，但KLF4與DLBCL關(guān)系的研究報(bào)道較少，且對(duì)DLBCL發(fā)生與發(fā)展的影響和機(jī)制了解尚淺，所以本文將對(duì)目前KLF4與DLBCL的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 KLF4的概述

1.1 KLF4的結(jié)構(gòu)與分布

1998 年人類的KLF4基因首先在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的cDNA文庫(kù)中被發(fā)現(xiàn)，位于人染色體9q31，包含了5個(gè)外顯子，且將一個(gè)470個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)進(jìn)行了編碼[2]。KLF4發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的基礎(chǔ)，是源于它有著多個(gè)功能結(jié)構(gòu)域，即轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域，DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域以及核定位序列，而核定位序列有兩個(gè)，分別位于鋅指結(jié)構(gòu)的N-端和第一個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域的前方，雙方互補(bǔ)并緊密相連，起到將KLF4轉(zhuǎn)移至核內(nèi)的作用[3]。

KLF4分布廣泛，在肺、角膜、胸腺細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等組織中均廣泛表達(dá)，尤其在有絲分裂后終末分化的上皮細(xì)胞如胃腸道、皮膚、口腔等呈高度表達(dá)，而由于其在胃腸道的上皮細(xì)胞中表達(dá)最多，也因此稱其為胃腸富集型Krüppel樣因子[2]。

1.2 KLF4的功能

KLF4因?yàn)橛兄喾N結(jié)構(gòu)域，所以和不同的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)揮不同的作用。KLF4是DNA結(jié)合的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，控制細(xì)胞周期的調(diào)控、增殖分化和凋亡等重要過(guò)程。KLF4調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的一個(gè)主要機(jī)制是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制因子（CDKN1A）的表達(dá)，使細(xì)胞周期停滯于G1/S和G2/M期[1]。

KLF4除了參與調(diào)節(jié)干細(xì)胞的自我更新和細(xì)胞衰老等生理過(guò)程，同時(shí)也參與了如腫瘤發(fā)生、炎癥形成等病理生理過(guò)程[4-5]。相關(guān)研究表明KLF4的表達(dá)依賴于P53基因，且KLF4的表達(dá)與DNA損傷程度呈負(fù)相關(guān)。KLF4在細(xì)胞靜止或者DNA輕度損傷后被P53激活，而在DNA嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)KLF4則通過(guò)增強(qiáng)mRNA的轉(zhuǎn)換而受到強(qiáng)烈抑制，從而不可逆轉(zhuǎn)的導(dǎo)致細(xì)胞凋亡；并且若阻斷KLF4對(duì)嚴(yán)重DNA損傷的抑制可抑制P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，而KLF4誘導(dǎo)的輕度DNA損傷則使P53反應(yīng)從細(xì)胞周期阻滯轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞死亡[6]。研究表明，MKP-1可以使KLF4磷酸化，而磷酸化修飾后的KLF4可以進(jìn)入細(xì)胞核，與P53相結(jié)合，并阻止YB-1、YY1、BCL-6等轉(zhuǎn)錄因子與P53基因的啟動(dòng)子結(jié)合，從而抑制P53的表達(dá)，起到促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞增殖的作用[7]。

1.3 KLF4在不同腫瘤中的作用

KLF4既可以作為癌基因，也可以作為抑癌基因，也主要取決于腫瘤的類型、組織或腫瘤分期，而這些變化經(jīng)常是在p53和p21以及p27等分子的幫助下通過(guò)加工或翻譯后的修飾來(lái)完成的[1]。已有研究證明，KLF4在胃癌、食管鱗癌、結(jié)直腸癌、肺癌、肝細(xì)胞癌[8]中表達(dá)下調(diào)，提示KLF4發(fā)揮了抑癌基因的作用。同時(shí)研究表明當(dāng)KLF4作為癌基因時(shí)則會(huì)在乳腺癌、口腔的鱗癌以及黑色素瘤[9]中過(guò)表達(dá)。另外有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在血液系統(tǒng)腫瘤如濾泡淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤以及經(jīng)典的霍奇金淋巴瘤中，KLF4則發(fā)揮著抑癌基因的功能，但往往由于基因甲基化而使其表達(dá)減低[10-11]。

2 KLF4與相關(guān)通路參與DLBCL發(fā)生發(fā)展的機(jī)制

2.1 KLF4與經(jīng)典Wnt信號(hào)通路

Wnt信號(hào)通路有兩條，一條為經(jīng)典Wnt信號(hào)通路，另一條是非經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路。經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路，即Wnt/β-catenin通路，目前研究較多。在細(xì)胞的增殖、分化、遷移和凋亡等過(guò)程中均參與調(diào)控。眾多學(xué)者已證明，在DLBCL中Wnt信號(hào)通路常作為一條重要的信號(hào)通路參與其發(fā)生發(fā)展[12-14]。研究發(fā)現(xiàn)在大腸癌中，KLF4是Wnt/β-catenin通路的負(fù)調(diào)控因子，KLF4被激活后，會(huì)直接結(jié)合并且隔離細(xì)胞核內(nèi)的 β-catenin，阻止 Wnt/β-catenin通路的激活，反之若下調(diào)KLF4則會(huì)促使Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的形成[15-16]。Li等[11]也證明了，在套細(xì)胞淋巴瘤中使用去甲基化藥物5-azaC恢復(fù)KLF4的表達(dá)，可抑制細(xì)胞核β-catenin的表達(dá)，并呈劑量依賴性，提示KLF4作為腫瘤抑制因子在套細(xì)胞淋巴瘤中負(fù)性調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號(hào)通路，并且KLF4的下調(diào)可能與高甲基化有關(guān)?；谝陨涎芯靠梢宰C明，在Wnt/β-catenin信號(hào)通路中，KLF4起著至關(guān)重要的作用。因此，深入對(duì)DLBCL中的KLF4與Wnt/β-catenin信號(hào)通路的作用機(jī)制的研究是非常有意義的。

2.2 KLF4與TGF-β信號(hào)通路

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β（transforming growth factorβ,TGF-β）是廣泛的細(xì)胞因子超家族中的一員，它是一種具有多效性二聚體的細(xì)胞因子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化以及多種病理、生理過(guò)程發(fā)揮著重要作用[17]。TGF-β在哺乳動(dòng)物組織中有三種不同的亞型，分別是：β1、β2、β3，其中 TGF-β1在生物調(diào)控中是最豐富和普遍表達(dá)的類型，并且可調(diào)控細(xì)胞的免疫和增殖等功能，與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展也息息相關(guān)[17-18]。研究表明，TGF-β1在不同的腫瘤細(xì)胞或者相同腫瘤的不同時(shí)期發(fā)揮不同的作用，并且在腫瘤發(fā)展的早期，TGF-β1起到抗腫瘤的作用，相反的是，在腫瘤發(fā)展的中晚期，則會(huì)起到促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用[19-20]。有研究報(bào)道，TGF-β可以促進(jìn)DLBCL的發(fā)生，源于TGF-β具有強(qiáng)大的免疫調(diào)控作用，可以將人體內(nèi)的淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成為Treg細(xì)胞，使Treg中叉狀頭轉(zhuǎn)錄因子家族成員（forkheadbox P3,Foxp3）過(guò)度表達(dá)，從而達(dá)到維系CD4+CD25+Treg細(xì)胞的作用[21]。國(guó)內(nèi)已有研究表明，TGF-β在DLBCL細(xì)胞系及淋巴結(jié)組織中均是高表達(dá)的。Sun等[22]也證明了在肝細(xì)胞癌中，Smad7是TGF-β的關(guān)鍵負(fù)調(diào)控因子，KLF4可以轉(zhuǎn)錄激活Smad7的表達(dá)，而KLF4的缺失則會(huì)下調(diào)Smad7，進(jìn)一步導(dǎo)致TGF-β的過(guò)度激活，從而促進(jìn)肝細(xì)胞癌的發(fā)生。以上研究提示了KLF4的表達(dá)下調(diào)可能會(huì)使TGF-β通路過(guò)表達(dá)，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移，同時(shí)也為后續(xù)KLF4和TGF-β通路共同作用于DLBCL中的機(jī)制研究提供思路。

2.3 KLF4與PI3K/Akt通路

磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol3-kinase,PI3K）根據(jù)其構(gòu)造和功能可分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，但在腫瘤細(xì)胞廣泛變異的是Ⅰ型。蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）是PI3K的下游效應(yīng)因子，通過(guò)磷酸化作用，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和凋亡，有促進(jìn)和抑制的作用[23]。PI3K/Akt信號(hào)通路廣泛存在于人體各種組織中，并在細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、分化、生存中起著關(guān)鍵的作用。此外，在惡性腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡等過(guò)程中，PI3K/Akt也扮演著重要角色[24]。根據(jù)研究得知，PI3K/Akt通路在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤[25]、伯基特淋巴瘤[26]、套細(xì)胞淋巴瘤和急性淋巴細(xì)胞白血病中具有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制凋亡的作用[27]。有國(guó)內(nèi)的研究表明，KLF4在DLBCL中低表達(dá)，如果對(duì)KLF4過(guò)表達(dá)，則發(fā)現(xiàn)DLBCL細(xì)胞的增殖和侵襲遷移會(huì)受到明顯抑制，并且DLBCL細(xì)胞中p-Akt和p-PI3K蛋白水平也會(huì)明顯降低，這說(shuō)明了KLF4的過(guò)表達(dá)能夠抑制PI3K/Akt信號(hào)通路，從而也提示了KLF4對(duì)PI3K/Akt信號(hào)通路的抑制，可能與其對(duì)DLBCL細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移的抑制作用有關(guān)，因此KLF4有希望成為DLBCL的潛在治療靶點(diǎn)[28]。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，KLF4作為抑癌基因，在信號(hào)通路中有著不可替代的重要作用。這是為了更進(jìn)一步地了解DLBCL的發(fā)生奠定了基礎(chǔ)，也為臨床治療提供了新的思路?？墒乾F(xiàn)在關(guān)于KLF4與DLBCL的關(guān)系研究的還不是很多，為了使其盡可能成為DLBCL的治療靶點(diǎn)之一，判斷DLBCL的預(yù)后，未來(lái)有很大的必要對(duì)其機(jī)制進(jìn)行深入研究。