尹小平 劉 戈 白 岑 張兆冠 岳巧云

(1.阿拉山口海關，新疆阿拉山口833418；2.阿勒泰海關，新疆阿勒泰835000; 3.中山海關技術中心，廣東中山 528400)

蜚蠊是一種重要的醫(yī)學媒介昆蟲，可以攜帶多種病原體，對人類的健康構(gòu)成威脅。蜚鐮俗稱蟑螂，是世界上最古老而至今大量存在的昆蟲類群。目前在中國已發(fā)現(xiàn)蜚蠊253種，隸屬于8科20屬，包括室內(nèi)已發(fā)現(xiàn)的種類及其近緣種30余種，最常見的有德國小蠊、美洲大蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊、日本大蠊(馮平章等，1997)。側(cè)緣佘氏蠊Shelfordellalateralis，別名櫻桃紅蜚蠊Blattalateralis，屬蜚蠊目Blattodea、蜚蠊科Blattidae、佘氏蠊屬Shelfordella，側(cè)緣佘氏蠊為體大型、雌雄異型。原分布于亞洲和非洲的熱帶地區(qū)，包括埃及、利比亞、蘇丹、沙特阿拉伯、以色列、伊拉克、伊朗、巴基斯坦、印度、阿富汗等國家。又名東突厥蜚蠊，這個名字由來是因為它們第一次在東突厥地區(qū)被采集到，是一種沙漠種類(Olson, 1985；Belletal., 2007)?，F(xiàn)已成功地定居在南加利福尼亞州、得克薩斯州最南端以及亞利桑納州少數(shù)地方的半沙漠地區(qū)。側(cè)緣佘氏蠊第一次到達美國是混雜在從中東地區(qū)返回加利福尼亞和得克薩斯的軍人個人物品中。側(cè)緣佘氏蠊在中國未見有文獻報告，目前在我國自然環(huán)境生態(tài)條件下也沒有分布，此次在中國新疆阿拉山口境內(nèi)采集的側(cè)緣佘氏蠊是在中國的首次發(fā)現(xiàn)。

1 材料與方法

1.1 標本采集

2018年9月8日深夜12點，阿拉山口海關媒介監(jiān)測人員在鐵路換裝線值班室外，沿墻邊發(fā)現(xiàn)有蜚蠊快速爬行，捕捉到2只并帶回實驗室鑒定，經(jīng)鑒定為外來物種——側(cè)緣佘氏蠊1雌1雄。隨后幾天又在該區(qū)擴大范圍，展開了追蹤調(diào)查，9月14日深夜12:00又在該區(qū)附近的2個地點，相隔2 km的人行道兩側(cè)發(fā)現(xiàn)有蜚蠊爬行，又捕獲3只，經(jīng)鑒定仍為側(cè)緣佘氏蠊，9月29日至10月7日深夜12：00在同一地點再次采到8只若蟲。從9月8日首次發(fā)現(xiàn)到10月再次連續(xù)發(fā)現(xiàn)，共采到側(cè)緣佘氏蠊13只，其中成體2只雌性，3只雄性，8只若蟲。標本保存于阿拉山口海關醫(yī)學媒介室。

1.2 分子鑒定

成蟲根據(jù)其形態(tài)學特征進行鑒定，為了驗證形態(tài)鑒定結(jié)果的準確性，取成蟲的足及若蟲共4個樣品送至中山海關技術中心用DNA條形碼進行分子鑒定(邱德義等，2017)。

1.2.1主要儀器和試劑：主要儀器為ABI Prolex 三槽PCR擴增儀、ThermoPico 17微量臺式離心機、Veriti 96 Thermo UVITEC凝膠成像儀等。EX-Taq DNA聚合酶、dNTP等PCR試劑購于寶生物工程(大連)有限公司；血液/細胞/組織基因組DNA提取試劑盒(目錄號：DP304-03)、瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(目錄號：DP210)、pGM-T連接試劑盒(目錄號：VT202-02)、上樣緩沖液、DNA Marker II、SYBR Green I購于天根生化科技有限公司。

1.2.2PCR擴增及序列分析：PCR擴增所用引物為：LCO1490 5′-G G T C A A C A A A T C A T A A A G A T AT T GG-3′，HCO2198 5′-T A A A C T T C A G G G T G A C C A A A A A A T CA-3′，由寶生物工程(大連)有限公司合成。

PCR反應體系(50 μL): 10倍PCR緩沖液5 μL；正向引物(20 μmol/L)2 μL；反向引物(20 μmol/L)2 μL；dNTP(10 mmol/L)2 μL；Ex-Taq(5U/μL)1μL；模板DNA 3 μL(50 ng/μL)；無菌水35 μL。EX-Taq DNA聚合酶擴增條件：94℃變性5 min；94℃ 30 s，50℃ 30 s，72℃ 1 min，反應30個循環(huán)；72℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物送交Life Technologies(廣州)進行雙向測序，測序引物同擴增引物。

DNA測序結(jié)果經(jīng)MEGA6軟件驗證圖譜為有效序列，去掉兩端的引物后的有效序列在NCBI和BOLD中進行比對。在NCBI和BOLD中下載序列相似度高的序列，采用Mega 6.0軟件的Kimura-2-parameter模型，構(gòu)建NJ樹(自檢值設置為1000次)。

2 結(jié)果

2.1 形態(tài)學結(jié)果

采集到的側(cè)緣佘氏蠊經(jīng)體視顯微鏡觀察顯示，雌蟲體黑褐色，頭黑褐色，單眼淺黃色。觸角黑褐色，下顎須黃褐色。前胸背板黑褐色，肩域具有黃褐色條紋。經(jīng)測量雄蟲體連翅長25.8～27.1 mm，體金黃色，前后翅發(fā)育完全，均超過腹部末端。雌蟲體連翅長21.1～22.5 mm，體黑褐色或暗紅色，無后翅，前翅退化，骨化程度高，末端僅達后胸后緣。頭頂外露，不被前胸背板遮住(圖1)。正是雌成體的顏色像成熟櫻桃紅色，故稱作“櫻桃紅蜚蠊”(Nasirian，2010)。隨后又在烏魯木齊市區(qū)周邊、昌吉、中蒙邊境塔克什肯、紅山嘴及吉木乃等口岸進行監(jiān)測，均未發(fā)現(xiàn)該種的存在。

圖1 側(cè)緣佘氏蠊形態(tài)學鑒定的體視顯微鏡照片

2.2 分子生物學結(jié)果

分子生物學方法鑒定結(jié)果與形態(tài)學鑒定結(jié)果完全一致。待鑒定的4個樣品中與公用數(shù)據(jù)庫中側(cè)緣佘氏蠊的最高相似度為100%，最低相似度為99.24%，詳見表1，根據(jù)DNA條形碼的鑒定規(guī)則待鑒定樣品可以判斷為側(cè)緣佘氏蠊。

表1 待鑒定樣品與相似種類序列比較信息

圖2 待鑒定樣品和相近種類的N-J樹

3 討論

目前的研究文獻表明，側(cè)緣佘氏蠊在我國及新疆尚無分布與發(fā)生，也未見有相關的文獻報道，僅2015年10月，天津東疆檢驗檢疫局對來自新加坡的進境空集裝箱中檢出一只雌性，2017年10月，河北檢驗檢疫局京唐港辦事處在對一批來自美國的廢紙實施現(xiàn)場查驗時，檢出一只雌性，經(jīng)昆蟲分類專家鑒定為側(cè)緣佘氏蠊。在1992年阿拉山口口岸開放前，口岸是沒有蜚蠊的，自2005年發(fā)現(xiàn)德國小蠊、擬德國小蠊入侵，后來德國小蠊在該口岸形成種群，2016—2017年在入境的集裝箱中先后2次采集到美洲大蠊2只(尹小平等，2011)。該次是首次發(fā)現(xiàn)側(cè)緣佘氏蠊，根據(jù)調(diào)查結(jié)果分析，此次發(fā)現(xiàn)的側(cè)緣佘氏蠊是否早已通過交通工具入侵至阿拉山口口岸還有待調(diào)查研究。蜚蠊不僅適應性強、活動范圍廣、食性雜、繁殖能力強，重要的是可攜帶多種病原體，被認為是“都市害蟲”“倉庫害蟲”，與人的關系極為密切(Milleretal., 2004)，它不僅能偷吃食物，損害衣物等，而且實驗證明它還是人類多種疾病的媒介昆蟲，可以攜帶傳染傷寒、結(jié)核、麻風、鼠疫等40種病菌，以及鉤蟲、蛔蟲等7種寄生蟲(胡修元，1999)。多年來國內(nèi)外報導，從其體內(nèi)外分離出大量的細菌、病毒、寄生蟲卵，體內(nèi)外可攜帶大量的致病菌，污染人們的生活環(huán)境，影響人們的身體健康。它的排泄物、尸體等，人接觸后會產(chǎn)生過敏反應，主要表現(xiàn)在皮膚和哮喘病上(Rosenstreichetal.,1997; Arrudaetal., 2001)。為此從1940年開始，蟑螂被列入醫(yī)學昆蟲，是口岸重點監(jiān)測的病媒昆蟲之一，極易造成有害生物入侵，甚至傳播人類傳染病(Matsuietal., 2003)。據(jù)相關資料報道，一只剛出生的側(cè)緣佘氏蠊需要大約2～3個月達到性成熟，成體后一般能活12～18個月，它們產(chǎn)卵繁殖，一般一個卵夾能孵化20～30只幼體(吳福楨，1987)。值得注意的是雄性的成年側(cè)緣佘氏蠊不僅爬行速度快，而且具有一定的飛行能力，故遷移、逃脫的問題還是需要關注。由于該種是熱帶蜚蠊，對物種的入侵威脅，是否造成在阿拉山口口岸、在國內(nèi)大陸種群的形成等問題還有待調(diào)查。為防止外來有害生物入侵，邊境口岸海關系統(tǒng)將繼續(xù)加大對交通工具、進口貨物的檢疫查驗力度，加強衛(wèi)生除害處理及后續(xù)監(jiān)管，降低疫情傳入風險，保障國門安全。