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磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法在乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用觀察

2020-08-24 13:26:22張昌森嚴(yán)子泳
關(guān)鍵詞:免疫吸附化學(xué)發(fā)光微粒

張昌森 嚴(yán)子泳

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染引發(fā)的傳染性疾?。?]。乙型肝炎病毒是廣泛存在于肝臟各個(gè)部位的嗜肝病毒,會(huì)損傷肝臟,引發(fā)肝細(xì)胞炎癥和壞死,嚴(yán)重者還會(huì)出現(xiàn)癌癥,威脅患者的生命健康[2]。采取快速、準(zhǔn)確的方法檢測(cè)乙型肝炎病毒感染有利于限制病毒的傳播和臨床治療。乙型肝炎病毒感染患者血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)是診斷乙型肝炎常用的指標(biāo)[3]。因此,本研究探討磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法在乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月~2019年12月于本院收治的200例乙型肝炎病毒感染患者作為研究對(duì)象,其中男114例,女86例;年齡21~68 歲,平均年齡(45.63±9.29)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合乙型肝炎病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];②認(rèn)知、語(yǔ)言及精神功能正常;③患者知情并簽署同意書(shū);④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并惡性腫瘤、造血功能障礙者;②合并腎、腦、心、肝等器官嚴(yán)重?fù)p傷者;③妊娠或哺乳期婦女。

1.2 方法 所有患者均使用磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清學(xué)標(biāo)志物。于清晨空腹抽取患者靜脈血4 ml,離心后取上清液于冰箱冷藏,冷藏溫度-20℃。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè):使用酶標(biāo)分析儀(深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司,型號(hào)RT-600),嚴(yán)格按照試劑和儀器進(jìn)行操作,對(duì)乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)內(nèi)容包括HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb。磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法:使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀(鄭州安圖生物工程股份有限公司,型號(hào)AutoLumo A2000 plus)檢測(cè)HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 比較兩種檢測(cè)方法血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性率。酶聯(lián)免疫吸附法陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn):以O(shè)D 值/臨界OD 值作為參考,OD 值/臨界OD 值≥1.00,HBsAb、HBsAg、HBeAg為陽(yáng)性;OD 值/臨界OD 值<1.00,HBeAb、HBcAb 為陽(yáng)性。磁磁微粒化學(xué)發(fā)光法陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn):HBsAb≥10 IU/ ml 為陽(yáng)性;HBsAg≥0.05 IU/ ml 為陽(yáng)性;相對(duì)光單位(RLU)/臨界RLU≥0.01 時(shí)HBeAg、HBcAb 為陽(yáng)性;RLU/臨界RLU<1.00 時(shí)HBeAb 為陽(yáng)性。

1.3.2 比較兩種檢測(cè)方法的診斷準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性率比較 磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAb、HBcAb 陽(yáng)性率分別為50.50%、38.00%,均高于酶聯(lián)免疫吸附法的36.50%、26.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩種檢測(cè)方法的HBsAg、HBeAg、HBeAb 陽(yáng)性率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩種檢測(cè)方法血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性率比較[n(%),n=200]

2.2 兩種檢測(cè)方法診斷準(zhǔn)確率比較 磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法診斷準(zhǔn)確率96.50%高于酶聯(lián)免疫吸附法的84.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩種檢測(cè)方法診斷準(zhǔn)確率比較[n(%),n=200]

3 討論

乙型肝炎病毒具有耐紫外線、耐低溫、耐熱等特點(diǎn),乙型肝炎病毒感染是具有高發(fā)病率的傳染性疾病[5]。乙型肝炎病毒感染患者救治不及時(shí),病毒會(huì)在肝細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制及繁殖,損傷肝臟,導(dǎo)致肝硬化、乙型肝炎[6]。任何年齡段群體都可能出現(xiàn)乙型肝炎病毒感染,現(xiàn)階段診斷及治療乙型肝炎病毒感染仍是臨床研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。臨床常使用血清標(biāo)志物反映患者的免疫功能損傷程度,HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 等血清標(biāo)志物能體現(xiàn)患者體內(nèi)乙型肝炎病毒水平,是臨床檢測(cè)乙型肝炎病毒感染的參考指標(biāo)[7]。血清標(biāo)志物能夠幫助診斷乙型肝炎病毒感染,有利于給予針對(duì)性治療,改善患者生存情況。

酶聯(lián)免疫吸附法是臨床檢測(cè)乙型肝炎病毒感染的常用方法,具有檢測(cè)花費(fèi)低、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)[8]。酶聯(lián)免疫吸附法能連接酶與待檢測(cè)物引發(fā)特異性反應(yīng),進(jìn)行檢測(cè)。但酶聯(lián)免疫吸附法在試劑的制作工藝、保存方法等因素影響下穩(wěn)定性相對(duì)較差,發(fā)生誤診的可能性升高。磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法是免疫發(fā)光檢測(cè)的一種方法,利用免疫測(cè)定技術(shù)和化學(xué)發(fā)光技術(shù)對(duì)抗原/抗體水平進(jìn)行定量或半定量檢測(cè)具有重復(fù)性高、檢測(cè)范圍廣、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)[9]。

本研究結(jié)果顯示,磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAb、HBcAb 陽(yáng)性率分別為50.50%、38.00%,均高于酶聯(lián)免疫吸附法的36.50%、26.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);由此提示磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法對(duì)乙型肝炎病毒感染患者血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確率較高。磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法將堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體、待測(cè)抗原、異硫氰酸熒光素標(biāo)記抗體形成復(fù)合物,利用抗熒光素抗體的磁性微粒將復(fù)合物和未結(jié)合的物質(zhì)進(jìn)行分離,對(duì)沉淀復(fù)合物進(jìn)行清洗后加入酶促化學(xué)發(fā)光底物,在酶的作用下底物裂解成激發(fā)態(tài)中間體,在回到基態(tài)的過(guò)程中出現(xiàn)發(fā)光反應(yīng),利用發(fā)光儀對(duì)發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)。此外,酶聯(lián)免疫吸附法受孵育時(shí)間、溫度等因素的干擾,加上人工進(jìn)樣,檢測(cè)過(guò)程可能出現(xiàn)非特異性反應(yīng),嚴(yán)重影響診斷的準(zhǔn)確率[10]。磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法的檢測(cè)試劑全為原裝配套,且采取自動(dòng)進(jìn)樣,能夠有效避免人為因素造成的誤差,提升了診斷的準(zhǔn)確率,具有良好的重復(fù)性。

綜上所述,磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法在乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)中具有良好的應(yīng)用價(jià)值,但磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法能夠提升檢測(cè)的準(zhǔn)確率,為臨床診療提供依據(jù)。

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