朱義朗，徐元宏，汪小五，李梅，高勇△

新型冠狀病毒（severe acute respiratory syndyome coronavirus 2，SARS-CoV-2）感染引起的新型冠狀病毒肺炎（coronavirus disease 2019，COVID-19）已在全球范圍內(nèi)廣泛流行［1-2］。該病傳染性極強(qiáng)，人群普遍易感，呼吸道及接觸傳染可能是其主要的傳播方式［3］。目前，COVID-19尚無特效的治療手段，早期發(fā)現(xiàn)和診斷顯得尤為重要。根據(jù)實驗室檢測數(shù)據(jù)篩查并確診COVID-19 是診療的關(guān)鍵［4］。本文通過分析COVID-19 患者血常規(guī)及淋巴細(xì)胞亞群CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞的變化，為COVID-19 的診斷和治療提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2020 年1 月—2 月在阜陽市第二人民醫(yī)院收治的COVID-19 確診患者66 例，男35 例，女31 例，年齡2～82歲，平均（40.10±17.29）歲；選擇同期在本院隔離的疑似COVID-19 并經(jīng)多次實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）檢測SARS-CoV-2 核酸陰性者56 例作為對照組，男28例，女28例，年齡1～77歲，平均（30.23±19.84）歲。COVID-19 組年齡高于對照組（t=2.937，P＜0.05），2 組性別比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.111，P＞0.05）。

1.2 方法 采集所有研究對象的空腹靜脈血于2 支EDTAK2抗凝管中，1 支在sysmex XE-2100 血球計數(shù)儀上采用sysmex 配套試劑進(jìn)行血常規(guī)分析；另1支抗凝血在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析，儀器及配套試劑購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 24.0 進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計量資料以表示，組間比較采用2 獨立樣本t檢驗，非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)和四分位數(shù)［M（P25，P75）］表示，組間比較采用Mann WhitneyU檢驗；計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。使用Logistic 回歸分析COVID-19 患病的血液細(xì)胞學(xué)影響因素，采用Spearman 系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血常規(guī)及淋巴細(xì)胞亞群水平比較 與對照組相比，COVID-19組白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞（NEU）、淋巴細(xì)胞（LYM）、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞水平降低（P＜0.05）；單核細(xì)胞（MONO）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血小板計數(shù)（PLT）、中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）、CD4+T/CD8+T組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

Tab.1 Comparison of blood routine items and lymphocyte subgroup levels between the two groups of ppatients表1 2組患者血常規(guī)及淋巴細(xì)胞亞群水平比較

2.2 COVID-19患病的血液細(xì)胞學(xué)影響因素 以是否罹患COVID-19 為因變量（是=1，否=0），以WBC、NEU、LYM、CD4+T 細(xì)胞、CD8+T 細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞為自變量，進(jìn)行Logistic 回歸分析，結(jié)果表明僅CD4+T細(xì)胞計數(shù)升高是COVID-19 患病的保護(hù)因素，見表2。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞與LYM呈正相關(guān)（rs分別為0.829和0.771，P＜0.01）。

Tab.2 Multifactor analysis of risk factors for COVID-19表2 COVID-19患病危險因素的多因素分析

3 討論

冠狀病毒是常見的呼吸道感染病原體之一。由于人類社會活動的多樣化，跨地區(qū)、跨國間的交流日益增多，冠狀病毒在跨物種之間的傳播可能性也隨之增加［5］。此次出現(xiàn)的SARS-CoV-2 是一種高度變異的新型冠狀病毒［2］。COVID-19 的臨床表現(xiàn)與以往常見的呼吸道病毒感染肺炎癥狀相似［6］。患者發(fā)熱、干咳以及腹瀉癥狀較明顯，?？砂l(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），可導(dǎo)致少數(shù)患者死亡［7］。SARS-CoV-2感染與常見呼吸道病毒感染的血液指標(biāo)改變具有高度一致性，包括WBC 及LYM 的減少，CD4+T細(xì)胞及CD8+T淋巴細(xì)胞計數(shù)下降［8-9］。本研究通過分析COVID-19患者血常規(guī)項目及淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SARS-CoV-2感染后WBC、NEU、LYM、CD4+T 細(xì)胞、CD8+T 細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞計數(shù)下降。隨著年齡的增大，特別是一些患有高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾病的老年人，其免疫功能也隨之下降，機(jī)體的免疫細(xì)胞數(shù)量也有可能在減少，這些因素疊加到一起，造成機(jī)體防御病原體入侵的能力不足，導(dǎo)致發(fā)生感染的可能性大大增加。

免疫系統(tǒng)是機(jī)體的安全屏障，而各類免疫細(xì)胞是它的“成員”。病原體入侵機(jī)體后，促使免疫細(xì)胞釋放大量的細(xì)胞因子，作用于細(xì)胞表面的特異性受體，聯(lián)絡(luò)免疫細(xì)胞和多種細(xì)胞因子之間的表達(dá)，調(diào)控免疫應(yīng)答的速度和程度。多數(shù)COVID-19患者可能是由于機(jī)體未能及時清除SARS-CoV-2，活躍過度的免疫應(yīng)答造成持續(xù)性免疫細(xì)胞損傷，進(jìn)而出現(xiàn)CD4+T 及CD8+T 細(xì)胞的下降［10］。本研究將WBC、NEU、LYM、CD4+T 細(xì)胞、CD8+T 細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞納入進(jìn)行多因素Logistic 回歸分析，結(jié)果表明只有CD4+T 細(xì)胞下降是COVID-19 患病的獨立危險因素。SARS-CoV-2 很可能主要作用于淋巴細(xì)胞，尤其是T淋巴細(xì)胞，這也是冠狀病毒感染的特征之一。T 淋巴細(xì)胞計數(shù)的減少提示SARS-CoV-2 消耗了大量的免疫細(xì)胞并且抑制機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，可能是COVID-19發(fā)病的主要因素［11］。由于基層醫(yī)院臨床實驗室檢測存在局限性，很難滿足T 細(xì)胞亞群的普遍檢測，所以筆者研究了CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞計數(shù)與血常規(guī)常見指標(biāo)LYM 的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)2 個指標(biāo)呈正相關(guān)，提示可以通過LYM水平從一定程度反映CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞水平。因此，對于COVID-19 患者，實驗室檢測血常規(guī)項目及CD4+T細(xì)胞的計數(shù)顯得尤為重要。

由于目前尚無針對COVID-19的特效藥和治療手段，因此適當(dāng)采用免疫增強(qiáng)劑以提高患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能，必要時輸注已痊愈患者的血漿進(jìn)行免疫抗體補(bǔ)充，以誘發(fā)機(jī)體對抗SARS-CoV-2 的免疫清除，可能是治療COVID-19的新途徑。