杜媛媛

【摘? 要】目的： 分析染色體微陣列技術對于胎兒先天性心臟?。╟ongenital heart defect，CHD）產(chǎn)前診斷的價值，為提高CHD的產(chǎn)前檢出率降低懷孕風險提供參考。方法：選擇在我院經(jīng)超聲檢查確診為胎兒CHD的單胎孕婦89例，診斷時間為2016年8月至2019年8月，先對符合研究條件的89例胎兒進行染色體核型分析，再用染色體微陣列（chromosome microarray analysis，CMA）檢測核型分析無異常的胎兒，將檢測數(shù)據(jù)與國際公共數(shù)據(jù)庫中的指標對比，對拷貝數(shù)變異（copy number variants，CNVs）性質(zhì)進行判斷。結果：經(jīng)染色體核型分析，有6例胎兒的染色體顯示異常，檢出率為6.74%（6/89），用CMA檢測其余83例核型分析正常的胎兒。從心臟單發(fā)異常的胎兒中檢測到1例致病性CNVs，為Xp22.33微重復（369.51kb），檢出率為2.00%（1/50）;從心臟復雜異常的胎兒中檢測出2例致病性CNVs，分別為Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），檢出率為6.06%（2/33）。結論： 染色體核型分析無法實現(xiàn)對全基因組的快速檢測，對于亞顯微的異常染色體以及未知染色體的檢測效果不理想。CMA技術具有較高的分辨率，可以明顯提高致病性CNVs的檢出率，對于CHD胎兒的產(chǎn)前診斷有重要價值。

【關鍵詞】染色體微陣列;產(chǎn)前診斷;先天性心臟病

先天性心臟?。╟ongenital heart defect，CHD）是新生兒中發(fā)病率較高的一種先天缺陷疾病，其發(fā)生和染色體異常（微缺失、微重復等）或者基因突變密切相關，因此對CHD的研究需要與全基因測序以及遺傳學等內(nèi)容聯(lián)系起來，以應用于臨床的診斷和治療中。染色體微陣列（chromosome microarray analysis，CMA）與傳統(tǒng)染核型分析相比，具有分辨率高，檢測快等優(yōu)勢，臨床診斷一般先進行核型分析，如果未發(fā)現(xiàn)異常，再進行CMA檢測，以進一步提高診斷的準確率。為進一步了解CMA對產(chǎn)前診斷CHD的價值，進行如下研究。

1 資料和方法

1.1基本資料

選擇經(jīng)我院超聲檢查確診胎兒CHD的單胎孕婦89例，診斷時間為2016年8月至2019年8月。年齡分布：20～30歲64.04%（57/89），31～38歲35.96%（32/89），中位年齡（28.3±1.6）歲，20周≤孕周≤31周，平均（25.8±1.3）周，包括胎兒心臟單發(fā)異常54例，復雜異常35例。排除影響研究結果合理性的其他因素，開展研究前醫(yī)生將研究相關事項均詳細告知孕婦及家屬，經(jīng)其同意后開展研究。

1.2方法

核型分析：抽取胎兒臍血并進行血細胞離心處理，將細胞培養(yǎng)10天至14天，在生長良好的狀態(tài)下加入秋水仙堿，收集細胞，用G顯帶方法觀察染色體，確定其核型。再用CMA檢測核型分析無異常的細胞：選擇USA生產(chǎn)的Affymetrix品牌CytoScan 750k芯片試劑盒，拷貝數(shù)探針數(shù)量約75萬，SNPs探針數(shù)量約20萬，可以全面覆蓋已知基因。將檢測的結果用Affymetrix配套的芯片平臺軟件進行分析，得到的數(shù)據(jù)與國際公共數(shù)據(jù)庫中的指標對比，對CNVs性質(zhì)進行判斷。所有操作保證在無菌狀態(tài)下進行，本研究中CNVs閾值為300kb，同時對新生兒進行3～6個月隨訪。

2 結果

2.1核型分析：89例檢測結果中有6例胎兒的染色體顯示異常，檢出率為6.74%（6/89）。見表1。

2.2 CMA檢測：83例核型檢測正常的對象中，從心臟單發(fā)異常的胎兒中檢測到1例致病性CNVs，為Xp22.33微重復（369.51kb），檢出率為2.00%（1/50）;從心臟復雜異常的胎兒中檢測出2例致病性CNVs，分別為Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），檢出率為6.06%（2/33）。

2.3 隨訪結果：單發(fā)異常的54例胎兒中共有39例生產(chǎn)，15例引產(chǎn)（3例核型異常、1例致病性CNVs、11例孕婦要求）;復雜異常的35例胎兒均實施引產(chǎn);進行3～6個月隨訪未發(fā)現(xiàn)新生兒有其他異常。

3 討論

G顯帶技術可以對400至550條染色體帶進行核型分析，對于10Mb以上的染色體異?？梢詼蚀_的檢測，但是對于異常不明顯的染色體往往無法精確檢測。而CMA的檢測速度、基因覆蓋面以及分辨率都明顯高于傳統(tǒng)核型分析技術，因此可以作為進一步判斷染色體是否異常的重要依據(jù)，可提高核型正常的CHD胎兒檢出率，為進行準確的產(chǎn)前風險評估提供數(shù)據(jù)參考。

綜上所述，染色體核型分析無法實現(xiàn)對全基因組的快速檢測，對于亞顯微的異常染色體以及未知染色體的檢測效果不理想。CMA技術對于核型正常染色體的微缺失或者微重復等異常的檢測更為精確，可及時發(fā)現(xiàn)產(chǎn)前CHD，對于降低孕期風險保障分娩安全有重要價值。

參考文獻

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