劉潤麗

【摘要】 目的：探討吉西他濱聯(lián)合依立替康對宮頸癌患者血管生成與侵襲能力的影響。方法：選取2018年4月-2019年10月本院收治的宮頸癌患者76例，按照抽簽法分為對照組（n=38）與研究組（n=38）。對照組實(shí)施單一依立替康治療，研究組在對照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合吉西他濱治療。比較兩組治療效果、侵襲能力、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、腫瘤微血管密度及不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果：研究組治療總有效率明顯高于對照組（P<0.05）。兩組病灶組織的細(xì)胞外因子蛋白（Wnt）1、Wnt3a、Wnt8、β-鏈蛋白水平、VEGF與腫瘤微血管密度均明顯高于健康組織（P<0.05）;研究組病灶組織Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-鏈蛋白水平、VEGF與腫瘤微血管密度均低于對照組病灶組織（P<0.05）。兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：吉西他濱聯(lián)合依立替康治療宮頸癌患者效果顯著，可改善VEGF水平，降低癌細(xì)胞的侵襲能力，且安全性較高，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 吉西他濱 依立替康 宮頸癌 血管生成

Effect of Gemcitabine Combined with Irinotecan on Angiogenesis and Invasive Ability of Patients with Cervical Cancer/LIU Runli. //Medical Innovation of China， 2020， 17（15）： 0-053

[Abstract] Objective： To investigate the effect of Gemcitabine combined with Irinotecan on angiogenesis and invasive ability of patients with cervical cancer. Method： A total of 76 patients with cervical cancer treated in our hospital from April 2018 to October 2019 were selected. They were divided into control group （n=38） and study group （n=38） according to the lottery method. The control group was treated with Irinotecan alone， and the study group was treated with Gemcitabine on the basis of the control group. The therapeutic effect， invasive ability. vascular endothelial growth factor （VEGF）， tumor microvascular density and adverse reactions were compared between the two groups. Result： The total effective rate of treatment in the study group was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. The levels of Wnt1， Wnt3a， Wnt8， β-chain protein， VEGF and tumor microvascular density of focus tissues in the two groups were significantly higher than those in the healthy tissues （P<0.05）. The levels of Wnt1， Wnt3a， Wnt8， β-chain protein， VEGF and tumor microvascular density of focus tissues in the study group were lower than those of focus tissues in the control group （P<0.05）. There was no statistically significant difference in the incidence of adverse reactions between the two groups （P>0.05）. Conclusion： Gemcitabine combined with Irinotecan has a significant effect in the treatment of cervical cancer patients， which can improve the level of VEGF and reduce the invasion ability of cancer cells and has a high safety. It is worth of promoting its application.

[Key words] Gemcitabine Irinotecan Cervical cancer Angiogenesis

First-authors address： Jiamusi University Grand Hospital， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.15.013

目前，宮頸癌在婦科惡性腫瘤中已十分常見，在早期臨床上主要采用手術(shù)切除的方法對其進(jìn)行有效治療，而單純的手術(shù)治療后易出現(xiàn)復(fù)發(fā)的情況，因此需進(jìn)行放療、化療等輔助治療，不僅可以促進(jìn)腫瘤體積縮小，還可以使癌細(xì)胞增殖能力明顯降低，有效控制疾病的復(fù)發(fā)[1]。目前，對于宮頸癌的早、中期患者來說，臨床主要采用手術(shù)病灶切除聯(lián)合放化療進(jìn)行治療[2]。隨著醫(yī)療技術(shù)水平的發(fā)展進(jìn)步，出現(xiàn)了新型的化療藥物，使宮頸癌治療效果有了進(jìn)一步提高的希望。吉西他濱就是新型抗代謝類抗癌藥物之一，是治療胰腺癌和非小細(xì)胞癌的一線藥物，同時是治療宮頸癌的二線藥物。吉西他濱對胰腺癌、肝癌、非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)的β-鏈蛋白和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）具有明顯的調(diào)控作用，除此之外還可以對細(xì)胞增殖及腫瘤血管生產(chǎn)進(jìn)行有效阻礙[3]。國內(nèi)外對吉西他濱治療宮頸癌的相關(guān)研究較少，其具體機(jī)制目前還未明確。本研究對宮頸癌患者采用吉西他濱聯(lián)合依立替康進(jìn)行治療，探討其對患者血管生成及侵襲能力的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年4月-2019年10月本院宮頸癌患者76例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)臨床確診為宮頸癌;（2）術(shù)后病理確診為早、中期宮頸癌;（3）神志清醒，具有一定文化水平，可進(jìn)行正常溝通交流。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并腎臟或其他嚴(yán)重疾病;（2）依從性較差或拒絕參與本次研究;（3）非第一次進(jìn)行放、化療或手術(shù);（4）妊娠期或哺乳期婦女。按照抽簽法分為對照組（n=38）與研究組（n=38）。所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 對照組實(shí)施單一依立替康治療。靜脈滴注100 mg/m2的依立替康（生產(chǎn)廠家：上海創(chuàng)諾制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20123191，規(guī)格：2 mL︰40 mg），第1～8天靜脈滴注時間以1.5 h為宜。研究組在對照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合吉西他濱進(jìn)行治療。依立替康的用法用量與對照組完全相同。靜脈滴注100 mg/m2的吉西他濱（生產(chǎn)廠家：哈藥集團(tuán)生物工程有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20113398，規(guī)格：1.0 g），第1～8天靜脈滴注時間以1.5 h為宜。兩組均治療4個療程，1個療程21 d。治療2個療程后，兩組施子宮切除術(shù)和盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)，切緣與腫瘤組織邊緣間距1.5 cm以上。在治療期間為了縮小治療結(jié)果的誤差，兩組嚴(yán)禁使用其他治療藥物及方法。保持患者周圍環(huán)境及衣物的干凈整潔，飲食上以清淡易消化為主，多吃高蛋白高纖維的食物，多吃水果、蔬菜。在患者出現(xiàn)負(fù)性情緒時要適當(dāng)給予心理安慰及疏導(dǎo)。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn) （1）比較兩組治療效果。以國際抗癌聯(lián)盟實(shí)體瘤療效為依據(jù)對兩組治療效果進(jìn)行評估。完全緩解（CR）：經(jīng)治療臨床癥狀完全消失，病灶及癌細(xì)胞完全消失;部分緩解（PR）：臨床癥狀得到明顯緩解，病灶體積縮小35%及以上;穩(wěn)定（SD）：臨床癥狀無明顯緩解，病灶體積縮小35%以下或無增加;進(jìn)展（PD）：臨床癥狀明顯嚴(yán)重，病灶體積增加或出現(xiàn)新病灶[4]?？傆行?CR+PR。（2）比較兩組侵襲能力。包括細(xì)胞外因子蛋白（Wnt）1、Wnt3a、Wnt8與β-鏈蛋白水平。（3）比較兩組VEGF與腫瘤微血管密度。將兩組病灶及病灶周圍健康組織進(jìn)行局部切除并實(shí)施免疫組化染色，對CD34+表達(dá)數(shù)進(jìn)行測定，作為腫瘤微血管密度。將切片用常規(guī)石蠟進(jìn)行包埋，在進(jìn)行脫蠟處理使用水和磷酸緩釋液進(jìn)行沖洗，在微波熱修復(fù)，使用滅活內(nèi)源性過氧化物（3.0%過氧化氫），山羊血清封閉，滴加一抗，取1/50濃度為宜，稀釋液選用磷酸緩釋液，將溫度設(shè)為4 ℃孵育過夜，隨后用磷酸緩釋液沖洗，滴加二抗，濃度以1/100為宜，進(jìn)行15 min的孵育溫度為37 ℃，二氧基聯(lián)苯胺顯色，陽性：蘇木精復(fù)染為棕色。在低倍鏡下取5個著色理想?yún)^(qū)域，高倍鏡下計數(shù)，著色區(qū)不管是否存在管腔均視為1條新生血管，最終結(jié)果為總新生血管數(shù)/5。術(shù)中切除的兩組病灶及病灶周圍健康組織按照1︰9質(zhì)量比混入0.9%氯化鈉注射液中，電動勻漿，離心后取上清液，采用全自動生化分析儀同時選用配套的試劑盒，用酶聯(lián)免疫吸附測定VEGF、Wnt1、Wnt3a、Wnt8與β-鏈蛋白水平[5-6]。（4）比較兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況，包括胃腸道反應(yīng)、局部疼痛及骨髓抑制。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 24.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn);計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對照組年齡34～64歲，平均（48.4±3.1）歲;病程3個月～3年，平均（1.7±0.4）年;其中鱗癌31例，腺癌7例。研究組年齡33～64歲，平均（48.6±3.2）歲;病程3個月～3年，平均（1.9±0.3）年;其中鱗癌29例，腺癌9例。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組治療效果比較 研究組治療總有效率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（字2=5.684，P<0.05），見表1。

2.3 兩組侵襲能力比較 兩組健康組織的Wnt1、Wnt3a、Wnt8與β-鏈蛋白水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩組病灶組織的Wnt1、Wnt3a、Wnt8與β-鏈蛋白水平均明顯高于健康組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。研究組病灶組織的Wnt1、Wnt3a、Wnt8與β-鏈蛋白水平均低于對照組病灶組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4 兩組VEGF與腫瘤微血管密度比較 兩組健康組織的VEGF與腫瘤微血管密度比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩組病灶組織VEGF與腫瘤微血管密度均高于健康組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。研究組病灶組織VEGF與腫瘤微血管密度均低于對照組病灶組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2.5 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（字2=0.256，P>0.05），見表4。

3 討論

在惡性腫瘤中有13%的患者為宮頸癌，在婦科臨床中該疾病發(fā)生率略低于乳腺癌，位居第二位，是臨床中較為常見的惡性腫瘤之一。對于宮頸癌患者來說化療在治療中十分重要[7-8]。相關(guān)研究結(jié)果顯示，中早期宮頸癌患者在實(shí)施相關(guān)治療后采用化療進(jìn)行輔助治療可改善術(shù)后5年內(nèi)的存活率[9]。

吉西他濱主要是由鹽酸雙氟脫氧胞苷組成，主要作用于DNA合成期，對癌癥疾病的進(jìn)展有明顯的阻礙作用[10-11]。尤其在腫瘤中期患者中吉西他濱新輔助化療較為常用，在抑制淋巴結(jié)擴(kuò)散、減小腫瘤體積有顯著效果，適用于由于各種原因無法接受手術(shù)治療的患者，與放化療聯(lián)合使用臨床效果較為突出[12-13]。本研究結(jié)果顯示，研究組臨床治療總有效率明顯高于對照組（P<0.05）。除此之外，該藥物在對胰腺癌和肝癌、非小細(xì)胞肺癌及宮頸癌患者體內(nèi)的VEGF和β-鏈蛋白，對腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和新生血管生成均有良好的抑制作用。

相關(guān)研究結(jié)果顯示，吉西他濱可對宮頸癌細(xì)胞侵襲進(jìn)行抑制，其主要原因是該藥物可使miR-497表達(dá)得到增強(qiáng)[14];有研究學(xué)者指出，吉西他濱對宮頸癌組織局部抗/促凋亡因子方面有著調(diào)整作用，可加速癌細(xì)胞凋亡，但對于抗血管生成、抗細(xì)胞侵襲的關(guān)聯(lián)性尚未給出統(tǒng)一結(jié)論[15]。腫瘤的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)就是血管生成，對生物學(xué)行為正常發(fā)揮起到至關(guān)重要的作用[16]。VEGF對血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖、向新生血管轉(zhuǎn)化有著促進(jìn)效果，給腫瘤細(xì)胞增殖提供良好的微環(huán)境[17]。目前開發(fā)腫瘤血管生成抑制劑主要是以VEGF及其受體為靶點(diǎn)進(jìn)行研發(fā)，并取得十分理想的效果[18]。腫瘤的與發(fā)生及進(jìn)展直接受到Wnt信號通路的影響，也可以直接反映出腫瘤的侵襲情況及惡性程度，其中最為經(jīng)典的通路為Wnt/β-catenin，被證實(shí)宮頸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移需要該通路的全程參與。β-catenin定位于染色體3p21-p22，也是目前調(diào)節(jié)Wnt信號通路最重要的因子，若β-catenin處于低表達(dá)狀態(tài)，Wnt通路則是呈現(xiàn)關(guān)閉狀態(tài)的，相反則Wnt通路呈開放狀態(tài)。β-catenin以Wnt1、Wnt3a、Wnt8為啟動因子。

本研究結(jié)果顯示，兩組病灶組織Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-鏈蛋白水平、VEGF與腫瘤微血管密度均明顯高于健康組織（P<0.05）。研究組病灶組織Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-鏈蛋白水平、VEGF與腫瘤微血管密度均低于對照組病灶組織（P<0.05）。相關(guān)研究顯示，腫瘤發(fā)生及進(jìn)展過程主要是有細(xì)胞外因子蛋白信號通路的參與，從而表達(dá)出腫瘤惡性程度及侵襲性，其中最為典型的通路為β-鏈蛋白，該通路是導(dǎo)致宮頸癌轉(zhuǎn)移和侵襲的主要通路[19-20]。

綜上所述，吉西他濱聯(lián)合依立替康治療宮頸癌患者效果顯著，可改善VEGF水平，降低癌細(xì)胞的侵襲能力，且安全性較高，值得推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2020-03-10） （本文編輯：田婧）