王建軍，趙 平，吳 亮，徐 哲，王福生，程勇前

(解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心 1. 國際肝病診療中心； 2. 感染性疾病診療與研究中心，北京 100039)

2019年12月，湖北省武漢市發(fā)生以肺部病變?yōu)橹鞯男掳l(fā)傳染病，張永振團(tuán)隊(duì)首次從患者收集的支氣管肺泡灌洗液中分離得到病原體并進(jìn)行全基因組測序，發(fā)現(xiàn)該病毒基因組與蝙蝠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)(GenBank登錄號(hào)AY278488.2)有79.5%的核苷酸相似性[1]。2020年1月11日世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)將這種病毒暫命名為2019-nCOV，2020年2月11日WHO宣布由新型冠狀病毒引發(fā)的疾病正式名稱為2019新型冠狀病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19),該病毒稱為嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)[2]。COVID-19短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散到全國，3月11日WHO宣布COVID-19已構(gòu)成全球大流行。實(shí)驗(yàn)室檢測是確診COVID-19的重要依據(jù)，對于該病的治療和防疫工作至關(guān)重要。本文對COVID-19實(shí)驗(yàn)室臨床診斷技術(shù)相關(guān)進(jìn)展進(jìn)行整理綜述。

1 病原學(xué)檢測

1.1 病毒分離 病原體鑒定主要包括病毒分離和病毒核酸檢測，其中病毒分離是實(shí)驗(yàn)室診斷病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。國內(nèi)有多個(gè)團(tuán)隊(duì)報(bào)道病毒分離結(jié)果，高福院士團(tuán)隊(duì)獲得COVID-19患者的支氣管肺泡灌洗液，將其接種至人氣管上皮細(xì)胞中進(jìn)行分離培養(yǎng)，通過透射電鏡觀察到病毒顆粒，將培養(yǎng)上清液進(jìn)行全基因組測序，并與基因庫比對確定分離出正確序列的SARS-CoV-2[3]。伍桂珍教授團(tuán)隊(duì)也選擇COVID-19支氣管肺泡灌洗液和咽拭子標(biāo)本接種至特殊致病性的人氣管上皮細(xì)胞(human airway epi-thelium, HAE)進(jìn)行病毒分離，應(yīng)用電子顯微鏡觀察病毒的形態(tài)，通過科赫法則初步鑒定病毒[4]。病毒分離耗時(shí)較長，對實(shí)驗(yàn)室條件要求高，不適合用于臨床患者的早期診斷，但準(zhǔn)確性高，對病毒鑒定、致病機(jī)制研究、疫苗研發(fā)和抗病毒藥物研制具有重要意義。

1.2 病毒核酸檢測

1.2.1 基因測序技術(shù) 高通量測序結(jié)合生物信息學(xué)分析可以快速識(shí)別病原體。2020年1月12日，我國學(xué)者將從患者體內(nèi)分離的SARS-CoV-2基因組序列提供給WHO[1]。對患者標(biāo)本病毒基因進(jìn)行測序，可以對病原體進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，并可以分析不同SARS-CoV-2病毒株基因組序列的同源性，但基因測序的成本相對較高，耗時(shí)較長，無法用于暴發(fā)流行期間大量疑似患者的快速診斷。病毒基因測序的重要意義在于病毒溯源、遺傳學(xué)進(jìn)化分析，以及病毒變異的研究，并可以作為確診SARS-CoV-2的病原學(xué)診斷依據(jù)之一。

由于病毒的高度變異性及病毒與參考基因組的偏差，對病毒數(shù)據(jù)分析鑒定速度的要求越來越高。Genome Detective是一個(gè)基于互聯(lián)網(wǎng)的軟件應(yīng)用程序[5]，可以快速、準(zhǔn)確地從第二代測序數(shù)據(jù)集中組裝所有已知的病毒基因組，允許以FASTA格式從組裝的基因組中鑒定系統(tǒng)發(fā)生簇和基因型。目前SARS-CoV-2的基因序列已在GeneBank中共享，Cleemput等[6]據(jù)此構(gòu)建了基因組檢測冠狀病毒分型工具，該工具可以準(zhǔn)確地識(shí)別世界各地分離的SARS-CoV-2序列，每次可接受2 000個(gè)序列的提交，對新的完整基因組序列的分析約需1 min。 該工具已對來自十種冠狀病毒的數(shù)百個(gè)全基因組進(jìn)行了測試和驗(yàn)證，并正確分類了所有與SARS相關(guān)的冠狀病毒(SARSr-CoV)和所有可用于COVID-19的公共數(shù)據(jù)。隨著疫情的蔓延，該工具還可以跟蹤新的病毒突變，有助于加速新型診斷試劑、藥物和疫苗的開發(fā)。

納米孔分析技術(shù)起源于Coulter計(jì)數(shù)器的發(fā)明以及單通道電流的記錄技術(shù)，與許多其他測序方法不同，納米孔測序不需要通過常見的化學(xué)熒光或酶反應(yīng)測試所檢測的樣品，而是采用測量分子通過納米孔時(shí)的電流中斷直接檢測單鏈DNA/RNA分子序列[7]。對病原體核酸進(jìn)行擴(kuò)增后使用納米孔測序儀進(jìn)行測序，將獲得的核酸序列與已知病原體序列對照以確定病原體類型，克服了傳統(tǒng)高通量測序平臺(tái)對樣本制備、場地要求、運(yùn)行時(shí)間長等不利因素，具備實(shí)時(shí)、運(yùn)行時(shí)間短、文庫構(gòu)建簡單等優(yōu)勢。武漢大學(xué)組建的聯(lián)合團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新性開發(fā)的納米孔靶向測序檢測方法，于2020年1月20日在臨床開展測序工作，能大幅提升病毒陽性檢出率，首次實(shí)現(xiàn)了在4 h內(nèi)獲得高敏感性、高準(zhǔn)確性SARS-CoV-2序列，較實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR)的陽性檢測率提升了43.8%；實(shí)現(xiàn)了同時(shí)檢測SARS-CoV-2和其他10類40種常見呼吸道病毒，以及監(jiān)測突變病毒[8]。2020年1月30日，中國疾病控制預(yù)防中心報(bào)道，應(yīng)用納米孔技術(shù)獲得了SARS-CoV-2的基因序列[4]。目前國內(nèi)也有多家公司宣布完成基于納米孔測序技術(shù)的SARS-CoV-2核酸全長檢測試劑盒的開發(fā)，已經(jīng)開始應(yīng)用于臨床COVID-19的快速診斷。SARS-CoV-2核酸基因測序技術(shù)的特征及應(yīng)用情況見表1。

表1 三種SARS-CoV-2基因測序技術(shù)的特征及應(yīng)用情況

1.2.2 PCR技術(shù) 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是RNA逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription, RT)與cDNA聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)相結(jié)合的技術(shù)。2020年1月23日德國Corman等[9]基于我國張永振團(tuán)隊(duì)上傳的SARS-CoV-2基因序列(GenBank MN908947)公布了SARS-CoV-2實(shí)時(shí)熒光RT-PCR(RT-qPCR)診斷測試方法和流程。此項(xiàng)工作被認(rèn)為是首個(gè)SARS-CoV-2診斷測試方法，并成為WHO SARS-CoV-2分子檢測試劑盒的基礎(chǔ)。PCR檢測方法主要針對SARS-CoV-2基因組中開放讀碼框1ab(open reading frame 1ab，ORF1ab)和核衣殼蛋白(nucleocapsid protein，NP)。SARS-CoV-2感染實(shí)驗(yàn)室確診需滿足以下兩項(xiàng)條件中的一項(xiàng)：(1)同一份標(biāo)本中SARS-CoV-2兩個(gè)靶標(biāo)(ORF1ab、N)RT-qPCR檢測結(jié)果均為陽性，如果出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽性的檢測結(jié)果，則需重新采樣，重新檢測；如果仍然為單靶標(biāo)陽性，判定為陽性。(2)兩種標(biāo)本RT-qPCR同時(shí)出現(xiàn)單靶標(biāo)陽性，或同種類型標(biāo)本兩次采樣檢測中均出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽性的檢測結(jié)果，可判定為陽性。

RT-PCT技術(shù)是目前疫情暴發(fā)期間快速確診SARS-CoV-2感染者的主要方法，但核酸檢測結(jié)果陰性并不能排除SARS-CoV-2感染，需排除可能產(chǎn)生假陰性的因素。試劑盒的特異度、靈敏度和穩(wěn)定性有待深入優(yōu)化與驗(yàn)證，試劑盒質(zhì)量也有待進(jìn)一步提升。2020年1月24日國內(nèi)首個(gè)商用SARS-CoV-2分子檢測試劑盒由上海之江生物科技有限公司完成，其后共有50多家生物科技公司開發(fā)出RT-PCR檢測試劑盒。有研究對多種國產(chǎn)SARS-CoV-2核酸檢測試劑盒的檢測性能進(jìn)行了比較與分析，結(jié)果顯示各試劑的檢測結(jié)果存在一定的差異[10]。常規(guī)RT-PCR SARS-CoV-2核酸檢測下限為50拷貝數(shù)/μL。最近，武漢大學(xué)藍(lán)柯團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用微滴式數(shù)字PCR(droplet digital, ddPCR)方法進(jìn)行SARS-CoV-2核酸檢測發(fā)現(xiàn)，ddPCR方法對SARS-CoV-2核酸檢測下限值至少為RT-PCR 1/500，且臨床檢測的總體準(zhǔn)確性為94.3%，提示ddPCR方法對COVID-19早期診斷及臨床治愈的判斷可能比常規(guī)RT-PCR檢測有更高的敏感性[11]。

2020年1月17日WHO臨時(shí)指導(dǎo)意見[12]建議，采集患者呼吸系統(tǒng)分泌物和血清標(biāo)本進(jìn)行SARS-CoV-2核酸檢測。門診患者可選擇鼻咽或咽拭子，如果有痰可選擇深咳痰，癥狀嚴(yán)重的患者可選擇支氣管或肺泡灌洗液。陳煒等[13]研究發(fā)現(xiàn)，痰標(biāo)本中可檢測出的SARS-CoV-2核酸量高于咽拭子標(biāo)本，表明痰標(biāo)本較咽拭子標(biāo)本可更好地診斷COVID-19，究其原因可能與SARS-CoV-2侵襲感染下呼吸道有關(guān)。另外，咽拭子檢測由于不易采集到足量、合格的標(biāo)本，故應(yīng)用咽拭子作為篩查SARS-CoV-2核酸的手段時(shí)，陰性檢測結(jié)果不能作為排除SARS-CoV-2感染的依據(jù)。因此，采集深咳痰標(biāo)本或者肺泡灌洗液，并以2個(gè)靶標(biāo)同時(shí)顯示陽性作為診斷標(biāo)準(zhǔn)為佳。2020年1月31日Holshue等[14]首次報(bào)道在確診病例的上呼吸道和糞便標(biāo)本中均檢出SARS-CoV-2，近期國內(nèi)有多項(xiàng)研究[15-16]發(fā)現(xiàn)患者糞便標(biāo)本SARS-CoV-2核酸檢測陽性。也有研究[17]發(fā)現(xiàn)感染后期肛門拭子陽性率高于咽拭子陽性率，提示SARS-CoV-2可能通過口-糞途徑傳播。檢測糞便標(biāo)本SARS-CoV-2核酸在確診COVID-19中也有重要意義。

1.2.3 CRISPR技術(shù) CRISPR技術(shù)發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)90年代初，并在發(fā)現(xiàn)7年后首次用于生物化學(xué)試驗(yàn)，迅速成為人類生物學(xué)、農(nóng)業(yè)和微生物學(xué)等領(lǐng)域最流行的基因編輯工具。CRISPR系統(tǒng)具有靶向RNA的特性，可以鑒定檢測標(biāo)本中是否存在特定的序列，從而達(dá)到檢測病原體的目的。2020年2月14日，麻省理工學(xué)院張峰團(tuán)隊(duì)[18]基于CRISPR-Cas13的檢測技術(shù)，將檢測方法開發(fā)成一種即時(shí)診斷產(chǎn)品。此診斷產(chǎn)品無需特定的檢測設(shè)備，僅通過類似于pH試紙測試方法，在1 h內(nèi)即可完成檢測，具有很高的靈敏度，病毒載量10～100個(gè)拷貝/μL即可檢測到。2020年3月2日Curti等[19]報(bào)道了基于CRISPR-Cas12技術(shù)開發(fā)的一種靈敏、快速、便攜式的SARS-CoV-2檢測技術(shù)。但國外開發(fā)的以上兩種方法尚未在臨床應(yīng)用。國內(nèi)Hou等[20]于2020年2月25日報(bào)道了基于CRISPR技術(shù)開發(fā)的一種快速檢測SARS-CoV-2的方法，并與宏基因組測序和RT-PCR檢測技術(shù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)CRISPR有接近單拷貝的敏感性，未發(fā)現(xiàn)假陽性情況，提示其有較高的敏感度和特異度；同時(shí)這種檢測方法耗時(shí)最短，僅為40 min，而RT-PCR則大約需1.5 h，基因組測序需20 h。CRISPR技術(shù)有很好的臨床實(shí)用性，可為COVID-19的診斷提供一種快捷、方便的方法。

1.2.4 其他分子診斷技術(shù) (1)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)技術(shù)是日本學(xué)者Notomi 等[21]于2000年發(fā)明的一種新的DNA擴(kuò)增技術(shù)，該方法可在等溫條件下高效、特異、快速地完成。通過一系列的鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，能在1 h內(nèi)將靶基因擴(kuò)增109倍，當(dāng)靶基因?yàn)镽NA時(shí)，該方法還可通過在反應(yīng)體系中添加反轉(zhuǎn)錄酶而實(shí)現(xiàn)對RNA的擴(kuò)增。2020年2月24日國內(nèi)尹秀山團(tuán)隊(duì)[22]報(bào)道了一種基于逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(reverse transcriptional loop-mediated isothermal amplification，RT-LAMP)技術(shù)的COVID-19檢測方法iLACO，可在15～40 min內(nèi)快速檢測SARS-CoV-2，其靈敏度與qPCR檢測方法相當(dāng)，并且iLACO帶有6個(gè)引物，能夠特異性地識(shí)別ORF1ab靶區(qū)的8個(gè)不同區(qū)域，由于引物設(shè)計(jì)的高度特異性，故不會(huì)產(chǎn)生假陽性結(jié)果。RT-PCR技術(shù)需2～43 h運(yùn)行時(shí)間，特殊的試驗(yàn)設(shè)備，可控的工作環(huán)境和訓(xùn)練有素的操作人員。與RT-PCR技術(shù)相比，iLACO方法快速、靈敏，利于病毒檢測試驗(yàn)的廣泛應(yīng)用，特別是在設(shè)施有限的發(fā)展中國家。(2)核酸即時(shí)檢測(point-of-care testing,POCT) 也可以解釋為靠近患者床旁的核酸檢測，醫(yī)生、護(hù)士，甚至患者本人都可以操作，操作者可在短時(shí)間內(nèi)完成核酸擴(kuò)增、信號(hào)收集與結(jié)果分析，快速的現(xiàn)場檢測避免了標(biāo)本采集、送檢等過多流程，縮短了病毒感染發(fā)現(xiàn)時(shí)間，可促進(jìn)藥物早期的合理應(yīng)用，是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中發(fā)展最快的領(lǐng)域之一。近年來，臨床對更快速、更廉價(jià)、更準(zhǔn)確檢測技術(shù)的需求，推動(dòng)這一市場不斷發(fā)展，現(xiàn)場PCR等各類分子檢測儀器設(shè)備也層出不窮。目前國內(nèi)已經(jīng)有企業(yè)應(yīng)用核酸POCT技術(shù)研發(fā)出可用于快速篩查的核酸POCT產(chǎn)品。中科院蘇州醫(yī)工所研發(fā)出一套針對SARS-CoV-2的現(xiàn)場快速核酸檢測系統(tǒng)，可定性現(xiàn)場即時(shí)檢測SARS-CoV-2核酸，約45 min即可得出結(jié)果。這類產(chǎn)品的開發(fā)與應(yīng)用，將大大提高COVID-19的診斷效率。SARS-CoV-2核酸檢測技術(shù)的特征及應(yīng)用情況見表2。

2 血清學(xué)檢測

目前COVID-19診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為病原學(xué)檢查，臨床最常見的為RT-PCR檢測，盡管RT-PCR檢測結(jié)果陽性可確診COVID-19，但由于各種原因存在假陰性可能，臨床出現(xiàn)過多次檢測結(jié)果為陰性之后復(fù)診為陽性的病例[23]。2020年1月17日WHO臨時(shí)指導(dǎo)意見建議，選擇血清檢測作為核酸檢測的補(bǔ)充，可選擇感染急性期血清和恢復(fù)期血清，結(jié)合血清特異抗體免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)/免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)檢測，可以明確患者近期或既往是否感染過SARS-CoV-2，有助于核酸檢測陰性但臨床癥狀疑似患者的進(jìn)一步確診[24]。通常在患者感染SARS-CoV-2后第7天血清中出現(xiàn)lgM，18 d后快速消失，其結(jié)果受限于抗體產(chǎn)生的時(shí)間和SARS-CoV-2載量。IgG特異性抗體在感染后18 d顯著上升，且IgG陽性表明機(jī)體有感染，但不能區(qū)分是現(xiàn)癥感染還是既往感染。即IgG陽性者可能是現(xiàn)癥感染也可能是既往感染，但體內(nèi)一旦產(chǎn)生抗體，就是感染過的標(biāo)志。

表2 幾種SARS-CoV-2核酸檢測技術(shù)特征及應(yīng)用情況

目前國內(nèi)上市的血清學(xué)檢測試劑盒是根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、化學(xué)發(fā)光法、膠體金技術(shù)等研制。ELISA是利用酶標(biāo)記抗原或抗體以檢測相應(yīng)抗原或抗體的一種免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、檢測速度快的特點(diǎn)，尤其適用于大批量標(biāo)本檢測，是國際認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)化診斷方法。Li等[25]應(yīng)用相當(dāng)于SARS-CoV-2的核蛋白(nucleoprotein， N)不同區(qū)域合成肽免疫動(dòng)物獲得多克隆和單克隆抗體，通過針對來自SARS-CoV-2、中東呼吸綜合征冠狀病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus， MERS-CoV)和SARS-CoV核蛋白的蛋白質(zhì)印跡分析評估SARS-CoV-2抗體的特異性，抗體用于SARS-CoV-2感染患者組織切片的免疫組織化學(xué)染色，可作為潛在的診斷工具。結(jié)果顯示多克隆抗SARS-CoV-2 NP抗體可以成功用作診斷SARS-CoV-2感染的工具。疫苗開發(fā)人員在制造參數(shù)優(yōu)化過程中可用該研究建立的夾心法ELISA試劑盒檢測培養(yǎng)物中的病毒表達(dá)水平。

化學(xué)發(fā)光法是通過標(biāo)記病毒的重組蛋白，捕獲血標(biāo)本中的病毒抗體IgM或IgG，再使用偶聯(lián)劑堿性磷酸酶特異抗原識(shí)別抗體。加入底物后會(huì)產(chǎn)生光信號(hào)，化學(xué)發(fā)光儀器通過高靈敏度的光電倍增管(photomultiplier tube，PMT)捕獲光子，從而實(shí)現(xiàn)pg(皮克)級別的高靈敏度檢測，具有可檢測全血，標(biāo)本采集感染風(fēng)險(xiǎn)低，操作簡單，檢測時(shí)間短，效率高及靈敏度高的特點(diǎn)。Cai等[26]報(bào)道了一種基于肽的磁性化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測血清中SARS-CoV-2的IgG和IgM抗體，該方法基于從基因組序列推導(dǎo)的20種候選肽中篩選出的S蛋白肽。使用合成肽作為抗原有助于增強(qiáng)測定的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，并且理論上比使用SARS-CoV-2作為抗原更具特異性。這種肽在檢測中顯示出非常好的特異性：感染SARS-CoV-2以外其他病原體的患者血清均未與該肽產(chǎn)生反應(yīng)，這種高特異性可歸因于該區(qū)域與其他冠狀病毒相對低的同源性。檢測血清SARS-CoV-2特異性IgM和IgG抗體診斷COVID-19，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，71.4%的患者檢測到特異性的IgG抗體，57.2%的患者檢測到特異性的IgM抗體，綜合兩種抗體，診斷陽性率提高至81.5%，此種檢測方法的特點(diǎn)為：在COVID-19患者血清中可同時(shí)檢測到特異性IgM和IgG。3月1日，由重慶醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合企業(yè)研發(fā)的化學(xué)發(fā)光法SARS-CoV-2 IgM/IgG抗體檢測試劑盒獲得國家藥品監(jiān)督管理局正式批準(zhǔn)，許可上市，正式投入臨床應(yīng)用。

膠體金技術(shù)檢測原理是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物標(biāo)記鼠抗人IgM，同時(shí)硝酸纖維素膜上包被SARS-CoV-2抗原，利用膠體金免疫層析間接法的原理，檢測人血清中SARS-CoV-2 IgM抗體。該方法的特點(diǎn)是10 min內(nèi)即可出結(jié)果，且易于觀察，僅憑肉眼即可判定是否陽性，適合大規(guī)模人群快速篩查。目前國內(nèi)已有多家公司開發(fā)出膠體金技術(shù)檢測血清中SARS-CoV-2 IgG和IgM抗體的試劑盒，并已經(jīng)開始應(yīng)用于臨床。

血清抗體IgM/IgG結(jié)果聯(lián)合病毒核酸檢測可綜合分析SARS-CoV-2感染狀態(tài)，見表3。有助于COVID-19患者的早期發(fā)現(xiàn)和隔離，以及進(jìn)一步快速確定其密切接觸者是否感染，利于更好地了解患者感染SARS-CoV-2的全部病程。2020年3月4日國家衛(wèi)生健康委發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)》[27]中，進(jìn)一步明確了血清特異性IgM/IgG抗體聯(lián)合病毒核酸檢測在確診SARS-CoV-2感染的重要意義。

表3 SARS-CoV-2病毒核酸聯(lián)合血清特異性IgM/IgG抗體檢測結(jié)果的臨床意義

病毒核酸抗體IgM抗體IgG臨床意義+--感染“窗口期”++-感染早期+-+感染中晚期+++感染活躍期,但已產(chǎn)生一定免疫力-+-可能感染急性期,需復(fù)查核酸--+既往感染,病毒已清除-++既往感染,病毒已清除或核酸假陰性

注：+為陽性，-為陰性。

COVID-19患者早診斷、早隔離，對控制疫情尤為重要。目前臨床上確診COVID-19的金標(biāo)準(zhǔn)是SARS-CoV-2核酸檢測，但核酸檢測可出現(xiàn)假陰性。迄今為止，許多新開發(fā)的技術(shù)逐漸應(yīng)用于SARS-CoV-2的檢測，這些新技術(shù)均有不同的優(yōu)缺點(diǎn)，在實(shí)際應(yīng)用中需根據(jù)特定檢測目的，合理選用檢測方法，以獲得最經(jīng)濟(jì)、最優(yōu)化的效果。如有必要也可將幾種方法相結(jié)合，以避免單一方法的弊端。隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，相信未來將有更高效、更便捷、更精準(zhǔn)的檢測方法應(yīng)用于SARS-CoV-2的檢測，為臨床醫(yī)生和科研工作提供更多選擇。