侯 惺 賈方真 李 娟 張 莉 趙 露 杜桂秋
(棗莊市立醫(yī)院,山東 棗莊 277100)
隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展,社會生活水平的提高,人們對健康的認(rèn)識越來越深,同時亞健康威脅了我們的生活質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織的調(diào)查顯示,其余75%以上的人都處在亞健康狀態(tài)。我們有必要對抗疲勞作用的中藥飲片進(jìn)行文獻(xiàn)研究,抗疲勞作用研究多是單味藥研究,如現(xiàn)代藥理研究杜仲[1-2]有耐缺氧、抗氧化、提高免疫力、降血脂及增加體質(zhì)量的作用,《本經(jīng)》描述杜仲“主腰脊痛,補(bǔ)中益精氣,堅筋骨”,續(xù)斷[3]為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根。此外還有對枸杞[4-5]、紅景天[6-7]、黃精[8]、人參[9]等抗疲勞作用研究。復(fù)方藥研究很少,杜仲和續(xù)斷二者配伍,在骨傷科常做藥對使用,也獨(dú)立成方,等量配伍組成杜仲丸,始載于《校注婦人良方》卷十二。亦有抗疲勞、抗衰老、增強(qiáng)免疫作用,中醫(yī)用其補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、續(xù)折傷。鹽炙后可引藥入腎,增強(qiáng)補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨作用。故以抗疲勞作用做為藥理指標(biāo),選擇有促成骨細(xì)胞增強(qiáng)作用的60%乙醇提取物,通過測定老齡小鼠給藥前后體質(zhì)量的變化和血清中的乳酸、尿素氮及肝糖原的含量,觀察杜仲丸的抗疲勞作用的影響。
1.1 試劑:乳酸、尿素氮、肝糖原試劑盒購自南京建成生物制成生物制品有限公司,乳酸批號20070423、20070520,尿素氮批號20070423,肝糖元批號20070423、20090520,其他試劑為分析純。
1.2 動物:昆明種小鼠,雌雄各半,體質(zhì)量23~27 g,由山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供,批號SCXK(魯)20050015。
1.3 儀器:數(shù)顯恒溫水浴鍋,常州國華電器有限公司;FA10004電子天平,上海恒平科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);LD24-0.8型離心機(jī),北京醫(yī)用離心機(jī)廠生產(chǎn);754紫外分光光度計,上海市精密儀器公司生產(chǎn)。
1.4 杜仲丸醇提取物:取杜仲飲片剪成3 mm以下碎片,續(xù)斷粉碎,過2號篩,精密稱取,各22.73 g,粉末等量混合,分置1000 mL燒瓶中,加20倍60%的乙醇浸泡1 h,回流提取2 h,提取液減壓濃縮,60 ℃干燥,得干粉。1 g干粉相當(dāng)于3.94 g生藥。
1.5 實驗方法:取70只小鼠,隨機(jī)分為7組:分別為對照組,生杜仲丸低、中、高劑量組。分別按0.023,0.045,0.091 mg/kg劑量,每天灌胃,稱重,連續(xù)14 d,對照組以等體積蒸餾水灌胃。末次灌胃30 min后,各組小鼠分別在溫度(30±1)℃深40 cm池中游泳120 min后[10-11],取出小鼠,休息60 min,摘眼球取血,依照乳酸試劑盒及尿素氮試劑盒測定血清乳酸[12-13]及血清尿素氮含量[14-16]。摘眼球后立即處死老鼠,解剖取其肝臟,依照肝糖原試劑盒測定肝糖原含量。
2.1 供試品對小鼠14日內(nèi)體質(zhì)量增加的影響:灌胃小鼠14 d內(nèi),生杜仲丸低、中、高劑量組和空白組小鼠體質(zhì)量都增加,且生杜仲丸低、中、高劑量組均比空白組小鼠增長速度快,提示杜仲、續(xù)斷配對,可增加對小鼠體質(zhì)量增加的影響,雄性小鼠普遍比雌性小鼠體質(zhì)量增長快。見表1。
表1 杜仲丸醇提物對小鼠每日體質(zhì)量增量的影響()
表1 杜仲丸醇提物對小鼠每日體質(zhì)量增量的影響()
2.2 供試品對小鼠運(yùn)動后血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響:低、中、高劑量組小鼠運(yùn)動后血清尿素氮、血清乳酸均低于空白組,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,低劑量組與空白對照組及中劑量與高劑量組,組間比較均有顯著性差異(P<0.05)。低、中、高劑量組小鼠運(yùn)動后肝糖原均高于空白組,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,空白組與低劑量組、低劑量組與中劑量組及中劑量與高劑量組比較均有顯著性差異(P<0.01)。見表2。
表2 杜仲丸醇提物對小鼠體內(nèi)血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響()
表2 杜仲丸醇提物對小鼠體內(nèi)血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響()
現(xiàn)在由于工作,學(xué)習(xí)壓力日益加重,生活環(huán)境日益惡化,近年來,由于疲勞誘發(fā)突發(fā)性疾病,導(dǎo)致疾病病情加重,甚至導(dǎo)致死亡。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003 年版)“緩解體力疲勞功能檢驗方法”項下結(jié)果判定的標(biāo)準(zhǔn):負(fù)重結(jié)果陽性,且血乳酸、血清尿素、肝糖原三項指標(biāo)中任兩項指標(biāo)陽性,即可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。糖元是機(jī)體運(yùn)動時能量的重要來源,有研究表明[17-18]中等強(qiáng)度和長時間的運(yùn)動會使骨骼肌糖原和血糖水平減少,使大腦皮層和骨骼肌工作能力下降,是造成運(yùn)動疲勞的直接原因。它的多少直接影響運(yùn)動能力,提高糖元儲備或減少運(yùn)動時糖元的消耗對提高速度增強(qiáng)耐力有重要意義[19-20]。糖元在體內(nèi)有肝糖原和肌糖原兩種儲備形式,是糖代謝的重要能源物質(zhì)??砷L時間維持運(yùn)動時的血糖水平,延緩疲勞在運(yùn)動著的肌肉中,當(dāng)能量平衡遭到破壞時,蛋白質(zhì)和含氮化合物的分解代謝加強(qiáng)并伴隨著尿素的形成增加。機(jī)體運(yùn)動負(fù)荷的適應(yīng)性越低,這種分解代謝作用越強(qiáng),形成的尿素也就越多[21]。本實驗結(jié)果可知杜仲丸能有效降低血清尿素氮、血清乳酸的含量,增加肝糖原的含量,而且鹽炙后有利于降低血清尿素氮、血清乳酸的含量,增加肝糖原的含量,增強(qiáng)機(jī)體對運(yùn)動負(fù)荷的適應(yīng)能力。證明杜仲丸有抗疲勞作用,鹽炙后有增強(qiáng)作用的趨勢。
《本草綱目》上記載杜仲“肝主筋,腎主骨,腎充則骨強(qiáng),肝充則筋健,屆伸利用,皆屬于筋”?!秳e錄》上記載續(xù)斷“主崩中漏血,金瘡血內(nèi)漏,止痛,生肌肉,踠傷,惡血,腰痛,關(guān)節(jié)緩急”。在現(xiàn)代藥理研究,杜仲與續(xù)斷有增強(qiáng)免疫作用,通過對杜仲丸鹽炙前后杜仲丸的抗疲勞的研究,為“咸入腎,腎入骨理論相關(guān)性研究”提供了部分科學(xué)依據(jù)。此外,隨著人們對日常保健越來越重視。具有抗疲勞作用的中藥飲片有助于提高人體免疫作用,將隨著制劑科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,對藥食同源產(chǎn)品的開發(fā)會越來越多[22-23],此研究也為杜仲、續(xù)斷后續(xù)的抗疲勞作用產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)。