張 婷,梁文學(xué)
(連云港市第一人民醫(yī)院,江蘇 連云港 222061)
消化道腫瘤已經(jīng)成為我國常見的惡性腫瘤疾病,此病的產(chǎn)生與人們的飲食習(xí)慣、生活習(xí)慣等有較大的關(guān)系[1]。消化道腫瘤疾病發(fā)病率不斷增加,容易對(duì)患者身體功能和正常飲食造成影響,多數(shù)患者伴有消化系統(tǒng)癥狀,對(duì)患者生命安全造成影響,需要進(jìn)行積極的治療[2]。消化道腫瘤患者常用的治療手段有手術(shù)、放化療等[3]。流式細(xì)胞術(shù)可以根據(jù)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記不同檢測(cè)外周血T、B和NK各淋巴細(xì)胞細(xì)胞亞群的水平,反映機(jī)體的免疫狀態(tài)[4]。本文主要研究淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)在消化道腫瘤中的臨床價(jià)值,如下所示:
本次的研究對(duì)象為在我院接受治療的消化道腫瘤患者,共納入2020年6月至2020年10月期間的62例,其中食管癌32例,肝癌12例,胃癌8例,直腸癌4例,胰腺癌3例,膽管癌3例,將其設(shè)為觀察組,并選取同時(shí)期在我院接受健康檢查的人員62例設(shè)為對(duì)照組。對(duì)照組中,男性35例、女性27例;年齡為42-77歲,平均(59.53±2.85)歲。觀察組中,男性患者有36例、女性患者有26例;年齡為43-77歲,平均(60.01±2.88)歲。兩組的資料對(duì)比,P>0.05,存在可比性。納入標(biāo)準(zhǔn):消化道腫瘤患者均經(jīng)過病理檢查確診;所有人員在檢查前均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他消化道疾病者;伴有其他惡性腫瘤疾病者;伴有全身免疫系統(tǒng)疾病者。
實(shí)驗(yàn)材料:空腹EDTA抗凝外周全血
實(shí)驗(yàn)試劑:CD3 FITC/CD8 PE/CD45 PerCP/CD4 APC 100Test試劑盒;CD3 FITC/CD16+56 PE/CD45 PerCP/CD19 APC 100Test試劑盒
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)標(biāo)記流式管(12*75 mm),編號(hào)對(duì)應(yīng)血樣編號(hào)(例:1T,1 BNK;2T;2 BNK);
(2)取20μl CD3/CD8/CD45/CD4抗體加入T管底部,取20μl CD3/CD16+56/CD45/CD19加入BNK管底部;
(3)漩渦震蕩3秒混勻或手動(dòng)顛倒10次全血標(biāo)本,用反向加樣法分別取50μl全血分別加入T、BNK管底部;
(4)漩渦震蕩器上輕輕混勻3秒,室溫靜置避光孵育15min;
(5)每個(gè)樣本管各加450μl溶血?jiǎng)?/p>
(6)漩渦震蕩器上輕輕混勻3秒樣本管,室溫靜置避光孵育15min;
(7)艾森流式細(xì)胞儀Novo Cyte3000檢測(cè),Novo Express軟件分析淋巴細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)及絕對(duì)計(jì)數(shù)。
統(tǒng)計(jì)兩組CD3+T淋巴細(xì)胞、CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞、CD3+CD8+T 淋巴細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞、NK 細(xì)胞的相對(duì)計(jì)數(shù)(%)及絕對(duì)計(jì)數(shù)(個(gè)/μl)并進(jìn)行對(duì)比。
應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件spss22.0進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),P<0.05,表明統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。
兩組各項(xiàng)計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比,P>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。觀察組患者的CD3+T淋巴細(xì)胞、CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞、CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與對(duì)照組對(duì)比,P<0.05,有顯著差異。見表2。
表1 各項(xiàng)結(jié)果對(duì)比()
表1 各項(xiàng)結(jié)果對(duì)比()
目前,消化道腫瘤患者常用的治療手段有手術(shù)、放化療等,其中放化療會(huì)導(dǎo)致腫瘤患者免疫力低下,更易發(fā)生各種感染甚至死亡。因此實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤患者的外周血免疫細(xì)胞對(duì)消化道腫瘤患者免疫水平的評(píng)價(jià)、治療方法的選擇以及療效評(píng)估都具有重要的意義[5]。
表2 兩組CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD16+CD56+絕對(duì)計(jì)數(shù)對(duì)比()
表2 兩組CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD16+CD56+絕對(duì)計(jì)數(shù)對(duì)比()
外周血淋巴細(xì)胞參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫,T淋巴細(xì)胞能分為輔助/誘導(dǎo)t淋巴細(xì)胞、對(duì)細(xì)胞毒t淋巴細(xì)胞抑制。目前,流式細(xì)胞術(shù)可以根據(jù)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記檢測(cè)T、B和NK細(xì)胞的水平,反映機(jī)體的免疫狀態(tài)[6]。
本次研究得出,兩組CD3+CD4+T 淋巴細(xì)胞、CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、CD3+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果相比,無顯著差異,P>0.05;觀察組患者的CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與對(duì)照組對(duì)比,P<0.05個(gè)/反映患者的免疫功能。目前臨床上在對(duì)淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)時(shí),主要是檢測(cè)患者的相對(duì)計(jì)數(shù),但是該計(jì)數(shù)對(duì)患者具體的免疫功能不能真實(shí)的反映,往往無法準(zhǔn)確的評(píng)估患者的病情,因此在臨床檢測(cè)中要大力推行淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)的檢測(cè),進(jìn)而提高腫瘤患者免疫功能評(píng)估的有效性。