趙麗 羅娟 陳晶

由于慢性肝炎和肝硬化的流行，肝細(xì)胞癌(HCC)的發(fā)病率呈上升趨勢。長期慢性的肝細(xì)胞損傷-再生過程在肝細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。由于巨噬細(xì)胞在慢性肝纖維化中起重要作用，腫瘤微環(huán)境在HCC的發(fā)生發(fā)展中作用關(guān)鍵。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)是免疫抑制細(xì)胞中的一個重要的組成部分，同時也參與了腫瘤微環(huán)境的建立，目前巨噬細(xì)胞在肝癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用已被人們所認(rèn)識，以TAMs為靶點的免疫治療可能為肝癌患者提供新的治療方法，是當(dāng)前一個新興的研究熱點。本文綜述了巨噬細(xì)胞在HCC發(fā)生、發(fā)展中的作用，以及針對TAMs為靶點對肝癌的免疫治療研究的最新進(jìn)展。

一、肝細(xì)胞癌(HCC)

肝細(xì)胞癌(HCC)是全球第二大與癌癥相關(guān)的死亡原因[1]。當(dāng)肝臟受到慢性肝損傷后，受損的肝組織啟動修復(fù)過程以恢復(fù)肝臟結(jié)構(gòu)和功能，這種慢性炎癥可導(dǎo)致肝細(xì)胞長期反復(fù)地破壞-再生，進(jìn)而導(dǎo)致了肝癌的發(fā)生和發(fā)展[2]。自細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4(CTLA-4)和程序性細(xì)胞死亡蛋白1(PD-1)抑制劑被批準(zhǔn)用于治療黑色素瘤以來，免疫治療因作為臨床實踐中的惡性腫瘤的替代治療方案而得到廣泛關(guān)注[3]。肝癌是一種炎癥驅(qū)動性疾病，約有四分之一的肝癌病例中可檢測到表達(dá)炎癥反應(yīng)的標(biāo)記物。然而，這些病例中也有較少的染色體畸變，提示我們結(jié)合免疫干預(yù)可能更有效地治療該病，使患者能有較好的臨床預(yù)后[4]。

二、肝巨噬細(xì)胞來源、異質(zhì)性及對肝癌的雙刃劍作用

肝巨噬細(xì)胞由庫普弗細(xì)胞和單核細(xì)胞組成，在慢性纖維化發(fā)病機(jī)制中有重要作用[5]。庫普弗細(xì)胞主要定位于肝竇腔內(nèi)，在慢性肝損傷的刺激下可轉(zhuǎn)化為活化的M1或M2型巨噬細(xì)胞。慢性肝纖維化是由這兩類庫普弗細(xì)胞之間的平衡調(diào)節(jié)的，而兩種表型的巨噬細(xì)胞對于機(jī)體幾乎具有相反的作用，即M1巨噬細(xì)胞的抗炎作用和M2巨噬細(xì)胞的促炎作用[6]。據(jù)研究報道，肝巨噬細(xì)胞通過表達(dá)NADP H氧化酶1誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生可促進(jìn)注射二乙基亞硝胺(DEN)小鼠腫瘤的發(fā)展[7]。

三、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)與肝癌

(一) TAMs在肝癌組織中的再合成 TAMs通過表達(dá)細(xì)胞因子和趨化因子抑制腫瘤免疫，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展[8]。楊等[9]首先證明腫瘤細(xì)胞衍生的Wnt配體通過經(jīng)典的Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)M2來傳遞TAMs的極化，從而導(dǎo)致HCC發(fā)生免疫抑制。因此，阻斷腫瘤細(xì)胞內(nèi)Wnt的分泌和/或激活TAMS中的Wnt/β-catenin信號有可能是未來肝癌治療的一種潛在策略。此外，有研究表明，在手術(shù)切除后HCC患者的TAMs增加與預(yù)后不良相關(guān)。董等[10]研究結(jié)果表明，CD86+M1巨噬細(xì)胞的低存在和CD206+M2巨噬細(xì)胞的高存在與肝癌的侵襲性表型有關(guān)，通過對CD86和CD206進(jìn)行聯(lián)合分析可為評估肝癌的預(yù)后提供了較好的指標(biāo)。

(二) TAMs調(diào)節(jié)血管的生成 由于TAMs能夠產(chǎn)生血管生成因子，血管生成抑制治療近年來已成為肝癌治療的一種很有前途的策略。以CXCR4為靶點的脂基納米粒子(NP)被作為一種抗血管生成的物質(zhì)可將VEGF siRNA特異性地傳遞給HCC，具有很好的臨床應(yīng)用前景[11]。一項基于慢性乙型肝炎病毒感染的病例對照研究表明，HCC患者血清中IL-23水平較高，炎癥性巨噬細(xì)胞通過產(chǎn)生IL-23通過上調(diào)巨噬細(xì)胞表面IL-23受體的表達(dá)來促進(jìn)巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的血管生成，表明IL-23可能促進(jìn)慢性乙型肝炎病毒感染后肝癌的發(fā)生發(fā)展[12]。

(三) TAMs促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移 SPON2通過不同的整合素-Rho GTPase-Hippo途徑促進(jìn)M1極化巨噬細(xì)胞的形成，抑制肝癌的轉(zhuǎn)移，有研究表明SPON2可能是介導(dǎo)抑制肝癌細(xì)胞生長和遷移的免疫反應(yīng)的關(guān)鍵因素[13]。姚等研究發(fā)現(xiàn)具有M2表型的TAMs通過調(diào)節(jié)TLR4/STAT3信號通路促進(jìn)HCC細(xì)胞的遷移[14]。

(四)TAMs對肝癌干細(xì)胞的保護(hù)及調(diào)節(jié)治療耐藥性 越來越多的證據(jù)證明肝癌干細(xì)胞(LCSCs)在肝癌的實質(zhì)異質(zhì)性和分級組織中起著重要的作用，同時也在肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、化療及放療耐藥復(fù)發(fā)中起著關(guān)鍵作用。從人肝癌組織和細(xì)胞系中分離出的CD+44細(xì)胞在體外和體內(nèi)均具有CSC活性。TAMS產(chǎn)生白細(xì)胞介素6和STAT 3信號介導(dǎo)GINAL促進(jìn)人肝癌干細(xì)胞的增殖[15]。Fan等指出，TAMs通過TGF-beta1誘導(dǎo)的EMT可產(chǎn)生CSC-樣性質(zhì)，可能有助于研究HCC的預(yù)后[16]。此外，索拉非尼是一種口服多激酶抑制劑，由于個體差異和耐藥性而在臨床上的應(yīng)用受到限制，天然CCR2拮抗劑可提高腫瘤中CD8+T細(xì)胞的數(shù)量通過阻斷TAMs介導(dǎo)免疫抑制從而增強(qiáng)索拉非尼對肝癌的治療效果[17]

四、巨噬細(xì)胞靶向治療原發(fā)性肝癌

(一)抑制單核細(xì)胞聚集 抑制單核細(xì)胞在HCC聚集是一種選擇性地消耗TAMs的方法。CCL-2-CCR2信號在大多數(shù)腫瘤類型TAMs的發(fā)生中起著重要作用，是抑制單核細(xì)胞聚集的新靶點，CCL2的主要來源之一是庫普弗細(xì)胞，因此，庫普弗細(xì)胞可能參與單核巨噬細(xì)胞的聚集和促腫瘤發(fā)生的表型轉(zhuǎn)化[18]。李等[19]結(jié)果表明，HCC中CCL2的高表達(dá)是影響患者預(yù)后的因素之一,通過阻斷CCL2/CCR2信號可抑制腫瘤膨脹巨噬細(xì)胞向腫瘤前M2表型的轉(zhuǎn)換，可激活T細(xì)胞抗腫瘤免疫反應(yīng)抑制小鼠肝癌模型的生長。

(二) TAMs的消除及“再教育” 由于臨床前證據(jù)很大程度上支持結(jié)合靶向TAMs策略和特異性免疫治療方法的組合方法來治療HCC。索拉非尼[17]是經(jīng)批準(zhǔn)用于肝癌的口服多激酶抑制劑，可抑制極化巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的人肝癌EMT及其通過HGF-Met信號通路的遷移。另外，向M1表型轉(zhuǎn)化的TAM特征是有利于腫瘤消退的免疫功能微環(huán)境。黃芩甙作為一種天然的蠶豆樣物質(zhì)，可以阻斷移植性肝癌小鼠模型的原位生長和使TAM重分化成M1型巨噬細(xì)胞，抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生[20]。

(三)TAMS促癌產(chǎn)物的中和作用 IL-6是由TAMs在HCC進(jìn)展過程中產(chǎn)生的，可促進(jìn)了CSCs的產(chǎn)生和腫瘤的發(fā)生。Tocilizumab是一種抗IL-6受體抗體,能夠通過阻斷IL-6信號在體外和體內(nèi)抑制人肝癌干細(xì)胞的TAM刺激活性[15]。

五、 結(jié)論

雖然巨噬細(xì)胞對免疫系統(tǒng)的正?；顒邮潜夭豢缮俚?，但它們的異常調(diào)節(jié)與肝癌有關(guān)。巨噬細(xì)胞通過調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和分泌多種細(xì)胞因子構(gòu)成了HCC的微環(huán)境，并在腫瘤的不可控惡性生長中發(fā)揮重要的作用。最近研究表明，TAMs在HCC的發(fā)展和進(jìn)展中起著至關(guān)重要的作用，包括免疫抑制功能、腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移增強(qiáng)、調(diào)節(jié)血管生成、維持干細(xì)胞及對治療耐藥性的影響。由于肝癌的高死亡率、有限的治療手段和不良的預(yù)后，迫切需要尋找新的免疫治療方法。因此，深入了解TAMs在HCC中的作用，對于HCC尋找新的治療方法至關(guān)重要。肝切除或肝移植后以TAMs為基礎(chǔ)的靶向治療有可能為HCC患者的輔助性免疫治療提供了新的思路。