張亮杰，王顯斌，劉 俊

乳腺癌是女性常見(jiàn)惡性腫瘤，近年來(lái)發(fā)病率明顯上升，且趨向年輕化[1]。早期常采用腫瘤標(biāo)志物診斷乳腺癌，但文獻(xiàn)報(bào)道，常規(guī)腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)、糖蛋白抗原153(CA153)、糖蛋白抗原125(CA125)等對(duì)早期乳腺癌敏感性較低，且無(wú)法反映乳腺癌腫瘤細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移特點(diǎn)[2-3]。胸苷激酶1(TK1)系人體嘧啶循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)關(guān)鍵酶，是合成DNA的重要材料，與腫瘤細(xì)胞增殖密切相關(guān)，屬S期特殊酶，其表達(dá)水平的變化與細(xì)胞增殖程度密切關(guān)聯(lián)。組織多肽特異性抗原(TPS)為上皮類腫瘤分子標(biāo)志物，系從組織多肽抗原純化而來(lái)，為細(xì)胞角蛋白(CK)片段上M3抗原重要決定簇，而CK則為上皮細(xì)胞骨架的主要成分，同時(shí)也是上皮源性惡性腫瘤中間絲的成分，與腫瘤DNA密度有關(guān)，可反映上皮源型新生物增殖活性，與細(xì)胞分裂增殖存在明顯關(guān)聯(lián)，同時(shí)可反映腫瘤生物學(xué)行為[4]。目前對(duì)TK1、TPS與乳腺癌病理參數(shù)關(guān)系的研究尚少見(jiàn)報(bào)道。本研究對(duì)乳腺癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，旨在探討乳腺癌患者血清中TK1、TPS含量與其病理特點(diǎn)的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：所有乳腺癌患者均經(jīng)病理或細(xì)胞學(xué)確診為乳腺癌；未接受放化療；年齡>20歲；臨床資料完整；乳腺良性病變患者均經(jīng)病理及影像學(xué)檢查證實(shí)；對(duì)照組均為同期來(lái)我院體檢的健康人，均無(wú)乳腺病變。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心肝腎肺疾病者；合并其他部位惡性腫瘤者；自身免疫性疾病或急慢性傳染疾病者；合并血液系統(tǒng)疾病者；入組前接受抗腫瘤治療者；妊娠及哺乳期女性；臨床資料不完整者。

1.2一般資料 選取2013年1月—2017年1月我院收治的70例乳腺癌作為乳腺癌組，同期我院收治的30例乳腺良性病變患者為良性病變組，20例來(lái)我院體檢的健康人為對(duì)照組。乳腺癌組年齡39～67(47.6±3.5)歲；病程1～8(5.1±1.2)年；浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌65例，乳頭狀癌3例，髓樣癌1例，單純癌1例。良性病變組年齡35～58(40.6±4.7)歲；病程3個(gè)月～2年(0.9±0.3)年；乳腺炎4例，乳腺囊性增生12例，脂肪瘤9例，纖維瘤5例。對(duì)照組年齡28～68(42.1±6.7)歲。乳腺癌組和乳腺良性病變組年齡、病程比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.3方法

1.3.1病例資料收集：收集乳腺癌患者TNM分期、病理分級(jí)、腫塊直徑、淋巴結(jié)數(shù)目、雌激素受體、孕激素受體、腋窩淋巴結(jié)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等資料。

1.3.2血清標(biāo)志物檢測(cè)：納入者均留取空腹外周血標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清TPS、TK1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)水平。TPS試劑盒購(gòu)自瑞典IDL Biotech AB公司，VEGF試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物制品有限公司。采用增強(qiáng)發(fā)光-免疫點(diǎn)印染法測(cè)定TK1水平，試劑盒及化學(xué)發(fā)光數(shù)字成像儀均購(gòu)自華瑞同康生物有限公司，均嚴(yán)格按照試劑使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1血清標(biāo)志物水平比較 良性病變組、乳腺癌組TPS、VEGF高于對(duì)照組，且乳腺癌組高于良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。乳腺癌組TK1高于對(duì)照組和良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，良性病變組與乳腺癌組TK1水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組納入者血清TPS、VEGF及TK1水平比較

注：TPS為組織多肽特異性抗原，VEGF為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，TK1為胸苷激酶1；與對(duì)照組比較，aP<0.05；與良性病變組比較，cP<0.05

2.2TPS、TK1、VEGF與乳腺癌病理特征的關(guān)系 不同腫瘤直徑、不同淋巴結(jié)數(shù)目患者TPS、TK1、VEGF水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，隨TNM分期的上升、病理分級(jí)的上升，患者TPS、TK1、VEGF表達(dá)水平上升(P<0.05)，腋窩淋巴結(jié)陽(yáng)性、合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者其TPS、TK1、VEGF表達(dá)水平高于腋窩淋巴結(jié)陰性、未合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者(P<0.05)，雌激素受體陽(yáng)性、孕激素受體陽(yáng)性的乳腺癌患者TPS表達(dá)水平低于陰性者(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 TPS、TK1、VEGF與乳腺癌病理特征的關(guān)系

注： TPS為組織多肽特異性抗原，TK1為胸苷激酶1，VEGF為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

2.3TPS、TKI與乳腺癌病理特征及VEGF相關(guān)性分析 乳腺癌患者血清TPS、TK1表達(dá)均與TNM分期、病理分級(jí)、腋窩淋巴結(jié)陽(yáng)性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)，但與雌激素受體、孕激素受體表達(dá)無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表3。

3 討論

乳腺癌臨床較常見(jiàn)，全球發(fā)病人群逾百萬(wàn)，約占女性惡性腫瘤的25%～30%，是威脅女性健康的主要惡性腫瘤之一[5]。乳腺癌起病隱匿，早期確診并給予積極治療是改善患者預(yù)后的前提條件[6]。目前CEA、CA153等均為乳腺癌診斷常用血清標(biāo)志物，但其僅可反映腫瘤負(fù)荷，對(duì)早期乳腺癌診斷靈敏度低，腫瘤分期價(jià)值也較低，對(duì)乳腺癌增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為診斷價(jià)值有限，無(wú)法反映癌細(xì)胞的增殖活躍程度[7-8]。

表3 TPS、TKI與乳腺癌病理特征及VEGF相關(guān)性分析

注：TPS為組織多肽特異性抗原，TK1為胸苷激酶1

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，TPS對(duì)上皮源性惡性腫瘤有較高的診斷價(jià)值[9]。TPS屬M(fèi)3抗原決定簇，是上皮細(xì)胞骨架的關(guān)鍵構(gòu)成部分，在內(nèi)皮細(xì)胞、纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞內(nèi)通常無(wú)TPS表達(dá)，血清TPS含量與DNA密度存在緊密關(guān)聯(lián)；同時(shí)與腫瘤細(xì)胞增殖活性存在明顯相關(guān)性，尤其對(duì)上皮源型腫瘤細(xì)胞增殖活躍程度敏感性較高，系上皮源性惡性腫瘤的有效分子標(biāo)志物。上皮類細(xì)胞增殖活躍期TPS表達(dá)水平上升，并釋放進(jìn)入血液，致血清TPS含量上升。TPS在泌尿生殖道細(xì)胞、肝細(xì)胞等生長(zhǎng)活躍的正常體細(xì)胞內(nèi)均少見(jiàn)表達(dá)，而在轉(zhuǎn)移癌、上皮源性惡性腫瘤中則?？梢?jiàn)高表達(dá)。既往常將TPS水平的變化用于結(jié)腸癌、肝癌、食管癌等疾病的診斷、預(yù)后及療效評(píng)價(jià)中[10-12]，但對(duì)TPS在乳腺癌診斷及病情監(jiān)測(cè)中的價(jià)值尚少見(jiàn)報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組血清TPS水平明顯高于良性病變組及對(duì)照組，提示乳腺癌可見(jiàn)TPS特異性表達(dá)上調(diào)，可將其作為與乳腺良性疾病的鑒別依據(jù)。同時(shí)進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血TPS表達(dá)與TNM分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腋窩、淋巴結(jié)陽(yáng)性、雌激素受體、孕激素受體及VEGF表達(dá)均存在一定的相關(guān)性，提示血清TPS表達(dá)與乳腺癌病理進(jìn)展、腫瘤生物學(xué)行為存在緊密聯(lián)系。

乳腺癌轉(zhuǎn)移主要通過(guò)機(jī)體淋巴系統(tǒng)，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是決定乳腺癌預(yù)后的關(guān)鍵指標(biāo)，一般伴腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者其腫瘤惡性程度較高，癌細(xì)胞分裂增殖較為活躍。雌激素、孕激素受體則主要受雌、孕激素調(diào)節(jié)，雌激素、孕激素受體表達(dá)陽(yáng)性，提示其對(duì)乳腺上皮增生調(diào)控作用存在，腫瘤分化通常較好，發(fā)生轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)低，而雌激素、孕激素受體陰性的乳腺癌患者因腫瘤分化程度差，易出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移[13-15]。

TK1為細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶，屬S期特殊酶，對(duì)細(xì)胞增殖敏感度較高，是決定細(xì)胞增殖程度的主要酶，在增殖細(xì)胞G1期、S期交界處升高，到S期抵達(dá)峰值，在癌細(xì)胞內(nèi)高TK1水平可從S期維持至M期早期，隨癌細(xì)胞的增殖而上升，被認(rèn)為是有較高生命潛力的腫瘤特異性標(biāo)志物[16-18]。在正常生理?xiàng)l件下，TK1表達(dá)水平極低，但在惡性腫瘤中?？梢?jiàn)患者TK1表達(dá)水平上升，且其含量的變化與腫瘤增殖速度呈明顯正相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組血清TKI含量明顯高于良性病變組和對(duì)照組，且隨乳腺癌TNM分期、病理分期的升高，其TK1表達(dá)上調(diào)，伴腋窩淋巴結(jié)陽(yáng)性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者TK1表達(dá)水平顯著高于腋窩淋巴結(jié)陰性、未合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，與陳曲波等[19]結(jié)論相符。本研究結(jié)果還顯示，TK1、TPS表達(dá)與VEGF表達(dá)呈明顯正相關(guān)。VEGF系常見(jiàn)血管滲透因子，可特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)血管新生，促進(jìn)實(shí)體瘤生長(zhǎng)及惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移[20]。而TKI、TPS與VEGF表達(dá)趨勢(shì)相近，提示兩者在腫瘤增殖、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中均發(fā)揮重要作用。

綜上所述，乳腺癌患者血清TPS、TK1表達(dá)水平較高，且兩者表達(dá)與乳腺癌臨床分期、病理分級(jí)、腋窩淋巴結(jié)陽(yáng)性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、VEGF表達(dá)均存在明顯相關(guān)性，同時(shí)TPS表達(dá)與雌激素受體、孕激素受體調(diào)節(jié)有關(guān)，均可反映乳腺癌癌細(xì)胞增殖活性。