吳梅青，王 姣，唐海飛

(湘潭醫(yī)衛(wèi)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南 湘潭 411102)

吳茱萸又名吳萸、茶辣、漆辣子，為蕓香科植物吳茱萸(Evodiarutaecarpa(Juss.) Benth.)、石虎(Evodiarutaecarpa(Juss.) Benth.var.officinalis(Dode) Huang)或疏毛吳茱萸(Evodiarutaecarpa(Juss.) Benth. var.bodinieri(Dode) Huang) 的干燥近成熟果實(shí)，具有散寒止痛、降溫止嘔、助陽(yáng)止瀉的功效[1]。吳茱萸中所含的化學(xué)成分眾多，藥理活性復(fù)雜。其主要的化學(xué)成分為生物堿類物質(zhì)、檸檬苦素類物質(zhì)和揮發(fā)油類物質(zhì)[2]，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗?jié)?、止嘔、止瀉、舒張血管及降血壓、強(qiáng)心、抗腫瘤等藥理作用[3]。吳茱萸生物堿類主要包括吳茱萸堿和吳茱萸次堿，在現(xiàn)行《中國(guó)藥典》[1]中以吳茱萸堿和吳茱萸次堿總量作為吳茱萸藥材質(zhì)量控制指標(biāo)?，F(xiàn)代研究表明，吳茱萸中生物堿類具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、抗?jié)儭⑹鎻堁?、調(diào)節(jié)血壓、抗心律失常、抗腫瘤、抗阿爾茨海默病等作用，同時(shí)吳茱萸次堿還能抵抗胃黏膜損傷[4]。本文就近年來(lái)吳茱萸中生物堿類在心腦血管系統(tǒng)疾病中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為后續(xù)研究提供參考。

1 對(duì)心臟的作用

1.1 抑制心肌肥厚發(fā)生、緩解右心室重構(gòu)

心肌肥厚是高血壓、冠心病和心瓣膜病等心血管疾病的并發(fā)癥。在慢性肺源性心臟病進(jìn)展過(guò)程中，由于心肌肥厚持續(xù)過(guò)久則會(huì)引起心力衰竭甚至猝死。因此，治療心肌肥厚是醫(yī)學(xué)界長(zhǎng)期以來(lái)的難題[5]。較多的研究表明，吳茱萸生物堿類能抑制心肌肥厚的發(fā)生。林淑嫻等[6]通過(guò)研究比較了吳茱萸中吳茱萸堿、吳茱萸次堿和吳茱萸總堿抑制血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的3個(gè)指標(biāo)(即Ang Ⅱ 致肥大心肌細(xì)胞表面積、蛋白質(zhì)含量、ANFmRNA表達(dá))，結(jié)果顯示三種生物堿均明顯抑制 Ang Ⅱ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大，但抑制效應(yīng)無(wú)明顯差異。張婧怡等[7]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸次堿能明顯防治大鼠腹主動(dòng)脈縮窄所致左室肥厚，其作用機(jī)制至少部分與其抑制MAPK/ERK信號(hào)通路有關(guān)。陳洪等[8]通過(guò)腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)制作心肌肥厚大鼠模型，造模4周，連續(xù)給藥4周后測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓，通過(guò)檢測(cè)分析大鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能改變、分離組織計(jì)算左心室肥厚指數(shù)(LVHI)、HE染色觀察左室心肌組織形態(tài)學(xué)變化、qRT-PCR法檢測(cè)心肌心房鈉尿肽mRNA表達(dá)等心肌肥大指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)吳茱萸次堿通過(guò)抑制MAPK/ERK信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)壓力負(fù)荷型心肌肥厚的發(fā)生具有抑制作用。通過(guò)進(jìn)一步研究證實(shí)，吳茱萸次堿能上調(diào) eNOS mRNA表達(dá)，使NOS活性和NO含量明顯增加，可以抑制Ang誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大[9]。黃波等[10]發(fā)現(xiàn)，吳茱萸次堿治療給藥對(duì)壓力負(fù)荷型心肌肥厚有改善的作用機(jī)制，可能與增加心肌鈉鉀ATP酶和鈣ATP酶活性，抑制CaN活性，最終調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+相關(guān)。

近年來(lái)，醫(yī)學(xué)界對(duì)心室重構(gòu)的研究越來(lái)越多，發(fā)現(xiàn)心室重構(gòu)是慢性心力衰竭發(fā)生發(fā)展的主要病理基礎(chǔ)，是影響發(fā)病率和死亡率的決定因素。因此，阻斷心室重構(gòu)是預(yù)防心力衰竭不容忽視的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。有文獻(xiàn)報(bào)道，吳茱萸次堿可以拮抗大鼠的右心室重構(gòu)。Li等[11]通過(guò)連續(xù)3周在10%氧氣缺氧條件下誘導(dǎo)形成大鼠的右心室重構(gòu)模型，以吳茱萸次堿灌胃，給藥組以劑量依賴方式拮抗大鼠的右心室重構(gòu)。另有研究報(bào)道，吳茱萸次堿抗右心室重構(gòu)的機(jī)制是刺激CGRP釋放，降低血漿中TGF-β1的濃度達(dá)到減弱缺氧誘導(dǎo)的右心室重構(gòu)[12]。還有研究顯示，吳茱萸次堿通過(guò)抑制NOX4的表達(dá)，進(jìn)而降低氧化應(yīng)激損傷達(dá)到緩解野百合堿誘導(dǎo)的pH大鼠右心室重構(gòu)[13]。

1.2 保護(hù)心肌缺血/再灌注損傷作用

心肌缺血/再灌注(I/R)損傷發(fā)生的機(jī)制目前認(rèn)為主要與細(xì)胞內(nèi)氧自由基的大量產(chǎn)生、鈣離子超負(fù)荷、白細(xì)胞的炎癥作用及高能磷酸化合物缺乏等有關(guān)。吳茱萸堿和吳茱萸次堿有可能成為新的保護(hù)心肌缺血/再灌注損傷藥物。楊晶等[14]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，降低TLR4/NF-κB的表達(dá)能明顯減少炎癥反應(yīng)，從而減輕心臟I/R損傷，而吳茱萸次堿則可以通過(guò)抑制TLR4/NF-κB信號(hào)通路保護(hù)心肌I/R損傷缺血/再灌注，作用機(jī)制與促進(jìn)CGRP釋放有關(guān)。也有研究表明，吳茱萸堿可通過(guò)激活A(yù)KT和AMPKα抑制心肌細(xì)胞凋亡，抑制NF-κB信號(hào)通路減輕心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)來(lái)發(fā)揮保護(hù)缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞炎癥和凋亡的作用[15]。

1.3 抗心律失常作用

目前，吳茱萸抗心律作用的研究主要集中在吳茱萸次堿和去氫吳茱萸堿上。饒本龍[16]采用Langendorff灌流裝置，主動(dòng)脈逆行酶解法分離大鼠心臟得到單個(gè)心室肌細(xì)胞，用吳茱萸次堿的細(xì)胞外液灌流加藥，以全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄給藥前后細(xì)胞INa和Ito及其相關(guān)的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，研究顯示吳茱萸次堿可能通過(guò)使心室肌細(xì)胞 Ito通道的激活減慢、失活加快、失活后恢復(fù)減緩，從而延長(zhǎng)動(dòng)作電位時(shí)程(APD)，減少室性早搏，終止2相折返，最終產(chǎn)生抗心律失常作用。有文獻(xiàn)報(bào)道，去氫吳茱萸堿通過(guò)減少Na+和 Ca2+內(nèi)向電流，增加靜息狀態(tài)下細(xì)胞內(nèi)液的pH值和Na+-H+交換，產(chǎn)生抗心律失常作用[17]。還有文獻(xiàn)證實(shí)，去氫吳茱萸堿還可以通過(guò)延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心肌細(xì)胞的動(dòng)作電位過(guò)程抑制鈣超載引發(fā)的心律失常[18]。

2 對(duì)血管的作用

2.1 抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖與鈣化

侯化化等[19]利用組織塊貼壁法培養(yǎng)大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞，通過(guò)MTT比色法檢測(cè)主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的增殖，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，測(cè)定培養(yǎng)細(xì)胞上清液中一氧化氮合酶(NOS)的活性和一氧化氮(NO)的含量，Realtime RT-PCR檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(PC-NA)、內(nèi)皮型NOS(eNOS) mRNA的表達(dá)，研究結(jié)果表明，吳茱萸堿可促進(jìn)NO的合成、釋放，通過(guò)阻滯主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞于G 0 /G 1期是抑制主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖的機(jī)制之一。Cx43表達(dá)異常增高是多種病理因素誘導(dǎo)主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖的重要機(jī)制。有文獻(xiàn)資料顯示，吳茱萸次堿可通過(guò)下調(diào)Cx43的表達(dá)，抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)的主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖和表型轉(zhuǎn)化，其機(jī)制涉及TRPV1/NF-κB信號(hào)途徑[20]。吳茱萸次堿還可抑制Ox-LDL 誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化和遷移，其機(jī)制與通過(guò)TRPV1/ [Ca2+]i/NF-κB信號(hào)途徑，抑制Cx43表達(dá)上調(diào)有關(guān)[21]。邵靜等[22]通過(guò)構(gòu)建大鼠血管平滑肌細(xì)胞鈣化體外模型，用不同濃度的吳茱萸次堿處理細(xì)胞，qRT-PCR檢測(cè)成骨樣分化基因Runx2、BMP2和Osterix的表達(dá)和茜素紅染色測(cè)細(xì)胞鈣化程度，發(fā)現(xiàn)高磷高鈣可刺激血管平滑肌細(xì)胞下調(diào)Sirt1的表達(dá)水平，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞成骨樣分化和鈣化，而吳茱萸次堿可通過(guò)上調(diào)Sirt1的表達(dá)，從而抑制血管平滑肌細(xì)胞鈣化，該研究結(jié)果為防治血管鈣化提供了新的線索。

2.2 調(diào)節(jié)血壓作用

吳茱萸具有雙向調(diào)節(jié)血壓的作用。及時(shí)雨等[23]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸次堿能有效降低自發(fā)性及兩腎一夾大鼠血壓，其降壓效果可能通過(guò)調(diào)節(jié)PGI2和TXA2水平，改善血管內(nèi)皮功能及增加舒血管物質(zhì)心房鈉肽水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。陳天琪等[24]通過(guò)體外研究證實(shí)，黔產(chǎn)吳茱萸水煎劑可使家兔離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力呈濃度(0～1.6 mg·mL-1)依賴性增加，且內(nèi)皮完整的胸主動(dòng)脈環(huán)收縮作用明顯強(qiáng)于去內(nèi)皮組，其機(jī)制與α受體有關(guān)。王嫣等[25]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，貴州余慶種植的吳茱萸水煎液能使家兔離體胸主動(dòng)脈環(huán)收縮，且收縮作用具有內(nèi)皮依賴性，同時(shí)推測(cè)吳茱萸水煎液內(nèi)還存在可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO和前列環(huán)素的成分，使血管舒張，部分抵消其收縮作用。而吳茱萸存在舒張和收縮血管環(huán)的化學(xué)成分是哪種物質(zhì)，其確切作用機(jī)制還有待進(jìn)一步分離吳茱萸的成分進(jìn)行探究。

3 降血脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化作用

3.1 降血脂的作用

高脂血癥是導(dǎo)致心腦血管等疾病的主要危險(xiǎn)因素，預(yù)防心腦血管疾病，就要預(yù)防高脂血癥。中藥調(diào)血脂因其具有療效好、毒副作用小等優(yōu)勢(shì)，已成為研究的熱點(diǎn)[26]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，吳茱萸堿有調(diào)血脂的功效。張秋方等[27]以小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以經(jīng)典的降脂藥洛伐他汀作為陽(yáng)性對(duì)照，研究發(fā)現(xiàn)吳茱萸堿具有降低高脂血癥小鼠TC、TG、LDL-C及血液黏稠度，升高 HDL-C的作用。趙小琴等[28]采用高脂飼料復(fù)制高脂血癥小鼠模型，通過(guò)觀察HE染色切片小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)，檢測(cè)血清總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)吳茱萸堿能改善高脂飼料誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠的肝臟脂肪病變，能增強(qiáng)高脂血癥小鼠的抗氧化能力。

3.2 抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用

動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。中醫(yī)藥在動(dòng)脈粥樣硬化治療中具有特殊優(yōu)勢(shì)，中醫(yī)藥可以對(duì)血脂代謝異常進(jìn)行有效調(diào)節(jié)，抑制血管平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)、繁殖和遷移、防止血小板聚集，具有顯著的抗氧化作用，同時(shí)還可以避免不良反應(yīng)[29]。吳茱萸堿有抗AS的作用。聶忠富等[30]通過(guò)研究顯示，經(jīng)吳茱萸堿處理后的動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血清中SOD、GSH-Px活性升高，MDA和ROS水平降低，吳茱萸堿可以減輕AS大鼠氧化損傷達(dá)到抗AS的作用。任妮娜等[31]采用SD大鼠構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化(AS)大鼠模型，研究吳茱萸堿對(duì)AS大鼠模型血清中Ox-LDL及炎性小體caspase-1表達(dá)的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，吳茱萸堿能通過(guò)抗炎抗氧化途徑來(lái)降低SD大鼠血清TC、TG、LDL水平及Ox-LDL、caspase-1表達(dá)量，提高HDL水平以達(dá)到抗AS的目的。楊奕櫻等[32]通過(guò)AS兔模型研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸堿高劑量組(50 mg/kg)有明顯的延緩和改善AS病理發(fā)展變化的作用，使處于纖維斑塊期的主動(dòng)脈弓朝向脂紋期發(fā)展的階段，再結(jié)合生化血脂含量檢測(cè)結(jié)果顯示，給藥組(包括吳茱萸堿給藥組及陽(yáng)性對(duì)照組)與模型組相比，兔血清TC、TG、LDL含量明顯下降，HDL水平升高顯著，明顯減緩AS的形成和發(fā)展，其作用機(jī)制可能與抑制NARC-1/ PCSK9表達(dá)有關(guān)。

3.3 吳茱萸堿聯(lián)合用藥降血脂作用

吳茱萸與黃連是中藥方劑中的經(jīng)典藥對(duì)，常配伍使用。黃連和吳茱萸的主要活性成分分別是小檗堿和吳茱萸堿。有較多的文獻(xiàn)報(bào)道，吳茱萸堿聯(lián)合小檗堿能增強(qiáng)降血脂作用。沈濤等[33]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，4.5%小檗堿水溶液、0.045%吳茱萸總堿水溶液按1﹕1比例混合配伍后可以提高大鼠高脂血癥模型肝組織ABCA1mRNA的表達(dá)，促進(jìn)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)是其發(fā)揮降血脂作用的主要環(huán)節(jié)之一。王靜等[34]通過(guò)研究顯示，黃連吳茱萸降血脂有效成分小檗堿、吳茱萸堿配伍可通過(guò)抑制肝臟HMG-CoA還原酶和L-FABP基因表達(dá)降低高脂血癥模型大鼠的血脂水平。還有文獻(xiàn)報(bào)道，小檗堿、吳茱萸堿配伍通過(guò)其上調(diào) LXRα和PPARy蛋白的表達(dá)降低高脂飲食誘導(dǎo)的高脂血癥大鼠血脂水平[35]，還可通過(guò)下調(diào)高膽固醇血癥大鼠小腸ACAT2、ApoB48和 NPC1L1的表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)體膽固醇代謝[36]，而達(dá)到降高膽固醇血癥的作用。

4 對(duì)腦缺血損傷的保護(hù)作用

吳茱萸生物堿類對(duì)腦血管的保護(hù)作用也引起了廣泛關(guān)注。吳茱萸次堿可以明顯改善腦缺血再灌注損傷造成的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，吳茱萸次堿通過(guò)提高小鼠腦內(nèi)SOD及GSH-Px活力減少自由基的產(chǎn)生，減輕腦缺血再灌注造成的損傷[37]。嚴(yán)春臨等[38]進(jìn)一步證實(shí)，吳茱萸次堿對(duì)腦缺血再灌注(I/R)損傷小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與降低NO的含量，影響NOS和iNOS的活力有關(guān)。楊成俊等[39]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸次堿對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷有明顯的保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié) TLR2/4-NF-κB的表達(dá)有關(guān)，為吳茱萸次堿作為腦中風(fēng)治療藥物的開(kāi)發(fā)利用提供了藥理學(xué)依據(jù)。

5 抗阿爾茨海默病的作用

阿爾茨海默病(AD)是一種與年齡高度相關(guān)、以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和記憶力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，目前尚無(wú)理想的治療方法。有文獻(xiàn)資料顯示，吳茱萸堿能通過(guò)抗炎作用改善阿爾茨海默病癥狀，其機(jī)理是降低炎性細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-1β、IL-6和 COX-2在阿爾茨海默病模型小鼠腦中的表達(dá)，增加其腦部組織對(duì)葡萄糖的攝取[40]。陳建國(guó)等[41]通過(guò)研究證實(shí)，吳茱萸次堿可減輕高糖誘導(dǎo)的阿爾茨海默病樣大鼠認(rèn)知功能障礙，其機(jī)制可能是通過(guò)增強(qiáng)海馬 pS9-GSK-3β磷酸化水平，下調(diào)GSK-3β活性，進(jìn)而降低tau蛋白相關(guān)位點(diǎn)的過(guò)度磷酸化實(shí)現(xiàn)的，研究結(jié)果提示，吳茱萸次堿可作為阿爾茨海默病治療干預(yù)的潛在藥物靶標(biāo)。齊宇航[42]通過(guò)一系列研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸堿具有很好的神經(jīng)保護(hù)活性，其機(jī)制與氧化應(yīng)激和Akt/mTOR/GSK-3β 信號(hào)傳導(dǎo)及其下游蛋白質(zhì)改善線粒體功能密切相關(guān)，研究結(jié)果顯示，吳茱萸堿可以作為預(yù)防和/或治療神經(jīng)退行性疾病的神經(jīng)保護(hù)候選物。

6 結(jié)語(yǔ)

吳茱萸中的化學(xué)成分眾多，藥理活性復(fù)雜，其主要的化學(xué)成分為生物堿類物質(zhì)、檸檬苦素類物質(zhì)和揮發(fā)油類物質(zhì)?，F(xiàn)代藥理研究主要集中于吳茱萸堿和吳茱萸次堿。大量的動(dòng)物體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，吳茱萸生物堿類在心腦血管系統(tǒng)的作用主要為抑制心肌肥厚發(fā)生、緩解右心室重構(gòu)、保護(hù)心肌缺血/再灌注損傷、抗心律失常、抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖與鈣化、改善血管內(nèi)皮功能和調(diào)節(jié)血壓、降血脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)腦血管和抗阿爾茨海默病等。隨著對(duì)吳茱萸生物堿類藥理作用的進(jìn)一步研究，吳茱萸堿和吳茱萸次堿有望作為阿爾茨海默病治療干預(yù)的潛在藥物靶標(biāo)，為心腦血管疾病特別是阿爾茨海默病的治療提供新的思路。吳茱萸堿與小檗堿在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的聯(lián)合用藥研究也進(jìn)一步證明了其潛在的心腦血管系統(tǒng)藥用開(kāi)發(fā)價(jià)值。

然而目前較多實(shí)驗(yàn)研究仍停留在小鼠或家兔體內(nèi)實(shí)驗(yàn)階段，暫未見(jiàn)吳茱萸生物堿用于臨床研究的相關(guān)報(bào)告，且吳茱萸生物堿類在心腦血管系統(tǒng)疾病中的作用機(jī)制尚未完全闡明，仍有待進(jìn)一步探究。