劉一萱

（河南省駐馬店市中心血站 檢驗科，河南 駐馬店 463000）

近年來臨床上成分輸血的應(yīng)用率越來越高，血小板輸注則作為成分輸血的重點，被廣泛的應(yīng)用于血小板減少性或血小板功能障礙性疾病的治療中［1］。為了指導(dǎo)臨床合理輸注血小板，通過隨機數(shù)字表的方法將2016 年1 月至2017 年8 月中心血站采集供給的經(jīng)過5%二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）制備并儲存于-80°C 的冰凍血小板以及5 d 內(nèi)的新鮮血小板中分別選取60 例作為研究對象同時通過血栓彈力圖（thromboelastogram，TEG）評估新鮮血小板和冰凍血小板的功能，取得一定的研究結(jié)果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

根據(jù)隨機原則要求將2016 年1 月至2017 年8 月中心血站采集供給的經(jīng)過5%DMSO 制備并儲存于-80°C 的冰凍血小板以及5 d 內(nèi)的新鮮血小板中分別選取60 例作為研究對象，在臨床輸注前將120 袋血小板進(jìn)行分組，其中新鮮血小板標(biāo)本設(shè)為A 組，按照2∶1 比例混合的新鮮與冰凍血小板標(biāo)本設(shè)為B 組，按照1∶1 比例混合的新鮮與冰凍血小板標(biāo)本設(shè)為C 組，冰凍血小板標(biāo)本設(shè)為D 組。本次研究方案經(jīng)院倫理委員會審批，且患者及家屬知情同意。

1.2 儀器與方法

新鮮血小板采集時選用Fenwal Amicus 血細(xì)胞分離機和配套的試劑盒以及耗材，整個操作過程嚴(yán)格按照說明書的要求進(jìn)行，全血和抗凝劑按照11∶1 的比例混合，處理總血量控制在4 000 ml 左右，單采時間不得超過120 min，通過Trima Accel血細(xì)胞分離機采集到的血小板要在72 h 內(nèi)震蕩儀保存，溫度控制在22°左右，根據(jù)重量計算5%DMSO 所需量，應(yīng)用20 mL 的空針抽取所需量的5%二甲基亞砜并固定在注射泵上，將血小板袋置于振蕩器上并和血小板延長管相連，將微量注射泵的注射速度調(diào)整為60 mL/h，然后按照說明書要求操作微量注射泵并加藥，完成后立即保存于-80°C。臨床在應(yīng)用冰凍血小板前必須放于40℃的融漿機中水浴解凍，然后取樣配成A、B、C、D 4 組各5 mL 進(jìn)行血栓彈力圖（TEG）各參數(shù)檢測。應(yīng)用北京樂普公司提供的TEG-5000 進(jìn)行血栓彈力圖參數(shù)測定，具體操作為：取血小板標(biāo)本1 mL 將其充分混勻后保存于高嶺土促凝管中，將瓶蓋擰緊，反復(fù)顛倒多次讓其混勻，然后將混勻后的樣品 340 μL+0.2 mmol/L 的 CaCl220 μL 注入杯中并將杯架升起，打開開關(guān)開始檢測。將按照1∶1稀釋后的血小板標(biāo)本應(yīng)用全自動血液分析儀進(jìn)行血小板常規(guī)參數(shù)測定，整個操作過程嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行［2-3］。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

研究資料采用SPSS 19.0 統(tǒng)計學(xué)軟件包進(jìn)行處理，計數(shù)資料和計量資料分別采用百分率（%）和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，通過χ2和t檢驗或方差分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組血小板標(biāo)本TEG參數(shù)檢測結(jié)果對比分析

研究數(shù)據(jù)顯示，A 組和C 組標(biāo)本反應(yīng)時間（reaction，R）值較B、D 兩組明顯縮短，比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；B、C 兩組標(biāo)本組間比較凝血時間（K 值）、ɑ 角（Ang）和最大振幅（maximum amplitude，MA）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但和A、D 兩組比較明顯增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 4組血小板標(biāo)本常規(guī)參數(shù)檢測結(jié)果對比分析

血小板計數(shù)（platelet，Plt）、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW） 3 方面比較，A、D 兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；B、C兩組在血小板計數(shù)（Plt）、血小板分布寬度（PDW）兩方面比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表1 4 組血小板標(biāo)本TEG 參數(shù)檢測結(jié)果對比 （）

表1 4 組血小板標(biāo)本TEG 參數(shù)檢測結(jié)果對比 （）

組別A組B組C組D組F值P值例數(shù)30 30 30 30 R/min 4.6±0.3 6.3±0.3 4.7±0.5 7.8±0.6 11.352 0.000 K/min 1.1±0.2 1.8±0.4 1.8±0.5 1.0±0.5 12.358 0.000 Ang/(°)76.2±2.4 82.3±3.3 81.2±2.5 70.9±2.1 13.241 0.000 MA/mm 67.6±2.6 76.3±2.7 75.7±1.9 68.0±1.7 8.278 0.001

表2 4 組血小板標(biāo)本常規(guī)參數(shù)檢測結(jié)果對比分析 （）

表2 4 組血小板標(biāo)本常規(guī)參數(shù)檢測結(jié)果對比分析 （）

組別A組B組C組D組F值P值例數(shù)30 30 30 30 Plt/(×1011/L)930.88±1.03 830.74±0.63 8.25±0.55 7.18±0.76 8.365 0.001 MPV/fg 10.25±0.67 11.28±0.83 11.35±0.92 12.17±1.45 9.438 0.000 PDW/%8.87±0.76 10.77±1.02 14.23±1.29 17.25±1.75 10.736 0.000

3 討論

在正常人的血液運行期間，血小板通常是保持靜息狀態(tài)，只有血小板膜受到刺激后其才能被激活，獨自或者同時發(fā)生變形、黏附、聚集和釋放等反應(yīng)，而這些反應(yīng)通常被臨床用來評估血小板功能或者質(zhì)量［4］。目前我國存在用血量大幅度上升的趨勢，而新鮮血小板由于受來源不足、儲存時間短等問題的影響，經(jīng)常在急需輸注時發(fā)生數(shù)量不足情況，因此許多醫(yī)院通過冰凍血小板來解決這一問題［5］。評估血小板功能和質(zhì)量的參考指標(biāo)很多，但是現(xiàn)階段尚沒有形成統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，因此評估方法和評估結(jié)果存在一定的差異，同時受人為因素的影響，導(dǎo)致無法依靠單一指標(biāo)來評估凝血全過程的實際情況［6］。

TEG 技術(shù)是把凝血信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柡笥呻娔X進(jìn)行處理并制成的TEG 曲線，主要對凝血和纖溶整個過程進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測，同時還可以用來綜合檢測和評估凝血因子、血小板功能［7-8］。TEG 參數(shù)很多，以R 值、K 值、MA 值臨床應(yīng)用最多，被廣泛的應(yīng)用于凝血功能變化的檢測。R 值主要用來體現(xiàn)凝血因子的功能，K 值和ɑ 角則用來反映凝塊的形成速率；MA 值則用來體現(xiàn)血凝塊的最大輕度和形成的血凝塊的穩(wěn)定性［9-10］。此次研究中，A組和C 組標(biāo)本反應(yīng)時間（R 值）較B、D 兩組明顯縮短，比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；B、C兩組標(biāo)本組間比較凝血時間（K 值）、ɑ 角（Ang）和最大振幅（MA）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但和A、D 兩組比較明顯增加，比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。血小板計數(shù)（Plt）、平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）3 方面比較，A、D 兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；B、C 兩組在血小板計數(shù)（Plt）、血小板分布寬度（PDW）兩方面比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。這說明血小板在制備期間會損害部分的血小板膜，增加血小板激活比率，造成大量的促凝血物質(zhì)釋放至血液中，和新鮮的血小板進(jìn)行混合，有利于提高血小板在早期的凝血速度［11-12］。ɑ 角主要用來表現(xiàn)形成血栓的速度，而混合后血小板的ɑ 角明顯增大，和K 時間基本保持一致，這提示混合后的血小板其促凝功能得到加強［13-14］。在4 組中以新鮮血小板的MA 值最高，這提示新采集的血小板具有較前的收縮功能，其形成的血栓穩(wěn)定性更強［15］。

總之，兩種血小板混合應(yīng)用，可以互相彌補不足，是臨床比較理想的輸血模式，值得推廣。