陳迪新 李瑞鵬 歐慧瑜 邵珍怡 郭秋平

(1.廣州醫(yī)藥研究總院有限公司藥物非臨床安全評(píng)價(jià)研究中心,廣州 510240)(2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院博士后科研流動(dòng)站,北京 100700)(3.廣州醫(yī)藥集團(tuán)有限公司博士后科研工作站,廣州 510130)

椎間盤(pán)由纖維環(huán)、髓核和軟骨終板構(gòu)成一個(gè)無(wú)血管、低氧、低營(yíng)養(yǎng)、低細(xì)胞結(jié)構(gòu)和酸性的環(huán)境[1]。遺傳易感性、不適當(dāng)?shù)呢?fù)重、營(yíng)養(yǎng)缺失、肥胖或者其他疾病導(dǎo)致了髓核細(xì)胞凋亡、纖維環(huán)破裂，炎性因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)增多，免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)增生和血管增生，最終造成腰椎間盤(pán)的退化。其中，髓核細(xì)胞凋亡、髓核細(xì)胞和纖維環(huán)炎性因子和基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)上調(diào)，免疫細(xì)胞浸潤(rùn)是病變的關(guān)鍵進(jìn)程。臨床研究標(biāo)明，腰椎間盤(pán)突出癥(Lumbar Disc Herniation，LDH)神經(jīng)根癥狀不僅與椎間盤(pán)突出的位置、大小有關(guān)，也和炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)[2]。炎癥被認(rèn)為是誘發(fā)神經(jīng)根癥狀的重要因素，炎癥因子的增加，COX-2/PGE2(cyclooxygenase-2/Prostaglandin E2)通路的激活，增加了神經(jīng)的敏感性，從而導(dǎo)致過(guò)敏性疼痛[3-4]。病人椎間盤(pán)組織PGE2含量明顯升高，與LDH神經(jīng)根癥狀呈正相關(guān)。在臨床中使用COX抑制劑通過(guò)抑制COX活性減少前列腺素的合成，起到緩解疼痛，改善椎間盤(pán)退化作用，被較多地用于椎間盤(pán)突出癥患者的保守治療[5]。目前LDH患者治療情況常常比較復(fù)雜，臨床干預(yù)研究方法難以準(zhǔn)確反應(yīng)COX抑制劑對(duì)LDH的影響。因此選取合適的腰椎間盤(pán)突出癥動(dòng)物模型，用于評(píng)價(jià)COX抑制劑對(duì)疾病的療效，對(duì)臨床COX抑制劑的選用有指導(dǎo)性意義[6-8]。本模型使用的是壓迫與炎性刺激共存型，即使用壓迫與炎性刺激共存的方法對(duì)大鼠進(jìn)行建模，能夠較貼切地模擬人類腰椎間盤(pán)突出癥的發(fā)病機(jī)制[9-11]。此類模型可以較好地誘導(dǎo)出大鼠神經(jīng)行為的改變，對(duì)大鼠損傷小，更加接近于臨床。

1 材料與方法

1.1 材料及試劑

0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)(分析純)，生產(chǎn)廠家為天津市大茂化學(xué)試劑廠。芬必得，生產(chǎn)廠家為中美天津史克制藥有限公司。PGE2、COX-2、IL-1、IL-6、NO試劑盒，購(gòu)買自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。戊巴比妥鈉：規(guī)格為25 g/瓶，德國(guó)默克公司(北京華美生物科技技術(shù)有限公司分裝)。

1.2 方法

1.2.1大鼠腰椎間盤(pán)突出癥模型構(gòu)建：實(shí)驗(yàn)選用雄性、體質(zhì)量為(180±20)g的SPF級(jí)SD大鼠60只(購(gòu)于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司)，SPF級(jí)動(dòng)物房常規(guī)飼養(yǎng)3 d后，分為3組(20只/組)，分別為假手術(shù)組、模型組、模型加芬必得給藥組(簡(jiǎn)稱芬必得組)。模型組與芬必得組分組后，大鼠腹腔注射2%戊巴比妥鈉(3 mL/kg)麻醉，俯臥固定，碘酒、酒精依次消毒，以L5/L6棘突間隙為中心，取后背正中切口約4 cm，逐層切開(kāi)皮膚及皮下組織，分離腰椎旁肌，深達(dá)椎板，暴露L5的橫突和椎間孔[12-13]。將直徑為0.8 mm，長(zhǎng)度為4 mm的L形鈦棒在L5椎間孔以背中線約30°～40°和-10低于椎體水平線15°角度約4 mm進(jìn)入椎間孔。當(dāng)鋼棒壓迫神經(jīng)節(jié)，同側(cè)后肢肌肉通常表現(xiàn)出一、兩次輕微的抽搐。另在大鼠背正中以腰椎L5～L6為中心切口，以手術(shù)刀做一長(zhǎng)約2 cm 縱形切口，組織鉗向切口兩側(cè)牽開(kāi)皮膚及皮下組織，以血管鉗分離顯露鼠尾2個(gè)節(jié)段的椎間纖維環(huán)。以手術(shù)刀尖于纖維環(huán)上做一切口，擠壓鼠尾椎間，可見(jiàn)清亮膠凍狀髓核組織于纖維環(huán)切口處突出。用刮匙刮出2節(jié)段髓核，移除大鼠背部傷口覆蓋物，以鑷子夾持髓核組織小心移植于L5椎間孔內(nèi)。放置后，對(duì)背部肌肉和皮膚逐層進(jìn)行縫合，且對(duì)尾部切口也進(jìn)行縫合。假手術(shù)組動(dòng)物僅不取出、放置尾部椎間盤(pán)髓核及不放置L型鋼棒，其余操作與模型組與芬必得組相同。造模完成，每只動(dòng)物的右側(cè)肌肉均連續(xù)注射3 d青霉素，以防感染。造模期間(T1～T7)，對(duì)每只動(dòng)物的左下肢進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分；造模第8天(T8)，選用運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分≥1的動(dòng)物進(jìn)行灌胃給藥(每組選擇16只動(dòng)物)；否則剔除。試驗(yàn)期間，對(duì)每只動(dòng)物的左下肢定期進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分、機(jī)械刺激回縮反應(yīng)測(cè)定、大腿周徑測(cè)量。連續(xù)給藥28 d，末次給藥后1 h全部麻醉后放血處死，取L4～L6腰椎及其神經(jīng)、用4%甲醛溶液進(jìn)行固定后進(jìn)行病理組織學(xué)檢查或進(jìn)行組織炎性細(xì)胞因子檢測(cè)。

1.2.2運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分觀察：按表1，對(duì)造模動(dòng)物的左后肢(造模足)的運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行觀察并評(píng)分。

1.2.3機(jī)械性縮足反射閾值的測(cè)定：用von Frey細(xì)絲以u(píng)p-and-down 法推算50%縮足閾值：將動(dòng)物置于金屬篩網(wǎng)上，安靜5 min后使用不同克數(shù)的Von Frey 纖維細(xì)絲(1、1.4、2、4、6、8、10、15、60 g等)垂直刺激大鼠左后肢手術(shù)側(cè)足底中部，持續(xù)時(shí)間≤4 s，大鼠出現(xiàn)抬足或舔足行為視為陽(yáng)性反應(yīng)，反之為陰性反應(yīng)。測(cè)定首先從2 g開(kāi)始，當(dāng)此力度的刺激不能引起陽(yáng)性反應(yīng)，則給予相鄰大一級(jí)力度的刺激；如出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)則給予相鄰小一級(jí)力度的刺激，如此連續(xù)進(jìn)行，直至出現(xiàn)第1次陽(yáng)性反應(yīng)和陰性反應(yīng)的交界值，再連續(xù)測(cè)定4次。若動(dòng)物的足部反應(yīng)>60 g，均以60 g計(jì)；若動(dòng)物的足部反應(yīng)<1 g，均以1 g計(jì)[14]。

表1 動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分表Table 1 Animal motor function score sheet

1.2.4坐骨神經(jīng)功能評(píng)價(jià)：

A．大腿關(guān)節(jié)周徑測(cè)定：采用游標(biāo)卡尺，測(cè)量各組動(dòng)物左右后肢的大腿關(guān)節(jié)周徑。

B．SFI(坐骨神經(jīng)功能指數(shù))：先進(jìn)行步態(tài)測(cè)量：自制大鼠足印行走箱[15]：選用一個(gè)規(guī)格為80 cm×12 cm×15 cm亞克力透明盒子(上部開(kāi)放)，然后選用一個(gè)規(guī)格為70 cm×20 cm的鏡子，傾斜45°放在中間。將大鼠放在行走箱一端，讓大鼠自行走向箱的另一端，若大鼠中途停止，重新放置起點(diǎn)讓其自行走。在上述自制裝置的正前方約1.5 cm處，調(diào)整好高度使鏡子反射出的圖像正好與高清數(shù)碼相機(jī)平行，然后拍攝大鼠的行走視頻。獲取SFI參數(shù)：將錄制的視頻用Photoshop軟件打開(kāi)，然后緩慢拖動(dòng)視頻時(shí)間軸直到出現(xiàn)清晰的大鼠后足底部時(shí)用軟件中“測(cè)量工具”測(cè)量其長(zhǎng)度、足寬度和中間趾寬度，計(jì)算其SFI (Sciatic nerve function index)。

SFI=-38.3(EPL-NPL)/NPL+109.5(ETS-NTS)/NTS +13.3(EIT-NIT)/NIT-8.8(E：實(shí)驗(yàn)側(cè)足；N：正常側(cè)足；PL(足趾長(zhǎng)度)：足跟到足尖的最長(zhǎng)距離；TS(足趾寬度)：第1～5趾連線的最長(zhǎng)距離；IT(中間足趾距離)：第2～4趾連線的最長(zhǎng)距離。)

1.2.5血清PGE2、COX-2、IL-1β (Interleukin-1β)、IL-6 (Interleukin-6)、NO (Nitric oxide)檢測(cè)：腹主動(dòng)脈取血。采血管的采血量應(yīng)多于4 mL，血液在室溫存放30 min至1 h，將采血管用2 000 g相對(duì)離心力，20 ℃離心15 min取血清。采用ELISA進(jìn)行濃度測(cè)量。

1.2.6椎間管神經(jīng)根PGE2、COX-2、IL-1、NO檢測(cè)：取壓迫處椎間管神經(jīng)根(約1 cm)進(jìn)行組織勻漿，ELISA進(jìn)行濃度檢測(cè)。

1.2.7對(duì)造模處神經(jīng)根及椎間盤(pán)進(jìn)行制片：組織標(biāo)本經(jīng)取材、固定、(椎間盤(pán)脫鈣)、修塊、流水沖洗、脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋后，石蠟切片，HE染色、封片。鏡檢：采用BX43型OLYMPUS?生物顯微鏡觀察和記錄背根神經(jīng)節(jié)及椎間盤(pán)組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)(背根神經(jīng)節(jié)×400，椎間盤(pán)×40)。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 壓迫L5背根神經(jīng)節(jié)及移植自體髓核誘導(dǎo)大鼠腰椎間盤(pán)突出癥相關(guān)癥狀

如圖1所示，用L型鋼棒壓迫大鼠L5背根神經(jīng)節(jié)，并移植自體髓核至背根神經(jīng)節(jié)進(jìn)行造模，模型大鼠在術(shù)后表現(xiàn)出坐骨神經(jīng)過(guò)敏性疼痛相似表現(xiàn)：造模側(cè)后爪經(jīng)常從地板上抬起，在靜息狀態(tài)常見(jiàn)舔造模側(cè)后爪的行為，在行走時(shí)造模側(cè)后爪緩慢放置，移動(dòng)緩慢。嚴(yán)重時(shí)造模側(cè)后爪外翻，可出現(xiàn)拖行及抬起造模側(cè)后爪跳走的行為。

圖1 壓迫與炎性刺激構(gòu)建腰椎間盤(pán)突出癥大鼠模型注：A：腰椎間盤(pán)突出癥大鼠模型構(gòu)建方法示意圖；B：假手術(shù)組(Sham)大鼠左后肢 vs.腰椎間盤(pán)突出癥模型組(LDH)大鼠左后肢Fig.1 Compression and inflammatory stimulation to construct a rat model of lumbar disc herniationNote:A,schematic diagram of the construction method of rat model of lumbar disc herniation;B,left hind limb of sham operation group (Sham)rat vs.lumbar disc herniation model group (LDH)

2.2 芬必得降低腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分

運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分用于描述模型大鼠的運(yùn)動(dòng)功能狀態(tài)，評(píng)分越高，動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能狀態(tài)越差。如圖2所示：造模第8天(T8)，假手術(shù)組、模型組、芬必得組的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分分別是0.00±0.00、1.69±0.70、1.63±0.81。與假手術(shù)組相比，造模動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分均明顯升高(P<0.05)，造模動(dòng)物各組運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分無(wú)明顯差異。T22和T34，與模型組(T22和T34∶1.31±0.48、0.75±0.68)相比，芬必得(T22和T34∶0.75±0.86、0.31±0.48)顯著降低運(yùn)動(dòng)功能的評(píng)分(P<0.05)。

圖2 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分的影響注：Tn表示造模后第n天；n=16；*P<0.05Fig.2 Effect of Fenbid on motor function score in rats with lumbar disc herniationNote:Tn indicates the nth day after modeling;n=16;*P<0.05

2.3 芬必得提高腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的機(jī)械性縮足反射閾值

機(jī)械性縮足反射閾值作為常用的神經(jīng)病理性疼痛行為學(xué)的觀測(cè)指標(biāo)，能夠反映動(dòng)物機(jī)械性刺激誘發(fā)的過(guò)敏疼痛程度，閾值降低，說(shuō)明動(dòng)物產(chǎn)生機(jī)械性過(guò)敏性疼痛。如圖3所示：造模第8天，與假手術(shù)組(16.46±7.00 g)相比，造模動(dòng)物(模型組、芬必得組)的機(jī)械性縮足反射閾值均明顯降低(P<0.05)，分別是(5.02±2.00)g、(6.02±2.47)g，造模動(dòng)物各組機(jī)械性縮足反射閾值無(wú)明顯差異。T34，與模型組(7.32±1.06)g相比，芬必得(8.98±2.68)g顯著升高模型動(dòng)物的機(jī)械性縮足反射閾值(P<0.05)。

圖3 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠機(jī)械性縮足反射閾值的影響注：Tn表示造模后第n天；n=16；*P<0.05Fig.3 Effect of Fenbid on the mechanical paw withdrawal reflex threshold in rats with lumbar disc herniationNote:Tn indicates the nth day after modeling;n=16; *P<0.05

2.4 芬必得提高腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的坐骨神經(jīng)功能

壓迫型腰椎間盤(pán)突出癥模型通過(guò)壓迫背根神經(jīng)節(jié)從而影響動(dòng)物的坐骨神經(jīng)功能。大腿周徑比值(造模側(cè)/對(duì)側(cè))是評(píng)價(jià)坐骨神經(jīng)功能的間接指標(biāo)。大腿周徑比值(造模側(cè)/對(duì)側(cè))下降，說(shuō)明坐骨神經(jīng)損傷，坐骨神經(jīng)支配肌肉群萎縮。如圖4 A所示：造模第22天，與假手術(shù)組(0.99±0.0)相比，造模動(dòng)物的大腿周徑比值(造模側(cè)/對(duì)側(cè))明顯降低(P<0.05)。T34，與模型組(0.82±0.10)相比，芬必得(0.89±0.05)顯著升高模型動(dòng)物的大腿周徑比值(造模側(cè)/對(duì)側(cè))(P<0.05)。

步態(tài)測(cè)量實(shí)驗(yàn)中坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)用于評(píng)價(jià)坐骨神經(jīng)的損傷。SFI=0為正常，-100為完全損傷。如圖4B所示：造模第8天，與假手術(shù)組(-11.97±2.8)相比，造模動(dòng)物的SFI值明顯降低(P<0.05)。T22和T34，與模型組(T22和T34：-43.20±10.80、-43.37±22.51)相比，陽(yáng)性藥芬必得(T22和T34：-30.67±11.64、-20.33±29.30)顯著升高模型動(dòng)物的SFI值(P<0.05)。

圖4 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠坐骨神經(jīng)功能的影響注：Tn表示造模后第n天；n=16；*P<0.05Fig.4 Effect of Fenbid on the sciatic nerve function in rats with lumbar disc herniationNote:Tn indicates the nth day after modeling;n=16;*P<0.05

2.5 芬必得改善腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的神經(jīng)根病變及椎間盤(pán)病變

2.5.1背根神經(jīng)節(jié)病理檢查結(jié)果；如圖5A所示，假手術(shù)組背根神經(jīng)節(jié)結(jié)構(gòu)完整，節(jié)細(xì)胞呈圓形或卵圓形，胞核大而圓、核仁清晰，胞漿內(nèi)可見(jiàn)較多尼氏小體；節(jié)細(xì)胞周圍可見(jiàn)扁平或橢圓形衛(wèi)星細(xì)胞環(huán)繞，節(jié)細(xì)胞間可見(jiàn)神經(jīng)纖維及少量結(jié)締組織、小血管。模型組可見(jiàn)不同程度節(jié)細(xì)胞及軸突變性，主要表現(xiàn)為節(jié)細(xì)胞體積減小、嗜酸性增強(qiáng)、排列疏松，部分節(jié)細(xì)胞核膜模糊，尼氏小體細(xì)小、稀疏，個(gè)別節(jié)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)見(jiàn)較大圓形空泡；節(jié)細(xì)胞周圍巨噬細(xì)胞數(shù)量增加，軸突嗜酸性增強(qiáng)、呈空泡狀、排列疏松。芬必得組可見(jiàn)節(jié)細(xì)胞及軸突變性，病變與模型組相似，但程度較輕。

圖5 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠神經(jīng)根及椎間盤(pán)病理變化的影響注：A：各組大鼠背根神經(jīng)節(jié)組織HE染色結(jié)果；B：各組大鼠椎間盤(pán)組織HE染色結(jié)果；C：各組大鼠背根神經(jīng)節(jié)組織病理評(píng)分，n=8；*P<0.05；D：各組大鼠椎間盤(pán)組織病理評(píng)分，n=4Fig.5 Effect of Fenbid on the pathological changes of nerve root and intervertebral disc in rats with lumbar disc herniationNote:A：HE staining results of dorsal root ganglion tissue in each group of rats;B：HE staining results of intervertebral disc tissue in each group of rats;C：Histopathological score of dorsal root ganglion in each group,n=8; *P<0.05;D：Histopathological score of intervertebral disc in each group,n=4

2.5.2椎間盤(pán)病理檢查結(jié)果：如圖5B所示，假手術(shù)組椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)完整，纖維環(huán)排列整齊、呈同心圓狀環(huán)繞于髓核外，兩者界線清晰；髓核內(nèi)見(jiàn)大量黏液樣基質(zhì)及脊索細(xì)胞、少量軟骨樣細(xì)胞。模型組可見(jiàn)不同程度退行性變化，主要表現(xiàn)為髓核體積減小、基質(zhì)成分及脊索細(xì)胞減少、類軟骨細(xì)胞數(shù)量增加，部分動(dòng)物可見(jiàn)髓核位置偏移、局部凸出、壓迫纖維環(huán)，被壓迫部位纖維環(huán)排列紊亂。芬必得組檢查可見(jiàn)不同程度退行性變化，病變與模型組相似，但程度較輕。

2.6 芬必得降低腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的血清炎性相關(guān)因子

組織損傷及炎性反應(yīng)可通過(guò)促炎因子等促進(jìn)COX-2在損傷的局部組織和全身大量表達(dá)，誘導(dǎo)PGE2上調(diào)，相反COX-2/PGE2通路的激活也會(huì)導(dǎo)致炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6等表達(dá)上調(diào)。如表2所示：與假手術(shù)組相比，模型組動(dòng)物血清的COX-2、PGE2、IL-1β、IL-6、NO濃度明顯升高(P<0.05)。與模型組相比，陽(yáng)性藥芬必得組動(dòng)物血清的COX-2、PGE2、IL-1β、IL-6、NO濃度明顯降低(P<0.05)。

表2 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的血清IL-1β、IL-6、NO、COX-2、PGE2的影響Table 2 Effect of Fenbid on serum IL-1β,IL-6,NO,COX-2 and PGE2 in rats with lumbar disc

注：與假手術(shù)組相比，*P<0.05，**P<0.01；與模型組相比，#P<0.05，##P<0.01
Note:compared with the sham operation group*P<0.05,**P<0.01;compared with the model group,#P<0.05,##P<0.01

2.7 芬必得降低腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的背根神經(jīng)節(jié)病變處炎性相關(guān)因子

如表3所示：與假手術(shù)組相比，模型組動(dòng)物背根神經(jīng)節(jié)病變處的COX-2、PGE2、IL-1β、NO濃度明顯升高(P<0.05)。與模型組相比，陽(yáng)性藥芬必得動(dòng)物背根神經(jīng)節(jié)病變處的COX-2、PGE2、IL-1β、NO濃度明顯降低(P<0.05)。

表3 芬必得對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥大鼠的背根神經(jīng)節(jié)病變處IL-1β、NO、COX-2、PGE-2的影響Table 3 Effects of Fenbid on IL-1β,NO,COX-2 and PGE2 in the dorsal root ganglion lesions of rats with lumbar disc n=8)

注：與假手術(shù)組相比，*P<0.05，**P<0.01；與模型組相比，#P<0.05，##P<0.01
Note:compared with the sham operation group*P<0.05,**P<0.01;compared with the model group,#P<0.05,##P<0.01

3 討論

腰椎間盤(pán)突出癥最基本的病因是腰椎間盤(pán)的退行性改變，在退行性改變的基礎(chǔ)上，由于勞累、外傷等因素使腰椎間盤(pán)發(fā)生結(jié)構(gòu)等改變，纖維環(huán)破裂，髓核向外膨出或脫出，壓迫神經(jīng)根或脊髓導(dǎo)致腰腿疼痛等癥狀。目前報(bào)道的LDH模型有多種，包括纖維環(huán)針刺損傷建模、手術(shù)損傷脊椎結(jié)構(gòu)建模、化學(xué)損傷法、單純炎性刺激型模型、壓迫背根神經(jīng)節(jié)模型、及壓迫與炎性刺激共存型。其中壓迫與炎性刺激共存型能夠較貼切地模擬人類腰椎間盤(pán)突出癥的發(fā)病機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)L型鋼棒經(jīng)椎間孔對(duì)背根神經(jīng)節(jié)進(jìn)行壓迫，同時(shí)使用自體尾椎髓核移植到背根神經(jīng)節(jié)處，成功構(gòu)建了壓迫與炎性刺激共存型大鼠腰椎間盤(pán)突出癥模型。模型大鼠表現(xiàn)出行為學(xué)評(píng)分變化、過(guò)敏性疼痛、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)下降及椎間盤(pán)病理性變化。利用此模型可用于緩解疼痛及改善退行性變藥物的評(píng)價(jià)。

腰椎間盤(pán)突出癥(Lumbar Disc Herniation，LDH)所致坐骨神經(jīng)痛等過(guò)敏性疼痛癥狀與炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)。研究表明PGE2含量明顯升高，與LDH神經(jīng)根癥狀呈正相關(guān)。前列腺素E2(PGE2)是一種主要的增強(qiáng)疼痛的炎癥介質(zhì)，由花生四烯酸通過(guò)一系列酶包括環(huán)氧合酶(COX)產(chǎn)生。組織損傷和炎癥導(dǎo)致COX-2(誘導(dǎo)型COX誘導(dǎo)型異構(gòu)體)局部大量誘導(dǎo)表達(dá)。另外，外周炎癥通過(guò)IL-1β誘導(dǎo)COX-2在脊髓背角神經(jīng)元中的中樞作用。COX-2/PGE2通路的激活，增加了神經(jīng)的敏感性，從而導(dǎo)致過(guò)敏性疼痛。臨床上NSAIDs (非甾體類抗炎藥，Non-Steroid Anti-Inflammtory Drugs)和COX-2抑制劑能減輕部分急性下腰痛患者的疼痛。另外COX-2也參與退化過(guò)程的PGE2的產(chǎn)生，該過(guò)程可能促進(jìn)腰椎間盤(pán)退行性變。因此在臨床中使用COX抑制劑通過(guò)抑制COX活性減少前列腺素的合成，起到緩解疼痛，改善椎間盤(pán)退化作用，被較多地用于椎間盤(pán)突出癥患者的保守治療。本實(shí)驗(yàn)對(duì)COX抑制劑芬必得治療腰椎間盤(pán)突出癥的療效進(jìn)行了評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示COX抑制劑可改善腰椎間盤(pán)突出癥模型大鼠的過(guò)敏性疼痛及椎間盤(pán)退行性變，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。