曹美榮 白春俠 劉麗

【摘要】 目的 研究病理技術(shù)蘇木素-伊紅（HE）染色在病理診斷中的價值， 并分析提高其應(yīng)用效果的方法。方法 8000例進(jìn)行病理診斷的患者作為研究對象， 對其樣本均采用HE染色進(jìn)行病理診斷， 統(tǒng)計樣本合格率和不合格率， 并分析樣品不合格的主要原因。結(jié)果 在本次研究中， 樣本合格率為99.00%（7920/8000）， 樣本不合格率為1.00%（80/8000）。樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。結(jié)論 病理技術(shù)HE染色在病理診斷中應(yīng)用效果較好， 其樣品合格率較高， 但是在進(jìn)行染色的過程中， 需要進(jìn)行更加細(xì)致的操作， 針對影響樣本合格的各種因素進(jìn)行有效規(guī)避， 以降低樣本被污染的幾率， 防止出現(xiàn)不合格樣本， 進(jìn)而提高診斷效率。通過上述保障， 病理技術(shù)HE染色值得在臨床病理診斷中推廣。

【關(guān)鍵詞】 蘇木素-伊紅染色;病理技術(shù);應(yīng)用價值;操作方法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.27.036

HE染色是目前最常見的一種病理學(xué)染色技術(shù)， 該技術(shù)能夠?yàn)橹髦吾t(yī)生在治療過程中提供具有針對性的診斷， 從而提高臨床的治療效率。但是， 就目前而言， 在利用HE染色病理技術(shù)進(jìn)行診斷的過程中， 仍然存在小部分染色效果不佳的情況發(fā)生， 導(dǎo)致診斷結(jié)果錯誤等情況發(fā)生， 在探究過程中發(fā)現(xiàn)染色效果不佳的原因， 主要與檢驗(yàn)過程中的操作有

關(guān)[1]， 因此， 為了能夠有效避免診斷誤差或者錯誤出現(xiàn)， 本文主要針對在本科室進(jìn)行HE染色的病理診斷進(jìn)行分析， 同時對如何提高HE染色的方法進(jìn)行研究， 具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料

選取2018年1月～2019年1月本科室8000例進(jìn)行病理診斷的患者作為研究對象， 其中男5312例， 女2688例， 平均年齡（40.23±3.45）歲。樣本來源占比分別為手術(shù)切除62.50%（5000/8000）、纖維內(nèi)窺鏡25.00%（2000/8000）、穿刺取材12.50%（1000/8000）， 各類樣本占比分別為子宮內(nèi)膜樣本13.75%（1100/8000）、脂肪組織樣本7.50%（600/8000）、骨組織樣本5.00%（400/8000）、腹腔臟器樣本73.75%（5900/8000）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均取得相關(guān)倫理研究協(xié)會的同意。②樣本涉及的患者及其家屬均簽署知情同意書。

1. 2 方法 在本次研究中， 對入選的8000例患者樣本進(jìn)行HE染色， 根據(jù)選取樣本的部位， 對其進(jìn)行不同的處理， 其中包括固定樣本、對樣本進(jìn)行脫水處理、對切片進(jìn)行染色等幾個步驟。其中， HE的染色過程主要包括：采用二甲苯進(jìn)行2次去蠟處理， 再利用不同濃度的無水乙醇將切片洗凈， 同時采用蒸餾水再次清洗切片， 并將洗凈的切片采用蘇木素進(jìn)行染色， 染色時間≤5 min， 并用流水浸洗， 直到切片的細(xì)胞核變?yōu)樗{(lán)色為止。然后使用伊紅進(jìn)行染色， 并采用濃度為95%的乙醇進(jìn)行沖洗， 使用苯酚二甲苯、二甲苯對切片進(jìn)行處理， 將其利用DPX封片劑進(jìn)行封存， 最后將處理好的樣本貼上標(biāo)簽。

1. 3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計樣本合格率和不合格率， 并分析樣品不合格的主要原因。

2 結(jié)果

在本次研究中， 樣本合格率為99.00%（7920/8000）， 樣本不合格率為1.00%（80/8000）。樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。

3 討論

HE染色， 就是利用蘇木素和伊紅進(jìn)行染色， 在臨床醫(yī)學(xué)中作為一項(xiàng)重要的病理診斷， 但是由于在染色過程中步驟較為復(fù)雜， 導(dǎo)致染色結(jié)果存在一定的誤差， 為了能夠有效確保每例樣本的準(zhǔn)確率， 在進(jìn)行HE染色的時候， 對其操作方法進(jìn)行仔細(xì)研究[2]。

HE染色法是石蠟切片技術(shù)中的一種常見的染色方法， 其中， 蘇木素的染液主要呈現(xiàn)出堿性， 通過染色以后， 切片中的細(xì)胞核會被染上紫藍(lán)色， 伊紅是一種酸性染料， 能夠使切片的細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外的物質(zhì)染成紅色。在實(shí)驗(yàn)中， 對蘇木素和伊紅進(jìn)行染色的時候， 步驟較為復(fù)雜， 尤其是在本次研究中， 通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)， 8000例樣本中， 仍然有1.00%的樣本存在不合格的情況， 通過對導(dǎo)致樣品不合格的原因進(jìn)行詳細(xì)分析以后， 發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。因此， 為了能夠提高HE染色效率， 就要對實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)染色技術(shù)進(jìn)行不斷的提高， 從而有效滿足醫(yī)院病理診斷的需要。

在本次研究中， 導(dǎo)致樣品不合格的主要原因之一是切片染色不均勻， 造成切片染色不均勻的主要原因包括：技術(shù)人員在對樣本進(jìn)行取材和固定的時候， 由于固定的位置不恰當(dāng)、樣本的脫水時間太短， 切片的厚度不均勻、切片上存在橫紋、染色過程中處理不恰當(dāng)?shù)龋?導(dǎo)致染色效果不佳。同時， 由于切片組織的取材較大， 切片較厚， 固定樣本時采用的固定液濃度較大， 導(dǎo)致組織不能完全被固定好， 從而影響了中間組織的著色效果， 造成著色模糊等現(xiàn)象發(fā)生， 另外， 脫水時間較短， 從而導(dǎo)致切片中存在水分， 導(dǎo)致切片的透明度較低， 影響最終的著色效果[3-5]。

導(dǎo)致樣品不合格的另一個重要原因?yàn)槿旧：?切片染色模糊主要是因?yàn)樵跈z驗(yàn)過程中， 工作人員在取材的時候， 操作不當(dāng)導(dǎo)致的， 例如在取材過程中， 標(biāo)本出現(xiàn)自溶情況， 在固定樣本的時候不及時， 從而引起組織結(jié)構(gòu)模糊的現(xiàn)象發(fā)生。另外， 在采用固定劑進(jìn)行固定的時候， 也是非常重要的， 如果固定不良， 就會導(dǎo)致切片染色模糊的現(xiàn)象發(fā)生， 另外， 在使用乙醇進(jìn)行標(biāo)本固定的時候， 也有可能導(dǎo)致染色出現(xiàn)模糊的現(xiàn)象發(fā)生。在取材過程中， 如果選取了淋巴組織， 會導(dǎo)致切片發(fā)灰， 這是由于淋巴細(xì)胞較為密集、其結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜， 同時， 在制作樣本的時候， 溫度過高、染料質(zhì)量較差、細(xì)胞分化太嚴(yán)重等， 也會導(dǎo)致染色模糊[6-8]。

而染色中組織切片脫落主要是與組織自身有關(guān)， 同時也與工作人員在處理樣本時， 處理不當(dāng)?shù)仍蛴嘘P(guān)。切片污染和染色困難主要是因?yàn)闃颖局械慕M織被污染， 是染液、試劑等不干凈導(dǎo)致的[9-12]。

綜上所述， 病理技術(shù)HE染色在病理診斷中應(yīng)用效果較好， 其樣品合格率較高， 但是在進(jìn)行染色的過程中， 需要進(jìn)行更加細(xì)致的操作， 針對組織切片脫落、染色不均勻、染色模糊、切片污染、染色困難等影響樣本合格的因素進(jìn)行有效規(guī)避， 以降低樣本被污染的幾率， 防止出現(xiàn)不合格樣本， 進(jìn)而提高診斷效率。通過上述保障， 病理技術(shù)HE染色值得在臨床病理診斷中推廣。

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[收稿日期：2019-02-14]