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白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方的篩選

2019-09-10 07:22黃穎融黃孝風(fēng)侯利涵陳慧晶周樹軍鄒娜
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2019年5期
關(guān)鍵詞:白芨

黃穎融 黃孝風(fēng) 侯利涵 陳慧晶 周樹軍 鄒娜

摘要:【目的】篩選白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方,為白芨的離體快繁和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。【方法】采用L9(34)正交試驗(yàn)和單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,篩選適宜白芨試管球莖膨大的基本培養(yǎng)基、生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度及蔗糖和活性炭濃度,確定白芨試管球莖膨大的最佳培養(yǎng)基配方。【結(jié)果】萘乙酸(NAA)和基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖膨大的影響大于6-芐氨基嘌呤(6-BA),當(dāng)NAA濃度為0.1 mg/L時,試管球莖膨大的各指標(biāo)值均最大;6-BA對試管球莖膨大各指標(biāo)值均無顯著影響(P>0.05);以1/2MS為基本培養(yǎng)基更有利于白芨試管球莖生根和膨大。蔗糖是影響白芨試管球莖膨大的重要因素,隨蔗糖濃度增加,試管球莖逐漸膨大且根生長量及植株長勢漸好,當(dāng)蔗糖濃度為20.0~40.0 g/L時試管球莖增殖效果較佳。培養(yǎng)基中添加0.5 g/L活性炭的白芨試管球莖鮮重增殖率最高,為33.41%。相關(guān)性分析結(jié)果表明,試管球莖生根率與鮮重增殖率呈正相關(guān),與高度增殖率呈顯著正相關(guān)(P<0.05);試管球莖萌芽率與鮮重增殖率、高度增殖率和直徑增殖率均呈負(fù)相關(guān),即生根對試管球莖膨大起促進(jìn)作用,而芽分化對試管球莖膨大起抑制效應(yīng)?!窘Y(jié)論】1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖+0.5 g/L活性炭可作為白芨試管球莖膨大的最佳培養(yǎng)基配方加以推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞: 白芨;試管球莖;膨大;離體快繁;培養(yǎng)基配方

中圖分類號: S682.31 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:2095-1191(2019)05-1064-08

Aabstract:【Objective】In order to provide reference for in vitro rapid propagation and industrial production of Bleti-lla striata,the medium formulation of bulbous enlargement was screened. 【Method】The suitable basic medium,different plant growth regulators,concentrations of sucrose and activated carbon on B. striata bulbous enlargement were studied utilizing L9(34) orthogonal experiment and single-factor complete random experiment design methods to screen the best medium formulation for bulbous enlargement of B. striata in vitro. 【Result】The results showed that the effects of nafusaku(NAA) and basal medium on bulbous enlargement was greater than that of 6-benzylaminopurine(6-BA). When NAA concentration was 0.1 mg/L,the average value of each index of bulb enlargement was the largest. 6-BA had no significant effect on each index of bulbous enlargement(P>0.05). 1/2MS was beneficial to the rooting and bulbous enlargement of B. striata. Sucrose was an important factor affecting the bulbous enlargement of B. striata in vitro. With the increase of sucrose content,the bulb gradually expanded, the roots and plant growth were fine. The bulb proliferation of B. striata was fine when sucrose concentration was 20.0-40.0 g/L. The fresh weight proliferation rate was the highest(33.41%) with 0.5 g/L activated carbon adding into basal medium. Correlation analysis showed that the rooting rate was positively correlated with fresh weight gain rate, and was significantly positively correlated with height multiplication rate(P<0.05). Germination rate was negatively correlated with fresh weight gain rate,height multiplication rate and diameter multiplication rate. It indicated that rooting promoted bulbous enlargement and the bud differentiation inhibited bulb enlargement. 【Conclusion】The suitable medium formulation for the bulbous enlargement of B. striata is 1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L sucrose+0.5 g/L activated carbon and can be promoted in production.

Key words: Bletilla striata; bulb in tube; enlargement; in vitro rapid propagation; medium formulation

0 引言

【研究意義】白芨(Bletilla striata)為蘭科白芨屬多年生草本植物,其花大且色艷,集觀賞和藥用價值于一體(石晶,2010)。由于野生白芨資源遭到過度采挖,加上白芨種子在自然條件下繁殖困難,其野生資源已急劇減少,因此白芨已被我國列為珍稀瀕危保護(hù)植物(陸峻波等,2011)。至今,有關(guān)白芨屬植物的研究報道主要集中于組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)(管常東等,2010;鄒娜等,2013)、栽培技術(shù)(張滿常等,2015;陳潤澤,2018)和藥理與臨床(王曉等,2017;胡長玉等,2018)等方面,也有部分針對資源與利用(石晶,2010)、細(xì)胞懸浮體系建立(劉軍凱,2012)和脅迫響應(yīng)(王瑩博等,2018)的報道。白芨的繁殖以分生繁殖為主,但分生系數(shù)小,植株生長周期較長,且耗種量大,不宜進(jìn)行大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)(張亦誠,2007)。組織培養(yǎng)技術(shù)具有繁殖系數(shù)高、受外界環(huán)境條件限制小等特點(diǎn),可在短期內(nèi)獲得大量材料實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)(李浩川等,2018;饒寶蓉等,2018;宋剛等,2018)。在白芨的常規(guī)組織培養(yǎng)過程中,試管苗的球莖重量輕、直徑小,移栽后地上部容易枯萎、成活率低,移栽后第2年大多數(shù)未能達(dá)到商業(yè)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),而用試管球莖替代試管苗進(jìn)行移栽,因試管球莖貯藏的養(yǎng)分能為幼苗生長發(fā)育提供大量營養(yǎng),可有效解決移栽后試管苗成活率低的問題(劉旭忻等,2015),但目前有關(guān)白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方篩選的研究尚無報道。因此,篩選白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方,對其種苗的離體快繁和工業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】Varshney等(2000)、朱錦等(2002)、王光萍等(2005)研究發(fā)現(xiàn),蔗糖是培養(yǎng)基中的碳源,能為植物提供營養(yǎng)物質(zhì),具有促進(jìn)植物生長的作用,尤其較高濃度的蔗糖能刺激百合和石蒜鱗莖形成和膨大。張延龍等(2006)、張潔等(2010)、張艷波(2013)研究認(rèn)為,用于誘導(dǎo)百合試管鱗莖形成及膨大的培養(yǎng)基主要為MS,但培養(yǎng)基中不同濃度的大量元素也會對鱗莖的形成和膨大產(chǎn)生影響。建立于試管苗培育基礎(chǔ)上的試管鮮莖膨大技術(shù)目前已在百合和石蒜等植物的相關(guān)研究中取得了一定成果(張延龍等,2006;任亞萍等,2011;張彥妮等,2016;劉旭忻等,2018)。蘇菁華(2014)研究顯示,培養(yǎng)基中6-芐氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)濃度均為0.5 mg/L時渥丹和川百合小鱗莖的膨大效果最佳。此外,在培養(yǎng)基中添加適宜濃度的活性炭,對百合鱗莖發(fā)育也有一定效果(胡鳳榮等,2006;王曉麗等,2011;秦新惠等,2015)。【本研究切入點(diǎn)】已有研究表明,3種納金花屬植物及乳白石蒜和中國石蒜等試管鱗莖移栽后,其成活率與試管鱗莖大小直接相關(guān),試管苗形成的鱗莖越大其移栽成活率越高(楊曦,2013),但至今未見關(guān)于白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方篩選及用膨大試管球莖替代試管苗移栽的相關(guān)研究報道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】分析植物生長調(diào)節(jié)劑種類(NAA和6-BA)和濃度配比、基本培養(yǎng)基及蔗糖和活性炭濃度對白芨試管球莖膨大的影響,探索促使白芨試管球莖膨大的途徑,篩選出最適白芨試管球莖膨大的培養(yǎng)基配方,進(jìn)而用膨大的試管球莖替代試管苗進(jìn)行移栽,為白芨的離體快繁、育種和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2017年10月22日—2018年3月12日在江西農(nóng)業(yè)大學(xué)花卉基地組培室進(jìn)行,以其繼代保存的白芨無菌試管苗開展球莖膨大試驗(yàn)。生長調(diào)節(jié)劑NAA和6-BA購自上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司;基本培養(yǎng)基購自荷蘭哈勒姆(Duchefa Biochemie,Haarlem,The Netherlands);蔗糖和活性炭等購自天津市大茂化學(xué)試劑廠。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 小球莖獲得 將白芨不定芽分割成單芽,轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基1/2MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L GA3中進(jìn)行生根壯苗及結(jié)球培養(yǎng)。40 d后取與球莖大小相近的試管苗,切去其葉片和根系,將球莖接種于各膨大培養(yǎng)基中。

1. 2. 2 試管球莖膨大L9(34)正交設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用3因素(生長素、細(xì)胞分裂素和基本培養(yǎng)基)3水平(生長素的3個濃度、細(xì)胞分裂素的3個濃度和基本培養(yǎng)基的3種類型)進(jìn)行L9(34)正交設(shè)計(jì)(表1),共9個處理組合,篩選適宜白芨試管球莖膨大的培養(yǎng)基配方。

1. 2. 3 蔗糖濃度篩選 在正交試驗(yàn)得出白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基配方的基礎(chǔ)上,采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,分析培養(yǎng)基中蔗糖濃度(0、20.0、40.0、80.0和120.0 g/L)對白芨試管球莖膨大指標(biāo)的影響。

1. 2. 4 活性炭濃度篩選 以正交試驗(yàn)結(jié)果和適宜蔗糖濃度為基礎(chǔ),采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,分析培養(yǎng)基中活性炭濃度(0、0.5、1.0和2.0 g/L)對白芨試管球莖膨大指標(biāo)的影響。

1. 2. 5 培養(yǎng)條件、測定指標(biāo)及方法 在1.2.1~1.2.4中,培養(yǎng)室溫度(25±2)℃,光照時間12 h/d,光照強(qiáng)度2000 lx。如無特殊說明,所有培養(yǎng)基均添加植物凝膠3.0 g/L和蔗糖20.0 g/L,pH 5.8~6.0,121 ℃高壓滅菌20 min。接種45 d后,統(tǒng)計(jì)各處理生根率、萌芽率和分化芽數(shù),然后從培養(yǎng)基中取出球莖,剪去葉片和根,稱其鮮重,測定球莖直徑和高度,統(tǒng)計(jì)球莖的膨大指標(biāo)(鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率)等。每處理接種6瓶,3次重復(fù)。

生根率(%)=生根球莖數(shù)/接種球莖總數(shù)×100

萌芽率(%)=萌芽球莖數(shù)/接種球莖總數(shù)×100

分化芽數(shù)=分化出的不定芽總數(shù)/接種球莖總數(shù)

鮮重增殖率(%)=(試驗(yàn)結(jié)束時球莖鮮重-球莖

初始鮮重)/球莖初始鮮重×100

直徑增殖率(%)=(試驗(yàn)結(jié)束時球莖直徑-球莖

初始直徑)/球莖初始直徑×100

高度增殖率(%)=(試驗(yàn)結(jié)束時球莖高度-球莖

初始高度)/球莖初始高度×100

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

采用DPS 7.05進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2016進(jìn)行整理,以SPSS 17.0進(jìn)行單因素方差分析和Duncan’s多重比較。

2 結(jié)果與分析

2. 1 植物生長調(diào)節(jié)劑種類及基本培養(yǎng)基配比對白芨試管球莖膨大的影響

表2為植物生長調(diào)節(jié)劑和基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖膨大影響的正交試驗(yàn)結(jié)果,圖1-A為各處理白芨試管球莖的膨大效果,圖1-B為處理2試管球莖的生長狀態(tài)。從圖1-A可看出,白芨的試管球莖近球形,略不規(guī)則,其膨大效果主要在鮮重增殖上體現(xiàn),其次是在直徑增殖和高度增殖上體現(xiàn)。極差分析結(jié)果(表3)表明,NAA、6-BA和基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖鮮重增殖率的極差(RA)分別為26.23、6.37和22.54,經(jīng)調(diào)整后的極差(R'A)分別為23.62、5.73和20.30,即影響白芨試管球莖鮮重增殖率的試驗(yàn)因素排序?yàn)镹AA>基本培養(yǎng)基>6-BA。NAA、6-BA和基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖直徑增殖率的極差(RB)分別為6.61、2.52和7.78,調(diào)整后的極差(R'B)分別為5.95、2.27和7.01;對白芨試管球莖高度增殖率的極差(RC)分別為3.00、1.70和4.88,調(diào)整后的極差(R'C)分別為2.71、1.53和4.40,即影響直徑增殖率和高度增殖率的試驗(yàn)因素排序均為基本培養(yǎng)基>NAA>6-BA。說明影響白芨試管球莖膨大的主要因素是NAA和基本培養(yǎng)基,6-BA的影響較小。其中,當(dāng)基本培養(yǎng)基中NAA濃度為0.1 mg/L時,白芨試管球莖膨大各指標(biāo)的增殖率均最高,鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率分別為44.77%、12.99%和8.24%,較NAA濃度為0.5和1.0 mg/L的培養(yǎng)基分別提高141.48%和23.37%、103.61%和7.98%、57.25%和36.88%;當(dāng)基本培養(yǎng)基為1/2MS時,白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均最高,較以MS和2MS為基本培養(yǎng)基分別提高5.10%和119.69%、24.29%和125.69%、103.83%和83.17%;6-BA對白芨試管球莖膨大各指標(biāo)的增殖率影響均較小,但以濃度1.0 mg/L時的鮮重增殖率最高。

方差分析結(jié)果(表4)表明,NAA對白芨試管球莖鮮重增殖率和直徑增殖率的影響分別達(dá)極顯著水平(P<0.01,下同)和顯著水平(P<0.05,下同),對高度增殖率的影響不顯著(P>0.05,下同);基本培養(yǎng)基對鮮重增殖率和高度增殖率的影響均達(dá)顯著水平,對直徑增殖率的影響達(dá)極顯著水平;而6-BA對各指標(biāo)的影響均未達(dá)顯著水平。綜上所述,白芨試管球莖膨大的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA。

2. 2 培養(yǎng)基中蔗糖濃度對白芨試管球莖膨大的影響

圖1-C為不同濃度蔗糖處理的白芨試管球莖膨大效果,圖1-D為40.0 g/L蔗糖處理的白芨試管球莖生長狀態(tài)。由表5可知,白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均隨培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加呈先增加后減少的變化趨勢,且均在蔗糖濃度為20.0和40.0 g/L時達(dá)較大值。試管球莖鮮重增殖率和直徑增殖率在基本培養(yǎng)基中蔗糖濃度為0~80.0 g/L時差異不顯著,高度增殖率以蔗糖濃度為20.0 g/L時最高,極顯著高于不添加蔗糖和添加蔗糖濃度為80.0和120.0 g/L時的高度增殖率,但與蔗糖濃度40.0 g/L的高度增殖率差異不顯著。綜合考慮其經(jīng)濟(jì)成本,白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基中蔗糖濃度以20.0 g/L為宜。

2. 3 培養(yǎng)基中活性炭濃度對白芨試管球莖膨大的影響

圖1-E為不同濃度活性碳處理的白芨試管球莖膨大效果,圖1-F為0.5 g/L活性碳處理的白芨試管球莖生長狀態(tài)。由表6可知,白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均隨培養(yǎng)基中活性炭濃度的增加呈先增加后減小的變化趨勢,當(dāng)活性炭濃度為0.5 g/L時達(dá)最大值,分別較不添加活性炭提高51.86%、1.76%和42.28%,但無顯著差異;培養(yǎng)基中活性炭濃度為0.5 g/L時試管球莖的鮮重增殖率和高度增殖率極顯著或顯著高于活性炭濃度為1.0和2.0 g/L時的鮮重增殖率和高度增殖率;不同活性炭濃度培養(yǎng)基中白芨試管球莖的直徑增殖率間無顯著差異,但活性炭濃度為1.0 g/L時的試管球莖直徑增殖率明顯低于活性炭濃度為0.5 g/L時的直徑增殖率。培養(yǎng)基中活性炭濃度為1.0和2.0 g/L時的試管球莖鮮重增殖率與不添加活性炭時的試管球莖鮮重增殖率無顯著差異。因此,白芨試管球莖膨大培養(yǎng)基中活性炭添加量以0.5 g/L為宜,在實(shí)際生產(chǎn)中也可考慮不添加活性炭。

2. 4 白芨試管苗生長與球莖膨大間的相關(guān)性

對表2、表5和表6中白芨試管球莖生根萌芽率和膨大指標(biāo)增殖率數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果(表7)表明,白芨試管球莖鮮重增殖率與直徑增殖率和高度增殖率、直徑增殖率與高度增殖率呈極顯著正相關(guān);試管球莖生根率與鮮重增殖率呈正相關(guān),與高度增殖率呈顯著正相關(guān),與直徑增殖率呈負(fù)相關(guān);試管球莖萌芽率與鮮重增殖率、高度增殖率和直徑增殖率呈負(fù)相關(guān),其中與直徑增殖率呈顯著負(fù)相關(guān)。說明生根對試管球莖膨大起促進(jìn)作用,而芽分化對試管球莖膨大起抑制效應(yīng)。

3 討論

3. 1 關(guān)于植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖膨大的影響

離體培養(yǎng)條件下,在培養(yǎng)基中添加適宜濃度及比例的生長素和細(xì)胞分裂素有利于植物儲貯藏器官發(fā)育。本研究結(jié)果表明,較低濃度(0.1 mg/L)NAA可促進(jìn)白芨試管球莖膨大,與Lim等(1998)對東方百合雜交系品種Casa blanca和Acapulco的研究結(jié)果相似。本研究中,6-BA對白芨試管球莖膨大影響不顯著,可能與細(xì)胞分裂素的主要生理作用是誘導(dǎo)芽細(xì)胞分裂和分化、促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長等有關(guān)(Kamínek et al.,2010)。李慧敏等(2013)研究表明,6-BA和激動素(KT)是影響白芨假鱗莖形成和膨大的主要因素,NAA對平均粒徑即假鱗莖的生長與膨大無明顯影響。本研究發(fā)現(xiàn)6-BA對白芨試管球莖膨大影響較小,而NAA是影響白芨試管球莖膨大的主要因素,與李慧敏等(2013)的研究結(jié)果存在差異,可能是白芨試管球莖所處生長階段存在差異所引起,說明不同生長階段白芨試管球莖對植物生長調(diào)節(jié)劑種類的需求不同。

已有研究表明,調(diào)整培養(yǎng)基中NAA與6-BA的比例可調(diào)控?zé)o菌苗根和芽的分化(葛軍等,2004;田士林和李莉,2007),本研究結(jié)果與其相似,并發(fā)現(xiàn)白芨試管球莖根和芽的分化影響白芨試管球莖的膨大;培養(yǎng)基中NAA濃度為0.1、0.5和1.0 mg/L時白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均得以提高,但NAA濃度為0.5 mg/L時的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均低于其他2個濃度,可能與培養(yǎng)基中NAA與6-BA的濃度配比不同有關(guān)。

基本培養(yǎng)基是影響白芨試管球莖生根、芽分化和促進(jìn)試管球莖膨大的重要因素。本研究結(jié)果表明,當(dāng)基本培養(yǎng)基為1/2MS時,白芨試管球莖的膨大效果最好,與張延龍等(2006)、張潔等(2010)、張艷波(2013)研究認(rèn)為濃度過低(1/2MS)的大量元素對大多數(shù)百合試管鱗莖膨大有不良影響、高濃度(2MS和3MS)可促進(jìn)試管鱗莖膨大的觀點(diǎn)不一致,可能與不同植物種類或變態(tài)器官類型對營養(yǎng)物質(zhì)的需求量存在差異有關(guān)。

3. 2 關(guān)于蔗糖濃度對白芨試管球莖膨大的影響

糖類作為培養(yǎng)基的主要成分之一,可調(diào)節(jié)植物形態(tài)的發(fā)生和生理過程(郭亞芬,2011;Horacio and ?Martinez-Noel,2013;鄒竣竹等,2017)。本研究結(jié)果表明,白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率隨培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加呈先增加后減少的變化趨勢,與孫靜秋等(2003)研究認(rèn)為添加高質(zhì)量濃度蔗糖會改變培養(yǎng)基中滲透壓,影響植株的正常生長,使多糖物質(zhì)合成和儲藏受阻,影響球根的形成和生長的觀點(diǎn)一致。但也有研究表明,高質(zhì)量濃度蔗糖對瀘定百合試管鱗莖形成及膨大的作用與其產(chǎn)生的滲透脅迫無關(guān),可能是由于高質(zhì)量濃度蔗糖會引起鱗莖內(nèi)源性糖含量及相關(guān)酶活性發(fā)生變化(Partelli et al.,2010;Turhan and Ergin,2012;周玲云等,2016)。

3. 3 關(guān)于活性炭濃度對白芨試管球莖膨大的影響

本研究結(jié)果表明,在培養(yǎng)基中添加適量活性炭能促進(jìn)白芨試管球莖膨大,其中以添加0.5 g/L時的促進(jìn)效果最佳,與王曉麗等(2011)、秦新惠等(2015)對垂花百合和蘭州百合的研究結(jié)果相似。活性炭除可為組培苗生根培養(yǎng)創(chuàng)造黑暗環(huán)境外,還具有吸附培養(yǎng)基中雜質(zhì)的作用,但在一定程度上也會吸附培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)(謝杰等,2006),因此添加量過大不利于植物生長。本研究培養(yǎng)基中的活性炭濃度為1.0 g/L時白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率均明顯受到抑制,一方面可能是由于較高濃度的活性炭會吸附培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì),致使促進(jìn)白芨生長的營養(yǎng)物質(zhì)含量降低;另一方面可能是培養(yǎng)基中添加1.0 g/L活性炭的白芨試管球莖萌芽較早,而此時根系尚未發(fā)育,無法向試管球莖提供養(yǎng)分,試管球莖萌芽只能消耗試管球莖的營養(yǎng)從而抑制試管球莖增殖膨大。

3. 4 關(guān)于白芨試管苗生長與球莖膨大的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果表明,白芨試管球莖鮮重增殖率與直徑增殖率和高度增殖率、直徑增殖率與高度增殖率呈極顯著正相關(guān);試管球莖生根率與鮮重增殖率呈正相關(guān),與高度增殖率呈顯著正相關(guān),與直徑增殖率呈負(fù)相關(guān);試管球莖萌芽率與鮮重增殖率、高度增殖率和直徑增殖率均呈負(fù)相關(guān),即白芨試管球莖生根對試管球莖膨大產(chǎn)生促進(jìn)作用,而芽分化對試管球莖膨大產(chǎn)生抑制效應(yīng)。因此推測,本研究中白芨試管球莖膨大對不同試驗(yàn)因素的響應(yīng)與試管球莖根系誘導(dǎo)有關(guān),通過形成根系從而促進(jìn)白芨試管球莖對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收并增殖膨大。

4 結(jié)論

1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖+0.5 g/L活性炭可作為白芨試管球莖膨大的最佳培養(yǎng)基配方加以推廣應(yīng)用。

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(責(zé)任編輯 思利華)

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