陳娜 胡雯

摘 要：為探究花椰菜蘿卜硫素是否對人體具有降糖作用，對新鮮花椰菜中的蘿卜硫素進行提取和分離，將受試者隨機劃分成對照組和觀察組，只令觀察組受試者服用花椰菜蘿卜硫素，在實驗開始前和結(jié)束后分別對血糖、尿糖進行檢測，分析治療效果，并對安全性指標進行測試。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實驗前后對比之下，觀察組比對照組血糖與尿糖顯著降低（P<0.05），觀察組臨床總有效例數(shù)均明顯高于對照組（P<0.05），觀察組與對照組受試者血生化指標以及血常規(guī)實驗前后無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果表明：花椰菜蘿卜硫素具有輔助人體降糖的作用。

關(guān)鍵詞：花椰菜蘿卜硫素;提取分離;人體;降糖

糖尿病屬于內(nèi)分泌疾病，經(jīng)大量研究表明，糖尿病與遺傳及環(huán)境有關(guān)，對人們身體健康產(chǎn)生不好的影響[1-2]。糖尿病臨床表現(xiàn)為高血糖、糖尿和負氮平衡等[3]。合成藥物臨床治療糖尿病具有較多不良反應(yīng)，天然藥物和合成藥物相比安全性更高，治療疾病更加便捷，能夠服用的時間較長[4-5]。蘿卜硫素是從植物中提取的天然物質(zhì)，經(jīng)研究表明，蘿卜硫素對2型糖尿病患者的胰島素在抵抗癥狀方面有一定的效果[6-7]。本文研究花椰菜蘿卜硫素對人體的降糖作用，為糖尿病患者的治療提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

新鮮花椰菜，在某大型蔬菜市場購買;蘿卜硫素標準品，由美國Sigma公司生產(chǎn)，含量超過98%[8];乙酸乙酯。

1.2 儀器與設(shè)備

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海增森儀器科技;超聲波振蕩儀，昆山市超聲儀器有限公司;液相色譜儀系統(tǒng)，上海泰特睿杰信息科技有限公司[9]。

1.3 方法

1.3.1 花椰菜蘿卜硫素的提取 將花椰菜處于80℃環(huán)境下脫水1h，再在60℃環(huán)境下脫水，保持花椰菜質(zhì)量不變，將其變成粉末狀并過篩，量取8g放在三角瓶中[10-11]。取芯采集的芥籽，將其變成粉末狀并過篩，量取2g放在三角瓶中，向其中添加60mL蒸餾水，對其進行超聲波處理，振蕩15min，對其進行過濾，獲取酶液。向裝有花椰菜干粉的三角瓶中添加40mL酶液，在室溫環(huán)境下酶解60min，冷凍干燥后添加95%乙醇300mL，超聲波提取1h，靜置30min后過濾壓縮，以一定的體積比添加乙酸乙酯萃取3次，在70℃環(huán)境下旋蒸濃縮，通過甲醇定容到30mL，實現(xiàn)花椰菜蘿卜硫素提取。

1.3.2 蘿卜硫素分離 粗提物脫脂后進行硅膠層析柱，上樣量15g，在不同梯度下進行洗脫處理，各梯度洗脫體積是 l L。把流速調(diào)整至15～25mL/min，每0.5 L采集1瓶。通過TLC對采集的不同管餾分進行測定，將含蘿卜硫素的餾分合并在一起，通過HPLC分析蘿卜硫素的純度[12-13]。

1.3.3 受試志愿者選擇及研究方法 選擇自愿合作、不患有影響本實驗的其他疾病的2型糖尿病患者共50例，其中男患者20例、女患者30例，病程在1～6年內(nèi)。全部患者都符合WHO糖尿病診斷和分型標準，沒有酮癥和其他感染，及營養(yǎng)代謝方面的疾病。隨機將上述受試者劃分成對照組和觀察組，兩組受試者的一般情況用表1進行描述。觀察組受試者服用花椰菜蘿卜硫素，每天3次，每次2g，服用30d。對照組受試者服用相同劑量的安慰劑。在實驗過程中，全部受試者停止服用降糖藥物，在實驗開始前和結(jié)束后分別對血糖、尿糖、葡萄糖進行檢測。

1.3.4 檢測方法 葡萄糖消耗檢測：提取受試者細胞，添加無血清且含胰島素的培養(yǎng)基孵育2 h，采集培養(yǎng)基上清液，通過葡萄糖對試劑盒處理樣本進行測定，令酶標儀在495 nm時對吸光度進行檢測，獲取葡萄糖消耗量[14]。血糖：通過葡萄糖氧化酶法進行測定[15]。尿糖：通過放射免疫分析法進行測定。降糖功效判斷：在實驗結(jié)束后，受試者臨床癥狀基本消失，空腹血糖與實驗前相比減少30%，或者降低至低于7.2 mmol/L，尿糖降低到“-”或1個“+”的受試者，認為顯效[16]。在完成實驗后，受試者臨床癥狀在很大程度上得到緩解，空腹血糖與實驗前相比減少10%，或者降低至低于8.3mmol/L，尿糖降低到1個“+”的受試者，認為顯效。全部不滿足上述“有效”標準者，都認為是無效。安全性判斷：安全性癥狀主要包括血生化指標、血常規(guī)檢查，以及胸透、心電圖、腹部和B超。血生化指標主要有總膽固醇、甘油三酯等。血常規(guī)檢查包括白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)和血紅蛋白。

1.4 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)通過±s進行描述，各組間通過t檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 血糖與降糖測試結(jié)果

從表2～3可以看出，花椰菜蘿卜硫素對糖尿病患者有顯著的降糖作用，血糖與尿糖均明顯下降，觀察組與對照組相比，實驗后血糖與尿糖顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。實驗結(jié)果表明，糖尿病患者每天服用3次花椰菜蘿卜硫素提取物，連續(xù)服用30d，在實驗結(jié)束后，能夠有效降低血糖與尿糖。

2.2 治療效果分析

由表4可知，針對多食、多飲和乏力癥狀糖尿病患者，服用花椰菜蘿卜硫素后，總有效例數(shù)均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），說明花椰菜蘿卜硫素具有臨床降低空腹血糖、尿糖、緩解糖尿病臨床癥狀的作用。

2.3 安全性指標測試

從表5可以看出，觀察組與對照組受試者血生化指標以及血常規(guī)實驗前后無顯著性差異（P>0.05），同時都在正常范圍內(nèi)。胸透、心電圖、腹部B超實驗前后都在正常范圍內(nèi)，也無顯著性差異（P>0.05）。

3 結(jié)論

動物與臨床實驗表明，花椰菜蘿卜硫素對糖尿病有一定的治療作用。本研究結(jié)果表明，花椰菜蘿卜硫素可降低空腹血糖與尿糖，糖尿病受試者服用后有顯著的臨床治療效果，同時血常規(guī)以及肝腎功能等均無顯著變化，說明花椰菜蘿卜硫素具有輔助人體降糖的作用。盡管如此，花椰菜蘿卜硫素詳細功效成分還不清楚，其對人體降糖的確切作用機制還未掌握，均需進一步分析。

參考文獻

[1]胡翠珍，李勝，馬紹英，等.響應(yīng)面優(yōu)化西蘭花中蘿卜硫素復(fù)合提取工藝[J].食品工業(yè)科技，2016，37（4）：271-277.

[2]方朝暉，仝小林，段俊國，等.糖尿病前期中醫(yī)藥循證臨床實踐指南[J].中醫(yī)雜志，2017，58（3）：266-270.

[3]應(yīng)令雯，周健.2017年ADA糖尿病醫(yī)學(xué)診療標準解讀[J].中國醫(yī)學(xué)前沿雜志（電子版），2017，9（1）：48-55.

[4]Cheng H，Zhang J，Qi Z.Effects of interaction with sulphur compounds and free volume in imidazolium-based ionic liquid on desulphurisation：a molecular dynamics study[J].Molecular Simulation，2017，44（1）：1-8.

[5]王文娟，郭思淼，安磊.蘿卜硫素對體外成熟小鼠卵母細胞谷胱甘肽合成相關(guān)基因表達的影響[J].中國畜牧雜志，2018，54（6）：65-68.

[6]宣偉，李帥，吳秀艷，等.蘿卜硫素對小鼠放射性肺損傷的防護作用機制[J].中華放射醫(yī)學(xué)與防護雜志，2017，37（4）：251.

[7]Jerram S T，Leslie R D.The genetic architecture of type 1 diabetes[J].Genes，2017，8（8）：209.

[8]高燦紅，董麗麗，關(guān)曉彎，等.青花菜蘿卜硫素合成相關(guān)基因BoCYP83A1的克隆與表達分析[J].西北植物學(xué)報，2016，36（7）：1302-1307.

[9]Marathe P H，Gao H X，Close K L.American diabetes association standards of medical care in diabetes 2017[J].Journal of Diabetes，2017，9（4）：320.

[10]Cho N H，Shaw J E，Karuranga S，et al.IDF diabetes atlas：global estimates of diabetes prevalence for 2017 and projections for 2045[J].Diabetes Research & Clinical Practice，2018，138：271.

[11]郭麗萍，王志英，楊潤強，等.西蘭花種子發(fā)芽過程中生理活性物質(zhì)含量的變化[J].中國食品學(xué)報，2016，16（3）：160-167.

[12]Soskolne W A，Klinger A.The relationship between periodontal diseases and diabetes：an overview[J].Ann Periodontol，2017，6（1）：91.

[13]Neal B，Perkovic V，Mahaffey K W，et al.Canagliflozin and cardiovascular and renal events in Type 2 Diabetes | NEJM[J].N Engl J Med，2017，377（7）：644-657.

[14]谷茂然，馮文，宋煌旺，等.蘿卜硫素類化合物的合成及抑菌活性研究[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2017，29（1）：118-122.

[15]趙靈燕.2型糖尿病中醫(yī)證候要素診斷量表的研制及初步應(yīng)用研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，41（10）：848-853.

[16]Schauer P R，Bhatt D L，Kirwan J P，et al.Bariatric surgery versus intensive medical therapy for diabetes-3-year outcomes[J].New England Journal of Medicine，2017，376（7）：641.

Abstract：To investigate whether the sulforaphane from cauliflower have hypoglycemic effect on human body，the sulforaphane in fresh cauliflower was extracted and separated.The diabetic subjects who volunteered to participate in the experiment were randomly divided into control group and observation group.The observation group took sulforaphane in cauliflower，while the control group took the same dose of placebo.The therapeutic effect was analyzed and the safety indexes were tested.Complete indicators were tested.Before and after the experiment，the blood glucose and urine glucose in the observation group were significantly lower than those in the control group（P<0.05）.The total effective cases in the observation group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）.There was no significant difference in blood biochemical indexes and blood routine test between the observation group and the control group（P>0.05）.The results showed that the sulforaphane from cauliflower radish had the effect of assisting human body to reduce blood sugar，and was safe and harmless to human body.

Keywords：sulforaphane from cauliflower;extraction and separation;human body;hypoglycemic

（責(zé)任編輯 李婷婷）