王亞佟 胡新紅 劉利娟 趙超群

腎細(xì)胞癌，簡(jiǎn)稱腎癌、腎腺癌，是一種起源于腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，該癥發(fā)病率較高，占腎臟惡性腫瘤的80%～90%，占成人所有惡性腫瘤的2%～3%，位居泌尿系統(tǒng)腫瘤第2位，僅次于膀胱癌。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，腎癌的高發(fā)年齡為50～70歲，且男性高于女性[1]。腎癌的發(fā)病原因現(xiàn)階段尚不清晰，但臨床研究發(fā)現(xiàn)，吸煙、肥胖、長(zhǎng)期攝入高脂肪食物等會(huì)增加該病的發(fā)生率。2008年的一項(xiàng)調(diào)研顯示，腎癌已經(jīng)位居我國(guó)男性惡性腫瘤發(fā)病率第10位，且近些年隨著現(xiàn)階段居民飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變，腎癌的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增趨勢(shì)，對(duì)我國(guó)居民的生命健康造成了嚴(yán)重威脅[2-3]。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一項(xiàng)極其復(fù)雜的過程，近些年分子生物學(xué)的發(fā)展發(fā)現(xiàn)[4]，各類血清因子與癌癥的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后具有密切的聯(lián)系，miRNA與惡性腫瘤之間的關(guān)系已經(jīng)引起醫(yī)學(xué)臨床工作者的廣泛關(guān)注。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月至2017年1月于我院進(jìn)行治療的75例腎癌患者為實(shí)驗(yàn)組，選取同期于我院進(jìn)行體格檢查的80例健康人為健康對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組中男性41例，女性34例，年齡35～69歲，平均年齡(53.26±2.59)歲；對(duì)照組中男性49例，女性41例，年齡35～70歲，平均年齡(53.09±2.81)歲。2組一般資料如性別、年齡等對(duì)比差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①實(shí)驗(yàn)組患者均經(jīng)病理學(xué)檢測(cè)確診為腎癌；②納入對(duì)象病歷資料齊全；③意識(shí)清晰能夠配合進(jìn)行調(diào)研；④預(yù)期生存期≥6個(gè)月；⑤患者及其家屬對(duì)本次調(diào)研過程、方法、原理清楚明白并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神疾患者；②合并意識(shí)障礙者；③合并其他器質(zhì)性疾病如冠心病、肺炎者；④復(fù)發(fā)性腎癌患者；⑤依從性差者。

1.2 方法

使用一次性真空采血管，手術(shù)前采集實(shí)驗(yàn)組患者與對(duì)照組對(duì)象空腹靜脈血5 ml，術(shù)后6個(gè)月采取復(fù)檢的方式采集實(shí)驗(yàn)組患者空腹靜脈血5 ml，室溫靜置30 min，而后于4 ℃條件下使用離心機(jī)離心，靜置15 min，小心采集上層清液1 ml，置于-80 ℃條件下保存。待所有樣本采集完畢后統(tǒng)一進(jìn)行血清因子水平檢測(cè)，使用賽默飛世爾科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒對(duì)2組的血清miRNA-21水平進(jìn)行檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行；根據(jù)2組檢測(cè)miRNA-21水平，計(jì)算2組血清因子水平平均值，并按照此標(biāo)準(zhǔn)將實(shí)驗(yàn)組患者區(qū)分為miRNA-21高表達(dá)組(35例)和低表達(dá)組(40例)，對(duì)2組患者術(shù)后6個(gè)月隨訪腎癌復(fù)發(fā)率進(jìn)行對(duì)比分析。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

首先對(duì)術(shù)前實(shí)驗(yàn)組患者與對(duì)照組對(duì)象血清miRNA-21水平進(jìn)行對(duì)比，而后對(duì)實(shí)驗(yàn)組術(shù)前及術(shù)后6個(gè)月血清miRNA-21水平進(jìn)行分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)組區(qū)分的miRNA-21高表達(dá)組與低表達(dá)組術(shù)后6個(gè)月腎癌復(fù)發(fā)情況進(jìn)行對(duì)比，最后對(duì)實(shí)驗(yàn)組患者術(shù)前血清miRNA-21水平與其臨床病理特征之間的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 術(shù)前實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清miRNA-21水平對(duì)比

實(shí)驗(yàn)組患者術(shù)前血清miRNA-21水平為(1.53±0.21)，高于對(duì)照組的(0.51±0.16)，對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.068，P=0.021)。

2.2 術(shù)后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清miRNA-21水平對(duì)比

實(shí)驗(yàn)組術(shù)前與術(shù)后6個(gè)月的血清miRNA-21水平分別為(1.53±0.21)、(0.83±0.15)，對(duì)照組的血清miRNA-21水平為(0.51±0.16)。經(jīng)測(cè)量對(duì)比，發(fā)現(xiàn)術(shù)后實(shí)驗(yàn)組患者血清miRNA-21水平出現(xiàn)明顯下降，對(duì)比術(shù)前差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.185，P<0.05)；但術(shù)后實(shí)驗(yàn)組水平仍高于對(duì)照組，對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.681，P<0.05)。

2.3 實(shí)驗(yàn)組血清miRNA-21不同表達(dá)組術(shù)后復(fù)發(fā)情況對(duì)比

經(jīng)評(píng)估對(duì)比，實(shí)驗(yàn)組中血清miRNA-21高表達(dá)組術(shù)后6個(gè)月腎癌復(fù)發(fā)率為17.14%(6/35)，高于低表達(dá)組的7.50%(3/40)，對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.361，P=0.011)。

2.4 術(shù)前血清miRNA-21水平與腎癌臨床病理特征相關(guān)性分析

經(jīng)評(píng)估對(duì)比，腎癌患者血清miRNA-21水平與其性別、年齡等不具有相關(guān)性，與其TNM分期、浸潤(rùn)深度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性(P<0.05)，見表1。

3 討論

隨著現(xiàn)階段居民飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變，腎癌的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年遞增趨勢(shì)，數(shù)據(jù)顯示，每年全球腎癌的新增病例數(shù)約為20萬例，2001年至2010年，美國(guó)腎癌的發(fā)病率已由10.6/10萬上升至12.4/10萬。由于腎臟血流豐富[5-6]，故而癌變細(xì)胞極易隨血液出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，臨床研究指出，胰腺、肺、骨骼是腎癌最常見轉(zhuǎn)移部位。由于腎癌初期臨床癥狀不明顯，多數(shù)患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已發(fā)展至中晚期，因此其治療難度大大增加，晚期腎癌患者常常出現(xiàn)血尿、肝功能異常、凝血機(jī)制異常等，對(duì)其生活質(zhì)量造成極大影響[7-8]。早期診斷對(duì)腎癌的治療及轉(zhuǎn)歸具有重要意義。傳統(tǒng)腎癌病理檢測(cè)方式為活檢，此方式為有創(chuàng)性操作，患者多難以接受，其他諸如B超、CT、MRI等雖然具有較高的準(zhǔn)確性，但對(duì)某些早期小腎癌檢測(cè)效果不佳，且無法判斷囊腫的良惡性。隨著近些年分子生物學(xué)的發(fā)展，越來越多的醫(yī)務(wù)工作者更趨向于使用血清因子來對(duì)腎癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)歸進(jìn)行檢測(cè)判斷[9]。

表1 75例腎癌患者miRNA-21水平與其臨床病理特征相關(guān)性分析

血清miRNA參與基本上所有的細(xì)胞生物學(xué)功能，包括細(xì)胞轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡，以及病毒的感染，糖尿病、腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展[10-11]。miRNA-21屬于miRNA的1個(gè)亞型，經(jīng)臨床研究發(fā)現(xiàn)，該血清因子與腎癌具有密切聯(lián)系。學(xué)者楊益等[12]通過將32例腎癌患者、20例健康人群及15例腎臟良性腫瘤患者血清miRNA-21進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，腎癌患者術(shù)后其miRNA-21水平會(huì)出現(xiàn)較大幅度的下降，同時(shí)腎癌患者術(shù)前血清miRNA-21水平高于健康對(duì)照組及腎臟良性病變患者，該學(xué)者的分析指出，miRNA-21在篩查腎癌中的敏感度為90%，特異度為84.4%，提示該指標(biāo)可以作為腎癌的生化標(biāo)志物。學(xué)者管金等[13]也通過對(duì)30例腎癌患者進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，腎癌患者血清miRNA-21水平遠(yuǎn)高于健康對(duì)照組，同時(shí)術(shù)后其水平出現(xiàn)顯著下調(diào)，該學(xué)者的研究指出miRNA-21檢測(cè)腎癌的敏感度為77.3%，特異度為96.4%。學(xué)者Kurozumi等[14]的研究也指出，血清miRNA-21與腎癌患者預(yù)后存在一定相關(guān)性，通過對(duì)腎癌患者術(shù)前血清指標(biāo)水平的監(jiān)測(cè)，能夠?qū)ζ漕A(yù)后進(jìn)行推斷。

本文作者通過設(shè)立實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的方式，就血清miRNA-21與腎癌臨床病例特征及對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行了探討，結(jié)果顯示，血清miRNA-21與腎癌患者的TNM分期、浸潤(rùn)深度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。本文作者分析認(rèn)為其原因?yàn)槟I癌是在多種基因調(diào)配下發(fā)生的病理改變，而抑癌基因的下調(diào)與其發(fā)病具有密切聯(lián)系，miRNA-21能夠參與RAS致癌信號(hào)的形成，誘導(dǎo)致癌基因表達(dá)，因而其水平能夠反映腎癌患者的病理改變狀態(tài)。同時(shí)本文研究還發(fā)現(xiàn)，血清miRNA-21與腎癌患者預(yù)后具有一定相關(guān)性，術(shù)前患者血清miRNA-21水平越高，其術(shù)后復(fù)發(fā)的可能性就越大，分析其原因與該血清因子的表達(dá)與抑癌基因的表達(dá)呈反比關(guān)系，術(shù)前水平能夠反映患者體內(nèi)抑癌基因的活躍狀態(tài)，因而能夠?qū)颊哳A(yù)后進(jìn)行判斷。

總而言之，血清miRNA-21與腎癌患者病理特征存在一定相關(guān)性，同時(shí)與腎癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，且對(duì)腎癌的復(fù)發(fā)具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，可以作為一項(xiàng)無創(chuàng)性腎癌檢測(cè)手段進(jìn)行推廣使用。