孟祥然,朱雪松,楊彩云,井 傲,譚奇紋,2,于慧娟,2△
(1.山東中醫(yī)藥大學,山東 濟南 250014;2.山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院,山東 濟南 250014)
肥胖作為全球性疾病[1],其病因除與不良生活方式和先天因素有關(guān)外,胰島素抵抗(Insulin resistance,IR)是導致其最主要的因素[2]。有研究表明,肥胖與IR一般相繼發(fā)生,大多數(shù)IR患者為肥胖型,而幾乎所有肥胖者都伴有IR[3]、血脂紊亂以及血清脂聯(lián)素(Adiponectin,APN)、視黃醇結(jié)合蛋白4(Retinol binding protein 4,RBP4)水平的異常。
《素問·六微旨大論曰》:“天樞之上,天氣主之;天樞之下,地氣主之”。張景岳注:“樞,樞機也。居陰陽升降之中,是為天樞”。天樞穴位于人體上下之氣交合處,為升清降濁之樞紐,具有健脾胃、調(diào)胃腸的功效。穴位埋線能夠糾正脂肪組織的分泌紊亂、緩解代謝性炎性反應狀態(tài)[4]。天樞穴位埋線可以整體調(diào)節(jié)機體脂代謝,改善大鼠肥胖指標,但其作用機制有待進一步闡釋。因此,本實驗通過構(gòu)建肥胖大鼠模型,從天樞穴位埋線影響肥胖大鼠體重、腹圍、Lee's 指數(shù)、血清甘油三脂(Triglyceride,TG)、總膽固醇(Total Cholesterol,TC)、APN、RBP4、空腹血漿中胰島素(Fasting plasma insulin,Fins)及IR的角度,闡明其在減肥中的作用,為臨床應用提供實驗依據(jù)。
健康雄性Wistar大鼠60只,約230 g,在山東大學實驗動物中心進行飼養(yǎng)及觀察[許可證號:SCXK(魯)2013 0009]。
將實驗大鼠分籠,每籠裝3~4只。實驗開始前先用普通飼料及飲用水喂養(yǎng)7天。7天后將大鼠隨機分為兩組:①普通組(10只):給予普通飼料喂養(yǎng);②高脂飲食組(50只):給予高脂飼料(普通飼料60%、蔗糖15%、奶粉13%、豬油12%)喂養(yǎng)。4周后,用電子天平(精確度0.5 g)稱量體質(zhì)量 ,超過普通組大鼠體質(zhì)量20%時,造模成功。
依據(jù)《實驗針灸學》[5]中大鼠穴位定位方法及模仿人體骨度分寸法。天樞穴的定位:大鼠腹部臍兩側(cè)旁開約5 mm[6]。
將造模成功的36只肥胖大鼠隨機分為模型組、藥物組和穴位埋線組。模型組不做治療。藥物組處理:奧利司他35 mg/kg(規(guī)格為0.12 g,重慶華森制藥有限公司),配合使用生理鹽水2 mL灌胃,1天1次,連續(xù)治療并觀察4周。穴位埋線組處理:大鼠固定鼠臺,將約0.5 cm長的羊腸線(山東博大醫(yī)療用品有限公司)插入穿刺針(鎮(zhèn)江高冠醫(yī)療器械有限公司)中,局部消毒后,刺入大鼠雙側(cè)天樞穴,順勢將羊腸線留于大鼠脂肪層。出針后,用低致敏型透氣膠貼貼于雙側(cè)天樞穴體表。埋線1周1次,持續(xù)4周。實驗期間,各組大鼠自由攝食和飲水,普通組給予普通飼料喂養(yǎng),其余組均以高脂飼料喂養(yǎng)。
1.5.1 各組動物體質(zhì)量變化 實驗第28天用電子天平(精確度0.5 g)稱量體質(zhì)量。
1.5.2 各組動物的腹圍及Lee's指數(shù) 實驗第28天用卷尺準確測定腹圍:大鼠取仰臥位時,測量劍突和后肢間垂直距離中點1周的長度;麻醉后測體長(鼻到肛門的距離)并得出Lee's指數(shù):Lee's指數(shù)=[體質(zhì)量1/3(g)×1 000]/ 體長(cm),反映了體脂含量的多少。
1.5.3 TG、TC檢測 實驗第28天,收集各組大鼠5 mL左右的血液,靜置2~3 h,離心取血清,放于-80℃冰箱,留存檢測。試劑盒測定TG和TC的濃度(試劑盒由美國Phoenix公司提供)。
1.5.4 APN、RBP4檢測 采用放射免疫法測定(試劑盒由美國Phoenix公司提供)。
1.5.5 胰島素敏感指數(shù)(ISI)、胰島素抵抗指數(shù)檢測(IRI) 檢測空腹血漿中葡萄糖(Fasting blood glucose,FBG)、Fins,分別計算IRI,IRI=FBG×Fins/22.5;計算ISI,ISI=-ln(FBG×Fins),即ISI定義為FBG含量與Fins含量乘積的倒數(shù),取其自然對數(shù)。采用放射免疫法測定Fins。
藥物組和穴位埋線組體質(zhì)量、腹圍及Lee's指數(shù)均低于模型組(P<0.05)。穴位埋線組體質(zhì)量、Lee's指數(shù)低于藥物組(P<0.05),兩組間腹圍差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。
表1 各組大鼠肥胖指數(shù)比較
注:與普通組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與藥物組比較,○P<0.05。
藥物組和穴位埋線組TC、TG均低于模型組(P<0.05),兩組間上述指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。
表2 各組大鼠血脂比較
注:與普通組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05。
與模型組比較,藥物組和穴位埋線組APN增高、RBP4降低(P<0.05);與藥物組比較,穴位埋線組APN增高于藥物組、RBP4低于藥物組(P<0.05)。見表3。
表3 各組大鼠APN、RBP4比較
注:與普通組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與藥物組比較,&P<0.05。
藥物組和穴位埋線組FBG、Fins、ISI和IRI均低于模型組(P<0.05),穴位埋線組上述指標均低于藥物組(P<0.05)。見表4。
組別nFBG(mmol/L)Fins(mIU/L)ISIIRI普通組107.9±1.75.0±1.00.66±0.121.8±0.6模型組1212.4±1.3?13.3±0.8?1.08±0.17?7.3±0.5?藥物組1210.1±0.9?#8.7±0.9?#0.87±0.12?#3.9±0.5?#穴位埋線組129.4±1.3?#&6.4±1.1?#&0.79±0.11?#&2.7±0.8?#&
注:與普通組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與藥物組比較,&P<0.05。
IR是指機體對胰島素的反應減弱,產(chǎn)生過量胰島素的病理狀態(tài)[7]。肥胖是導致IR最主要的原因。在肥胖機體中,脂代謝增強,TG分解釋放游離脂肪酸(Free fatty acids,FFA)增多,F(xiàn)FA含量上升,導致IR[8]。
目前研究[9]顯示,穴位埋線可以較好地調(diào)整機體脂代謝。本課題研究表明,天樞穴位埋線具有減輕體重、腹圍的趨勢,因此在減肥中作用明顯。同時,能更好地減少腹脂,使Lee's 指數(shù)、TC及TG 水平下降,改善脂代謝紊亂,F(xiàn)ins亦顯著降低,從而有效改善IR[10],表明穴位埋線對肥胖機體具有減肥、良性調(diào)節(jié)血脂的作用。
有研究發(fā)現(xiàn),IR與體內(nèi)APN含量呈負相關(guān),與RBP4含量呈正相關(guān)[11]。APN作為內(nèi)源活性多肽,是機體抗IR過程中最關(guān)鍵的因素。在肥胖引起的IR中,APN表達下調(diào)[12]。RBP4作為一種新的脂肪因子,廣泛存在于血液、腦脊液中。有研究闡述RBP4在IR過程中的主要機制為:①RBP4可通過對IRS1-Ras-MAPK信號傳導通路進行干預,導致IR[13];②RBP4可增加肝糖輸出,產(chǎn)生IR。本實驗顯示,APN降低及RBP4升高后,機體對胰島素敏感性降低,導致嚴重的IR;當APN恢復正常以及RBP4含量降低時,IR可改善。埋線法和奧利司他可以有效調(diào)控APN、RBP4表達,并且埋線法效果較好。
姜氏[14]課題研究顯示穴位埋線明顯降低肥胖機體體重、Lee’s指數(shù)(P<0.01),效果優(yōu)于西藥,其機制是通過中樞和外周路線改善機體的IR。在改善肥胖機體和抑制IR方面,穴位埋線法優(yōu)于西藥,并且可以避免西藥的不良反應。本實驗選用的天樞穴是大腸募穴,可調(diào)暢一身氣機。天樞穴位埋線既有針刺基本治療功效,又有“靜以留之”的持久刺激。其大致機理為線體在體內(nèi)分解的過程,對穴位產(chǎn)生的生理和生化刺激至少兩周,有別于針刺時不銹鋼針暫時的單一物理作用[15]。此種治療方法將多種刺激結(jié)合,在相應中樞節(jié)段控制下,良性調(diào)整臟腑功能[16]。故本研究推測天樞穴位埋線改善IR的作用機制可能是通過神經(jīng)-內(nèi)分泌-體液-免疫等途徑,增強各種代謝物質(zhì)的活性,促進機體對葡萄糖和脂肪的吸收、轉(zhuǎn)化等,提高胰島素敏感性,從而改善肥胖機體IR。
綜上,天樞穴位埋線可以有效減輕肥胖機體的體質(zhì)量與體脂,良性調(diào)整脂代謝以及合理調(diào)控機體APN和RBP4表達,增強胰島素的生理效應,改善肥胖機體IR,具有顯著的降血脂、減體脂作用,對于防治肥胖及其并發(fā)癥有較好的臨床效果。當然,其具體作用機制有待于后期在相關(guān)研究中進一步探索和完善。