彭燕群，徐國(guó)琴，翁錫全，藍(lán)道忠

1 廣州體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)生物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(廣東廣州 510500)； 2 江西工業(yè)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院(江西萍鄉(xiāng) 337000)

枸杞子是茄科落葉小灌木——枸杞的成熟果實(shí)，具有滋陰補(bǔ)血，益精明目之功效[1]。研究證明枸杞子的有效成分為枸杞多糖，具有提高免疫、抗氧化、抗疲勞等作用[2-4]。枸杞汁，是用枸杞鮮果為原料經(jīng)過(guò)物理方法如壓榨、離心、萃取等得到的汁液產(chǎn)品，一般分為果肉飲料、果漿、純枸杞汁、枸杞飲料等類型。其中純枸杞汁為新型零添加、非濃縮還原枸杞果汁，充分保留了枸杞鮮果的主要功能成分及營(yíng)養(yǎng)要素[5]。研究表明，青海枸杞有相對(duì)多量的多糖和黃酮類物質(zhì)，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[6]，且目前純枸杞汁對(duì)人體免疫功能影響的研究報(bào)道較少。因此，本研究采用產(chǎn)自青海枸杞制成的果汁，于2014年10月至2015年2月對(duì)31～65歲成年男性進(jìn)行飲用試驗(yàn)觀察，以探討純枸杞汁對(duì)不同年齡階段成年男性免疫功能的影響，為飲用純枸杞汁增強(qiáng)成年男性免疫保健效果提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 招募31～65歲成年男性，身體健康，無(wú)明顯心、腦、血液疾病，并排除近期存在感染性疾病、免疫性疾病患者，最終確定40例為研究對(duì)象，并按年齡分為2個(gè)年齡組，其中31～40歲組有18例，41～65歲組有22例，受試者均已婚，有配偶，其身高、體重、體質(zhì)指數(shù)(BMI)等基本情況見表1。31～40歲組體重和BMI均高于41～65歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)前受試者均了解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，承諾嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行，并簽署知情同意書。

組別31～40歲組(n=18)41～65歲組(n=22)身高(cm)172.76±4.85169.90±5.70體重(kg)75.82±8.7865.79±8.53?BMI(kg/m2)25.37±2.4622.85±3.20?

*與31～40歲組比較P<0.05

1.2 材料與方法 實(shí)驗(yàn)中純枸杞汁由新鮮采摘的枸杞經(jīng)清洗、紅外消毒后勻漿而成，為零添加枸杞果汁。實(shí)驗(yàn)期間受試者每天睡覺前飲用純枸杞汁100 mL，持續(xù)飲用32 d。受試者在實(shí)驗(yàn)開始日和實(shí)驗(yàn)結(jié)束日晨7:30-8:30取肘靜脈血，其中抗凝管收集全血2 mL用于T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷細(xì)胞測(cè)試，非抗凝管收集全血2 mL后分離血清，用于血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的測(cè)試。

1.3 觀察指標(biāo)測(cè)試方法 流式細(xì)胞法測(cè)試全血T淋巴細(xì)胞亞群輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞，CD3+、CD4+)和抑制性T細(xì)胞(TS細(xì)胞，CD3+、CD8+)的、自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞，CD3+、CD16+、CD56+)，并計(jì)算飲用枸杞汁后各免疫指標(biāo)的增加值；免疫比濁法測(cè)試血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的含量。

2 結(jié)果

2.1 飲用純枸杞汁對(duì)成年男性T淋巴細(xì)胞亞群變化的影響 飲用純枸杞汁前，41～65歲組成年男性Th細(xì)胞顯著低于31～40歲組(P<0.05)。飲用純枸杞汁后，不同年齡組成年男性Th細(xì)胞均有所升高，尤其是41～65歲年齡組Th細(xì)胞在飲用枸杞汁后增加尤其明顯，其飲用前后的增加值顯著性高于31～40歲年齡組(P<0.05)。飲用純枸杞汁前后，不同年齡組成年男性TS細(xì)胞和Th細(xì)胞/TS細(xì)胞比值的變化均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

組別31～40歲組41～65歲組飲用前飲用后增加值飲用前飲用后增加值Th細(xì)胞(%)56.59±8.91 57.17±9.200.58±0.2746.64±16.40?51.08±10.934.44±1.89?TS細(xì)胞(%)33.36±7.2434.78±6.690.42±0.3838.36±15.4037.75±11.34-0.21±0.13Th細(xì)胞/TS細(xì)胞1.81±0.631.75±0.600.06±0.041.50±0.941.51±0.670.02±0.01

*與31～40歲組比較P<0.05

2.2 飲用純枸杞汁對(duì)成年男性NK細(xì)胞變化的影響 飲用純枸杞汁后，不同年齡組成年男性NK細(xì)胞均有所增加，且41～65歲組NK細(xì)胞的增加比例較大，各年齡組成年男性在飲用枸杞汁后NK細(xì)胞數(shù)量與飲用前相比較均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但41～65歲組成年男性在飲用枸杞汁后NK細(xì)胞的增加值顯著高于31～40歲組(P<0.05)。見表3。

2.3 飲用純枸杞汁對(duì)成年男性血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM變化的影響 飲用純枸杞汁后，不同年齡組成年男性血清免疫球蛋白IgA、IgG均有所增加，IgM稍有降低，但血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM在服用枸杞汁前后的變化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

組別31～40歲組(n=18)41～65歲組(n=22)飲用前2.48±1.102.49±1.29飲用后3.19±1.013.98±1.72增加值0.71±0.161.50±0.69?

*與31～40歲組比較P<0.05

組別31～40歲組41～65歲組飲用前飲用后飲用前飲用后IgA2.59±1.202.99±1.982.12±0.672.31±0.97IgG9.00±1.779.95±1.618.94±2.169.46±2.29IgM1.29±0.361.19±0.281.23±0.261.10±0.37

3 討論

人體在增齡過(guò)程中各組織器官均會(huì)產(chǎn)生一定的衰退，免疫系統(tǒng)是較早地產(chǎn)生衰老的組織結(jié)構(gòu)改變的系統(tǒng)之一，主要表現(xiàn)在T、B 細(xì)胞數(shù)量及抗原受體的減少、自身抗體的產(chǎn)生和免疫耐受性的障礙等方面[7]。人體中樞免疫器官胸腺在性成熟期就開始退化，到60歲時(shí)只剩15%，因而由胸腺產(chǎn)生的T 淋巴細(xì)胞更容易因衰老而受到影響，繼而降低細(xì)胞吞噬及分泌干擾素的能力[8]。本研究中也證實(shí)，41～65歲組成年男性的免疫機(jī)能與31～40歲組相比較已有顯著性降低，主要表現(xiàn)在Th細(xì)胞有明顯地下降，免疫球蛋白IgA隨著年齡的增加也有降低的趨勢(shì)，直接影響到機(jī)體抗感染的能力。

隨著人民生活水平的提高以及保健意識(shí)的提高，中老年人在注重體育鍛煉的同時(shí)也開始關(guān)注營(yíng)養(yǎng)保健，各種營(yíng)養(yǎng)保健品也應(yīng)運(yùn)而生。祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)研究表明，增齡過(guò)程中免疫功能衰退大多是由腎虛和脾虛引起的，滋補(bǔ)虛衰類中藥是目前抗衰老及增強(qiáng)免疫能力的重要考慮內(nèi)容[9]，其中枸杞是廣受中老年人喜愛的營(yíng)養(yǎng)保健食品。枸杞具有滋陰補(bǔ)血，益精明目等功效，許多研究都表明枸杞對(duì)機(jī)體免疫機(jī)能都有很好的調(diào)節(jié)作用[4，10]。實(shí)驗(yàn)研究[11]發(fā)現(xiàn)，枸杞中的有效成份可有效提高機(jī)體的非特異免疫功能和特異免疫功能，可明顯促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖，但其作用并不隨劑量的增加而增強(qiáng)[12]。枸杞中的重要成份枸杞多糖(LBP)可發(fā)揮各種免疫調(diào)節(jié)功能，包括T細(xì)胞和B細(xì)胞的活化，LBP不僅能激活Th細(xì)胞并誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-21分泌，還可誘導(dǎo)Tfh細(xì)胞的產(chǎn)生[13]；還可增加總T淋巴細(xì)胞及其亞群百分比和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，提高人外周血單核細(xì)胞、白細(xì)胞介素2和腫瘤壞死因子-α基因的表達(dá)水平[14]。

成年人隨著年齡的增長(zhǎng)，胸腺的退化，機(jī)體的免疫機(jī)能也呈下降趨勢(shì)[15-16]，枸杞在預(yù)防增齡過(guò)程中的免疫機(jī)能下降方面具有一定的效果。研究表明，無(wú)論是枸杞補(bǔ)充[17]還是枸杞重要成份的飲食攝入[18]，都可提高老年大鼠免疫機(jī)能的適應(yīng)性和免疫反應(yīng)能力，增加CD4+T細(xì)胞和NK細(xì)胞的數(shù)量，提高機(jī)體白細(xì)胞介素-4的含量。本研究發(fā)現(xiàn)，41～65歲組Th細(xì)胞顯著低于31～40歲組，這和前人的研究是一致的，增齡過(guò)程中存在免疫機(jī)能下降的現(xiàn)象，但不同年齡組成年男性飲用純枸杞汁后，雖不同年齡組Th細(xì)胞均有所升高，但41～65歲組Th細(xì)胞的增加值顯著性高于31～40歲組；不同年齡組成年男性NK細(xì)胞數(shù)量雖在飲用枸杞汁前無(wú)差異，但在飲用枸杞汁后也呈現(xiàn)這種現(xiàn)象，即41～65歲組NK細(xì)胞的增加值顯著性高于31～40歲組。表明飲用純枸杞汁對(duì)免疫機(jī)能趨向低下的41～65歲組的免疫機(jī)能增強(qiáng)效果明顯優(yōu)于免疫機(jī)能正常的31～40歲組，其原因可能為免疫機(jī)能在正常機(jī)體處于一種穩(wěn)定狀態(tài)，免疫能力太高和太低均不利于身體健康，飲用純枸杞汁不會(huì)干擾機(jī)體正常的免疫機(jī)能穩(wěn)定狀態(tài)，而對(duì)于免疫機(jī)能偏低者，飲用枸杞汁就能達(dá)到有效的免疫力正向調(diào)節(jié)作用。

血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 也是增齡過(guò)程中評(píng)價(jià)免疫機(jī)能的重要指標(biāo)，研究顯示老年大鼠機(jī)體的血清 IgG、IgA水平呈顯著下降[19]。給某有色金屬冶煉廠接觸氟化鈉的28名工人服用復(fù)合枸杞多糖1周后，其血清免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM 的含量[20]顯著高于服用前，表明復(fù)合枸杞多糖對(duì)接觸氟化物的工人具有增強(qiáng)免疫功能的作用。本研究中不同年齡組成年男性飲用純枸杞汁后，血清免疫球蛋白IgA、IgG含量雖有所增加，但無(wú)論是哪一年齡組，其增加均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

在本研究中發(fā)現(xiàn)無(wú)論是41～65歲組還是31～40歲組成年男性，其飲用純枸杞汁后許多免疫機(jī)能指標(biāo)與飲用前相比較都有提高，但和飲用前相比較其差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其原因可能與本研究中所使用的枸杞汁中有效物質(zhì)的劑量以及使用時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)，前人的研究大多使用的是枸杞多糖[11，13-14，20-21]，且使用劑量也比較大(20 mg/kg以上)，而本實(shí)驗(yàn)所使用是100%的枸杞汁，其所含有的枸杞多糖相對(duì)劑量較小，且研究時(shí)限僅32 d。

綜上所述，飲用純枸杞汁對(duì)成年男性機(jī)體的免疫功能有一定的增強(qiáng)作用，尤其是年齡較大、免疫機(jī)能有不同程度降低的41～65歲組，無(wú)論是Th細(xì)胞還是NK細(xì)胞數(shù)量的增加，枸杞汁均有較好的正向調(diào)節(jié)作用，而對(duì)免疫機(jī)能較為正常的年輕人(31～40歲)免疫調(diào)節(jié)作用不明顯。因此，是否可以通過(guò)飲用純枸杞汁提高人體的免疫力仍需要通過(guò)大樣本和長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)觀察去進(jìn)一步驗(yàn)證。