陳君君
(蘇州農業(yè)職業(yè)技術學院,江蘇蘇州 215008)
脂質過氧化是造成肉類品質下降的主要原因,包括產生異味、多不飽和脂肪酸、脂溶性維生素和色素,以及產生過氧化物和醛類等有毒化合物(Morrissey等,1994)。通常添加在豬飼料中添加抗氧化劑改善抗氧化狀態(tài),防止肉類發(fā)生氧化反應。生育酚是體內主要的脂溶性抗氧化劑(Burton等,1982),而維生素E是8種天然化合物的統(tǒng)稱(Rimbach等,2002)。有研究表明,日糧添加維生素E超過需要量時,可以顯著改善生長和育肥期豬肉的肉質和屠宰性能,如肌肉pH、導電性、肉色和滴水損失(Guo等,2006),但 Hasty等(2002)研究顯示,日糧添加維生素E對上述指標無顯著影響。茶多酚是由綠茶中提取的富含黃酮醇的物質,其中表兒茶素-3-沒食子酸酯、表兒茶素-3-沒食子酸酯和表兒茶素是綠茶中主要的兒茶素,具有強大的抗氧化活性,可直接抑制自由基或再生維生素E等內源性抗氧化劑(Leung等,2001)。Frank等(2006)研究發(fā)現,日糧添加2 mg/kg表兒茶素和兒茶酸可以顯著提高大鼠組織和血漿α-生育酚含量,同時也可以抑制自由基的產生。因此,本試驗在日糧中添加不同水平的茶多酚,研究其對生長豬體內維生素E狀態(tài)、抗氧化性能和肉質的影響。
1.1 試驗日糧與分組 試驗選擇平均體重為(31.24±0.48)kg的三元豬240頭,隨機分為3組,每組4個重復,每個重復20頭豬。試驗共設計3種日糧,對照組飼喂基礎日糧,處理組在基礎日糧中分別添加10和100 mg/kg茶多酚,試驗共進行5周。試驗前所有豬只均用相應組別的飼料預飼5 d。試驗期間豬只自由飲水和采食?;A日糧原料組成及營養(yǎng)水平見表1。
試驗豬只在飼喂前通過穿刺頸靜脈將血樣抽入肝素鈉真空管,在2000 g 4℃條件下離心10 min,分離血漿,-80℃保存。試驗進行5周后,豬只禁食24 h二氧化碳窒息處死,同樣用肝素鈉真空管收集血液,分離血漿,-80℃保存。之后對豬只進行屠宰,屠體在70℃熱水中浸泡10 min,收集肌肉、肝臟和肺,液氮-80℃保存。
表1 基礎日糧原料組成及營養(yǎng)水平
表2 茶多酚化學組成及含量 %
1.2 血漿抗氧化性能測定 參考Re等(1999)的研究結果分析血漿總抗氧化力,同時參考Schlesier等(2002)的研究方法分析鐵還原力。
1.3 血漿和組織中生育酚和膽固醇含量 取100 mg組織樣品,2 mL乙醇處理后加入300 μL飽和氫氧化鉀,50 mL H2O和56.5 g KOH溶液用氮氣沖洗管,封閉,渦流,搖勻,在70℃下孵育30 min。隨后,樣本立即在冰和50 μL丁基羥基甲苯溶液(0.1%丁基羥基甲苯,乙醇,m/V)和2 mL正己烷。用氮氣沖洗試管,封閉混合30 s。800 g離心5 min,將1000 μL上清液轉移到干凈的試管中,血樣樣品操作方法如上,但不皂化。制備好的樣品用HPLC法分析生育酚含量。血漿膽固醇含量采用南京建成生物試劑盒測定。
1.4 肉質 測定肌肉溫度、pH、導電率、顏色和滴水損失指標,用于評估肉品質。收集的腰肌和腿肌分別在屠宰后45 min和24 h后測定肌間溫度和pH。參考Lee等(2002)的研究方法測定肌肉導電率、肉色和滴水損失。
1.5 統(tǒng)計分析 統(tǒng)計學分析采用SPSS軟件,試驗收集的數據用單因素方差分析,Ducan’s多重比較,結果用“平均數±標準誤差”表示。P<0.05表示組間顯著差異。
2.1 日糧添加茶多酚對生長豬抗氧化狀態(tài)的影響 試驗結束后發(fā)現,各處理組對生長豬采食量、日增重和屠宰重均無顯著影響(P>0.05)(數據未列出)。日糧添加茶多酚對生長豬血漿總抗氧化力和鐵還原力的影響見表3。結果顯示,各處理組對生長豬試驗初期和末期血漿總抗氧化力和鐵還原力均無顯著影響(P>0.05),但對照組、10和100 mg/kg茶多酚添加組血漿試驗末期鐵還原力均顯著高于試驗初期(P<0.05)。
表3 茶多酚對生長豬血漿抗氧化狀態(tài)的影響
2.2 茶多酚對生長豬血漿和組織維生素E狀態(tài)的影響 由表4可知,日糧添加茶多酚對生長豬肝臟、肌肉、血漿α-生育酚和γ-生育酚含量均無顯著影響(P>0.05),其中肝臟生育酚含量最高,之后依次是肌肉、肺和血漿。日糧添加10或100 mg/kg茶多酚肺中α-生育酚和γ-生育酚含量較對照組有提高趨勢(P=0.09)。對照組、10和100 mg/kg茶多酚組血漿膽固醇含量分別是100.1、101.9和 101.1 mg/dL,差異不顯著(P>0.05)。
2.3 茶多酚對生長豬肉質的影響 日糧添加茶多酚對生長豬肌肉pH、滴水損失和肉色的影響見表4。結果顯示,各組對生長豬肌肉pH、滴水損失、導電率及亮度均無顯著影響(P>0.05)。與對照組相比,日糧添加100 mg/kg茶多酚提高了生長豬屠宰后48 h肌肉的滴水損失。各組肌肉硫代巴比妥酸含量分別為1.0、1.1和0.5 μmol/kg,統(tǒng)計學分析均無顯著差異(P>0.05)。
表4 茶多酚對生長豬血漿和組織α-生育酚和γ-生育酚含量的影響
表5 茶多酚對生長豬肉質的影響
α-生育酚是哺乳動物體內重要的脂溶性抗氧化劑(Burton等,1982)。一些研究表明,在豬飼糧中添加α-生育酚可以改善肉質和動物健康(Guo等,2006;Corino等,1999),但也有研究得出了不顯著的結果(Hasty等,2002)。Leung等(2001)在體外的研究表明,茶多酚含有多種抗氧化成分,但體外試驗結果并不能完全應用到體內。Zhou等(2005)報道了維生素E與茶多酚的抗氧化協(xié)同作用,因此,作者推測,茶多酚可以改善機體維生素E狀態(tài),保護α-生育酚被自由基氧化,所以在本試驗中探討茶多酚對生長豬機體維生素E狀態(tài)、抗氧化性能和肉品質的影響。
本試驗結果發(fā)現,日糧添加茶多酚對生長豬血漿總抗氧化力無顯著影響,但對照組、10和100 mg/kg茶多酚添加組血漿試驗末期鐵還原力均顯著高于試驗初期,這與Yeum等(2004)的研究結果一致。末期總抗氧化力的升高與內源性維生素C的合成量提高有關,而維生素C是生長豬主要的水溶性抗氧化劑,日糧茶多酚對改善血漿和組織抗氧化性能的作用受限。與人不同的是,在豬上還未有相關研究去探討過茶多酚是否可以作為機體氧化應激和抗氧化狀態(tài)的生物標記物(Higdon和 Frei,2003)。本試驗日糧添加 10和100 mg/kg茶多酚,這相當于一個70 kg的成年人攝入12或120杯綠茶所含的量(Astill等,2001)。
日糧添加茶多酚對生長豬肝臟、肌肉、血漿α-生育酚和γ-生育酚含量均無顯著影響,其中肝臟生育酚含量最高,之后依次是肌肉、肺和血漿。日糧添加10或100 mg/kg茶多酚肺中α-生育酚和γ-生育酚含量較對照組有提高趨勢,這與Frank等(2006)的研究結果一致。在老鼠身上已經發(fā)現,灌胃茶多酚使淋巴吸收的α-生育酚減少(Loest等,2002)。因此,維生素E消耗量相對較高,而茶多酚可以降低其還原作用,使機體維生素E保留的量升高。由于日糧添加茶多酚對生長豬抗氧化性能無顯著影響,也對肉質相關參數如溫度、pH、導電率、肉色和滴水損失無顯著影響。目前,關于茶多酚在豬上的生物學利用率還缺乏相關資料。在人上,茶多酚的損失量在1.7~3.4 h(Lee等,2002)。由于豬只屠宰前禁食24 h,可以推測茶多酚的活性可能也受到損失,從而對肉質的影響也是短暫的。
生長豬日糧添加茶多酚對組織維生素E水平、血漿抗氧化力及肌肉品質無顯著改善作用。