李全春

急性顱腦損傷是外力作用于頭部所導(dǎo)致的顱骨、腦膜、腦血管和腦組織的機(jī)械形變所致，是致死和致殘的主要原因之一[1]。臨床上，常用格拉斯哥昏迷量表評(píng)估急性顱腦損傷的嚴(yán)重程度，而結(jié)構(gòu)性損傷可能通過(guò)磁共振技術(shù)檢查發(fā)現(xiàn)，但準(zhǔn)確度不高，且并不能預(yù)測(cè)患者的長(zhǎng)期臨床預(yù)后[2]。S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)和神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是常用的檢測(cè)急性顱腦損傷的生物學(xué)標(biāo)志物，但其靈敏度均不高[3，4]。探尋一種高度敏感的生物學(xué)檢測(cè)指標(biāo)用于顱腦損傷治療和預(yù)后評(píng)估成為臨床研究的熱點(diǎn)[5]。為探討血清神經(jīng)絲蛋白輕鏈多肽（neurofilament light polypeptide,NF-L）預(yù)測(cè)急性顱腦損傷預(yù)后的應(yīng)用價(jià)值，我院對(duì)100例急性顱腦損傷患者進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月至2016年1月我院收治的急性顱腦損傷患者100例作為觀察組，男65例，女35例，年齡18～67歲，平均（41.2±10.2）歲，排除患神經(jīng)和/或自身免疫性疾病史者及懷孕者。選取同期我院體檢的年齡和性別相匹配的50例健康人群作為對(duì)照組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)討論通過(guò)，所有患者或其家屬知情后簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

在觀察組患者入院后立即完善各項(xiàng)常規(guī)檢查，并且于受傷后D0、D1、D2、D3、D4、D6、D8-9和D10-12檢測(cè)血清NF-L水平（采用人NF-L酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，上海童耀生物科技有限公司）和血清S100B水平（采用ELISA，Bio-rad680型酶標(biāo)儀）。同時(shí)檢查對(duì)照組血清NF-L水平和血清S100B水平，比較2組血清NF-L水平和血清S100B水平。

對(duì)觀察組進(jìn)行CT分級(jí)。Fisher CT分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：1級(jí)：蛛網(wǎng)膜下腔未見(jiàn)血液；2級(jí)：縱裂、腦島池等各掃描層有薄層血液，厚度＜1 mm，或血液彌漫分布于蛛網(wǎng)膜下腔；3級(jí)：蛛網(wǎng)膜下腔局限血凝塊，或垂直各層面血塊厚≥1 mm；4級(jí)：腦內(nèi)或腦室內(nèi)血塊，無(wú)或有彌漫性蛛網(wǎng)膜下腔出血。分析觀察組受傷后D0 CT分級(jí)和血清NF-L、S100B水平相關(guān)性。

隨訪觀察組受傷后1年預(yù)后情況：采用格拉斯哥預(yù)后量表（Glasgow outcome scale，GOS）對(duì)患者評(píng)分，分值1～5分，其中1分為死亡；2分為持續(xù)性植物狀態(tài)；3分為嚴(yán)重殘疾；4分為中度殘疾；5分為完全恢復(fù)。1～3分為預(yù)后不良；4～5分為預(yù)后良好。根據(jù)觀察組1年后生存和GOS評(píng)分分為生存亞組和非生存亞組、預(yù)后良好亞組和預(yù)后不良亞組，比較不同亞組血清NF-L水平。分析觀察組預(yù)后和血清NF-L水平的相關(guān)性，分析血清NF-L水平預(yù)測(cè)急性顱腦損傷預(yù)后的ROC曲線。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，采用Spearman相關(guān)性分析軟件進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血清NF-L水平比較

觀察組患者受傷后D0、D1、D2、D3、D4、D6、D8-9和D10-12血清NF-L水平均顯著高于對(duì)照組（均P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 2組患者不同時(shí)間點(diǎn)血清NF-L水平比較（pg/mL）

觀察組患者受傷后D0、D1、D2、D3和D4血清S100B水平均顯著高于對(duì)照組（均P＜0.05），D6、D8-9和D10-12血清S100B水平與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 2組患者不同時(shí)間點(diǎn)血清S100B水平比較（μg/L）

2.2 觀察組受傷后D0 CT分級(jí)和血清NF-L、S100B水平相關(guān)性

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示觀察組受傷后D0CT分級(jí)與血清NF-L水平呈顯著正相關(guān)（r=0.386，P=0.001），與血清S100B水平無(wú)相關(guān)性（r=0.234，P=0.125）。

表3 觀察組受傷后D0 CT分級(jí)和血清NF-L、S100B水平相關(guān)性分析

2.3 不同預(yù)后亞組血清NF-L水平比較

非生存亞組患者受傷后24 h和1～12 d血清NF-L水平均顯著高于生存亞組（均P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 非生存亞組和生存亞組患者血清NF-L水平比較（pg/mL）

預(yù)后不良亞組患者受傷后24 h血清NF-L水平顯著高于預(yù)后良好亞組（P＜0.05），見(jiàn)表5。

表5預(yù)后不良亞組和預(yù)后良好亞組患者受傷后24 h血清NF-L水平比較（pg/mL）

2.4 觀察組預(yù)后和血清NF-L水平的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示觀察組患者1年后GOS評(píng)分與血清NF-L水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.367，P=0.008），見(jiàn)表6。

表6觀察組患者1年后GOS評(píng)分與血清NF-L水平相關(guān)性分析

2.5 血清NF-L水平預(yù)測(cè)急性顱腦損傷預(yù)后的ROC曲線分析

入院當(dāng)天血清NF-L預(yù)測(cè)急性顱腦損傷的AUC為0.99，且在入院后6 d AUC上升到1.00；入院當(dāng)天血清NF-L預(yù)測(cè)急性顱腦損傷生存的最佳截?cái)嘀禐?12 pg/mL，靈敏度和特異度分別為71%和88%；入院24 h血清NF-L預(yù)測(cè)急性顱腦損傷預(yù)后的最佳截?cái)嘀禐?17 pg/mL，靈敏度和特異度分別為86%和56%。

3 討論

近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)多種與顱腦損傷相關(guān)的生物學(xué)標(biāo)記物，這些標(biāo)記物在顱腦損傷病情發(fā)展和預(yù)后中起到一定作用，但特異性和靈敏度均不高[6]。外力所致軸突白質(zhì)損傷是引起顱腦損傷的主要因素，而NF-L大量表達(dá)于軸突白質(zhì)中，是細(xì)胞骨架的重要組成部分，并維持軸索的正常生理功能，包括樹(shù)突的分支和生長(zhǎng)等[7]。研究表明顱腦損傷患者的腦脊液NF-L水平顯著增高，可以用于評(píng)估患者的病情和預(yù)后，然而，由于腰椎穿刺的侵入性，臨床上常規(guī)進(jìn)行重復(fù)腰椎穿刺是不可行的[8,9]，因此我們采用超靈敏的ELISA法來(lái)測(cè)量急性顱腦損傷患者血清NF-L水平，來(lái)探討其與預(yù)后的關(guān)系。

本研究分析了100例急性顱腦損傷患者和50例健康人群的血清NF-L水平，結(jié)果顯示觀察組血清NF-L水平顯著高于對(duì)照組，在發(fā)生急性顱腦損傷后很快可以從患者血清中檢測(cè)到NF-L，且濃度顯著高于對(duì)照組，且在患者入院后至D12呈迅速升高趨勢(shì)，這可能與顱腦損傷后繼發(fā)的顱內(nèi)高壓和低氧血癥有關(guān)[10,11]。進(jìn)一步研究顯示非生存亞組和預(yù)后不良亞組患者血清NF-L濃度顯著高于生存亞組和預(yù)后良好亞組，表明顱腦損傷患者血清NF-L水平與患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)和損傷嚴(yán)重程度顯著相關(guān)。這是由于NF-L高表達(dá)于軸索，在受外力作用后，神經(jīng)元損傷，NF-L進(jìn)入細(xì)胞外液，通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血液中，直至達(dá)到平衡[12]。因此，顱腦損傷更為嚴(yán)重的患者的血清NF-L濃度要高于顱腦損傷較輕的患者。S00B蛋白屬于S100家族，主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，S100B與腫瘤、精神障礙、癲癇有關(guān)，而且與腦損傷有密切關(guān)系。正常情況下，S100B蛋白不能通過(guò)血腦屏障，顱腦損傷導(dǎo)致腦組織損傷，腦細(xì)胞和血腦屏障的破壞使血S100B迅速升高，對(duì)腦損傷的診療評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。本研究結(jié)果也顯示在急性腦損傷后患者血液中的S100B蛋白急速升高，顯著高于對(duì)照組，但是隨著時(shí)間的推移，血清S100B蛋白水平不斷下降，到受傷后第6天血清S100B蛋白水平與對(duì)照組無(wú)顯著差異。進(jìn)一步分析結(jié)果顯示S100B蛋白與患者顱腦損傷的CT分級(jí)無(wú)相關(guān)性，而血清NF-L與患者顱腦損傷的CT分級(jí)呈顯著正相關(guān)，能夠很好表現(xiàn)患者的顱腦損傷程度，這與S100B蛋白比較，具有一定的優(yōu)勢(shì)。

進(jìn)一步研究的結(jié)果也表明血清NF-L水平和患者1年后的GOS評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)。本研究通過(guò)繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)入院當(dāng)天血清NF-L預(yù)測(cè)急性顱腦損傷的AUC就達(dá)到0.99。預(yù)測(cè)患者死亡風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后的靈敏度和特異度分別達(dá)到71%、88%和86%、56%，靈敏度和特異度較高，且與國(guó)內(nèi)外其他研究的結(jié)果相似[13，14]。最近一項(xiàng)關(guān)于腦脊髓神經(jīng)鞘損傷的研究表明NF-L是軸突損傷的標(biāo)志，NF-L的濃度與MRI的軸突損傷程度有關(guān)[15]，而本研究并沒(méi)有評(píng)估NF-L濃度和軸突損傷的關(guān)系，存在一定局限性，后續(xù)研究將通過(guò)磁共振成像技術(shù)，如擴(kuò)散張量成像來(lái)評(píng)估軸突的損傷程度與血清NF-L濃度。

綜上所述，血清NF-L水平與急性顱腦損傷患者臨床預(yù)后呈顯著負(fù)相關(guān)，檢測(cè)血清NF-L水平有利于敏感評(píng)價(jià)急性顱腦損傷后神經(jīng)元損傷的嚴(yán)重程度，血清NF-L可以作為預(yù)測(cè)急性顱腦損傷的理想生物學(xué)標(biāo)記物，有利于敏感評(píng)價(jià)患者預(yù)后、監(jiān)測(cè)病情發(fā)展及療效、及時(shí)改善治療方法，值得臨床加以關(guān)注。