趙磊，劉北力，蔣黃卉，劉仕聰，郭思蘭，孫艷濤*

1.四平市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 四平 136000；2.吉林省四平市第四人民醫(yī)院，吉林 四平 136000；3.吉林師范大學(xué) 化學(xué)學(xué)院，吉林 四平 136000；4.吉林省四平市婦嬰醫(yī)院，吉林 四平 136000

蠐螬主產(chǎn)東北、江蘇、安徽、四川、河北、山東、河南等地，從黑龍江起至長(zhǎng)江以南地區(qū)以及內(nèi)蒙古、陜西等地均有分布[7]。蠐螬生活在土壤中，這種習(xí)性可能引起銻及汞元素的富集，影響用藥的安全[8-10]。銻與汞是可長(zhǎng)距離輸送的有毒元素，銻已被證實(shí)對(duì)人體及具有毒性及致癌性，并導(dǎo)致肝、皮膚、呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)方面的疾病，銻中毒具有潛伏期長(zhǎng)的特點(diǎn)[11]。工業(yè)中的銻用于阻燃劑、制造合金材料等。銻屬于一類(lèi)污染物，歐盟將銻列為高危害有毒物質(zhì)和可致癌物質(zhì)并予以管制。硒可防止因氧化而引起的衰老、組織硬化，并且它還具有活化免疫系統(tǒng)、預(yù)防癌癥的功效，是必要的微量礦物質(zhì)。硒參與構(gòu)成很多酶類(lèi)，特別是谷胱甘肽過(guò)氧化酶，可以保護(hù)細(xì)胞和組織，維持其正常功能。硒還有解毒功效，因?yàn)槲徒饘儆泻芎玫挠H和性。硒有很強(qiáng)的抗氧化性，具有保護(hù)心血管和抗腫瘤的作用[12-13]。

目前測(cè)定重金屬及有害元素素的分析多為原子吸收分光光度法、電感耦合等離子體-質(zhì)譜(ICP-MS)。原子熒光光譜法(AFS)因化學(xué)蒸氣分離、非色散光學(xué)系統(tǒng)等特性，是測(cè)定微量硒、汞、銻等元素最成功的分析儀器之一。是我國(guó)科技工作者為原子熒光光譜分析的發(fā)展作出了重要貢獻(xiàn)[14]。微波消解-ASF操作簡(jiǎn)單，可為蠐螬藥材測(cè)定銻、汞、硒元素提供參考[15]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

AFS-9700A雙通道原子熒光光度計(jì)(北京海光儀器有限公司)；MARS微波消解儀(美國(guó)CEM公司)；Thermo Genpure Pro型超純水器(美國(guó)Thermo公司)；電子天平BT125D型萬(wàn)分之一分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠(chǎng)制造)；BHW-09C-20恒溫加熱器(上海博通化學(xué)科技有限公司)

1.2 試藥

銻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 100 μg mL-1(壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，批號(hào)：B1807102)；汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 100 μg mL-1(壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，批號(hào)：B1803110)；硒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 100 μg mL-1(壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，批號(hào)：B1804120)；氫氧化鈉、硼氫化鉀、鐵氰化鉀、硫脲、抗壞血酸、溴酸鉀、溴化鉀、鹽酸羥胺為分析純；鹽酸、硝酸、過(guò)氧化氫為優(yōu)級(jí)純，水為高純水。

蠐螬收集9批藥材，規(guī)定編號(hào)為qc1～qc9，經(jīng)延邊大學(xué)藥學(xué)院呂慧子教授鑒定為蠐螬。

2 方法與結(jié)果

2.1 AFS儀器條件

設(shè)定儀器最佳狀態(tài)，穩(wěn)定30 min，還原劑為20 mg mL-1硼氫化鈉溶液(稱(chēng)取10.0 g硼氫化鈉溶于500 mL的2 mg mL-1氫氧化鈉溶液)，載氣為氬氣，載流為(5∶95)的鹽酸溶液，進(jìn)樣體積1.5 mL，以熒光強(qiáng)度值測(cè)量。儀器條件見(jiàn)表1。

表1 原子熒光光度法儀器條件

2.2 樣品溶液及空白溶液制備

精密稱(chēng)取蠐螬樣品0.5 g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸8 mL、過(guò)氧化氫2 mL，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解儀中消解(消解程序：一階段10 min內(nèi)升溫至130 ℃保持10 min；二階段，20 min升至160 ℃；三階段，5 min升至180 ℃保持10 min)。二次消解完全后，取消解罐置恒溫加熱器中120 ℃緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮近并近干，加入1 mL鹽酸。硒元素測(cè)定時(shí)加入100 mg mL-1的鐵氰化鉀1 mL。汞元素測(cè)定時(shí)加入5 mL高純水，加入0.5 mL溴酸鉀-溴化鉀溶液(0.278 g無(wú)水溴酸鉀、1 g溴化鉀，加高純水溶解并稀釋至100 mL)，搖勻放置20 min后，滴加1滴 100 mg mL-1的鹽酸羥胺溶液。銻元素測(cè)定時(shí)加入1 mL硫脲-抗壞血酸溶液(10.0 g硫脲加約80 mL高純水，加熱溶解，冷卻后加入10.0 g抗壞血酸，稀釋至100 mL)，分別用高純水定容至10 mL，搖勻，作為樣品溶液。同法制備樣品空白溶液，作為空白校正。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

硒、汞、銻元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用高純水稀釋成標(biāo)準(zhǔn)使用液的質(zhì)量濃度分別為100、10、100 ng mL-1。分別取硒、汞、銻元素標(biāo)準(zhǔn)使用液至10 mL量瓶中，制成表2中的不同濃度，每個(gè)容量瓶中分別加入1 mL鹽酸。硒元素測(cè)定時(shí)加入100 mg mL-1的鐵氰化鉀1 mL。汞元素測(cè)定時(shí)加入7 mL高純水，加入0.5 mL溴酸鉀-溴化鉀溶液(0.278 g無(wú)水溴酸鉀、1 g溴化鉀，加高純水溶解并稀釋至100 mL)，搖勻放置20 min后，滴加1滴100 mg mL-1的鹽酸羥胺溶液。銻元素測(cè)定時(shí)加入1 mL硫脲-抗壞血酸溶液(10.0 g硫脲加約80 mL高純水，加熱溶解，冷卻后加入10.0 g抗壞血酸，稀釋至100 mL)，分別用高純水稀釋定容至10 mL，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。同法制備標(biāo)準(zhǔn)空白溶液，作為空白校正。 測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以濃度為橫坐標(biāo)，熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。硒、汞、銻元素的濃度見(jiàn)表2，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)見(jiàn)表3。

表2 硒、汞、銻元素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度范圍 ng mL-1

表3 硒、汞、銻元素的回歸方程 μg L-1

2.4 精密度試驗(yàn)

取硒、汞、銻質(zhì)量濃度分別為10、0.4、3.0 ng mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果熒光強(qiáng)度的RSD分別為0.21%、0.34%、0.38%，結(jié)果表明精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取硒、汞、銻質(zhì)量濃度分別為10、0.4、3.0 ng mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，分別定容后的0、1、3、4、5 h測(cè)定，結(jié)果熒光強(qiáng)度RSD為0.33%、0.37%、0.42%結(jié)果表明5 h的穩(wěn)定性良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取樣品qc1共6份，按照2.2樣品溶液制備方法制備后測(cè)定，結(jié)果硒、汞的RSD為1.41%、2.42%，結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

稱(chēng)取已知含量的供試品粉末9份(qc1)，每份約0.25 g，精密稱(chēng)定，分別加入 硒、汞、銻元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成高、中、低3個(gè)濃度的加標(biāo)樣品各3份，按“2.2樣品溶液制備”，測(cè)得值按標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算，結(jié)果回收率見(jiàn)表4。

表4 加樣回收率試驗(yàn)(n=9) %

2.8 樣品測(cè)定結(jié)果

取10批樣品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)所示儀器工作條件測(cè)定，計(jì)算樣品中硒、汞、銻元素的含量。結(jié)果見(jiàn)表5。

3 討論

富硒稻谷硒含量在0.04～0.30 mg kg-1之間。而測(cè)定蠐螬中含硒元素在0.43～1.96 mg kg-1，說(shuō)明蠐螬富含硒。而硒元素具有如提高人體免疫力，保護(hù)眼睛，保護(hù)修復(fù)細(xì)胞，減輕細(xì)胞損傷，防止血栓、冠心病等作用。而蠐螬具有破血，利水消腫。常用于太陰人跌打損傷，羸瘦腹?jié)M，癥瘕，經(jīng)閉，浮腫等病癥。說(shuō)明硒元素與蠐螬的治療作用有相關(guān)性。在汞元素測(cè)定時(shí)對(duì)比原子吸收測(cè)定方法，結(jié)果原子熒光與原子吸收測(cè)定的樣品RSD<7.0%，說(shuō)明測(cè)定結(jié)果的差異性較小。有害元素銻未檢測(cè)到，說(shuō)明具有遷移性的蠐螬未受到銻元素污染。樣品處理時(shí)采用的微波消解過(guò)程，考察加入2 mL過(guò)氧化氫試液，結(jié)果比不加入過(guò)氧化氫消化效果好。如有批次消化不完全，可采用二次微波解。本實(shí)驗(yàn)采用微波消解-AFS測(cè)定蠐螬中硒、汞、銻的含量，具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、測(cè)試成本較低的優(yōu)點(diǎn)。

表5 9批樣品中硒、汞、銻元素的含量(n=2) mg kg-1

注：/表示未檢出。