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艾灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面修復(fù)的影響

2018-12-21 12:41于杰孫忠人李洪玲
關(guān)鍵詞:壓力性損傷修復(fù)艾灸

于杰 孫忠人 李洪玲

[摘要] 目的 觀察艾灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面修復(fù)的影響。 方法 采用自制模型裝置通過(guò)缺血-再灌注損傷方式建立2~3期壓力性損傷動(dòng)物模型,將造模成功的70只SD雌性大鼠隨機(jī)分為模型組與艾灸組,每組各35只。每組根據(jù)干預(yù)時(shí)間的長(zhǎng)短再分為5個(gè)亞組,即1 d、3 d、5 d、7 d、10 d亞組,7只/亞組。將空白組35只正常健康大鼠隨機(jī)分為上述5個(gè)亞組,7只/亞組,不予造模,僅對(duì)模擬造模部位處進(jìn)行碘伏處理。模型組于造模后只對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行碘伏常規(guī)處理,艾灸組在造模成功后,先對(duì)創(chuàng)面予碘伏處理,繼予艾灸回旋灸操作,以壓力性損傷創(chuàng)面為中心,1 cm長(zhǎng)度為半徑,1次/d,15 min/次。依次在上述5個(gè)時(shí)間點(diǎn)標(biāo)本采集前測(cè)定壓力性損傷創(chuàng)面面積,通過(guò)蘇木精-伊紅(HE)染色法觀察其創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果 治療1 d后,各組組間的壓力性損傷創(chuàng)面愈合率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。艾灸組在其余4個(gè)時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面愈合率均明顯高于模型組,分別對(duì)同一時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行兩組組間比較,差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)。與模型組比較,艾灸組創(chuàng)面肉芽組織分別在生長(zhǎng)狀態(tài)與出現(xiàn)時(shí)間方面存在明顯優(yōu)勢(shì),其創(chuàng)面面積縮小程度較為明顯,收縮速度更快。HE染色發(fā)現(xiàn),艾灸組大鼠創(chuàng)面組織中的炎細(xì)胞浸潤(rùn)高峰及肉芽組織出現(xiàn)時(shí)限均較模型組提前,成纖維細(xì)胞增生程度與數(shù)量更明顯,且出現(xiàn)時(shí)限較早。艾灸組大鼠創(chuàng)面更早出現(xiàn)新生血管和表皮結(jié)構(gòu)的恢復(fù)。 結(jié)論 艾灸能夠有效促進(jìn)壓力性損傷創(chuàng)面的愈合。

[關(guān)鍵詞] 艾灸;壓力性損傷;修復(fù);創(chuàng)面愈合率;病理形態(tài)學(xué)

[中圖分類號(hào)] R245.81 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210(2018)09(a)-0004-06

[Abstract] Objective To observe the effect of moxibustion on wound repair in rats with pressure injuries. Methods The models of rats with pressure ulcers which belonged to stage 2-3 were established by using self-made devices of pressure ulcers. The models of 70 SD female rats with skin ischemia reperfusion injury were randomly divided into model group and moxibustion group. There were 35 rats in each group. Each group was divided into 5 subgroups including 1 d, 3 d, 5 d, 7 d and 10 d according to the length of intervention time. Seven experimental rats were included in each subgroup. The blank group was given shaving disinfection, tied together with other groups of rats given only conventional iodophor intervention. The model group was only given conventional iodophor intervention. The moxibustion group was given iodophor intervention at first and direct moxibustion intervention to the local tissue of pressure ulcer with cyclotron operation, with moxibustion once a day and 15 minutes each time. The wound area was measured respectively after five time-points (1 d, 3 d, 5 d, 7 d and 10 d after intervention or treatment) before drawing. HE staining was used to observe the pathological changes of the pressure ulcer. Results There were no significant differences in the wound healing rates between the groups in the 1 d after intervention(P > 0.05). Compared with the model group, the wound healing rates of moxibustion group were significantly higher at the four time-points including 3 d, 5 d, 7 d and 10 d after treatment. At the same time-points, there were significant differences between the two groups (P < 0.01). Compared with the model group, the granulation tissues in the wounds of rats which belonged to moxibustion group with pressure ulcers had obvious advantages both in the time-points and the growth states. There were granulation tissues at the third day after treatment in the moxibustion group, while those of model group appeared about at the seventh day after iodophor intervention. Simultaneously, the wound contraction rates of pressure ulcers were faster in the moxibustion group which had more evident area reductions. Pathological changes of pressure ulcers were observed by HE staining that the peaks of the inflammatory infiltrations which existed in the moxibustion group had appeared in advance compared with the model group. Meanwhile, fibroblasts appeared earlier, having more numbers and obvious degrees of hyperplasia. The occurrence time of granulation tissues was earlier in the moxibustion group. Hence, neovascularization which belonged to moxibustion group formed earlier than that of model group. The epidermal structures of rats in the moxibustion group recovered in advance. Conclusion Moxibustion can promote the wound healing effectively in rats with pressure injuries.

[Key words] Moxibustion; Pressure injury; Repair; Wound healing rate; Pathological morphology

壓力性損傷是一種由于局部組織長(zhǎng)期受壓,繼而發(fā)生持續(xù)缺血、缺氧以及營(yíng)養(yǎng)不良,最終致使組織發(fā)生潰爛、壞死的外科疾患。本病的發(fā)病因素眾多,主要包括三大類,即內(nèi)源性因素、外源性因素與加劇性因素,其中多因素相互作用導(dǎo)致發(fā)病居多[1]。剪切力、摩擦力與垂直壓力共同構(gòu)成壓力性損傷的外源性因素,上述三大力學(xué)因素在致病過(guò)程中或單獨(dú)或合并導(dǎo)致本病的發(fā)生[2-3]。營(yíng)養(yǎng)、感覺(jué)障礙、年齡、意識(shí)水平、活動(dòng)性等共同構(gòu)成了壓力性損傷的內(nèi)源性因素[3]。本研究動(dòng)物模型評(píng)價(jià)參照NPUAP公布的最新指南(2016版)[4],其分期嚴(yán)格按照該指南的最新界定標(biāo)準(zhǔn)。本課題組多年來(lái)致力于艾灸促進(jìn)壓力性損傷組織血管新生的相關(guān)研究[5-12],且采用艾灸治療壓力性損傷取得較滿意的臨床療效。本研究通過(guò)KP-21C型求積儀測(cè)定壓力性損傷創(chuàng)面愈合率、肉眼及蘇木精-伊紅染色(HE染色)觀察創(chuàng)面組織病理形態(tài)學(xué)變化,旨在客觀評(píng)價(jià)艾灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面修復(fù)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

對(duì)120只體重230~245 g的雌性健康SD大鼠[黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證:SYXK(黑)2013-012]給予單籠喂養(yǎng),使其自由飲水、進(jìn)食并活動(dòng)[6-9]。在濕度40%~50%RH、溫度(19.0±2.1)℃、明暗周期12 h的環(huán)境中進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)14 d后選取85只給予造模處理,另35只作為空白組,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處置符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 主要儀器及試劑

1.2.1 主要儀器 求積儀(KP-21C型、日本PLACOM),電子天平(MP200A型、上海精密儀器廠),造模裝置(玻璃板、純凈水瓶、十字形托盤(pán)、不銹鋼絲網(wǎng)、膠水、膨脹螺絲、帆布條、鋼珠、尼龍?jiān)鷰В妱?dòng)理發(fā)器(寧波真漢子電器有限公司),非接觸式電子溫度計(jì)(廣州市金鑫寶電子有限公司)。DM4000B顯微鏡、EG1169組織包埋機(jī)及RM2235型切片機(jī)(德國(guó)LEICA),HI1220烘片機(jī)(德國(guó)LEICA),包埋盒(世泰實(shí)驗(yàn)耗材有限公司)。

1.2.2 試劑 敏感肌膚型脫毛膏(薇婷牌,利潔時(shí)家化中國(guó)有限公司),五年陳艾(有煙艾條,規(guī)格:18 mm×200 mm,南陽(yáng)藥益寶艾草制品有限公司),醫(yī)用酒精(安捷高科消毒制品有限公司),醫(yī)用碘伏(山東利爾康消毒科技有限公司)、醫(yī)用棉簽(沈陽(yáng)北華醫(yī)材有限公司),生理鹽水(青島華仁藥業(yè)股份有限公司)。水溶性伊紅(碧云天生物技術(shù)),蘇木精染液(碧云天生物技術(shù)),無(wú)水乙醇(上海富宇),二甲苯(上海富宇),石蠟、10%中性甲醛溶液、鹽酸(均為上海富宇),蒸餾水[屈臣氏集團(tuán)(香港)有限公司],定性濾紙1001-6508(美國(guó)GEwhatman),水合氯醛(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

1.3 自制裝置

①取3塊玻璃板(規(guī)格:6.0 cm×5.0 cm×1.5 cm)制成倒置的“U”形裝置,于水平玻璃板中心打孔,孔徑大小=膨脹螺絲外管外徑。②處理固定膨脹螺絲外管,確保螺釘錐度側(cè)沖下方從鐵管中穿行。③固定水瓶底座與螺紋。④調(diào)節(jié)螺絲外管高度后固定鐵管與水平玻璃板,系牢帆布條[7-9]。

1.4 模型制備

分別用塑料制尼龍?jiān)鷰⒋笫?個(gè)部位固定(腹部、雙側(cè)腋下、雙側(cè)踝部、雙側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)),充分暴露造模部位后備皮處理(備皮長(zhǎng)寬分別20 mm),消毒待造模處及螺釘錐度側(cè)。將造模裝置固定于大鼠腿部近膝關(guān)節(jié)骨隆突處(即造模處),通過(guò)缺血-再灌注損傷循環(huán)周期模式制備壓力性損傷動(dòng)物模型。1個(gè)循環(huán)=缺血期(120 min)+再灌注期(30 min),5個(gè)循環(huán)/d,持續(xù)3 d。30 min的再灌注期解壓松綁大鼠,任其活動(dòng)、飲水及進(jìn)食。造模3 d后,持續(xù)1 d的觀察期,用以評(píng)價(jià)模型制備成功與否,并剔除制備失敗的動(dòng)物模型[7-9]。

1.5 動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)

動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)參照2~3期壓力性損傷(即2016年NPUAP公布的最新指南)[4],并進(jìn)行肉眼(創(chuàng)面顏色、形態(tài)及滲出物性質(zhì))及行為學(xué)(大鼠整體狀態(tài)、性情、步態(tài)及二便等)觀察[13]。

1.6 實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)治療

遵循先造模后隨機(jī)的原則,將85只實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行壓力性損傷缺血-再灌注模型制備,造模過(guò)程中共9只大鼠死亡,6只大鼠造模失敗。將造模成功的70只雌性SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為模型組和艾灸組,每組各35只。每組根據(jù)干預(yù)時(shí)間的長(zhǎng)短再分為5個(gè)亞組,即1 d、3 d、5 d、7 d、10 d亞組,7只/亞組,造模后至干預(yù)過(guò)程中共有10只大鼠脫落。將空白組35只正常健康大鼠隨機(jī)分為上述5個(gè)亞組,7只/亞組,其中共有5只大鼠于備皮時(shí)出現(xiàn)負(fù)損傷而給予剔除,因此上述所有亞組最終每亞組6只大鼠納入實(shí)驗(yàn)。三組動(dòng)物捆綁方式均相同,即對(duì)大鼠腹部、雙側(cè)腋下、雙側(cè)踝部、雙側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)4個(gè)部位通過(guò)塑料制尼龍?jiān)鷰Ю壒潭ㄓ诓讳P鋼絲網(wǎng)上??瞻捉M不予造模,僅對(duì)模擬造模部位處進(jìn)行碘伏處理。模型組于造模后只對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行碘伏常規(guī)處理,艾灸組在造模成功后,先對(duì)創(chuàng)面予碘伏處理,繼予艾灸回旋灸操作,以壓力性損傷創(chuàng)面為中心,1 cm長(zhǎng)度為半徑,1次/d,15 min/次。將艾條燃燒端及非接觸式電子溫度儀探頭與壓力性損傷創(chuàng)面的距離控制在30 mm左右,將艾灸溫度控制在40~42℃,測(cè)量溫度每隔30 s測(cè)1次,全程施灸操作需注意對(duì)艾條燃燒過(guò)程中產(chǎn)生灰燼的及時(shí)處理,旨在達(dá)到艾灸療效最佳化與負(fù)損傷最小化。

1.7 測(cè)定壓力性損傷大鼠創(chuàng)面愈合率

對(duì)各組大鼠分別選取兩個(gè)測(cè)量點(diǎn)(即造模后和取材前)進(jìn)行創(chuàng)面面積的測(cè)定。首先,采用制版硫酸轉(zhuǎn)印紙(消毒后)通過(guò)透繪法對(duì)壓力性損傷創(chuàng)面處勾畫(huà)輪廓圖,將其掃描至計(jì)算機(jī),然后對(duì)其等比例放大10倍后打印,利用KP-21C型求積儀測(cè)定經(jīng)放大10倍后的圖形面積,再將測(cè)定面積值除以10倍,得出大鼠壓力性損傷創(chuàng)面實(shí)際面積值,最后分別測(cè)量3次取均值作為實(shí)驗(yàn)大鼠壓力性損傷創(chuàng)面面積值。壓力性損傷大鼠創(chuàng)面愈合率=[(造模成功后的測(cè)量面積-取材前的測(cè)量面積)/造模成功后的測(cè)量面積]×100%。

1.8 觀察艾灸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學(xué)改變的影響

1.8.1 標(biāo)本采集 分別將模型組和艾灸組大鼠于治療1 d、3 d、5 d、7 d、10 d后進(jìn)行標(biāo)本采集,空白組大鼠隨同以上兩組于上述5個(gè)時(shí)間點(diǎn)取材處理。標(biāo)本采集前對(duì)所有大鼠體重測(cè)定,根據(jù)體重不同分別給予對(duì)應(yīng)的水合氯醛進(jìn)行腹腔注射麻醉,取材區(qū)域?yàn)橐詨毫π該p傷創(chuàng)面正中心為圓點(diǎn),5 mm為半徑的皮膚全層組織。取材過(guò)程中注意勿將組織打卷,展平固定在濾紙中,置于包埋盒中,貯存在盛有10%的中性甲醛溶液,24 h內(nèi)做包埋處理,標(biāo)本采集后的所有大鼠脫頸椎處死。

1.8.2 包埋及HE染色步驟 包埋:采集后的標(biāo)本置入已標(biāo)號(hào)的新包埋盒。60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、100%乙醇Ⅰ、100%乙醇Ⅱ,依次進(jìn)行酒精梯度脫水。酒精和二甲苯等量混合及二甲苯浸泡,透明處理。在二甲苯和石蠟等量混合、石蠟Ⅰ、石蠟Ⅱ進(jìn)行浸蠟處理,包埋成塊。HE染色:①切片≤4 μm。②常規(guī)二甲苯脫蠟處理切片,梯度酒精脫水處理:二甲苯Ⅰ 5 min → 二甲苯Ⅱ 10 min → 無(wú)水乙醇Ⅰ 2 min → 無(wú)水乙醇Ⅱ 2 min → 95%乙醇1 min → 80%乙醇1 min → 75%乙醇1 min。③蒸餾水沖洗1 min。④蘇木精染色5 min → 沖洗。⑤將1%鹽酸乙醇分化30 s。⑥蒸餾水過(guò)洗60 s。⑦伊紅液染色2 min → 沖洗30 s。⑧常規(guī)脫水、透明處理:95%乙醇Ⅰ浸泡1 min → 95%乙醇Ⅱ 1 min → 無(wú)水乙醇Ⅰ 3 min → 無(wú)水乙醇Ⅱ浸泡3 min → 二甲苯Ⅰ 3 min → 二甲苯Ⅱ浸泡3 min。⑨封片:中性樹(shù)膠封片。⑩光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠壓力性損傷皮膚的病理形態(tài)學(xué)改變。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較選取ANOVA,多重比較選取LSD檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察艾灸對(duì)壓力性損傷大鼠損傷修復(fù)中創(chuàng)面愈合率的影響

觀察各組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)壓力性損傷創(chuàng)面愈合率的比較發(fā)現(xiàn),治療1 d后,模型組和艾灸組兩組創(chuàng)面愈合率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。與模型組比較,艾灸組在治療3 d、5 d、7 d、10 d后的創(chuàng)面愈合率明顯升高。分別對(duì)同一時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行兩組組間比較,差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)。見(jiàn)表1。

2.2 實(shí)驗(yàn)大鼠壓力性損傷創(chuàng)面局部的肉眼觀察改變

空白組大鼠為正常皮膚組織,皮膚完整,外觀呈肉粉色,未見(jiàn)水腫及滲出等損傷,見(jiàn)圖1A。造模前期,大鼠創(chuàng)面顏色變紅,壓之不褪色,皮膚較完整,符合1期壓力性損傷的模型標(biāo)準(zhǔn);造模后期,大鼠病灶創(chuàng)面伴有結(jié)痂,質(zhì)地或軟或硬,或偏創(chuàng)面中央,或于創(chuàng)面周?chē)糠炙捚屏褲{液得以吸收,部分水皰仍然存在,創(chuàng)面仍表現(xiàn)水腫,顏色紅紫,符合2~3期壓力性損傷的特點(diǎn);造模結(jié)束第1天晚即造模觀察評(píng)價(jià)期,大鼠的創(chuàng)面水腫,顏色或紅紫或蒼白,血性或黃色滲出物,符合2~3期壓力性損傷特點(diǎn),即造模成功標(biāo)志。見(jiàn)圖1B~D。

模型組大鼠在上述5個(gè)時(shí)間點(diǎn)經(jīng)過(guò)碘伏處理后,創(chuàng)面愈合進(jìn)程較艾灸組明顯滯后,但整體趨勢(shì)向愈合發(fā)展。碘伏處理3 d后,創(chuàng)面呈結(jié)痂狀態(tài),質(zhì)硬,膿性滲出物減少,血性滲出物仍存在,水腫明顯。碘伏處理7 d后,創(chuàng)面輪廓縮小明顯,結(jié)痂質(zhì)地較前更軟,部分逐漸脫落,創(chuàng)面呈現(xiàn)粉紅色,肉芽組織較豐富。見(jiàn)圖2A~B。

艾灸組治療3 d后,其創(chuàng)面滲出物(血性)明顯減少,創(chuàng)面顏色呈鮮紅色,邊緣結(jié)痂,呈現(xiàn)柔軟的肉芽組織,水腫明顯緩解。治療5 d后,壓力性損傷創(chuàng)面滲出物顯著減少,較干燥,肉芽組織較3 d明顯豐富,創(chuàng)面顏色呈粉紅色,結(jié)痂質(zhì)軟,尤其在創(chuàng)面邊緣處的結(jié)痂部分已與皮膚分離,創(chuàng)面面積縮小顯著。治療10 d后,創(chuàng)面顏色呈現(xiàn)皮膚本色或略白色。見(jiàn)圖3A~C。

2.3 HE染色觀察大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學(xué)改變

空白組鏡下清晰可見(jiàn)較完整的表皮全層結(jié)構(gòu),真皮層可見(jiàn)豐富的膠原纖維,見(jiàn)圖4A。模型組碘伏處理1 d后,鏡下所示真皮層內(nèi)大量出血,以及少量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),纖維組織斷裂及壞死。碘伏處理3 d后,表皮層斷裂,真皮層出現(xiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),伴有出血。碘伏處理5 d后,真皮層可見(jiàn)大量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),少許血管壞死及纖維增生。碘伏處理7 d后,損傷部位可見(jiàn)少量的膠原細(xì)胞增生,大量的成纖維細(xì)胞增生及毛細(xì)血管芽。碘伏處理10 d后,鏡下可見(jiàn)少量的中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、大量的膠原細(xì)胞、成纖維細(xì)胞增生。見(jiàn)圖4B~D。

艾灸組治療1 d后,鏡下所示部分表皮細(xì)胞呈脫落狀態(tài),真皮層可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。治療3 d后,真皮層出現(xiàn)小血管壞死,大量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),出現(xiàn)少許毛細(xì)血管芽。治療5 d后,表皮的角質(zhì)層、顆粒層清晰可見(jiàn),其真皮層可見(jiàn)少許中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),以及大量成纖維細(xì)胞為主的增生,毛細(xì)血管芽較3 d后明顯增多。治療7 d后,表皮層恢復(fù)程度尚可,真皮層可見(jiàn)少許炎細(xì)胞的浸潤(rùn)及大量的成纖維細(xì)胞增生。治療10 d后,表皮結(jié)構(gòu)恢復(fù)較好,傷口縮小明顯,可見(jiàn)毛囊細(xì)胞的增生,真皮層少許的成纖維組織增生伴有大量的膠原纖維,肉芽組織較前減少。見(jiàn)圖5A~C。

3 討論

壓力性損傷與中醫(yī)學(xué)的“褥瘡”、“席瘡”或“壓瘡”病名對(duì)應(yīng)。中醫(yī)學(xué)對(duì)席瘡的認(rèn)識(shí)早在《外科啟玄》中便有記載,即“席瘡乃久病著床之人,挨擦磨破而成。上而背脊,下而尾閭,當(dāng)用馬屁勃軟襯……病人但見(jiàn)席瘡,死之征也?!彼粌H首次提出“席瘡”的概念,并在病因病機(jī)、發(fā)病部位及干預(yù)措施等方面加以概括?!鹅`樞·官能》:“針?biāo)粸椋闹??!薄夺t(yī)學(xué)入門(mén)·針灸》載:“藥之不及,針之不到,必須灸之?!被匦膶儆趹移鹁牡姆懂牐瑢?duì)于壓力性損傷、皮膚淺表性潰瘍以及其他慢性組織損傷等疾病的應(yīng)用確有優(yōu)勢(shì)。有煙艾灸在燃燒過(guò)程所發(fā)出熱、光、煙[14-15],其中光譜輻射可能是促進(jìn)發(fā)揮作用的關(guān)鍵因素,主要成分為近紅外輻射[16-17],它能夠滲透至機(jī)體較深部位而發(fā)揮效應(yīng)。另外,本課題將艾灸干預(yù)的溫度控制在40~42℃[18-22]的適宜范圍,旨在發(fā)揮艾灸治療壓力性損傷的最佳療效的同時(shí)避免出現(xiàn)負(fù)損傷。本研究采用透繪法結(jié)合求積儀測(cè)定各組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)壓力性損傷創(chuàng)面愈合率發(fā)現(xiàn),3 d作為艾灸干預(yù)發(fā)揮促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用的起效時(shí)間,推測(cè)此療效的發(fā)揮可能需要建立在累積一定刺激量的基礎(chǔ)之上。因此,艾灸干預(yù)能夠促進(jìn)壓力性損傷創(chuàng)面的愈合及修復(fù),其療效是確切的。壓力性損傷大鼠創(chuàng)面局部的肉眼觀察改變也與上述結(jié)論基本相符。

壓力性損傷歸屬慢性及難愈性創(chuàng)面,由于在組織修復(fù)進(jìn)程中的每一個(gè)階段均較一般皮膚損傷相對(duì)滯后,因此,其具有相對(duì)復(fù)雜的修復(fù)過(guò)程,而肉芽組織的形成處于關(guān)鍵的核心地位。肉眼觀察壓力性損傷創(chuàng)面愈合過(guò)程發(fā)現(xiàn),艾灸組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面肉芽組織在治療3 d后出現(xiàn),而模型組在碘伏處理7 d后出現(xiàn),即在肉芽組織出現(xiàn)的時(shí)限上艾灸組發(fā)揮優(yōu)勢(shì)。在其生長(zhǎng)狀態(tài)上,兩者比較亦是如此。艾灸組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面面積縮小較模型組更加顯著,由此說(shuō)明,艾灸干預(yù)促進(jìn)壓力性損傷創(chuàng)面的修復(fù),療效確切。HE染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),艾灸組大鼠創(chuàng)面組織中的炎細(xì)胞浸潤(rùn)高峰及肉芽組織出現(xiàn)時(shí)間均較模型組提前,成纖維細(xì)胞增生程度與數(shù)量更明顯,且出現(xiàn)時(shí)限較早。艾灸組大鼠創(chuàng)面更早出現(xiàn)新生血管和表皮結(jié)構(gòu)的恢復(fù)。由此說(shuō)明,艾灸干預(yù)能夠從皮膚愈合的三個(gè)關(guān)鍵時(shí)期(即炎癥期、增生期和重塑期)分別促進(jìn)創(chuàng)面的修復(fù)及愈合進(jìn)程。即艾灸能夠促進(jìn)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面的愈合及修復(fù),從整體上加速創(chuàng)面愈合的進(jìn)程,從而縮短創(chuàng)面愈合的所需時(shí)間。本課題組在后續(xù)的研究中將分別通過(guò)透射電鏡觀察壓力性損傷創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)、從基因及蛋白層面探討艾灸促進(jìn)壓力性損傷組織創(chuàng)面修復(fù)的可能機(jī)制。

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(收稿日期:2017-11-30 本文編輯:任 念)

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