陳 甫，劉帥杰，朱風(fēng)華，高善頌，朱連勤*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，山東青島 266109；2 .青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島 266109）

飼料原料短缺是制約我國(guó)集約化養(yǎng)殖快速發(fā)展的重要問題之一[1-2]。油脂作為一種優(yōu)質(zhì)的能量飼料，在飼料工業(yè)和畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛[3-4]。鴨油是在鴨肉制品加工過程中提煉獲得的油脂，富含單不飽和脂肪酸，將其作為能量飼料不僅有利于農(nóng)業(yè)廢棄物再利用，還可以在一定程度上填補(bǔ)國(guó)內(nèi)能量飼料缺口[5]。我國(guó)肉鴨養(yǎng)殖位居世界第一，鴨油產(chǎn)量巨大，現(xiàn)已成為國(guó)內(nèi)應(yīng)用最為廣范的飼用油脂，但應(yīng)用過程中也不斷暴露出一些問題。物理、化學(xué)和微生物等因素會(huì)導(dǎo)致油脂發(fā)生酸敗，產(chǎn)生毒性物質(zhì)，降低飼料的適口性和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，從而影響動(dòng)物的健康和生長(zhǎng)性能[6-10]。目前，鴨油酸價(jià)對(duì)肉雞健康以及生長(zhǎng)性能的影響尚不明確，缺乏科學(xué)使用鴨油的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。鑒于此，本試驗(yàn)探究飼喂不同酸價(jià)的鴨油對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化功能和免疫功能的影響，為科學(xué)使用鴨油以及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 鴨油購(gòu)于山東某飼料公司，優(yōu)質(zhì)鴨油酸價(jià)4 mg/kg，高酸價(jià)鴨油酸價(jià)為14.21 mg/kg。用優(yōu)質(zhì)鴨油和高酸價(jià)鴨油按照比例混合進(jìn)行稀釋，混勻后檢測(cè)鴨油酸價(jià)并調(diào)整鴨油比例，最終獲得酸價(jià)分別為7、9、11、14 mg/g的鴨油。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧 選用108只1日齡商品代白羽肉雞，公母混合。預(yù)試7 d后隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)。1組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；2～6組為不同酸價(jià)鴨油組，在基礎(chǔ)日糧中分別添加酸價(jià)為4、7、9、11、14 mg/g的鴨油。基礎(chǔ)日糧參照NRC（1994）標(biāo)準(zhǔn)配制，配方及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 正試期為35 d，采用網(wǎng)上平養(yǎng)，24 h光照模式，自由采食、飲水，記錄每日耗料量、死亡數(shù)等。免疫程序?yàn)槌Ｒ?guī)免疫：7日齡注射新流（La Sota株+SZ株）二聯(lián)滅活疫苗，14日齡和28日齡注射傳染性法氏囊弱毒疫苗，35日齡注射新流二聯(lián)滅活疫苗。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能及屠宰性能 試驗(yàn)至肉雞42日齡時(shí)限飼12 h，以重復(fù)為單位稱重，計(jì)算平均日增重和耗料增重比。從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)抽取3只雞，稱重后屠宰，記錄屠體重、全凈膛重、腿肌+胸肌重，計(jì)算屠宰率、全凈膛率和瘦肉率。分離脾臟、胸腺、法氏囊、肝臟、心臟、肺臟、腺胃、肌胃、十二指腸、空腸和回腸，分別稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。用游標(biāo)卡尺測(cè)定十二指腸、空腸和回腸腸壁厚度。

表1 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分

1.4.2 抗氧化和免疫指標(biāo)檢測(cè) 試驗(yàn)至肉雞22日齡和42日齡時(shí)，限飼12 h，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3只雞，翅靜脈采集血液至血清分離管中，3 000 r/min離心10 min分離血清，用于檢測(cè)谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）活性、羥自由基（·OH）、丙二醛（MDA）和總抗氧化能力（T-AOC）水平（抗氧化指標(biāo)檢測(cè)試劑盒購(gòu)于南京建成生物科技有限公司），免疫球蛋白（Ig）G、IgM、IgA、干擾素 -γ（IFN-γ）、白介素（IL）-2、IL-4、IL-6水平，新城疫病毒抗體（NDV-Ab）、傳染性法氏囊病毒抗體（IBDV-Ab）和H9禽流感病毒抗體（H9-Ab）的效價(jià)（免疫指標(biāo)ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)于武漢賽培生物科技有限公司）。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel 2013和SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、單因素方差分析和Duncan′s多重比較。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞生長(zhǎng)、屠宰性能的影響 如表2所示，4 mg/kg酸價(jià)組耗料量和耗料增重比顯著低于對(duì)照組和其他酸價(jià)組（P＜0.05），平均日增重顯著高于14 mg/kg酸價(jià)組（P＜0.05），全凈膛率顯著高于11、14 mg/kg酸價(jià)組（P＜0.05），瘦肉率顯著高于9、11、14 mg/kg酸價(jià)組（P＜0.05）；11、14 mg/kg酸價(jià)組耗料增重比顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），7～14 mg/kg酸價(jià)組全凈膛率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），14 mg/kg酸價(jià)組瘦肉率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.2 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞抗氧化功能的影響 如表3所示，4 mg/kg酸價(jià)組肉雞22日齡時(shí)的GSH-Px活性和42日齡時(shí)的GSH-Px活性、CAT活性和T-AOC水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。與對(duì)照組和4 mg/kg酸價(jià)組相比，7 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著提高肉雞22日齡時(shí)的·OH水平和42日齡時(shí)的MDA含量（P＜0.05），顯著降低22日齡時(shí)的T-AOC水平（P＜0.05）和42日齡時(shí)的SOD、CAT和T-AOC水平（P＜0.05）；9 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的GSH-Px活性（P＜0.05），11 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的SOD活性（P＜0.05），14 mg/kg酸價(jià)組能顯著降低22日齡時(shí)的CAT活性和42日齡時(shí)的GSH-Px活性（P＜0.05）。隨著酸價(jià)和飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)，MDA含量越高，抗氧化酶活性和T-AOC水平越低（P＜0.05）。

2.3 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞免疫指標(biāo)的影響 如表4所示，4 mg/kg酸價(jià)組肉雞22日齡時(shí)的IFN-γ水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；與對(duì)照組和4 mg/kg酸價(jià)組相比，7 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的IgG水平和42日齡時(shí)的IL-6水平（P＜0.05），9 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的IFN-γ、IL-6水平和42日齡時(shí)的IFN-γ、IL-4、IgA、IgG、IgM水平（P＜0.05），11 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的IL-2、IL-4、IgA水平和42日齡時(shí)的IL-2、IL-6水平（P＜0.05）。隨著酸價(jià)升高和飼喂時(shí)間延長(zhǎng)，IFN-γ、IL-6、IL-4、IL-2、IgG、IgM和IgA水平逐漸降低（P＜0.05）。

2.4 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞疫苗抗體水平的影響 如表5所示，4 mg/kg酸價(jià)組在肉雞22日齡和42日齡時(shí)的H9-Ab含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；與對(duì)照組和4 mg/kg酸價(jià)組相比，7 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的NDV-Ab和42日齡時(shí)的IBDV-Ab、NDV-Ab和 H9-Ab效價(jià)（P＜0.05），11 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低22日齡時(shí)的H9-Ab效價(jià)（P＜0.05），14 mg/kg酸價(jià)組能顯著降低IBDV-Ab效價(jià)（P＜0.05）。隨著酸價(jià)升高和飼喂時(shí)間延長(zhǎng)，IBDV-Ab、NDV-Ab和（或）H9-Ab效價(jià)逐漸降低（P＜0.05）。

表2 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞生長(zhǎng)、屠宰性能的影響

表3 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞血清抗氧化功能的影響

2.5 不同酸鴨油價(jià)對(duì)肉雞臟器指數(shù)的影響 如表6所示，4 mg/kg酸價(jià)組各臟器指數(shù)與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）；與對(duì)照組和4 mg/kg酸價(jià)組比，7 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低肺臟、肌胃指數(shù)（P＜0.05），9 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低胸腺指數(shù)和空腸厚度（P＜0.05），11 mg/kg以上酸價(jià)組均能顯著降低腎臟指數(shù)和回腸厚度（P＜0.05），14 mg/kg酸價(jià)組能顯著降低十二指腸厚度（P＜0.05）。隨著酸價(jià)提高和飼喂時(shí)間延長(zhǎng)，器官指數(shù)越來越小和各段小腸厚度越來越?。≒＜0.05）。

3 討 論

油脂氧化酸敗會(huì)對(duì)動(dòng)物的消化道和生長(zhǎng)性能產(chǎn)生負(fù)

面影響，特別是腸道黏膜和腸腺損害嚴(yán)重，小腸絨毛變短、萎縮，導(dǎo)致飼料效率下降和增重降低，而且酸價(jià)越高影響越嚴(yán)重[6-10]。王榮[7]研究發(fā)現(xiàn)，高酸價(jià)油脂會(huì)損傷肉仔雞的腸道黏膜和腸腺，導(dǎo)致腸道發(fā)生卡他性炎癥，腸絨毛萎縮變短，顯著降低肉仔雞的生長(zhǎng)性能，耗料量、體重及體增重顯著下降，耗料增重比顯著上升。本試驗(yàn)中，飼喂高酸價(jià)鴨油組肉雞的肌胃、十二指腸和空腸等臟器指數(shù)和十二指腸、回腸和空腸厚度顯著下降，耗料增重比隨著鴨油酸價(jià)的升高逐漸增加，平均日增重不斷降低，屠體率下降，而且酸價(jià)越高，差異越大。這進(jìn)一步說明酸敗鴨油既能影響采食量，又對(duì)肉雞消化道具有明顯的損害作用，影響了胃腸道的消化吸收功能，導(dǎo)致肉雞生長(zhǎng)性能下降。

表4 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞血清免疫功能的影響

表5 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞疫苗抗體水平的影響

表6 不同酸價(jià)鴨油對(duì)肉雞臟器指數(shù)的影響

日糧油脂氧化酸敗可引起機(jī)體氧化應(yīng)激，抗氧化功能降低，脂質(zhì)過氧化水平提高，如降低肝臟和血清SOD、GSH-Px、谷胱甘肽還原酶以及肝臟線粒體NAD-依賴型醛脫氫酶和NADP-依賴型醛脫氫酶的活性[6,9-10]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，正常鴨油能顯著提高肉雞GSHPx、CAT活性和T-AOC水平，隨著鴨油酸價(jià)升高，血清中GSH-Px、CAT、SOD活性和T-AOC水平明顯降低，MDA含量升高，說明高酸價(jià)鴨油會(huì)導(dǎo)致肉雞抗氧化能力降低；而且飼喂至42日齡時(shí)，GSH-Px、CAT和SOD活性較22日齡時(shí)下降更多，MDA含量更高。這說明鴨油酸價(jià)越高，持續(xù)作用時(shí)間越長(zhǎng)，氧化損傷越嚴(yán)重，對(duì)動(dòng)物抗氧化能力影響越大[9-10]。也有研究認(rèn)為，攝食氧化油脂后動(dòng)物肝臟和血清CAT、GSH-Px、SOD、葡萄糖-6-磷酸酶及肉雞腸系膜GSH-Px活性升高，抗氧化輔助因子谷胱甘肽減少，一些與機(jī)體代謝氧化產(chǎn)物有關(guān)的酶（如肝臟微粒體醛脫氫酶、細(xì)胞色素C還原酶）活性升高[7]。導(dǎo)致研究結(jié)果的不同可能與應(yīng)用的油脂類型、試驗(yàn)動(dòng)物的類型和耐受能力等因素有關(guān)系。

酸敗油脂產(chǎn)生的有害物質(zhì)會(huì)損傷脾臟、胸腺等免疫器官和免疫細(xì)胞，降低免疫球蛋白的合成，引起免疫抑制；而氧化酸敗油脂對(duì)抗體滴度、血清淋巴細(xì)胞數(shù)量及其免疫反應(yīng)的影響仍需深入研究[6-8]。本研究發(fā)現(xiàn)，與正常鴨油組和對(duì)照組相比，高酸價(jià)鴨油組胸腺指數(shù)顯著降低，細(xì)胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、INF-γ）水平、免疫球蛋白（IgG、IgM和IgA）水平和抗體（NDV-Ab、IBDV-Ab和H9-Ab）滴度顯著下降；而且酸敗油脂作用時(shí)間越長(zhǎng)免疫指標(biāo)水平越低。說明高酸價(jià)鴨油產(chǎn)生的有害物質(zhì)會(huì)抑制胸腺免疫器官發(fā)育、細(xì)胞免疫反應(yīng)，降低免疫應(yīng)答。

4 結(jié) 論

本研究發(fā)現(xiàn)，高酸價(jià)鴨油會(huì)使肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育受阻，抗氧化功能和免疫力下降；綜合肉雞生產(chǎn)性能和各項(xiàng)健康指標(biāo)，建議飼料中使用酸價(jià)低于7 mg/kg的鴨油。