陳麗芳，陳詠芳，賴 馨△，李小峰

(1.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 518172；2.廣東省深圳市龍崗中心醫(yī)院檢驗科 518172)

胸腔積液(PEs)是指胸腔異常積聚的液體，任何原因?qū)е滦啬で粌?nèi)出現(xiàn)過多的液體稱為PEs，俗稱胸水。據(jù)報道，已有60余種病因可導(dǎo)致PEs產(chǎn)生，包括腫瘤、感染及多系統(tǒng)性疾病等病因[1-2]。炎癥、結(jié)核和腫瘤是引起滲出性PEs最常見的原因。PEs的形成原因是臨床上治療的第一步，特別是對患者PEs的良惡性，必須在最短的時間內(nèi)作出準(zhǔn)確判斷，對癥治療，這對患者的治療和預(yù)后有重要的意義。目前臨床常規(guī)診斷方法很難確認(rèn)PEs的性質(zhì)[3]。而且常用的各種檢查方法都有其局限性，例如PEs脫落細(xì)胞檢查是最簡單、最特異的檢查方法，但其陽性率較低，據(jù)統(tǒng)計僅為30%[4]。因此檢測PEs中高敏感性、高特異性的可溶性標(biāo)志物成為臨床研究的一個重點。PEs中分子標(biāo)志物的檢測已成為臨床上常用的鑒別良性和惡性PEs的常用方法[5-6]。本文通過測定良性與惡性PEs患者PEs中的白細(xì)胞介素-22(IL-22)、白細(xì)胞介素-27(IL-27)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、組織因子(TF)、組織因子途徑抑制物(TFPI)的水平，探討其在PEs良惡性性質(zhì)中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院2015年1月至2016年1月90例PEs患者的PEs標(biāo)本。根據(jù)患者病理學(xué)和影像學(xué)檢查結(jié)果確診為惡性PEs的47例患者為惡性組；同時選取診斷為良性PEs的43例患者為良性組。

1.2試劑與儀器 IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技公司提供，操作過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，并用匯松公司的酶標(biāo)儀進(jìn)行比色讀數(shù)。

1.3方法 在患者未進(jìn)行藥物治療前在無菌條件下抽取PEs 10 mL，3 500 r/min離心10 min后提取上清液，儲存于-80 ℃。待所有患者的積液標(biāo)本留取完成后統(tǒng)一進(jìn)行測定。本研究中采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測兩組PEs中IL-22、IL-27、VGEF、TF、TFPI的水平。

2 結(jié) 果

2.1良性和惡性PEs組中5項分子指標(biāo)水平比較 惡性組PEs的IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI水平明顯高于良性組，且5項分子指標(biāo)間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 良性和惡性PEs組中5項分子指標(biāo)水平

表2 PEs 5項分子指標(biāo)的相關(guān)性分析

注：*P<0.01

2.2PEs 5項分子指標(biāo)的相關(guān)性分析 通過對PEs分子5項指標(biāo)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析可知,這5項指標(biāo)相互影響，且互為正相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3PEs中IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI的ROC曲線特征 根據(jù)PEs兩組中的5項分子指標(biāo)水平繪制PEs 5項分子指標(biāo)ROC曲線(圖1)。根據(jù)ROC曲線特征可知5項分子指標(biāo)的ROC下面積、診斷點、靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度。PEs中的VEGF檢測的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度遠(yuǎn)高于其他4項指標(biāo)。因此，在良惡性鑒定中，VEGF的優(yōu)勢高于其他4項分子指標(biāo)，見表3。

圖1 PEs5項分子指標(biāo)ROC曲線

表3 PEs 5項分子指標(biāo)的ROC曲線特征

注：AUC>0.5即有診斷價值

3 討 論

IL-22也稱為IL-10相關(guān)T細(xì)胞衍生的可誘導(dǎo)因子。在人體內(nèi)，IL-22的功能多種多樣，主要有保護(hù)和修復(fù)組織損傷，促進(jìn)細(xì)胞再生及增生、抗微生物感染、促炎、促纖維化、抗細(xì)胞凋亡等作用[7-8]。而腫瘤的生長及浸潤離不開新生血管的形成。IL-22具有激活細(xì)胞生長、增殖和分裂周期的相關(guān)信號通路的功能[9]。在胸膜腔中，IL-22可通過促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)表達(dá)發(fā)揮免疫病理作用。

IL-27是目前新發(fā)現(xiàn)的眾多個白細(xì)胞介素中的一種，是一種新型IL-6/IL-12家族成員，參與全身多種炎性反應(yīng)，在自身免疫介導(dǎo)的組織損傷及炎癥過程中發(fā)揮了重要作用。IL-27在腫瘤性疾病中具有一定的治療潛能，抑制調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Treg)生成，影響凋亡和抑凋亡基因生成，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡參與抗腫瘤作用[10-13]。

VEGF是一種對血管生長有強(qiáng)效誘導(dǎo)作用的有絲分裂原。該物質(zhì)廣泛分布于人體內(nèi)各重要器官和血管中，能夠與血管內(nèi)皮細(xì)胞上特異的酷氨酸激酶受體結(jié)合，發(fā)揮其促進(jìn)血管生長，增加血管通透性，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移等生物活性。腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)是血管生成。VEGF是所有血管生成促進(jìn)因子中作用最強(qiáng)的促血管生成因子，可強(qiáng)烈誘導(dǎo)血管生成，并可特異性地作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使其產(chǎn)生促分解、增生和趨化作用，增加血管內(nèi)皮的通透性而促進(jìn)浸潤轉(zhuǎn)移，并使腫瘤細(xì)胞逃脫免疫監(jiān)視。有研究表明，VEGF過量表達(dá)與診斷患者伴有惡性腫瘤呈相關(guān)性。

TF又名凝血因子Ⅲ，是血管外細(xì)胞表面跨膜糖蛋白受體。有研究顯示，TF促進(jìn)血管新生、腫瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移。

TFPI是一種絲氨酸蛋白酶抑制物，是TF凝血途徑的主要抑制物。腫瘤患者經(jīng)常出現(xiàn)高凝狀態(tài)。腫瘤誘導(dǎo)新血管的生成。TF的高表達(dá)，會引起血栓形成。同時化療，長期臥床也會導(dǎo)致血栓形成。因此TFPI作為天然抗凝劑可能有用武之地。凝血異常甚至血栓形成與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

本研究對43例良性PEs和47例惡性PEs標(biāo)本的5項分子指標(biāo)水平分別進(jìn)行檢測，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。當(dāng)這5項指標(biāo)水平上升，有提示PEs惡性質(zhì)的可能，要引起高度注意。對PEs 5項分子指標(biāo)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，這5項指標(biāo)互呈正相關(guān)。由ROC曲線特征可知，這5項分子指標(biāo)對PEs的良惡性診斷均有價值(AUC>0.5)。均有一定的靈敏度和特異度提示PEs惡性性質(zhì)的可能。跟其他4項指標(biāo)相比，VEGF在惡性PEs中檢出的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度高于本研究中其他的4項指標(biāo)。國外許多實驗表明：VEGF與惡性PEs形成關(guān)系密切，許多腫瘤的腹膜轉(zhuǎn)移依賴于VEGF水平。VEGF可促進(jìn)惡性PEs的形成，在惡性PEs中具有較高的表達(dá)水平。

所以，VEGF檢測水平可作為惡性PEs診斷的一種新方法而為臨床服務(wù)，從而對良惡性PEs鑒定中起到一定的作用，使患者迅速得到治療，避免延誤了病情的情況發(fā)生。