田梅金 謝道燕

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所， 云南蒙自 661101)

朱砂葉螨(TetranychuscinnabarinusBoisduval)在我國(guó)分布廣泛，是棉花和多種蔬菜上危害嚴(yán)重而又難以防治的一種害螨。因其繁殖力強(qiáng)、世代周期短、活動(dòng)范圍小、近親交配率高、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)[1]，致使朱砂葉螨對(duì)多數(shù)殺螨劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性[2-3]。田間防治過(guò)程中如果藥劑選用不當(dāng)，不僅影響防治效果，還會(huì)造成農(nóng)藥浪費(fèi)和環(huán)境污染，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)錯(cuò)過(guò)防治適期，造成不可挽回的損失[4]。云南省的自然氣候環(huán)境特殊，春、夏、秋3個(gè)季節(jié)都是桑園主要害蟲危害的高峰期，所以桑園害蟲防治在蠶桑生產(chǎn)中具有重要作用[5]?；瘜W(xué)藥劑防治仍是當(dāng)前防治朱砂葉螨的主要方法。然而，對(duì)蠶區(qū)桑園及周邊農(nóng)田朱砂葉螨的防治用藥，還必須以家蠶的安全性為前提，避免因使用殺蟲劑防治害蟲引起的家蠶中毒事件發(fā)生，以保證蠶桑產(chǎn)業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。因此，開展朱砂葉螨的防治研究，需要兼顧藥劑對(duì)家蠶安全性問題，使“保蟲”和“治蟲”高度統(tǒng)一，篩選出對(duì)朱砂葉螨成螨和螨卵高效且對(duì)家蠶安全的殺蟲劑，在一定程度上保護(hù)了天敵，減輕了環(huán)境污染，這對(duì)蠶桑產(chǎn)業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展是十分必要的。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑 49%橄欖鯊軟皂水劑、87%松螨鯊松油乳劑，均為深圳百樂寶生物農(nóng)業(yè)科技有限公司與澳大利亞環(huán)球科技有限公司合資產(chǎn)品。

1.1.2 供試朱砂葉螨及螨卵 朱砂葉螨采自云南省蒙自市桑園，采集的朱砂葉螨于室內(nèi)溫度(26±1)℃、相對(duì)濕度(RH)60%～80%、光照時(shí)間14 h/d的條件下飼養(yǎng)數(shù)代后，用盆栽豇豆苗進(jìn)行飼養(yǎng)及擴(kuò)大繁殖。在養(yǎng)蟲室內(nèi)飼養(yǎng)數(shù)代后視為相對(duì)敏感種群，抗性種群則是用炔螨特藥劑連續(xù)篩選數(shù)代后所得。用于藥劑室內(nèi)毒力測(cè)定試驗(yàn)的成螨直接選自豇豆苗上發(fā)育至3～5日齡、大小一致、顏色鮮艷、行動(dòng)活潑的雌成螨，移至面積約12 cm2的葉片上備用；供試螨卵則將大小一致的10頭雌成螨挑至面積約12 cm2的葉片上，讓其產(chǎn)卵24 h，然后移除雌成螨，當(dāng)卵齡在4～28 h后開始用于螨卵的毒力測(cè)定。

1.1.3 供試家蠶品種 菁松×皓月，由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所提供，選取其健康的3齡起蠶為供試對(duì)象。

1.1.4 主要儀器設(shè)備 Burkard標(biāo)準(zhǔn)型Potter噴霧塔，英國(guó)BURKARD科學(xué)儀器公司產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 橄欖鯊和松螨鯊對(duì)室內(nèi)朱砂葉螨成螨的毒力測(cè)定 參照聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization，F(xiàn)AO)推薦的葉片殘毒法[6]并加以改進(jìn)為Potter噴霧處理的葉片殘毒法，噴霧量為1.0 mL藥液，噴霧壓強(qiáng)為20 kPa，沉降時(shí)間為10 s。將供試藥劑用清水分別稀釋成所需的6個(gè)系列濃度，橄欖鯊為8 166.67、5 444.44、4 083.33、3 266.67、2 722.22、2 333.33 mg/L，松螨鯊為8 700.00、4 350.00、2 175.00、1 087.50、543.75、271.88 mg/L，以等量清水處理為對(duì)照。每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30頭朱砂葉螨。噴藥后的朱砂葉螨置于同等條件下飼養(yǎng)48 h后調(diào)查成螨的死亡情況，建立毒力回歸方程。

1.2.2 橄欖鯊和松螨鯊對(duì)室內(nèi)朱砂葉螨螨卵的毒力測(cè)定 采用保濕葉碟噴霧法[7]測(cè)定橄欖鯊和松螨鯊對(duì)室內(nèi)朱砂葉螨螨卵的毒力大小。首先將菜豆葉片打成大小一致的葉碟(面積約12 cm2的葉片)，背面向上放置在盛有保濕濾紙的培養(yǎng)皿里，每皿3片葉碟，每片葉碟接10頭雌朱砂葉螨成螨產(chǎn)卵，產(chǎn)卵后去除雌朱砂葉螨成螨并調(diào)查朱砂葉螨卵基數(shù)，然后按1.2.1項(xiàng)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)從低劑量到高劑量的順序，用Potter噴霧塔進(jìn)行噴霧，每處理2.0 mL，沉降10 s，每處理3片葉碟，另設(shè)等量清水噴霧空白對(duì)照。于噴藥7 d后開始調(diào)查螨卵的孵化情況，以未孵化卵作為死卵計(jì)數(shù)，計(jì)算卵的孵化率，并建立毒力回歸方程。

1.2.3 橄欖鯊和松螨鯊對(duì)家蠶的急性毒性測(cè)定 在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用食下毒葉法測(cè)定藥劑對(duì)家蠶的急性毒性。將橄欖鯊和松螨鯊用清水分別稀釋成6個(gè)濃度，橄欖鯊為16 333.33、12 250.00、9 800.00、8 166.67、7 000.00、6 125.00 mg/L，松螨鯊為2 900.00、2 175.00、1 740.00、1 450.00、1 242.86、1 087.50 mg/L，以清水處理為對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)50頭3齡起蠶。從桑樹上采集展開的第2、第3片健康葉，擦凈葉面上的灰塵等附著物，對(duì)桑葉去除葉柄后，切成細(xì)條狀待用。每個(gè)重復(fù)稱取10 g桑葉，用10.0 mL供試藥液噴灑均勻，晾干后放入供試3齡起蠶的飼養(yǎng)盒內(nèi)給家蠶添毒；將添毒處理后的家蠶置于溫度26 ℃、RH 70%～75%、光照時(shí)間14 h/d的飼養(yǎng)室內(nèi)飼養(yǎng)，供試家蠶連續(xù)添食毒葉1個(gè)齡期，直至4齡起蠶，每隔24 h檢查死、活蠶頭數(shù)，觀察記錄存活個(gè)體中毒癥狀。并調(diào)查添食72 h內(nèi)的中毒死亡率和3齡眠蠶體質(zhì)量及4齡起蠶后饑餓48 h的死亡率。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理 均采用Excel 2003和SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 橄欖鯊和松螨鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群的室內(nèi)毒力

從表1可以看出，橄欖鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群的成螨毒力最強(qiáng)，噴霧48 h后的半致死濃度(LC50)值分別為2 361.37 mg/L和2 326.24 mg/L，對(duì)螨卵的毒力較差，LC50值分別為127 999.39 mg/L和585 160.54 mg/L；松螨鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群成螨的毒力比螨卵高，對(duì)敏感種群和抗性種群成螨的LC50相對(duì)毒力的計(jì)算是以殺蟲劑敏感種群成螨或螨卵的相對(duì)毒力為1.00，對(duì)其他螨態(tài)的相對(duì)毒力為同一殺蟲劑對(duì)成螨或螨卵的LC50除以其對(duì)應(yīng)螨態(tài)的LC50。

表1橄欖鯊和松螨鯊對(duì)不同發(fā)育期朱砂葉螨敏感種群和抗性種群噴霧48h后的室內(nèi)毒力

藥劑種群蟲態(tài)毒力回歸方程卡方值P值半致死濃度(LC50)相對(duì)毒力49%橄欖鯊軟皂水劑敏感成蟲y=-940+279x930005236137100卵y=-832+163x13208612799939100抗性成蟲y=-930+276x935005232624099卵y=-531+092x1160885851605445787%松螨鯊松油乳劑敏感成蟲y=-405+120x1551000235121100卵y=-488+136x3393000377874100抗性成蟲y=-559+160x412039321154137卵y=-717+203x4271000346966092

值分別為2 351.21 mg/L和3 211.54 mg/L，對(duì)敏感種群和抗性種群螨卵的LC50值分別為3 778.74 mg/L和3 469.66 mg/L。在測(cè)定的2個(gè)朱砂葉螨種群中，橄欖鯊對(duì)抗性種群螨卵的毒力是敏感種群螨卵的毒力的4.57倍，對(duì)成蟲的毒力則是抗性種群是敏感種群的0.99倍；松螨鯊對(duì)抗性種群成蟲的毒力是敏感種群成蟲的毒力的1.37倍，對(duì)螨卵的毒力則是抗性種群是敏感種群的0.92倍。

從表2可以看出，松螨鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群的螨卵毒力最強(qiáng)，噴霧7 d后螨卵孵化率分別是13.27%～89.11%和9.90%～98.00%，橄欖鯊對(duì)敏感種群和抗性種群螨卵的孵化率分別是82.35%～89.62%和95.00%～98.88%；橄欖鯊和松螨鯊不同濃度藥液處理的螨卵孵化率均小于其對(duì)照處理。因此，橄欖鯊和松螨鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群成螨的毒力比螨卵高，而對(duì)螨卵的毒力較差，但對(duì)螨卵的孵化有抑制作用。

2.2 橄欖鯊和松螨鯊添食家蠶72 h的急性毒性及家蠶的中毒癥狀

從表3可以看出，橄欖鯊添食濃度為6 125.00～16 333.33 mg/L的家蠶72 h后雖然未見中毒死亡蠶，但添食濃度為7 000.00～16 333.33 mg/L的家蠶有輕微中毒癥狀，主要表現(xiàn)為行動(dòng)呆滯；添食濃度為表中數(shù)值均為3個(gè)重復(fù)的平均值。表3-4同。

表2橄欖鯊和松螨鯊對(duì)朱砂葉螨敏感種群和抗性種群螨卵孵化率的影響

藥劑濃度/(mg/L)螨卵孵化率/%朱砂葉螨敏感種群朱砂葉螨抗性種群49%橄欖鯊軟皂水劑81666782359500544444866097694083338679978032666787109793272222885297952333338962988887%松螨鯊松油乳劑870000132799043500065356196217500674263311087507797853754375882493552718889119800CK(清水對(duì)照)09205100

6 125.00 mg/L的家蠶未出現(xiàn)中毒癥狀。松螨鯊添食濃度為1 450.00～2 900.00 mg/L的家蠶出現(xiàn)輕微中毒和少量中毒死蠶，其中毒死亡率在0.87%～2.22%，主要表現(xiàn)為拒食、呆滯等癥狀，添食濃度為1 087.50～1 242.86 mg/L的家蠶未出現(xiàn)中毒癥狀。

表3橄欖鯊和松螨鯊不同濃度添食對(duì)3齡家蠶72h內(nèi)的急性中毒死亡率及中毒情況

藥劑濃度/(mg/L)24h中毒死亡率/%48h中毒死亡率/%72h中毒死亡率/%中毒癥狀49%橄欖鯊軟皂水劑1633333000呆滯、少數(shù)蠶膨胸、S型1225000000呆滯、少數(shù)蠶膨胸、輕微中毒980000000呆滯、擺頭、輕微中毒816667000呆滯、輕微中毒700000000呆滯、輕微中毒612500000無(wú)中毒癥狀87%松螨鯊松油乳劑29000002220呆滯、拒食、膨胸、S型21750001010呆滯、拒食、膨胸、輕微中毒17400008700呆滯、拒食、輕微中毒145000000少數(shù)蠶呆滯，輕微中毒124286000無(wú)中毒癥狀108750000無(wú)中毒癥狀CK(清水對(duì)照)0000無(wú)中毒癥狀

2.3 橄欖鯊和松螨鯊添食對(duì)3齡眠蠶體質(zhì)量及4齡起蠶后饑餓48 h的影響

微弱不良因素刺激會(huì)造成眠蠶體質(zhì)量變化和眠起不齊，因此，眠蠶體質(zhì)量是家蠶生長(zhǎng)發(fā)育性狀中較為敏感的指標(biāo)之一[8]。從表4可以看出，橄欖鯊6個(gè)添食濃度雖然沒有造成家蠶中毒死亡，但對(duì)3齡眠蠶體質(zhì)量有所影響，其中添食濃度為9 800.00～16 333.33 mg/L和7 000.00 mg/L的3齡眠蠶體質(zhì)量與對(duì)照相比差異顯著；松螨鯊6個(gè)處理的眠蠶體質(zhì)量與對(duì)照相比均存在顯著差異。橄欖鯊和松螨鯊添食處理的4齡起蠶(家蠶4齡眠起后未給桑)饑餓48 h后觀察，發(fā)現(xiàn)所有添食處理組均有不同程度的死亡蠶，其死蠶癥狀為體縮、吐水、體褐色等，死亡率在16.36%～59.80%，而對(duì)照未見死亡蠶，說(shuō)明橄欖鯊和松螨鯊添食處理后的家蠶出現(xiàn)慢性累積性中毒，且蠶體虛弱。

表4橄欖鯊和松螨鯊不同濃度添食對(duì)3齡眠蠶體質(zhì)量及4齡起蠶后饑餓48h的死亡率

藥劑濃度/(mg/L)3齡眠蠶體質(zhì)量/(g/頭)饑餓48h死亡率/%49%橄欖鯊軟皂水劑1633333018±000c59801225000018±000bc5222980000018±000bc5000816667019±001ab3786700000018±001bc3333612500019±000ab224587%松螨鯊松油乳劑290001017±000b5593217500017±001b3505174000018±000b3483145000017±000b2895124286018±000b1667108750018±000b1636CK(清水對(duì)照)0020±000a0

表中同列數(shù)據(jù)后的不同小寫英文字母表示差異顯著(P<0.05，Duncan新復(fù)極差測(cè)驗(yàn))。

3 小結(jié)與討論

橄欖鯊是一種廣譜觸殺型殺蟲、殺螨劑，其殺蟲機(jī)理為通過(guò)強(qiáng)力的親脂活性溶解昆蟲表皮蠟質(zhì)層和角質(zhì)層蛋白，破壞其表皮結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物的泄露和脫水而死亡，適合有機(jī)農(nóng)業(yè)。鄭惠普等[9]通過(guò)橄欖鯊防治黃瓜蚜蟲、白粉虱、白粉病田間藥效試驗(yàn)結(jié)果分析認(rèn)為，濃度為6 533.33 mg/L對(duì)蚜蟲的防控效果最佳，其次是4 900.00 mg/L；橄欖鯊這2個(gè)濃度的溶液均能對(duì)白粉病有很好的防控效果，并且對(duì)作物黃瓜安全。本研究中橄欖鯊濃度為4 083.33～8 166.67 mg/L對(duì)朱砂葉螨敏感種群和抗性種群成螨的殺蟲效果較好，朱砂葉螨死亡率分別是71.11%～98.89%和91.11%～97.78%，而濃度低于4 083.33 mg/L的殺蟲效果較差，朱砂葉螨死亡率分別是57.78%～62.22%和0.08%～56.67%；與鄭惠普等[9]報(bào)道一致。松螨鯊是一種觸殺型高效生物殺螨劑，對(duì)環(huán)境友好。其殺蟲機(jī)理為藥液與害螨接觸后，脂肪酸酯液滴迅速而精確地滲入并破壞朱砂葉螨的氣孔結(jié)構(gòu)，通過(guò)窒息造成若螨和成螨的迅速死亡，適合有機(jī)農(nóng)業(yè)。李玉萍等[10]研究結(jié)果表明，松螨鯊在稀釋液濃度為1 740.00～1 087.50 mg/L范圍內(nèi)對(duì)辣椒紅蜘蛛的防治效果較好，且對(duì)作物辣椒安全。本研究試驗(yàn)結(jié)果與李玉萍等[10]研究結(jié)果不一致，可能是本試驗(yàn)所選的朱砂葉螨長(zhǎng)期使用單一的同種殺螨劑而造成朱砂葉螨對(duì)部分新型殺蟲劑的敏感性降低，另外由于供試害螨的采集點(diǎn)不同，對(duì)藥劑敏感性也會(huì)存在差異。本研究中松螨鯊濃度為4 350.00～8 700.00 mg/L對(duì)朱砂葉螨敏感種群和抗性種群成螨的殺蟲效果最佳，死亡率分別是73.33%～81.11%和46.67%～56.67%，而濃度低于2 175.00 mg/L對(duì)朱砂葉螨的殺蟲效果較差，死亡率分別是17.67%～35.56%和9.93%～19.96%。松螨鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群的螨卵毒力最強(qiáng)，即噴霧7 d后螨卵孵化率分別是13.27%～89.11%和9.90%～98.00%；橄欖鯊對(duì)2個(gè)朱砂葉螨種群螨卵的毒力較差，其噴霧7 d后孵化率分別是82.35%～89.62%和95.00%～98.88%；雖然橄欖鯊和松螨鯊對(duì)螨卵的殺卵效果較差，但對(duì)螨卵的孵化有抑制作用。

家蠶是中國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲，是農(nóng)藥使用時(shí)保護(hù)的非靶標(biāo)生物。研究證明，農(nóng)藥對(duì)昆蟲的毒性并非都表現(xiàn)為急性致死效應(yīng)，蟲酰肼及其衍生物0593對(duì)家蠶的毒性表現(xiàn)較為緩慢，至96 h表現(xiàn)出較明顯的致毒效應(yīng)，齡期提前、家蠶取食量減小、生長(zhǎng)受阻和繁殖力降低等[11]；亞致死劑量的農(nóng)藥雖不能使家蠶直接致死，但可使家蠶幼蟲眠起不齊，眠蠶體質(zhì)量減輕，發(fā)育歷期延長(zhǎng)，而且對(duì)食物利用有明顯的影響，亞致死劑量的農(nóng)藥中毒家蠶由于饑餓造成消化液減少，消化酶活性減弱，使得食物利用率和轉(zhuǎn)化率降低，導(dǎo)致家蠶體質(zhì)下降[12-13]。本試驗(yàn)通過(guò)調(diào)查橄欖鯊6個(gè)濃度對(duì)3齡家蠶72 h內(nèi)的急性中毒死亡率及中毒情況發(fā)現(xiàn)，6個(gè)濃度添食72 h內(nèi)雖然沒有造成家蠶中毒死亡，但對(duì)3齡眠蠶體質(zhì)量有所影響，特別是添食高濃度橄欖鯊藥液的3齡眠蠶體質(zhì)量與對(duì)照相比差異顯著；添食高濃度松螨鯊藥液造成少數(shù)蠶中毒死亡，添食低濃度松螨鯊藥液雖未造成家蠶中毒死亡，但松螨鯊6個(gè)濃度的3齡眠蠶體質(zhì)量與對(duì)照相比均存在顯著差異。

綜上所述，橄欖鯊在4 083.33～8 166.67 mg/L推薦濃度范圍內(nèi)使用對(duì)朱砂葉螨敏感種群和抗性種群的成螨有較好的殺滅作用，且對(duì)家蠶毒性較低，具有可在蠶區(qū)用于防治桑園朱砂葉螨及在其他作物螨蟲的應(yīng)用前景；但松螨鯊在4 350.00～8 700.00 mg/L超過(guò)推薦使用濃度范圍時(shí)才對(duì)2個(gè)種群的朱砂葉螨有較好的殺滅作用，而在1 740.00～870.00 mg/L推薦使用濃度范圍內(nèi)對(duì)2個(gè)種群朱砂葉螨的殺滅作用較差，因此田間防治桑園朱砂葉螨時(shí)建議選用橄欖鯊軟皂水劑。橄欖鯊和松螨鯊對(duì)朱砂葉螨以外的其他害蟲的殺滅作用或田間防治效果有待進(jìn)一步試驗(yàn)證實(shí)。

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·書訊·

《蠶學(xué)精義叢書》

由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所原所長(zhǎng)、國(guó)際著名家蠶生理病理學(xué)家和昆蟲分子病理學(xué)家呂鴻聲教授近年傾心編著的《蠶學(xué)精義叢書》，已出版發(fā)行。

叢書共5部。第1部《栽桑學(xué)原理》闡述優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)桑葉生產(chǎn)的方法和原理，第2部《蠶種學(xué)原理》講述“無(wú)毒”蠶種生產(chǎn)的方法和原理，第3部《養(yǎng)蠶學(xué)原理》論述優(yōu)質(zhì)制絲原料繭生產(chǎn)的方法與原理，這3部專著共同構(gòu)成了廣義養(yǎng)蠶學(xué)的理論和技術(shù)體系。叢書第4部《昆蟲免疫學(xué)原理》在全面深刻闡述昆蟲免疫學(xué)基礎(chǔ)理論、基本原理的基礎(chǔ)上，提供了大量現(xiàn)代昆蟲免疫學(xué)研究的范例，包括蠶體免疫學(xué)研究的成果。叢書第5部《家蠶性別控制原理》譯著(原著作者是俄羅斯科學(xué)院院士、原蘇聯(lián)遺傳學(xué)會(huì)會(huì)長(zhǎng)斯特隆尼科夫)闡述家蠶生殖遺傳、性別控制原理與雜種優(yōu)勢(shì)利用。

叢書內(nèi)容豐富，寫作規(guī)范，文句流暢，圖文并茂，理論聯(lián)系實(shí)際，從宏觀到微觀，既深刻闡明了基本理論，又詳盡地介紹了基礎(chǔ)知識(shí)和關(guān)鍵技術(shù)；不僅可以作為大專院校蠶學(xué)專業(yè)的教科書、科研院所蠶業(yè)科技人員的參考書，也適合農(nóng)村廣大蠶桑生產(chǎn)者、各級(jí)蠶業(yè)生產(chǎn)管理干部學(xué)習(xí)。

叢書定價(jià)均為60元/冊(cè)，郵寄費(fèi)10元/冊(cè)；可以整套訂購(gòu)，也可單冊(cè)購(gòu)買。郵局或銀行匯款均可，單位名稱：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所，開戶行：江蘇省鎮(zhèn)江市工行潤(rùn)州支行，帳號(hào)：1104055109000013982。

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